HPLC双波长法测定小柄马勃子实体、液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮含量

建立HPLC双波长法同时测定小柄马勃(Lycoperdon pedicellatus)子实体与液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的含量,并比较2种不同药用部位中麦角甾醇和麦角甾酮的含量差异。采用岛津InertsilODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱,流动相为甲醇,流速为0.8 mL·min~(-1),检测波长分别为282 nm、 349 nm,柱温为30℃。结果表明,子实体中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.02μg~0.20μg (r=1)、 6.54 ng~65.40 ng(r=1)范围内线性关系良好。液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.305μg~3.05μg (r=1)、6.54 ng~65.40 ng (r=1)范围内线性关系良好。因此所建立的双波长测定法准确可靠、重复性良好,可用于小柄马勃及其液体发酵菌丝中麦角甾醇、麦角甾酮化学成分的含量测定,为控制其质量提供参考依据。     

HPLC法测定松杉灵芝发酵产物中甘露醇和麦角甾醇

目的:建立松杉灵芝发酵产物中甘露醇和麦角甾醇的测定方法。方法:采用HPLC法,甘露醇的色谱柱为SUGAR SC1011柱(300 mm×8 mm,6μm),超纯水作流动相,流速0.5 mL/min,柱温70℃,示差折光器检测。麦角甾醇的色谱条件为汉邦ODS-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇作流动相,流速1.0 m L/min,检测波长282 nm,柱温30℃。结果:甘露醇在6.26~18.78μg内具有良好的线性关系,回归方程为:Y=16708X-2601,r=0.9999,平均加样回收率为98.89%,RSD值为1.67%。麦角甾醇在0.2096~1.4672μg内具有良好的线性关系,回归方程为:Y=1.2E+6X-37700,r=1,平均加样回收率为98.56%,RSD值为0.97%。结论:研究的方法具有较高的专属性、准确性、重现性和可行性,可作为松杉灵芝菌丝体中甘露醇和麦角甾醇含量质量控制的定量方法。     

UPLC测定不同方式干燥的猴头菌中麦角甾醇的含量

以采摘于黑龙江省海林市的猴头菌为研究对象,分别使用自然干燥、加热干燥、真空加热干燥、真空冷冻干燥和微波干燥等方式将其制备成样品,然后用超高效液相色谱(UPLC)-紫外检测法来测定不同干燥方式的样品中麦角甾醇的含量。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相:乙腈,流速:0.3 mL/min,检测波长282 nm,进样体积4μL,以猴头菌中麦角甾醇的含量为指标,分别对提取溶剂、水浴时间和料液比进行了最佳条件优化。结果表明:最佳的提取溶剂为无水乙醇,水浴时间为30 min,料液比为1∶20(g∶mL),其回归方程Y=9609.4X+4955.6,R2=0.9998,平均加样回收率为100.70%,RSD为0.66%。猴头菌经70℃真空干燥方式处理的麦角甾醇含量最高,而采用1.34 KW微波干燥处理的麦角甾醇含量最低,表明了不同的干燥方式会对猴头菌中的麦角甾醇含量有所影响,因而应当根据不同的药用和医疗途径去选择合适的干燥加工方式。     

反相高效液相色谱法测定瓦尼木层孔菌中柚皮素的含量

采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定瓦尼木层孔菌(Phellinus vaninii)中柚皮素含量。瓦尼木层孔菌醇提物水解后采用RP-HPLC对柚皮素的含量进行测定,色谱条件:Hypersil ODS(4.6mm×100mm,3μm)色谱柱,流动相为1%冰醋酸溶液-甲醇(62∶38),柱温为40℃,流速为0.6mL/min,检测波长为288nm。标准曲线为A=4.18×106 X+40109(r=0.9998,n=5),柚皮素进样量在0.0202～2.020μg间线性关系良好,相对标准偏差(RSD)为1.56%(n=5),回收率为97.8%,重现性实验RSD为1.76%。该法适于瓦尼木层孔菌醇提物中柚皮素的含量测定。     

HPLC法测定柳蘑麦角甾醇含量

目的：建立柳蘑中抗菌成分麦角甾醇含量的测定方法，为柳蘑的质量控制提供依据。方法：运用高效液相色谱法(HPLC),DIKMA C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)，流动相为100%甲醇，流速1.0 mL/min，柱温20℃，进样体积10μL，检测波长为282 nm。结果：麦角甾醇在质量浓度0.0 225～1.1 227 mg/mL线性关系良好(R²=0.9 998)，平均回收率为100.48%,RSD为1.38%。结论：该方法操作简便，测定结果准确，重复性好，稳定可靠，可作为柳蘑中抗菌成分麦角甾醇含量的测定方法。     

