母体铅暴露对仔鼠海马内Calsyntenin-1表达的影响

探讨母体铅暴露对仔鼠海马内钙结合蛋白-1(Calsyntenin-1,Clstn-1)表达的影响。采用自由饮水模式建立铅暴露动物模型,将40只孕小鼠,随机分为对照组和低、中、高剂量染毒组,分别饮用去离子水和1、5、10g/L的乙酸铅水溶液。仔鼠21日龄,分别测其血液和海马组织中铅的含量,然后取其海马组织,分别通过免疫组化方法和Western blot技术检测各组仔鼠海马组织中Clstn-1的蛋白表达情况。结果显示,21d仔鼠血铅、海马铅水平均明显高于对照组(P0.01);免疫组化染色结果显示,Clstn-1免疫组化阳性反应主要定位于胞浆,在仔鼠海马组织的CA1区域中,每个铅暴露组仔鼠Clstn-1免疫组化阳性反应物的面密度与对照组相比增加显著,但平均灰度值明显降低(P0.01);Western blot结果显示,与对照组相比,铅暴露组仔鼠Clstn-1蛋白的表达明显高于对照组,并随染毒剂量增加,表达量增高,差异具有统计学意义(P0.01)。母体铅暴露可能通过上调仔鼠海马内钙结合蛋白的表达进而造成海马损伤,引起神经毒性。     

隆朋单一麻醉对犬IL-1β IL-2 IL-8及TNF-α等4种细胞因子的影响

研究隆朋麻醉对犬4种促炎因子(IL-1β、IL-2、IL-8及TNF-α)的影响。12只健康犬分别于麻醉前(0 h)、麻醉后0.5、2、8、24、48、72 h及120 h共8个时间点,空腹采5 mL血离心取血清,动态检测IL-1β、IL-2、IL-8及TNF-α水平。结果为:IL-1β组只有麻醉后2 h的血清中IL-1β浓度显著低于0 h对照值(P0.05),其他各组的IL-1β浓度虽低于与0 h对照值,但比较差异不显著(P0.05)。IL-2在麻醉后出现下降趋势,在麻醉后48 h显著低于0 h对照值(P0.05),之后开始上升并于120 h基本恢复正常。IL-8组各时间点与0 h对照值比较皆差异不显著(P0.05)。TNF-α在麻醉后出现下降趋势,其中24、48 h与0 h对照值比较差异显著(P0.05),48 h后出现上升趋势,72 h与0 h对照值比较已差异不显著(P0.05),120 h基本回复正常。隆朋单一麻醉对犬4种细胞因子存在一定影响,各细胞因子在120 h后基本恢复正常。     

臭氧与药物治疗对兔骨性关节炎血清中IL-1β、TNF-α含量的影响

目的通过观察比较臭氧与药物治疗兔骨性关节炎血清中IL-1β、TNF-α水平的变化,探讨比较臭氧及药物治疗骨性关节炎的作用效果。方法新西兰兔80只,采用II型胶原蛋白酶关节腔内注射法诱导骨性关节炎模型。随机分为正常组、模型对照组、10ug/ml臭氧关节腔内注射组;20ug/ml臭氧关节腔内注射组;40ug/ml臭氧关节腔内注射组;低剂量药物灌胃组;中剂量药物灌胃组;高剂量药物灌胃组;每组10只。造模4周后进行臭氧干预,同时进行药物灌胃治疗,每周2次,共4周。末次注射及药物灌胃后4周抽取血液样本检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL)-1β含量。结果各治疗组及模型组的血清中TNF-α和IL-1β含量均高于正常组(p0.05);臭氧治疗组与模型组间的血清TNF-α和IL-1β含量无显著性差异(p0.05);药物灌胃治疗组与模型组间的血清TNF-α和IL-1β含量显著性差异(p0.05)。结论(1)骨性关节炎动物模型出现血清TNF-α和IL-1β含量升高,说明造模成功;(2)臭氧无抑制已升高的血清TNF-α和IL-1β含量的作用;(3)药物灌胃治疗均能抑制已升高的血清TNF-α和IL-1β含量的作用。     

