hApoCⅢ转基因小型猪的脂蛋白构成变化

为分析hApoCⅢ转基因小型猪的脂蛋白构成变化,探讨载脂蛋白ApoCⅢ在代谢调节中的作用,应用Western blot和免疫组织化学方法检测人ApoCⅢ在转基因小型猪体内的表达和分布,并通过脂蛋白的快速蛋白液相色谱分析试验分析转基因小型猪的脂蛋白构成特点。结果显示,在转基因小型猪的肝脏和小肠组织中能检测到hApoCⅢ蛋白,且转基因小型猪血浆极低密度脂蛋白(VLDL)颗粒较非转基因小型猪显著增高。这表明,hApoCⅢ转基因小型猪过表达ApoCⅢ蛋白造成其VLDL颗粒显著增高。     

ApoCⅢ转基因小型猪的表型特征

应用体细胞核移植方法制备ApoCⅢ转基因小型猪,并分析其表型特征。通过血浆脂质检测、口服脂肪负荷试验、肝素后血浆脂蛋白酶活性测定以及静脉葡萄糖耐量试验,分析转基因小型猪的脂质和糖代谢特点。该小型猪表现出显著的高甘油三酯血症,与非转基因小型猪相比,转基因小型猪对甘油三酯(TG)的清除显著延迟,且肝素后血浆脂蛋白脂酶活性也显著降低,但静脉糖耐量未有改变。     

转基因克隆技术与猪的遗传育种

动物克隆技术的研究现状及其发展趋势１、克隆动物研究背景“克隆”在生物学上有多个概念,但其基本含义系指一个细胞或个体以无性繁殖方式产生的一群细胞或一群个体,在不发生突变的情况下,克隆出的细胞或个体具有完全相同的遗传性状,常称“无性繁殖系”（细胞系）。因...     

广西巴马小型猪IFN-Y基因的克隆和序列分析

将猪外周淋巴细胞进行体外培养,在刀豆球蛋白A(conA)刺激培养15h后,提取培养淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR技术扩增广西巴马小型猪Y-干扰素(IFN-Y)基因,并克隆到PMD18-T载体上,进行测序。测序结果表明,扩增的cDNA全长558个碱基,包含501个碱基开放阅读框架,编码166个氨基酸,分子量为19．42ku。此cDNA与人、牛、山羊、马、狗和鼠的IFN-Y基因核苷酸比较,同源性分别为74．9％,86．5％,86．9％,81％,58．7％和63．3％,与其它猪种的IFN-Y基因核苷酸比较同源性为100％。     

转基因猪中抗生素标记基因neo漂移风险评估

本试验旨在研究转基因猪中抗生素标记基因neo漂移的可能性。利用Southern blotting鉴定F1代仔猪的显隐性,结果发现6头仔猪中有3头为转基因仔猪,3头为阴性仔猪。通过PCR技术对试验仔猪血液和消化道组织中neo基因进行检测,结果发现neo基因没有在血液水平和消化道组织中发生漂移。通过PCR技术对试验仔猪肠道细菌中neo基因进行检测,在肠道细菌基因组中没有检测到neo基因的存在。检测结果表明,仔猪血液、肠道细菌和消化道组织等都没有发生neo基因的漂移。     

转基因玉米和转基因猪研究新进展

转基因技术是将外源基因(人工分离和修饰过的基因)导入到生物体基因组中并进行表达的技术,它能引起生物体性状的可遗传的修饰.人们常说的"遗传工程"、"基因工程"、"遗传转化"等均为转基因的同义词.     

我国转基因猪的研究进展

自1997年首例体细胞克隆羊“多莉”获得成功以后,转基因家畜在生物反应器、异种器官移植和提高动物生产性能等方面得到了广泛的应用。由于猪在解剖、生理和营养代谢等方面与人类很接近,又是一种重要家畜．所以转基因猪的研究越来越受重视。该文综述了我国转基因猪在生产性能改良、器官移植和疾病模型等方面的研究进展。     

我国转基因猪的研究进展

自1997年首例体细胞克隆羊“多莉”获得成功以后,转基因家畜在生物反应器、异种器官移植和提高动物生产性能等方面得到了广泛的应用。由于猪在解剖、生理和营养代谢等方面与人类很接近,又是一种重要家畜．所以转基因猪的研究越来越受重视。该文综述了我国转基因猪在生产性能改良、器官移植和疾病模型等方面的研究进展。     

吸入麻醉在小型猪无菌剖腹产中的使用效果观察

随着我国整体科技水平的不断提高，对实验动物的微生物背景要求越来越高。为了满足此种需求，北京市SPF猪育种管理中心协助中国农业大学实验动物研究所等单位实施国家科技部社会公益研究专项资金项目——我国小型猪实验动物化及生物安全性研究(项目编号：2001DIA40036)，旨在通过无菌剖腹产手术获取无特定病原体仔猪，     

转基因猪的研究进展

猪是人类生活关系最为密切的家畜之一。猪在解剖、组织、生理和营养代谢等方面与人类接近,因此,转基因猪的研究获得了众多科学家的重视,尤其在近几十年,转基因猪的发展相当迅速。本文主要从国内外转基因猪育种进程对转基因猪的研究概况作一评述。     

五指山小型猪对猪病毒瘟的敏感性试验

本试验证明,２～４月龄猪瘟抗体阴性的五指山小型猪对猪瘟石门系病毒具有良好的敏感性。     

猪蓝耳病的生物安全管理及预防

猪蓝耳病又称猪繁殖及呼吸障碍综合征(PRRS),主要是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染所致.该病毒的主要侵害目标是猪肺的淋巴组织,可对免疫器官造成巨大的损伤,导致免疫系统发生抑制性反应.加强对猪蓝耳病的生物安全管理及预防,是现阶段国内生猪生产行业的重要工作之一.     

