不同生长期灵芝子实体三萜酸和多糖含量测定

分别采用HPLC法和药典法测定不同生长期灵芝子实体中三萜酸和灵芝多糖的含量。HPLC法色谱条件:色谱柱为Alltech Alltima C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.04%甲酸溶液,检测波长254 nm,流速1.0 m L/min,柱温15℃。结果:灵芝酸C_2、灵芝酸G、灵芝烯酸B、灵芝酸B、灵芝烯酸A、灵芝酸A、灵芝酸D、灵芝烯酸D和灵芝酸C_1的线性范围为5.9~42.0μg/m L,r为0.999,加样回收率为96.42%~104.14%。表现方法可行、重现性好,能定量测定灵芝中三萜酸和多糖的含量。     

不同来源赤芝活性成分分析及质量评价

分别采用高效液相色谱仪、荧光分光光度计、紫外-可见分光光度计测定13批不同来源赤芝（Ganoderma lucidum）子实体的多糖、总三萜中甾醇、灵芝酸C2、灵芝酸B、灵芝酸A、灵芝酸E、灵芝酮三醇、灵芝萜烯二醇以及硒的含量，并基于熵权逼近理想解排序法（technique for order preference by similarity to an idealsolution, TOPSIS）对上述测定指标进行数据分析，综合评价产品质量。结果表明，基于液相色谱分析建立的6种三萜化合物含量测定方法具有较高的灵敏度与准确度；熵权TOPSIS评价模型快速、灵敏、有效，与主成分分析评价模型结论基本一致，能全面、客观地评价赤芝药材质量，可为赤芝品质分析与综合评价提供参考。     

硬孔灵芝和赤芝孢子油的脂肪酸、角鲨烯及麦角甾醇类的比较

采用超临界CO_2流体萃取技术分别从硬孔灵芝(Ganoderma duropora)和赤芝(G.lucidum)孢子粉中萃取分离孢子油,采用气相色谱(GC)法测定孢子油(萃取条件相同)的脂肪酸成分和角鲨烯含量,用气相色谱-质谱联用选择性离子检测(GC-MS/SIM)模式测定麦角甾醇类成分和总含量。结果表明:两种孢子油中脂肪酸成分组成相似,在不同分离条件(分离I和II)下获得的样品(分别标记分离I和II得到的硬孔灵芝样品为A和B,赤芝样品为C和D)均由油酸、亚油酸、硬脂酸和棕榈酸组成,4种脂肪酸在硬孔灵芝中占检出成分的95.1%～96.3%(质量分数),在赤芝中占97.0%～97.9%(质量分数),其中硬孔灵芝A和B中两种不饱和脂肪酸(油酸和亚油酸)的相对含量分别合计为71.2%和73.1%,略低于赤芝(C和D分别合计为76.8%和77.7%);两种孢子油中均检测出开链三萜——角鲨烯,其在硬孔灵芝孢子油A和B中含量分别为0.40mg/g和0.44mg/g,在赤芝孢子油C和D中分别为0.41mg/g和0.43mg/g;两种孢子油中也均检测出至少4种麦角甾醇类成分,组成相似,其中硬孔灵芝孢子油A和B中含量分别合计为1.9mg/g和2.9mg/g,与赤芝孢子油(C和D中分别为2.4mg/g和2.7mg/g)中相近。     

赤芝子实体乙酸乙酯提取物的化学成分研究

用乙酸乙酯对赤芝(Ganoderma lucidum)子实体进行提取,并采用多种柱层析方法分离得到10个化合物,经质谱和核磁共振方法鉴定这10个化合物分别为拱状灵芝素A(1)、拱状灵芝素B(2)、对苯二甲酸正丁异丁二醇酯(3)、对苯二甲酸二丁酯(4)、α-羟基-24-烷酸(5)、棕榈酸(6)、硬脂酸(7)、N-苯乙基-苯甲酰胺(8)、原儿茶酸(9)和琥珀酸(10),其中化合物3、4、8、9和10是首次从赤芝子实体中分离得到的.     