氨基多糖纳米微粒对RAW264.7细胞分泌TNF-α、IL-1β影响的试验

为了研究氨基多糖纳米微粒(CNP)对巨噬细胞株RAW264.7分泌细胞因子TNF-α、IL-1β的影响,以巨噬细胞株RAW264.7为腹腔巨噬细胞模型,分别用CNP作用RAW264.7细胞12 h、18 h及24 h后,运用酶联免疫法(ELISA),测定细胞培养液中细胞因子TNF-α、IL-1β的变化。结果:CNP有明显的提高巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1β的作用。表明CNP对巨噬细胞的免疫功能具有促进作用。     

黄芩苷黄芩素小檗碱对LLC-PK1细胞炎症模型中TNF-α IL-1β及IL-6表达的影响

研究中药黄芩苷、黄芩素、小檗碱对细菌脂多糖(LPS)诱导的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)中肿瘤坏死因子-α(TNG-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。用噻唑蓝比色法(MTT法)筛选LPS、黄芩苷、黄芩素和小檗碱对细胞作用的最佳浓度,用RT-PCR检测TNF-α、IL-1βmRNA表达,以确定细胞炎症模型是否建立成功;炎症模型建立后,用最佳浓度的黄芩苷、黄芩素和小檗碱分别作用细胞24h,用qPCR检测TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA的表达量。结果LPS刺激组细胞TNF-α、IL-1βmRNA表达量极显著高于正常对照组(P0.01),黄芩苷、黄芩素和小檗碱作用组细胞TNF-α、IL-1β及IL-6mRNA表达量比LPS刺激组显著降低(P0.05),与对照组无显著差异(P0.05)。上述结果表明,黄芩苷、黄芩素和小檗碱通过抑制炎症细胞TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA的表达,从而发挥抗炎作用。     

冬、夏季室内外饲养对鸡IL-1、TNF-α含量的影响

为探讨不同季节室内外饲养对鸡IL-1、TNF-α含量的影响,在夏、冬季对35日龄黑脚麻鸡进行室内平养和室外放养,49、63、77、91日龄时用ELISA法测定鸡血清中IL-1、TNF-α含量。结果:(1)夏季49、77、91日龄,室内平养组IL-1、TNF-α含量均低于室外放养组;冬季试验除49日龄外,室内平养组IL-1含量均显著高于室外放养组(P0.05)。(2)两季节比较,49、63、77日龄时冬季室外放养组IL-1含量高于夏季放养组(P0.05);冬季室内平养组除49日龄外,IL-1含量均显著高于夏季平养组(P0.05)。TNF-α含量上,冬季室外放养组除91日龄外,均显著高于夏季放养组(P0.05);冬季室内平养组TNF-α含量也均显著高于夏季平养组(P0.05)。结论:夏季室外放养可提高鸡IL-1、TNF-α含量;冬季室内平养可提高鸡IL-1、TNF-α的含量。贵州冬季产生的冷应激可提高鸡血清IL-1、TNF-α的含量。     

母体铅暴露对仔鼠肝脏MMP-2和MMP-9 mRNA表达的影响

为探讨母体铅暴露对仔鼠肝脏MMP-2和MMP-9 mRNA表达的影响,采用自由饮水模式建立铅暴露动物模型,将40只雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(1.0,5.0,10.0g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21d,随机分为低、中、高剂量染毒组和对照组,仔鼠21日龄,分别测其血液和肝脏中铅的含量,然后取其肝脏组织,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测各组仔鼠肝脏中MMP-2和MMP-9mRNA的表达情况。结果显示,21d后,铅暴露组仔鼠血液和肝脏中铅水平均明显高于对照组(P<0.05);与对照组相比,低、中和高剂量铅暴露组仔鼠肝脏内MMP-2mRNA的表达量明显增高,且差异具有统计学意义(P<0.05)。中、高剂量铅暴露组仔鼠肝脏组织中MMP-9mRNA的表达明显高于对照组(P<0.05),但低剂量铅暴露组仔鼠肝脏组织中MMP-9mRNA的表达与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结果表明,母体铅暴露可能通过改变仔鼠肝脏中MMP-2 mRNA的表达进而造成肝脏损伤。母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,铅暴露可能通过增强仔鼠肝脏中MMP-9mRNA的表达进而造成肝脏损伤,从而引起组织发生病变。     

