不同来源蛹虫草核苷类成分分析

采用超高效液相色谱法测定了不同来源蛹虫草样品中的9种核苷类成分,包括尿嘧啶、尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、胸苷、腺苷、2’-脱氧腺苷、虫草素,使用统计产品与服务解决方案(19.0)和中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012)软件,分析不同来源蛹虫草核苷类成分的含量差异。结果表明,不同来源蛹虫草9种核苷类成分总含量在4 488.36μg·g~(-1)~10 294.16μg·g~(-1),平均值为8 115.06μg·g~(-1),变异系数为15.33%;蛹虫草中9种核苷类成分含量高低依次为腺苷、鸟苷、尿苷、虫草素、肌苷、腺嘌呤、尿嘧啶、 2’-脱氧腺苷、胸苷,其中,腺苷、鸟苷、尿苷和虫草素是蛹虫草中主要的核苷类成分;聚类分析结果显示,不同来源蛹虫草中核苷类成分的含量具有一定的地理相关性。指纹图谱相似度计算结果显示, 30个样品间指纹图谱相似度在0.69~0.99,表明不同来源蛹虫草核苷类成分相似度较高,但仍然存在一定的差异。     

产不同色素古尼拟青霉菌株功效成分分析

为比较产不同色素古尼拟青霉菌株菌丝体功效成分的差异，本研究对产不同色素古尼拟青霉菌株及对应古尼虫草样品进行试验分析。观察其菌落形态和菌落颜色；用紫外分光光度法测定多糖和D-甘露醇含量；用HPLC法测定虫草素、腺苷、肌苷、胸苷、鸟苷、尿苷6种核苷类成分含量。结果显示，菌落背面绿色的菌株pgjt03，腺苷含量是古尼虫草样品YHCGGB0145的6倍，且虫草素、胸苷、鸟苷、尿苷含量也均达到最高，与它对应的古尼虫草样品YH—CGJT0148虫草素、腺苷、鸟苷、尿苷含量均高于其它古尼虫草；而菌落背面浅灰色的菌株pNt01，核苷类成分含量均低于其他菌株。说明古尼拟青霉产色素与功效成分之间有一定的相关性，古尼拟青霉所产色素颜色越深，功效成分的含量相对越高。通过该研究指出，菌落颜色可作为筛选古尼拟青霉菌株高产功效成分的标志之一，且菌落背面绿色的菌株pgit03，性状优良，生长较快，可作为潜在的生产菌株。     

红树莓花色苷的提取与鉴定

以"秋福"红树莓果实为试材,对其花色苷提取条件进行优化,并采用高效液相色谱质谱联用分析鉴定其花色苷组成成分。结果表明:"秋福"红树莓花色苷最佳提取条件为1.5%的盐酸-甲醇溶液,料液比1∶30 g·mL~(-1),提取时间3 h,提取温度35℃,此时花色苷含量可达4.49 mg·g~(-1)。高效液相色谱-质谱联用分析鉴定出"秋福"红树莓中花色苷共有6种组成成分,其中含量最多为花青素-3-葡萄糖苷,其次为花青素-3-槐糖苷和花青素-3-芸香糖苷,三者含量总和占花色苷总含量的93.03%。     

观赏紫稻花色苷含量和稳定性的研究

选择2个典型的紫稻品种为试材,用1%(v/v)盐酸甲醇溶液提取色素,用紫外-见可分光光度计扫描提取液和测定色素含量变化.结果表明:隐性紫色稻的花色苷含量是显性紫色稻花色苷含量的3.0倍;光和热对花色苷的稳定性有显著影响.     

高效液相色谱结合DA方法对3种虫草的分类研究

利用高效液相色谱测定冬虫夏草(Ophiocordyceps sinensis)、柞蚕蛹虫草(Cordyceps militaris)、蛹虫草(Cordyceps militaris)子实体中的尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷、虫草素含量和共有特征峰值,并依据他们共有的13个特征峰值对这3类虫草的21个样品建立判别分析模型(discrimant analysis,DA),同时以3个虫草样品对该模型进行判别验证。结果显示,DA方法对3种虫草的判别分类效果良好。表明高效液相色谱法结合SPSS的DA判别分析方法可以作为这3种虫草分析鉴别的新方法。     