四种灵芝产品中多糖和三萜含量的比较

以市场上的灵芝破壁孢子粉、未破壁孢子粉、子实体和精粉共4种灵芝产品为研究对象,比较分析其活性成分三萜和多糖含量的差异。应用光学显微镜比较破壁孢子粉与未破壁孢子粉的差别、热水浸提法提取多糖、苯酚-硫酸法测定多糖含量、醇提法提取三萜、香草醛-冰醋酸法测定三萜含量、高效液相色谱法(HPLC)检测灵芝酸。结果显示精粉中多糖含量为52.40 mg·g~(-1),显著高于其他三者,破壁与未破壁孢子粉多糖含量为(21.32±1.11)mg·g~(-1),差异不显著,但高于子实体的9.83 mg·g~(-1)。而子实体中三萜含量却是最高的,为4.97 mg·g~(-1),破壁孢子粉中三萜含量为2.23 mg·g~(-1),明显高于未破壁的1.10 mg·g~(-1)。通过对比4种产品的三萜指纹图谱发现,子实体和精粉中的灵芝酸种类远远多于破壁及未破壁孢子粉中的,且不同产品中有相同的组分。     

三株野生重伞灵芝的鉴定及其多糖、三萜含量分析

采用形态鉴定、ITS鉴定和ITS-RFLP分子标记方法对采集自福建的3株野生灵芝进行鉴定,并将其生物学特性及化学成分与赤芝(Ganoderma lingzhi)菌株ZK进行比较。结果表明:采集的3株野生灵芝为重伞灵芝(G.multipileum)。与赤芝菌株ZK相比,3株野生重伞灵芝菌株LQ、LJ和Y1菌丝生长速度快(P0.01),LQ、LJ、Y1最适生长温度分别为32、32、34℃,均高于赤芝ZK;供试菌株均偏好酸性生长环境;重伞灵芝LQ和Y1的产量分别为每袋(12.1±1.3)、(11.7±0.9)g,达到ZK产量(17.6±1.8)g的66%以上。Y1与LQ的子实体多糖含量分别为(12.9±0.1)、(10.7±0.3)mg/g,高于赤芝ZK的子实体多糖含量(9.2±0.2)mg/g(P0.01);LJ、Y1的三萜含量约为7.5mg/g,LQ的三萜含量为(6.5±0.3)mg/g,分别是ZK三萜含量的84.27%和73.03%。从HPLC图谱可知重伞灵芝有许多赤芝没有的峰,三萜酸的种类比较丰富。     

基于偏最小二乘法的赤芝子实体三萜类化合物抗氧化谱效关系的研究

测定了64株赤芝(Ganoderma lucidum)子实体醇提物清除二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基的活性和三萜指纹图谱,采用遗传算法筛选其指纹图谱中的26个共有峰,并标定出其中15个特征峰,运用偏最小二乘回归分析方法(partial least squares regression,PLSR)对指纹图谱中26个三萜峰与醇提物清除DPPH自由基的活性进行关联分析,建立了赤芝子实体三萜类化合物的抗氧化谱效关系方程。在赤芝子实体醇提物三萜指纹图谱的26个共有峰中,峰S1、S4、S9、S10和S26的峰面积与醇提物清除DPPH自由基的活性呈显著正相关关系;峰S3、S11、S15、S18、S19、S22和S25的峰面积与醇提物清除DPPH自由基的活性呈显著负相关关系。分别测定鉴定出的15个峰对应的三萜化合物对DPPH自由基的清除活性,发现与清除DPPH自由基活性呈显著正相关的三萜化合物灵芝酸C_2(S4)、灵芝酸B(S9)、灵芝酸LM_2(S10)、灵芝醛A(S26)对DPPH自由基的清除活性明显高于其他三萜化合物,与清除DPPH自由基活性呈显著负相关的三萜化合物灵芝酮三醇(S18)、灵芝萜酮二醇(S22)无清除DPPH自由基的活性。另外,利用H_2O_2诱导的PC12细胞损伤模型进一步验证灵芝酸C_2、灵芝酸B、灵芝酸LM_2、灵芝醛A和灵芝萜酮二醇在细胞水平的抗氧化活性,发现灵芝酸C_2、灵芝酸B、灵芝酸LM_2、灵芝醛A具有明显的保护神经细胞氧化损伤的活性,而灵芝萜酮二醇对神经细胞的氧化损伤无保护作用。结果表明,本研究建立的赤芝子实体三萜类化合物抗氧化谱效关系方程具有较高的准确性,能够较全面地反应赤芝子实体醇提物中不同三萜化合物与其抗氧化活性的相关性,可快速锁定有效成分以指导活性成分的分离纯化工作。此外,该方法也为赤芝子实体的质量控制提供了更为有效和准确的方法。     