白细胞介素-1β蛋白在孕哺期铅暴露仔鼠海马组织中的表达

为探讨母体铅染毒对其子一代海马组织中白细胞介素-1β（IL-1β）蛋白表达的影响,将雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅（0.3,1.0,3.0g/L,对照组饮蒸馏水）至仔鼠出生后21d断乳为止。随机抽取各组仔鼠,于出生后7,14,21d分别测其血液和海马组织中铅的含量;于出生后21d,采用Western blot方法测定各组海马组织中IL-1β的表达情况。结果表明,孕哺期不同剂量铅暴露后,出生后7,14,21d的仔鼠血铅、海马铅水平均明显高于对照组（P〈0.05）。Western blot结果显示,IL-1β蛋白在不同剂量铅暴露组海马组织中的表达明显高于对照组（P〈0.05）。相关分析表明,IL-1β蛋白的表达与血铅、海马铅呈显著正相关（P〈0.05）。母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,提示仔鼠血铅和海马铅的升高,引起海马组织中IL-1β表达的上调,可能损伤了海马神经元,进而损伤了神经系统。     

PDGF-B基因沉默对LPS介导小鼠乳腺上皮细胞分泌IL-6和TNF-α的影响

旨在观察PDGF-B基因沉默对LPS诱导小鼠乳腺上皮细胞分泌IL-6和TNF-α的影响,为揭示乳腺上皮细胞的免疫机制提供参考数据。采用siRNA转染技术对PDGF-B基因进行沉默,用实时荧光定量RT-PCR方法筛选最佳转染条件,并检测沉默后LPS介导其下游信号PI3K mRNA的表达量,用ELISA法检测其下游信号PI3K蛋白含量和LPS介导细胞分泌前炎症细胞因子IL-6和TNF-α的含量。结果显示,选用PDGF-B-mus-886片段的50nmol/L浓度转染组能极显著抑制PDGF-B的mRNA表达(P0.01);PDGF-B沉默后,LPS刺激下其下游PI3K的mRNA和蛋白表达量与对照组相比均呈显著性降低(P0.05);细胞分泌IL-6的量与对照组相比呈显著性降低(P0.05),而分泌TNF-α的量各组无显著性变化(P0.05)。结果表明,PDGF-B可引起LPS介导乳腺上皮细胞IL-6分泌量的改变,因此,PDGF-B可作为靶基因深入研究乳腺上皮细胞的免疫功能,为乳腺炎症、肿瘤等相关乳腺疾病的治疗提供新的思路及试验数据,为新药的开发和应用提供理论依据。     

犬穿透性角膜移植术后血清TNF-α、IL-2和β-EP的动态变化

为了解犬穿透性角膜移植术后的免疫排斥反应、炎症反应与疼痛反应,在选择11只6-12月龄、体重为4.0-6.5 kg的西施犬、北京犬和小型杂交犬进行穿透性角膜移植后,每天观察受体犬的全身及眼部表现,并于术后30 d内每5 d和30 d后每10 d采集1次受体犬外周静脉血,应用放射免疫法检测血清中的TNF-α、IL-2与β-EP含量,研究其动态变化。试验结果显示,术后第5-10天各受体犬血清TNF-α、IL-2、β-EP含量均表现不同程度的升高;从术后第15天开始,受体犬血清TNF-α、IL-2、β-EP含量则受多种因素影响而发生不同变化。研究结果表明,犬同种异体穿透性角膜移植和术后局部使用地塞米松,基本不出现亚急性免疫排斥反应或排斥反应程度很轻,术后血清TNF-α含量的动态变化不宜用于免疫排斥反应的早期预测及诊断;犬同种异体穿透性角膜移植后,血清IL-2含量可随眼部炎症程度的改变而发生相应变化,术后监测其变化可作为判断角膜移植术后炎症程度及其转归的重要指标;角膜创伤及其表面线结可引起犬的疼痛反应和血清β-EP含量显著升高,术后监测血清β-EP含量的动态变化能够准确反映角膜移植后犬对角膜疼痛的应激程度。     