14个欧亚种红色酿酒葡萄品种(品系)的花色苷组成和含量分析

【目的】对14个欧亚种红色酿酒葡萄品种(品系)的花色苷组成和含量进行分析,以探究利用花色苷作为化学指纹来区分品种。【方法】以北京市海淀区中国农业大学上庄实验站的14个欧亚种红色酿酒葡萄品种(品系)为材料,利用高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)方法检测其果皮中的花色苷组成和含量,对不同葡萄品种中各种花色苷类型进行比较,并基于各单体花色苷含量进行聚类分析和主成分分析。【结果】共检测到21种花色苷,‘西拉’花色苷含量最高;‘黑比诺115’的二甲花翠素-3-葡萄糖苷相对含量最高,且不含酰化类花色苷;‘丹魄’是花翠素-3-葡萄糖苷、甲基花翠素-3-葡萄糖苷相对含量较高的品种。从酰化花色苷的相对含量可以看出,乙酰化和香豆酰化花色苷相对含量高于咖啡酰化类,‘马贝克’‘西拉’酰化花色苷相对含量高于其他品种;‘品丽珠’和‘内比奥罗’的乙酰化花色苷相对含量最高;‘马贝克’的香豆酰化花色苷含量最高;‘蒙特布查诺’的咖啡酰化类花色苷含量最高。聚类分析表明,供试的14个品种(品系)可以被分为2大类,第1大类是‘黑比诺115’,第2大类包括‘马贝克’和其他品种。主成分分析将‘黑比诺115’和‘多塞托’分在第1象限,‘蒙特布查诺’和‘丹魄’分在第2象限,第3象限是‘比诺塔吉’‘内比奥罗’‘西拉’和‘马贝克’,‘品丽珠’和‘美乐’的各个品系都在第4象限。【结论】不同品种单体花色苷所占比例有明显差异,供试的14个葡萄品种(品系)主成分分析结果与聚类分类结果基本一致,花色苷可以作为化学指纹区分14个欧亚种红色酿酒葡萄品种(品系)。     

8个葡萄品种的花色苷组分及含量分析

【目的】了解不同葡萄品种的花色苷组分特征。【方法】采用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)法对8个特色葡萄品种成熟期果皮花色苷组分及含量进行测定分析。【结果】不同品种的果皮花色苷质量分数以‘摩尔多瓦’最高,为8 131.08 mg·kg~(-1),其次是‘蜜萄斯’‘阿考龙’‘福客’,为7 016.25~7 546.66 mg·kg~(-1),而‘天赐’‘赤霞珠’的花色苷较低,分别为2 608.59和2 442.87 mg·kg~(-1),且均由二甲花翠素类、甲基花翠素类、花翠素类,以及花青素类、甲基花青素类花色苷组成,但不同葡萄品种单体花色苷所占比例不同。二甲花翠素类花色苷是所测品种的主要花色苷,其所占比例最高,达80.76%。‘赤霞珠’与‘天赐’、‘蜜萄斯’与‘阿考龙’、‘早巨峰’与‘摩尔多瓦’的花色苷组成比例相似度较高,而‘贝克’及‘福客’花色苷组成与上述品种差异较大。不同品种的花色苷修饰程度以‘贝克’最高,为99.41%,其次是‘摩尔多瓦’及‘天赐’,分别为96.51%、94.60%,‘福客’修饰程度最低,为81.20%。‘赤霞珠’‘天赐’‘蜜萄斯’与‘阿考龙’不含双葡萄糖苷,属欧亚种葡萄,而‘早巨峰’‘摩尔多瓦’‘福客’及‘贝克’主要为双葡萄糖苷花色苷,不属于欧亚种葡萄。通过主成分及聚类分析,‘蜜萄斯’与‘阿考龙’、‘赤霞珠’与‘天赐’最为接近,‘早巨峰’‘贝克’‘摩尔多瓦’‘福客’花色苷组分关系则较远。【结论】不同葡萄品种单体花色苷所占比例有明显差异,二甲花翠素类花色苷是所测品种的主要花色苷,大部分欧亚种葡萄中含量次高的花色苷是甲基花青素类,而欧美杂交种葡萄中则是甲基花翠素类;‘摩尔多瓦’‘蜜萄斯’及‘阿考龙’花色苷含量及修饰程度均较高,具有染色品种的功能。     