HPLC法测定猴头菌菌丝体中麦角甾醇含量

从猴头菌菌丝中分离麦角甾醇并建立测定含量的高效液相色谱法（HPLC）。方法：色谱柱为XTerra MSC18（4．6mm×250mm5μm），流动相为甲醇-水（98：2），流速为1．0mL／min，检测波长为284nm，柱温为室温。结果：样品在1．02-10．2mg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=0．9999（n=6）。平均加样回收率为106．69％，RSD为0．86％。结论：所建立的方法能够对猴头菌中的麦角甾醇的含量进行测定，方法准确、简便、重现性好，为猴头菌药材质量评价提供了可靠依据。     

三波长法测定超临界萃取九州虫草总黄酮含量

以九州虫草为试材,采用三波长-紫外分光光度法,测定了九州虫草超临界流体萃取物中的总黄酮含量。结果表明:以芦丁为标准品,选定244、272、302nm为测定波长,标准曲线回归方程为y=0.025 3x-0.090 4(r2=0.999 7);在浓度16~56μg·mL~(-1)内,△A与浓度之间呈良好的线性关系,表明该方法稳定性好,回收率为94.80%~97.75%,精密度RSD0.67%(n=6),超临界提取获得的虫草黄酮含量为1.89mg·g~(-1)。     

高效液相色谱法测定苹果、青椒等水果蔬菜中绿原酸的含量

采用高效液相色谱法测定果蔬中绿原酸含量,色谱柱为HYPERS IL-C18(5μm,250mm×416mm),以乙腈(A)和0.5%磷酸溶液(B)进行洗脱,流速为1.0mL/min;进样量为20μL;检测波长为330nm。结果表明,绿原酸在40~200μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997。平均回收率为99.52%,RSD小于2.0%。采用高效液相色谱法测定果蔬中绿原酸含量,方法简便、准确,可以用于绿原酸的检测。     

海棠果实中脱落酸的高效液相色谱测定

以‘草莓果冻’海棠为试材,采用高效液相色谱结合固相萃取法建立了一种用于海棠果实中脱落酸(ABA)含量检测的方法。通过优化前处理及色谱条件,最终确定取样量为3g,用80%预冷甲醇浸提12h,经不溶性PVPP吸附酚类等杂质,石油醚脱色,乙酸乙酯萃取,C18固相萃取小柱进一步纯化,再经甲醇∶1.0%乙酸溶液(45∶55,v/v),流速为1.0mL·min~(-1)进行洗脱,C18色谱柱分离,进样体积20μL,检测波长为254nm,柱温45℃。结果表明:该方法在0.01~0.50μg·mL~(-1)范围内线性关系良好,R~2=0.999 8,3个浓度水平下平均回收率均大于70%。采用该方法对‘草莓果冻’海棠半同胞子代中14个单株落果初期果实进行了测定,发现果实中脱落酸含量最低为0.026 9μg·g~(-1),最高含量为0.357 9μg·g~(-1),差别较大,该浓度与已有报道中的测定结果处于同一数量级水平。该方法的建立对于海棠的选育和生长发育进一步研究具有重要意义。     

TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的体系优化

采用薄层层析法(TLC),展开剂为氯仿-甲醇-氨水=8∶2∶0.1;同时采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Ultra IITMC18(5μm×250mm×4.6mm)、流动相为0.01mol/L磷酸盐缓冲液-甲醇(45∶55)、检测波长为216nm、流速为1.0mL/min、柱温为30℃、进样量为10μL;建立TLC和HPLC同时分离测定苦豆子生物碱体系的优化方法。结果表明:槐定碱和苦参碱在200~900μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,R2分别为0.9994和0.9996。平均回收率(n=9)分别为99.47%和99.82%;试验表明可通过TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的含量,并可用该方法进行苦豆子药材及含苦豆子药用成分的质量控制。     