高致病性猪蓝耳病自然病例血清致炎因子IL-1、IL-6和TNF-α含量的测定与分析

本试验旨在探究高致病性蓝耳病(HP-PRRS)自然病例中致炎因子IL-1、IL-6和TNF-α含量,进而阐述HP-PRRS的致病机理,为养殖生产中的HP-PRRS防控提供理论基础。在成都地区4个发病猪场采集具有临床症状的猪血清(含5头濒死猪)35份与无临床症状猪血清23份,利用RT-PCR分别检测出HP-PRRSV阳性血清25份和11份。将检测出阳性表现症状的25份血清、检测阳性无临床症状的11份血清及检测阴性的12份血清分成3组,分别标注为病猪组、隐性感染组和健康对照组,运用ELISA方法进行IL-1、IL-6和TNF-α含量测定。结果显示,IL-1含量在三组中差异极显著(P0.01),病猪组极显著高于隐性感染组与健康组(P0.01),隐性感染组与健康对照组差异不显著(P0.05);IL-6含量在三组中差异显著(P0.05),病猪组显著高于隐性感染组与健康对照组(P0.05),隐性感染组与健康对照组差异不显著(P0.05);TNF-α含量在三组之间无显著差异(P0.05)。该结果表明IL-1与IL-6在HP-PRRS感染致病中具有重要作用。     

Mizolastine对趾叶炎小鼠趾部组织TNF-α表达的影响

采用组织化学和免疫组化的染色方法,检测趾叶炎小鼠趾部组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)的表达水平、炎性细胞、肥大细胞及其脱颗粒的动态变化.结果显示,造模组在免疫后14 d TNF-α表达达到一个峰值,而后表达开始减弱,21 d后表达开始增强,极显著高于同一时相正常组(P<0.01);各治疗组其表达均极显著低于同一时相造模组,其中低剂量治疗组小鼠同一时相均极显著高于正常组(P<0.01),中剂量治疗组小鼠除免疫后前3个时相显著外(P<0.05),免疫后35 d与正常组不显著(P>0.05),高剂量治疗组小鼠除免疫后14 d显著外(P<0.05),其余各时相均与正常组不显著(P>0.05),各治疗组小鼠的TNF-α表达水平并随药物浓度的提高和免疫时间的延长而逐渐减弱,而肥大细胞及其脱颗粒和炎性细胞变化均与TNF-α的表达趋势相吻合.结果表明,Mizolastine可以显著抑制TNF-α的表达.     

脂多糖诱导小鼠肾小管上皮细胞和肺泡巨噬细胞IL-12和TNF-α表达的研究

为了研究脂多糖(LPS)诱导小鼠肾小管上皮细胞和肺泡巨噬细胞IL-12和TNF-α表达的关系,试验采用不同浓度LPS以不同时间体外刺激肾小管上皮细胞(TEC)和肺泡巨噬细胞(AM),用ELISA法分别检测上清液中IL-12和TNF-α的分泌量。结果表明:用2μg/mLLPS刺激TEC,其分泌IL-12的量于24小时达到峰值(P0.01);随着LPS浓度的增加,TEC分泌IL-12的量逐渐增大,当LPS浓度增加到20μg/mL时IL-12的分泌量达到峰值。用10μg/mLLPS刺激AM,AM分泌TNF-α的量于2小时达到峰值(P0.01),随后逐渐下降;随着LPS浓度的变化,TNF-α分泌水平有明显不同。说明在一定的剂量范围内,IL-12和TNF-α的分泌量与LPS呈剂量及时间依赖关系,但随着LPS刺激时间及浓度的增加,IL-12和TNF-α的分泌量逐渐减少;不同浓度的LPS与细胞因子的产生效价有相关性。     