刺芹侧耳下脚料水溶性细胞壁多糖碱提工艺优化及活性分析

采用碱提法提取刺芹侧耳(Pleurotus eryngii)下脚料水溶性细胞壁多糖,以得率、多糖含量和β-葡聚糖含量为主要指标,对提取过程中的碱液浓度、料液比、提取温度和提取时间等因素进行考察,优化的提取工艺:1 mol/L的NaOH溶液为提取溶剂,料液比1∶20(g∶mL),提取温度30℃,提取时间4 h,在此条件下,所得水溶性细胞壁多糖组分得率6.25%,多糖含量74.56%,β-葡聚糖含量56.37%。高效凝胶尺寸排阻色谱-多角度激光光散射-示差折光检测仪联用法(HPSEC-MALLS-RI)分析结果显示,该组分主要含4个峰,其中峰1和峰2对应的组分相对分子质量分别为1.36×10~7和2.68×10~6,峰3和峰4对应的组分相对分子质量分别为3.15×10~5和9.82×10~3;体外免疫活性检测结果显示,该水溶性细胞壁多糖组分具有刺激巨噬细胞释放NO和促进小鼠脾淋巴细胞增殖的活性。     

三波长法测定超临界萃取九州虫草总黄酮含量

以九州虫草为试材,采用三波长-紫外分光光度法,测定了九州虫草超临界流体萃取物中的总黄酮含量。结果表明:以芦丁为标准品,选定244、272、302nm为测定波长,标准曲线回归方程为y=0.025 3x-0.090 4(r2=0.999 7);在浓度16~56μg·mL~(-1)内,△A与浓度之间呈良好的线性关系,表明该方法稳定性好,回收率为94.80%~97.75%,精密度RSD0.67%(n=6),超临界提取获得的虫草黄酮含量为1.89mg·g~(-1)。     

不同产地紫芝子实体中活性成分的测定分析

对来自浙江省、老挝和福建省的紫芝(Ganoderma sinense)(编号分别为GS-ZJ、GS-LW、GS-FJ)子实体中水溶性多糖、β-葡聚糖、海藻糖、糖醇、核苷和三萜等多种活性成分的含量进行测定。结果表明:GS-ZJ和GS-LW中水溶性多糖的含量差异不显著,分别为1.27%和1.20%,GS-FJ中水溶性多糖含量相对较低,为0.95%,三者β-葡聚糖含量差异不显著,均在16%左右;GS-FJ中含有的海藻糖和糖醇含量较高,其中甘露醇含量达到4037.7μg/g,远高于另外两种紫芝子实体;核苷类成分比较结果显示,GS-FJ含量最高,其次为GSZJ,GS-LW在种类和含量上均较少;但是GS-LW中三萜种类较丰富,其总三萜含量为538.8μg/g,远高于另外两种紫芝。     

人工培养蛹虫草核苷类HPLC指纹图谱的建立

建立了蛹虫草(Cordyceps militaris)核苷类高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的分析方法,采集10批不同产地人工培养蛹虫草HPLC图谱,运用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"软件建立人工蛹虫草标准图谱并以该模式为参照,计算10批不同产地蛹虫草之间的相似度。结果表明:方法的稳定性、精密度、重现性符合方法学要求;建立的核苷类HPLC指纹图谱共得到10个共有峰,并对确认了虫草素和腺苷峰这两个特征峰,各样品图谱与标准指纹图谱的相似度均在0.9以上。     

黑穗醋栗果皮中非花色苷酚的鉴定与分析

以26个不同品种的黑穗醋栗果皮为试验材料,采用溶剂提取法对不同黑穗醋栗品种果皮中非花色苷酚类物质进行提取,并用高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)技术对果皮中非花色苷酚类物质进行定性及定量分析。结果表明:在负离子扫描模式下,共检测到10种非花色苷酚类物质,主要有杨梅酮-3-葡萄糖苷、杨梅酮-3-芸香糖苷、槲皮素-3-葡萄糖苷和二氢山奈酚-3-鼠李糖苷等;大部分品种果皮非花色苷酚含量在0.5mg·g-1以上,其中含量较丰富的品种为‘格鲁布基’‘戈金鹦鸽’‘滨海明珠’。该研究结果为黑穗醋栗的综合开发利用提供技术支撑,同时也为新品种的选育提供参考依据。     