灵芝含量和发酵温度对灵芝葡萄酒质量的影响

灵芝葡萄酒含有多种营养物质和活性成分,具有保健和预防疾病的作用,但灵芝葡萄酒的质量受多种因素的影响。本试验以黑提葡萄和赤灵芝Ganoderma lucidum(Curtis,Fr.)P.Karst为材料,设置2个因素的不同水平处理:灵芝含量0、3.0 g·kg~(-1)、7.0 g·kg~(-1)、11.0 g·kg~(-1)和温度20℃、25℃、自然(18℃~34℃),通过测定pH、酒精度、残糖量、甲醇含量、总SO2含量、干物质含量、灵芝三萜含量、苦味等指标,研究其对灵芝葡萄酒质量的影响。结果显示,综合各项指标,对灵芝葡萄酒质量影响效果由好到差顺序的处理分别是灵芝含量:7.0 g·kg~(-1)11.0 g·kg~(-1)3.0 g·kg~(-1)0,温度:25℃20℃自然温度(18℃~34℃)。因此,灵芝葡萄酒制作的最佳条件为灵芝含量7.0 g·kg~(-1),发酵为温度25℃,本试验为酿造优质灵芝葡萄酒提供技术指导。     

2种灵芝液体培养的比较研究

比较赤芝和松杉灵芝液体培养菌丝体生物量和多糖含量。在相同的培养条件下,对赤芝和松杉灵芝进行液体培养,采用热水浸提法提取干燥菌丝体多糖,通过蒽酮-硫酸法测定赤芝和松杉灵芝多糖含量。测得赤芝多糖含量为7.22%,松杉灵芝多糖含量为3.78%,液体培养赤芝生长速度比松杉灵芝快,多糖含量也比松杉灵芝高,因此,赤芝更适合用于液体培养生产灵芝多糖。     

玉米秆在灵芝制种中的应用

灵芝是一类重要的木腐真菌,其制种研究为进一步的大田栽培提供了原料基础。该研究以玉米秆为主要成分应用于灵芝制种培养基的制备,二级种和三级种分别设置了3种不同的配方,比较了灵芝菌丝在不同培养基上的生长速度、形态特征和菌丝中多糖含量。结果表明:灵芝菌株在培养基YM2B和YM3C上生长速度分别为(3.09±0.06)mm·d~(-1)和(4.84±0.33)mm·d~(-1),多糖含量分别为(0.440±0.025)%和(0.279±0.032)%,生长优势明显,有利于进一步大田栽培应用。表明玉米秆可作为主要原料用于灵芝制种培养基的配制。     

不同栽培方式对赤灵芝多糖的影响

灵芝(Ganoderma lucidum)是我国传统中药材,多糖是灵芝的重要功能成分。通过对大段木、小段木、袋料3种不同栽培方式的灵芝多糖含量和化学性质进行比较分析。结果显示,大段木灵芝、小段木灵芝、袋料灵芝的灵芝多糖含量分别为14.67 mg·g~(-1)、11.96 mg·g~(-1)、5.35 mg·g~(-1);大段木灵芝多糖组分分子量高达4 688kDa;大段木灵芝多糖、小段木灵芝多糖和袋料灵芝多糖分别含有8种、5种和7种单糖,组成比例存在差异。本文的研究结果显示大段木栽培的灵芝多糖具有一定优势,为灵芝多糖的选择和应用提供了基础。     

定向采收‘沪农灵芝1号’高三萜和水溶性多糖原料研究

采用超高效液相色谱-质谱（UPLC-MS/MS）法和高效排阻色谱-多角度激光散射（HPSEC-MALLS）法检测灵芝（Ganoderma lucidum）‘沪农灵芝1号’不同生长期（接种后2～7个月，分别命名为P1～P6）子实体和菌基中三萜和水溶性多糖含量，并结合子实体和菌基的产量计算三萜和水溶性多糖的产量。结果表明：子实体中灵芝酸C2、G含量在P1、P2期较高，灵芝烯酸B和灵芝酸D、F、DM含量在P2期最高，灵芝酸B、A、S、T和总三萜含量在P1期最高；菌基中灵芝酸C2、A、D、DM和灵芝烯酸B含量在P1期最高，灵芝酸G含量在P 5期最高，灵芝酸B、S含量在P 6期最高，灵芝酸F含量在P 1、P 6期较高，灵芝酸T、总三萜含量在P 5、P 6期较高。子实体中灵芝酸C2、G、B、D、F、DM，灵芝烯酸B，总三萜产量在P2期最高；灵芝酸A产量在P3期最高；灵芝酸S、T产量在P1期最高。菌基中灵芝酸C2、G、B、A、D、F、DM，灵芝烯酸B产量在P1期最高；灵芝酸S、T产量在P2期最高；总三萜产量在P1、P2期较高。子实体和菌基中的水溶性多糖含量和产量均在P1期最高。研究结果将为‘沪农灵芝...     