HPLC法测定柑桔维生素C含量的优化及其应用

通过对流动相的优化以及维生素C稳定性影响试验,建立了柑桔维生素C(L-抗坏血酸)含量测定的高效液相色谱法(HPLC法):维生素C提取剂(稀释剂)宜用0.1%草酸溶液,采用C_(18)色谱柱分离,以体积比=8∶92的甲醇和0.01mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH值至3.5)为流动相,流速0.5mL/min,检测波长245nm,柱温25℃,进样量20μL,所得图谱峰分离效果和峰形都较好,出峰时间在6.053min。维生素C质量浓度(x)在0.5~10mg/L范围内与色谱峰面积(y)具有良好的线性关系,回归方程为:y=110.4 x-12.33,R2=0.999 0。试验建立的HPLC法具有前处理简单、快速、重现性好、准确度高等优点,不但适用于椪柑,还适用于温州蜜柑、本地早桔、瓯柑和葡萄、枇杷、猕猴桃等其他水果维生素C含量的测定。利用建立的HPLC法对贮藏椪柑和温州蜜柑的维生素C含量进行测定,发现维生素C含量随着贮藏时间的增加而持续减少,且在贮藏第42天至第56天之间下降最明显。     

高效液相色谱法测定葡萄中甜蜜素的残留量

建立了高效液相色谱法测定葡萄中甜蜜素残留量的方法。采用Inertsil C_(18)(4.6×250mm)色谱柱,柱温25℃,乙腈:水=60:40作流动相,检测波长为313nm,流速0.8m L/min的条件测定。甜蜜素标准品以不同体积进样,获得标准曲线y=360.86x-106.89,其相关系数R~2=0.9999,在2~50μg范围内呈良好的线性关系。实验建立的甜蜜素测定方法稳定可靠,可快速检测葡萄中的甜蜜素残留量。     

正交实验设计优选薄荷芳香水的提取工艺

以薄荷为试材,建立气相色谱(GC)测定薄荷芳香水中薄荷脑含量的方法,色谱柱选择5%苯基-甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm);载气为氮气,流速1.5mL·min^-1,氢气流速40mL·min^-1;检测器温度280℃;进样口温度250℃;进样量为1μL。采用水蒸气蒸馏法提取薄荷芳香水,以挥发油提取量和薄荷脑含量为考核指标,以加水量、药材浸泡时间和提取时间为考察因素,进行L9(34)正交实验,优选薄荷芳香水的提取工艺。结果表明:采用GC测定薄荷芳香水中薄荷脑的含量,薄荷脑浓度在0.02～0.20mg·mL^-1线性关系良好(r=0.999 8),准确度、精密度RSD均小于5%,色谱条件发生小的变动不会影响测定结果。正交实验结果表明,浸泡时间是影响薄荷挥发油提取的主要因素,其次为提取时间、加水量;最佳提取工艺为加8倍量水,浸泡1.5h,提取3.0h。     

HPLC法测定花菇中麦角甾醇含量

目的 建立花菇中麦角甾醇含量的测定方法.方法 采用高效液相色谱方法,采用Diamonsil (TM)C18分析柱(250×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇,流速1.0 mL/min,检测波长283 nm;柱温25℃；结果 麦角甾醇进样量在2～8 μg之间与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999;平均回收率为99.88％,RSD为0.16％.方法具有较高的专属性、准确性、重现性和可行性.结论 该方法简便、准确、线性范围宽、灵敏度好,为花菇质量评价提供了可靠依据.     

新疆慕萨莱思葡萄酒中原花青素含量测定的HPLC方法建立

以矢车菊素、儿茶素、表儿茶素、表儿茶素没食子酸酯为标准品,采用岛津LC-20A高效液相色谱仪、二极管阵列检测器,建立了慕萨莱思酒中原花青素含量测定的HPLC方法。结果表明:优化后的色谱条件为色谱柱Inertsil DOS-3,5μm 4.6mm×250mm色谱柱;流动相A为甲醇,流动相B为超纯水;流动相比例为流动相A为35%,流动相B为65%;流速1.0mL/min;进样量10μL;柱温38℃。应用所建立的HPLC方法对慕萨莱思酒进行分析,出峰效果良好;标准曲线正常,回收率为82%~93%。该方法操作简单、准确度高、测定时间短,可用于慕萨莱思酒中原花青素的测定。     