猪蓝耳病的生物安全管理及预防

针对性地分析了猪蓝耳病的发病、预防和控制措施,提出了对应的生物安全管理及防控方法,以期为研究猪蓝耳病的对应疫苗奠定基础。     

转基因及基因编辑技术与猪遗传育种

基因编辑是一种利用人工核酸酶系统对特定基因进行敲除、插入或修饰的技术。在猪的传统育种中,存在着选育时间长、低遗传力性状选择效率低等诸多缺陷,而基因编辑技术可以对控制相关性状的关键基因进行改变,不仅可以克服传统育种中的困难,而且在生长速度、瘦肉率、抗病能力、环境改善等方面都有重要突破,成为近年来猪遗传育种的新方向。另外,猪在解剖学与生理学上与人具有高度同源性,使得猪成为疾病模型和异体器官移植的研究热点。本文主要总结了基因编辑和转基因技术在猪现代育种中的相关进展,并展望了其发展前景。     

转基因猪银染核仁组织区的初步研究

采用外周血淋巴细胞培养技术，硝酸银银染法研究转基因猪的染色体银染核仁组织区（Ａｇ－ＮＯＲ）。结果表明：由湖北白猪Ｖ系经基因转移形成的转基因猪（以后简称转基因猪）与湖北自猪ＩＶ系普通猪（以后简称普通猪）银染点的数目和大小在个体、细胞、染色体水平上具有多态性，Ａｇ－ＮＯＲ位于第８号和第１０号染色体的次缢痕区；不同个体的Ａｇ－ＮＯＲ数不同，转基因猪平均每个细胞有二个银染点，普通猪平均每个细胞有三个银染点     

广西巴马小型猪MyoG基因克隆及外显子3多态性分析

为了解RT-PCR扩增广西巴马小型猪肌细胞生成素(MyoG)cDNA序列,并分析与其他物种间的聚类关系,试验采用PCR-SSCP技术分析广西巴马小型猪、长白猪、杜洛克猪、大约克猪MyoG基因外显子3多态性,根据GenBank中已发表的猪MyoG基因序列设计PCR引物,以广西巴马小型猪肌肉组织总RNA为模板进行RT-PCR,所得目的片段经纯化、克隆、鉴定和测序;从4个猪种的耳组织中分别提取30个个体的基因组DNA,采用PCR的方法扩增出外显子3并进行SSCP分析。结果表明:克隆得到广西巴马小型猪MyoG基因编码区长675 bp,与四川野猪、人、奶牛、小鼠同源序列相似性分别为99.7%、93.8%、91.7%、90.5%,且不同物种间保守性较强;与四川野猪相比,克隆得到的广西巴马小型猪MyoG cDNA序列在第233位点及第642位点上发生基因突变;广西巴马小型猪MyoG基因的基因型只有AA型,而长白猪、杜洛克猪、大约克猪MyoG基因的基因型只有AB型,各群体内无多态性。     

转基因猪的研究进展

自80年代转基因动物模型建立以来,转基因动物己应用于生命科学的各个领域,尤其在生物反应器、异种器官移植和提高动物生产性能等方面得到了广泛的应用。转基因动物越来越受到人们的重视,由于猪在解剖、组织、生理和营养代谢等方面均与人类最接近,又是一种重要家畜。所以转基因猪的研究越来越受重视。本文综述了转基因猪的常用技术方法,尤其是显微注射法、核移植法等几种主要方法,评价了转基因的研究概况和转基因猪的热点应用领域等。     

转基因猪的研究进展

自80年代转基因动物模型建立以来,转基因动物己应用于生命科学的各个领域,尤其在生物反应器、异种器官移植和提高动物生产性能等方面得到了广泛的应用。转基因动物越来越受到人们的重视,由于猪在解剖、组织、生理和营养代谢等方面均与人类最接近,又是一种重要家畜。所以转基因猪的研究越来越受重视。本文综述了转基因猪的常用技术方法,尤其是显微注射法、核移植法等几种主要方法,评价了转基因的研究概况和转基因猪的热点应用领域等。     

猪胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖基因的原核表达及其产物的细胞毒性

参考GenBank中猪胸膜肺炎放线杆菌（App）血清2型荚膜多糖基因的序列分别设计了3对特异性引物，通过PCR分别扩增了CpsA、CpsB、CpsC3个基因，获得长约1137、429、1146bp的片段，将其分别克隆到pMD18-T中，经酶切鉴定和序列分析获得了阳性克隆子；再将CpsA、CpsB、CpsC分别插入原核表达载体pGEX-KG后，转化BL21，在IPTG诱导下获得高效表达，经Western-blotting检测证实，表达产物CpsC有生物学活性，CpsA、CpsB无活性；将3种表达产物等量混合，做10倍递进稀释后，与分离出的猪嗜中性粒细胞作用，37℃、50mL／L CO2培养箱中温育4h后加入底物液，测定D492nm值。结果表明，App荚膜多糖对猪嗜中性粒细胞无毒性作用。