桂西北野生灵芝和人工栽培灵芝多糖含量比较

用苯酚-硫酸法测定了桂西北地区几种人工栽培灵芝和野生灵芝的多糖含量。结果表明:人工栽培赤芝的多糖含量均比野生赤芝的多糖含量高;人工栽培赤芝的多糖含量也比部分野生黑芝的多糖含量高。分析了不同样品灵芝多糖含量差异的原因,并探讨保护野生药用植物资源,用人工栽培灵芝替代野生灵芝的可行性。     

不同灵芝、多孔菌样品对LN-CaP和A549细胞生长的影响

准确记录不同产地灵芝、多孔菌(云南丽江黑芝、海南黑芝、海南紫芝、越南无柄赤芝、海南假芝、西藏林芝赤芝、浙江庆元方格人工种植赤芝和贵州桑黄、吉林桦褐孔菌)的形态,核对生物学分类中的科属种;观察9个样品和丙酸睾酮对人激素依赖性前列腺癌细胞株(LN-CaP)和肺腺癌细胞株(A549)的细胞图谱。结果显示:不同产地、不同灵芝、多孔菌样品有不同的细胞生理效应;不同浓度丙酸睾酮对LN-CaP细胞株有不同的细胞生理效应;并发现桦褐孔菌细胞图谱与众不同,探讨样品给药量与效应之间的关系。     

灵芝优良菌株选育初报

对日赤芝进行不同分离部位比较试验,对分离筛选获得的两菌株(延特1号、延特2号)进行培养基筛选及栽培比较,结果表明:灵芝最佳分离部位为菌柄基部;最适培养基为营养液培养基;延特1号为试验筛选出的最佳灵芝菌种。     

利用阶段pH控制提高灵芝深层发酵合成三萜能力的研究

采用3 L发酵罐考察不同pH发酵条件对灵芝(Ganoderma lucidum)菌丝体生长和灵芝胞内三萜合成的影响。结果表明,在pH4.5条件下,菌丝体干重和胞内三萜含量均最高,分别为12.31 g·L~(-1)和237.91 mg·L~(-1)。根据不同pH条件下,灵芝发酵过程中菌丝体的比生长速率、三萜比合成速率的变化,提出四阶段pH控制策略:0～26 h pH自然,26～36 h pH4.0,36～81 h pH4.5,81～168 h pH5.0,在此条件下,在3 L发酵罐中发酵,灵芝的菌丝体干重为14.18 g·L~(-1),比对照(pH自然)和pH4.5时分别提高59.15%和15.19%,灵芝胞内三萜含量279.59 mg·L~(-1),比对照和pH4.5时分别提高47.72%和17.52%;在50 L发酵罐中进行发酵验证,菌丝体干重和灵芝胞内三萜含量分别为13.54 g·L~(-1)和256.97 mg·L~(-1)。本研究的四阶段pH控制策略可较大幅度提高灵芝胞内三萜产量,且该发酵工艺操作简单易行,可为利用规模化深层发酵技术生产灵芝胞内三萜提供有益的参考。     

不同生长期乳苣营养器官矿质营养元素含量的动态变化

为了研究不同生长时期乳苣营养器官矿质营养元素含量动态变化,为乳苣最佳营养时期的确立提供理论依据,以乳苣为试材,分析幼苗期、生长期和开花期乳苣根、茎、叶3大营养器官的矿物质元素含量变化。结果表明,(1)在根、茎和叶器官中,大量元素K、Mg随着时间的延长其含量逐渐下降,而开花期Ca含量显著高于幼苗期和生长期,叶片中大量元素的含量高于根和茎。(2)根中幼苗期微量元素Na、Mn、Zn含量显著高于生长期和开花期,开花期Cu含量(5.996 mg·kg~(-1))显著高于幼苗期(4.503 mg·kg~(-1))和生长期(2.966 mg·kg~(-1)),Fe在各个时期无显著变化;茎中幼苗期Na、Mn、Zn和Cu含量显著高于生长期和开花期,而生长期Fe元素含量显著高于幼苗期和开花期;叶中幼苗期Na元素含量(567.99 mg·kg~(-1))显著高于生长期(396.22 mg·kg~(-1))和开花期(304.41 mg·kg~(-1)),生长期Na、Mn、Cu含量显著高于幼苗期和开花期,开花期Zn含量显著高于生长期和幼苗期。(3)相关性分析表明,乳苣的根、茎、叶器官中大量元素之间存在显著正相关,元素的吸收具有相互促进的作用。综合以上结果表明,乳苣最佳营养时期为生长期或开花期,在幼苗期乳苣全株营养价值较低。     