蛹虫草类胡萝卜素酶法提取和TLC法纯化研究

为了开发一种条件温和、安全环保的方法来分离纯化水溶性蛹虫草类胡萝卜素,通过试验筛选得到辅助提取蛹虫草类胡萝卜素的最佳酶为脂肪酶,并优化形成最佳工艺。蛹虫草子实体粉与水1∶4 (m∶v)混匀,加入0.1%脂肪酶,于pH 8～8.5,50°C条件下酶解30 min;将酶解液的乙醇浓度调至60%,室温下静置提取90 min;离心收集上清液。用该工艺提取1次蛹虫草类胡萝卜素的含量为(1 747.8±17.6)μg·g~(-1),显著高于直接浸提法的[(652.3±24.9)μg·g~(-1)]和超声辅助提取法[(661.5±41.9)μg·g~(-1)],P0.01。通过试验筛选得到蛹虫草类胡萝卜素TLC纯化法的最佳展开剂配比为:0.5%乙酸水溶液∶乙醇∶正丁醇∶乙酸乙酯=12∶8∶24∶36。用该展开剂能分离形成4个清晰的条带。经HPLC对比分析,4个条带的溶出液在出峰时间和顺序上与文献报道的4种蛹虫草类胡萝卜素Cordyxanthin-Ⅰ、Cordyxanthin-Ⅱ、Cordyxanthin-Ⅲ、Cordyxanthin-Ⅳ分别一一对应,峰面积百分比分别为76.10%、95.90%、97.96%、81.53%。     

罗伯茨虫草及其无性型活性成分分析

以10株野生罗伯茨虫草及其无性型罗伯茨被毛孢液体发酵菌丝体为研究对象,采用比色法和高效液相色谱法（HPLC）分别测定其多糖、甘露醇、尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷及虫草素等活性成分含量,并与西藏那曲野生冬虫夏草作比较。结果表明,罗伯茨虫草尿嘧啶含量高于冬虫夏草,尿苷、鸟苷、腺嘌呤、腺苷含量与冬虫夏草接近,而多糖和虫草素含量与冬虫夏草差距较大。在10株罗伯茨被毛孢中,菌株HRT06的多糖、尿苷、鸟苷及腺苷含量最高,与其余菌株有显著性差异（p〈0.05）,且菌株HRT06的腺苷含量为0.140 mg·g-1,达到中国药典冬虫夏草腺苷含量不得少于0.100 mg·g-1的规定,可以筛选作为优良菌株加以利用。本研究测定罗伯茨虫草及其无性型罗伯茨被毛孢活性成分含量,为综合评价罗伯茨虫草应用价值及其开发利用提供科学依据。     

蛹虫草多糖及虫草素的综合提取工艺优化

以蛹虫草菌皮为材料,研究虫草多糖和虫草素的提取工艺,通过单因素正交试验考察了提取温度、提取时间、料液比及提取次数4个因素对虫草多糖和虫草素提取率的影响,建立了提取虫草多糖及虫草素的最佳工艺,即优化条件为:提取温度100℃,提取时间2 h,料液比1∶10,提取次数2次,此时虫草多糖提取率可达8.72%,虫草素的提取率达到0.2908%。     

比色法测定广东虫草虫草酸含量

利用比色法快速测定广东虫草人工培养子实体、液体发酵菌丝体和培养后大米培养基中虫草酸的含量,并采用水提取和乙醇提取两种预处理方法进行虫草酸含量测定方法的比较。结果表明,虫草酸的最大特征吸收峰在412 nm处,质量浓度在10 mg/L-50 mg/L内线性良好,其线性回归方程为：Y=0.0946X-0.0987,R2=0.9989;样品显色后在120 min内基本无变化,稳定性较好;样品平均回收率及RSD分别为98.83%和3.6%;广东虫草子实体、液体发酵菌丝体和培养后大米培养基中虫草酸含量不同,其中子实体的虫草酸含量最高,大米培养基中含量最低;不同预处理方法也对虫草酸含量的测定有不同影响,醇提取法的测出量高于水提取法。广东虫草子实体、发酵菌丝体、大米培养基水提液中的虫草酸含量分别为11.87%,9.49%,3.88%,醇提液中的虫草酸含量分别为17.09%,11.28%,4.03%。     