不同程度奶牛乳腺炎IL-8、TNF-α的研究

为了研究不同程度乳腺炎患牛血液和乳汁中IL-8、TNF-α的活性变化,试验采用放射免疫分析法对不同程度乳腺炎患牛血清和乳清中IL-8、TNF-α的含量进行了测定。结果表明:不同程度乳腺炎患牛血液中IL-8活性随着乳腺炎严重程度的增加而呈递增趋势,均高于对照组奶牛(P<0.05或P<0.01);但体细胞数(SCC)为≥150～≤500万个/mL和SCC>500万个/mL的患牛乳汁中IL-8活性与对照组相比无显著变化,不具备乳腺炎的评价。不同程度乳腺炎血液和乳汁中TNF-α活性随着乳腺炎严重程度的增加而呈递增趋势,均高于对照组奶牛(P<0.05或P<0.01)。说明血液中IL-8及血液和乳汁中TNF-α均可作为奶牛乳腺炎的诊断指标。     

高钼低铜对小鼠肾脏结构及其表达TNF-α蛋白的影响

为研究高钼低铜对小鼠肾脏结构及TNF-α蛋白表达的影响,选用80只雄性昆明种小鼠随机分为4组,在饮水中添加不同浓度的钼(600 mg/L)及铜(3mg/L),建立动物模型。在试验处理第90天时采样,研究高钼低铜对小鼠肾脏组织病理学及TNF-α表达的影响。结果显示,高钼组小鼠肾脏组织肾小体聚集,部分肾小球发生萎缩,间质中有大量炎性细胞浸润,有新月体出现。与对照组相比,高钼组肾脏TNF-α蛋白表达量上升15.60%(P0.01);与低铜组相比,高钼低铜组肾脏TNF-α蛋白表达量上升24.60%(P0.01);与高钼组相比,高钼低铜组肾脏TNF-α蛋白表达量上升7.14%(P0.05)。表明高剂量钼导致肾脏发生明显的病理组织学损伤,显著提高了小鼠肾脏TNF-α的表达,低铜加剧了钼的毒性作用。     

普洱茶对巨噬细胞分泌IL-1β的影响

研究了普洱茶水提取物对THP-1细胞经PMA诱导分化成的巨噬细胞,经脂多糖（LPS）刺激后IL-1β分泌的影响。结果表明,在LPS刺激后24h内,250μg／ml的普洱茶水提取物可以明显抑制IL-lβ的分泌,同等剂量的绿茶和红茶水溶物也有类似的效果,但绿茶中最重要的活性成分EGCG（12．5μg／ml）没有抑制IL-1...     

冷暴露仔猪PBMC中Hsp72与血浆TNF-α、IL-6的变化规律

为探讨急性冷应激对仔猪免疫系统的影响及机制,本试验将18头仔猪随机分成常温对照组、冷暴露组和冷暴露并糖皮质激素受体(GRs)阻断组.常温组在18℃～20℃下而冷暴露各组在4℃～8℃环境下分栏饲养.试验期持续12 h,在冷暴露开始后六个时间点对18头仔猪采血并分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),检测Hsp72和TNF-α、IL-6的水平.实验结果显示:冷暴露组IL-6水平在冷暴露6 h时比开始前有显著升高(P＜0.01),TNFα水平在冷暴露1 h 时显著下降(P＜0.01),3 h和6 h又显著升高(P＜0.01),且IL-6与TNF-α呈中等相关(r=0.4198);GRs阻断组IL-6水平在冷暴露6 h时显著升高,TNF-α水平在各时间点差异不显著;冷暴露各组Hsp72在冷暴露1 h,3 h,6 h,9 h,12 h时均显著升高(P＜0.01),且受体阻断组TNF-α与Hsp72呈中等强度负相关(r=0.6444).这些结果表明:急性冷暴露能使血浆IL-6水平升高和PBMC中Hsp72 的表达增强,而使TNF-α的水平降低,且阻断糖皮质激素对它们之间的相关性有一定影响.     