灵芝菌丝体速溶粉的体外抗氧化作用

试验研究灵芝菌丝体速溶粉的体外抗氧化作用,为其功能定位提供参考。主要对灵芝菌丝体速溶粉清除DPPH·、·OH、O_2~-·的能力,总还原力以及抑制脂质过氧化的能力进行测定,并检测了灵芝菌丝体中的多糖含量。结果表明,灵芝菌丝体速溶粉中的灵芝多糖含量为4.89%。随着灵芝菌丝体速溶粉浓度的增加,清除各自由基的清除率、总还原力和抑制脂质过氧化的抑制率均逐渐增大;清除DPPH·、·OH、O_2~-·的IC_(50)值分别为0.912 mg·mL~(-1)、3.173 mg·mL~(-1)、0.863 mg·mL~(-1),抑制脂质过氧化作用的IC50值为6.706 mg·mL~(-1)。说明灵芝菌丝体速溶粉有较强的抗氧化活性。     

不同品种桃果酒品质特性与酿酒适宜性评价

【目的】比较不同品种桃果酒的品质特性,明确不同品种桃果酒的优缺点,筛选适宜酿制果酒的桃品种。【方法】以不同肉色的13个品种桃果实为原料发酵制酒,分析桃果酒的感官、理化品质、酚类物质含量、抗氧化能力及甲醇和高级醇含量,对不同品种桃果实的酿酒适宜性进行评价。【结果】原料桃品种对桃果酒品质具有显著影响。不同品种桃果酒的色泽因果肉颜色不同而差异很大,白肉桃果酒褐变明显;酒精度(φ)、总酸、干浸出物含量(ρ,后同)分别为9.43%～11.93%、4.22～6.79 g·L~(-1)和20.60～37.46 g·L~(-1),均符合果酒产品质量标准要求;总酚、总黄酮、花色苷含量(w,后同)和抗氧化活性分别为183.02～437.22 mg·L~(-1)、40.03～212.07 mg·L~(-1)、0～843.29μg·L~(-1)和237.51～661.61μmol·L~(-1),均以万州酸桃果酒为最高,黄肉桃果酒的多酚、类黄酮含量和抗氧化活性均较低;甲醇含量为0.22～0.55 g·L~(-1),以万州酸桃果酒为最高,仓方早生桃果酒最低;高级醇含量为277.63～752.71 mg·L~(-1),以大久保桃果酒为最高,武汉2号桃果酒最低;感官评定结果以万州酸桃、NJC 83、白凤、仓方早生、中农金辉和中桃绯玉表现较优。【结论】不同肉色桃果酒的品质特性存在较大差异,红肉桃品种万州酸桃、中桃绯玉,白肉桃品种白凤、仓方早生,黄肉桃品种NJC 83、中农金辉,比较适宜酿制不同特色的桃果酒。     

野生层迭灵芝驯化栽培研究初报

报道了野生层迭灵芝(Ganoderma lobatum)发现和采摘的地理位置和生态环境,分离、纯化出了泰G1号菌种,以及在木屑袋料和椴木上驯化栽培试验成功的步骤和方法。驯化栽培出的层迭灵芝子实体,经泰国玛希隆大学药学学院商品质量检测中心测试,其三萜含量为(0.8±0.01)%(w·w~(-1),n=3,RSD=0.79%),多糖含量为(1.4±0.01)%(w·w~(-1),n=3,RSD=0.83%);经上海市农科院食用菌研究所检测,层迭灵芝三萜含量为5.32%,多糖含量为2.39%,核苷和三萜含量及图谱与其他灵芝品种有较大差异。试验和检测结果表明,层迭灵芝可作为灵芝属一新栽培品种,具有极高的经济价值和研究价值。