丝棉木叶片花色苷的提取、稳定性和成分研究

以秋冬季丝棉木的红色叶片为材料,研究叶片中花色苷的提取工艺和不同条件下的稳定性,并采用高效液相色谱法对其成分做出鉴定。结果表明:丝棉木叶片中花色苷的最佳提取方法为以90%甲醇-0.1 mol·L~(-1)盐酸作为提取液,提取温度为60℃,提取时间为3 h,料液比为1∶40 g·mL~(-1)。花色苷对日光敏感,在酸性条件下稳定,60℃以下比较稳定,Pb~(2+)、Fe~(2+)、Fe~(3+)和Cu~(2+)对花色苷有破坏作用,不耐氧化剂和还原剂,麦芽糖对其稳定性也有较大影响。花色苷的主要成分为飞燕草素-3,5-二葡萄糖苷和矢车菊素-3-半乳糖苷。     

高效离心分配色谱(HPCPC)分离纯化苹果树枝中的根皮苷

根皮苷是苹果中主要的水溶性多酚化合物,对人体具有多种生理保健功能。为了获得高纯度的根皮苷,运用高效离心分配色谱技术对苹果树枝乙醇提取物中的根皮苷进行分离纯化。对两相溶剂体系、转子转速和流动相流速等参数进行系统的优化实验。结果表明,最佳两相溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶5∶1∶5,v/v),上相有机相为固定相,下相水相为流动相,转子转速为1500r·min-1,流速为3.0mL·min-1,紫外检测波长为287nm。在此条件下,在30min内,从纯度为17.91%苹果树枝乙醇提取物中一步分离纯化得到根皮苷,高效液相色谱法测定其纯度为91.20%,根皮苷的回收率为98.10%。     

高原线虫草子座和菌核活性成分比较

采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)和紫外分光光度法(ultraviolet-visible spectrophotometry,UV)对高原线虫草(Ophiocordyceps highlandensis)子座和菌核的核苷类、麦角甾醇、总多糖、甘露醇、黄酮、皂苷和三萜等活性成分进行测定和分析。结果表明,核苷类成分、麦角甾醇含量,子座高于菌核;而总多糖、甘露醇、黄酮、皂苷、三萜的含量,菌核高于子座。     

苹果新品种‘瑞雪’及几个常见品种果实香气物质成分差异分析

【目的】以苹果新品种‘瑞雪’及其亲本‘粉红女士’和‘富士’以及代表性栽培品种‘嘎拉’‘乔纳金’‘金冠’‘王林’等7个品种为试验材料,分析果实成熟期香气物质成分的差异,探索苹果新品种‘瑞雪’的主要香气物质成分,为新品种的推广提供理论依据。【方法】应用顶空固相微萃取和气相色谱质谱联用技术,并结合主成分分析,解析参试品种的香气成分。【结果】7个品种共检测出香气物质成分92种,其中:酯类53种、醛类12种、醇类6种、酮类4种、烯烃类9种以及其他类8种;参试品种共有的香气物质成分有:乙酸丁酯、丁酸丁酯、乙酸己酯、2-甲基丁酸-2-甲基丁酯、2-甲基丁酸己酯、己酸己酯、己醛、2-己烯醛、1,3-2甲基苯、ɑ-法尼烯等共10种;不同品种特征香气成分个数分别为‘:瑞雪’(10种)、‘金冠’(10种)、‘粉红女士’(9种)、‘嘎拉’(9种)、‘王林’(8种)、‘乔纳金’(7种)、‘富士’(6种);根据7个苹果品种中香气物质相对含量为数据源进行主成分分析将其分为三类:第一类为‘嘎拉’和‘粉红女士’,第二类为‘富士’、‘王林’和‘金冠’,第三类为‘瑞雪’和‘乔纳金’;不同苹果品种间香气成分种类和含量均存在差异,苹果香气成分可以作为苹果品种选育的评价指标之一。【结论】相较于其他品种‘,瑞雪’苹果中特征香气成分种类较多,香气物质成分中的2-甲基-丁酸己酯(15.24%)、2-己烯醛(17.65%)和ɑ-法尼烯(27.88%)相对含量较高,而2-甲基-1-丁基乙酸酯和乙酸己酯相对含量较低,这些香气物质成分可能是形成‘瑞雪’苹果独特风味的重要原因。