大肠杆菌对奶牛子宫内膜组织合成分泌IL-1β、IL-6和PGE_2的影响

基于奶牛子宫内膜组织体外培养方法,分别采用浓度为1×10~5,1×10~6 CFU/mL的致病性大肠杆菌处理体外培养的子宫内膜组织12,24 h后用HE染色方法评价组织损伤情况,ELISA法检测组织培养液上清中IL-1β,IL-6和PGE_2的分泌变化,RT-qPCR法检测IL-1β和IL-6基因表达变化。结果显示:与对照组相比,大肠杆菌分别处理12,24 h后奶牛子宫内膜组织中子宫内膜上皮细胞和腺上皮细胞脱落、坏死、崩解,并且显著提高奶牛子宫内膜组织IL-1β,IL-6和PGE_2的分泌及IL-1β和IL-6的mRNA的表达量。结果表明:成功建立了体外大肠杆菌型奶牛子宫内膜炎模型,且IL-1β,IL-6和PGE_2在大肠杆菌引起的奶牛子宫内膜组织炎症反应中发挥着重要的调控作用。     

松子壳多糖体外诱生小鼠IL-2和TNF-α的研究

<正>松子壳多糖(Pine nut shell polysaccharide,PSP)是从松子壳(松塔)中提取的酸性多糖成分,其在抗肿瘤、抗病毒和免疫促进剂作用方面研究较多(Sak-agami等,1999;Harada等,1991;吕永俊等,2008),我们在前期试验证实了松子壳多糖对小鼠脾T、B淋巴细胞转化、巨噬细胞的吞噬功能、NK细胞杀伤作用均有明显的促进作用,但PSP对细胞因子的影响未见报道。本次试验进一步考察松子壳多糖对小鼠体外诱生IL-2及TNF-α分泌的影响,旨在为松子壳多糖的深入开发利用奠定一定的实验基础。     

TNF-α对牦牛卵母细胞HIF-1α和HSP70的表达及后续胚胎发育能力的影响

旨在研究肿瘤坏死因子(TNF-α)对牦牛卵母细胞体外成熟和对低氧诱导因子1α(HIF-1α)、热休克蛋白70(HSP70)的表达以及后续胚胎发育能力的影响。在牦牛卵母细胞体外成熟培养液中添加不同浓度的TNF-α(最终浓度分别为0、10、25、50 ng·mL^-1),牦牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)培养成熟后,统计其卵母细胞成熟率及体外受精后早期胚胎的发育率,采用RT-PCR扩增牦牛 HIF-1α、 HSP 70基因,采用实时荧光定量PCR(qRT-RCR)、蛋白免疫印迹法(Western blotting)和免疫荧光染色技术检测HIF-1α、HSP70在基因和蛋白水平的表达情况。结果发现:1)成熟液中加入TNF-α,卵母细胞的成熟率提高,且随着TNF-α浓度的升高,卵母细胞的成熟率、卵裂率和囊胚率逐渐升高,当TNF-α浓度为 25 ng·mL^-1 时,卵母细胞的成熟率和卵裂率达到最高,分别为84.98%和66.85%,而囊胚率也达到了21.48%,均显著高于对照组( P <0.05);2)随着TNF-α浓度的升高, HIF-1α的表达量逐渐降低,对照组 HIF-1α的表达量极显著高于其他组(P <0.01),50 ng·mL^-1 TNF-α组 HIF-1α的表达量极显著低于其他组(P <0.01),HIF-1α在卵丘细胞和卵母细胞上均有表达;3)25 ng·mL^-1 TNF-α组的HSP 70表达量最高,极显著高于其他组(P <0.01),而当TNF-α达到50 ng·mL^-1 时,HSP 70的表达量最低。综上表明,在牦牛卵母细胞体外成熟过程中,TNF-α明显提高了卵母细胞的发育能力,同时还诱导了HSP 70的表达,抑制了HIF-1α的表达,为今后探讨TNF-α、 HIF-1α和HSP70在牦牛生殖过程中发挥的作用以及对胚胎发育的影响提供理论依据。