高效液相色谱法测定番茄粉和番茄调味粉中番茄红素

本文建立了一种高效液相色谱测定番茄粉和番茄调味粉中番茄红素含量的方法。色谱柱选用Waters Sun Fire~(TM) C18(4.60mm×250mm,5.00μm)分离,以90%乙腈水溶液、乙酸乙酯、甲醇为流动相,梯度洗脱,检测波长472nm,流速1.0m L/min,温度30℃,进样量10.00μL。结果发现,番茄红素在0.36~3.68g/m L范围内线性关系良好(R~2=0.993),加标回收率为103.33%,RSD为4.00%。本方法可以有效分析番茄粉和番茄调味粉中的番茄红素含量,可应用于含番茄红素的蔬菜及相关保健品中番茄红素含量的测定。     

超高效液相色谱法分析丝瓜酚类物质组分及其含量

建立超高效液相色谱快速测定丝瓜中酚类物质组分及其含量的方法,为丝瓜酶促褐变的后续研究提供技术支持。液相色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为甲醇(A)/0.3%乙酸水溶液(B),柱温32℃,进样量2μL,流速为0.25 m L·min~(-1)。采用梯度洗脱,洗脱程序0~0.5 min,95%B;0.5~17.5 min,95%~67.5%B;17.5~18 min,67.5%~95%B。检测波长选取283 nm。14种酚类化合物标准品在18 min内完全分离,样品中检测出13种酚酸。线性范围在0.05~4mg·L-1,检出限(S/N=3)为0.004~0.049 mg·L~(-1),决定系数均大于0.999,精密度、重复性、稳定性相对标准偏差均小于5%。平均回收率在95.70%~106.89%,相对标准偏差在0.32%~4.71%。龙胆酸为丝瓜样品中主要酚酸,其次是绿原酸、多巴胺、L–酪氨酸,再次是焦性没食子酸、原儿茶酸、香草酸、儿茶酚、表儿茶酸、对羟基苯甲酸、丁香酸、4–甲基儿茶酚、对香豆酸。     

苹果叶片SPAD值与叶绿素含量相关性分析

为探究红富士苹果叶片SPAD值与叶绿素含量的相关性,采用SPAD-502叶绿素计与分光光度法分别测定红富士苹果叶片的SPAD值、叶绿素含量,分析其相关性,建立拟合方程,并进行检验。结果表明:红富士苹果叶片SPAD值与叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总含量间呈正相关;红富士苹果叶片叶绿素a含量与SPAD值的回归方程为:y=0.0662x-0.9603(R2=0.913);红富士苹果叶片叶绿素b含量与SPAD值的回归方程为:y=0.0246x-0.3515(R2=0.4745);红富士苹果叶片叶绿素总含量与SPAD值的回归方程为:y=0.898x-1.3214(R2=0.9096)。红富士苹果叶片叶绿素含量的实测值与回归方程预测值间均无显著差异。采用回归方程,通过SPAD值可以预测红富士苹果叶片的叶绿素含量。     

药用真菌白刺马勃的生药学研究

对白刺马勃(Lycoperdon wrightii Berk.Curt.)进行生药学研究。采集白刺马勃子实体,结合文献资料,通过基原鉴别、性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别和薄层色谱鉴别等,得到白刺马勃真伪鉴别特征,利用高效液相色谱法测定其化学成分麦角甾醇和麦角甾酮含量。通过白刺马勃基原考证、性状鉴别及显微观察、薄层色谱研究,确定了药用真菌白刺马勃的鉴别方法,其薄层色谱具有多个专属性的斑点,包含麦角甾醇和麦角甾酮斑点。结果显示麦角甾醇含量为0.0808 mg·g~(-1)、麦角甾酮含量为16.4871μg·g~(-1)。通过对白刺马勃性状和电镜下菌丝、孢子特征的观察,以及薄层色谱专属性的检识,可综合鉴别白刺马勃的真伪,为其鉴别提供了参考依据。建立的白刺马勃中麦角甾醇和麦角甾酮含量测定方法,可作为其质量控制的重要检测方法,其麦角甾醇和麦角甾酮的含量也为今后质量标准的建立提供借鉴。     

HPLC法测定香菇中香菇嘌呤含量

建立1种运用高效液相色谱(HPLC)测定香菇(Lentinula edodes)中香菇嘌呤含量的方法。优化后的色谱条件为:Ultimate AQ-C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(7∶93,pH 4.67)等度洗脱,流速1 mL/min,柱温30℃,检测波长259 nm,进样量10μL。研究结果发现该方法准确、灵敏、重现性好,适用于香菇嘌呤的定量分析。