一致性检验比较两种弓形虫抗体检测试剂盒

比较两个弓形虫抗体检测试剂盒检测结果的一致性,为流行病学调查和临床诊断筛选可合理使用的商品化试剂盒。对510份猪血清分别进行弓形虫抗体IHA和ELISA检测,应用Kappa检验比较两种试剂盒检测结果的一致性并进行分析,用x~2检验分析差异性。两种试剂盒联合检出79份阳性,阳性符合率为67.52%,阴性符合率为95.17%,总符合率为88.82%。x~2检验差异显著(x~2=228.23,p=0.00);u检验值为15.89,两种产品的一致性为中度一致(Kappa值=0.66)。所以弓形虫病IHA检测试剂盒可作为现场收益流行病学调查,而弓形虫Ig G抗体ELISA检测试剂盒适合辅助临床检测和诊断。x~2检验比较两种试剂盒具有局限性。u检验排除偶然性造成的一致程度,与Kappa检验结合可比较一致性。弓形虫抗体检测要根据实况选择不同的试剂盒。     

口蹄疫病毒A型竞争ELISA抗体检测试剂盒在流行病学调查中的应用

为评价口蹄疫病毒A型竞争ELISA(cELISA)抗体检测试剂盒在流行病学调查中的应用前景,对2017年从福建省三明市采集的336份黄牛、奶牛、羊和猪血清样品,用A型cELISA抗体检测试剂盒进行抗体检测。结果显示,92份黄牛血清、92份羊血清、92份猪血清、60份奶牛血清的A型抗体阳性率分别为13.04%、11.96%、20.65%、86.67%。从上述4种血清中,各挑选10份血清(阴性、阳性各5份)共40份,采用口蹄疫病毒液相阻断ELISA(LPB-ELISA)抗体检测试剂盒进行验证。结果显示:cELISA检测为阳性的20份血清中,用LPB-ELISA检出阳性19份;cELISA检测为阴性的20份血清中,用LPB-ELISA检出阴性17份;两种方法的κ值为0.8,总符合率为90.00%。结果表明,A型cELISA试剂盒与LPB-ELISA试剂盒的符合率和一致性均较高,可用于口蹄疫流行病学调查和血清学监测。     

应用Kappa检验比较猪蓝耳病ELISA抗体检测试剂盒

[目的]比较两个猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）抗体酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测试剂盒结果的一致性。[方法]对390份猪血清进行PRRSV抗体ELISA检测,应用Kappa检验比较两种试剂盒检测结果的一致性并进行分析。[结果]两种试剂盒联合检测出250份PRRSV抗体阳性和70份阴性,阳性一致性为80.65%,阴性一致性为87.50%,符合率82.1%,结果一致性为中度一致（ Kappa值=0.552）。[结论]2种方法检测结果一致性较好,建议根据实际需要选择PRRSV抗体检测试剂盒。     

比较两种ELISA试剂盒在猪伪狂犬病血清抗体检测中的一致性

比较两种ELISA试剂盒检测结果的一致性,为流行病学调查和临床诊断筛选适合的商品化试剂盒。采用来自两个厂家的野毒抗体(gE)和免疫抗体(gB)ELISA检测试剂盒分别检测362份和392份猪血清,应用Kappa检验比较试验数据的一致性。结果显示:两种猪伪狂犬病抗体(g E)检测试剂盒联合检测出95份抗体阳性和256份阴性,符合率97.24%,结果一致性为极强(Kappa值0.932);两种猪伪狂犬病抗体(gB)检测试剂盒联合检测出351份抗体阳性和9份阴性,符合率91.84%,一致性为弱(Kappa值0.347)。以上结果说明,两种猪伪狂犬病抗体(gE)检测试剂盒都适用于PRV gE抗体检测,而两种猪伪狂犬病抗体(gB)检测试剂金差异较大,需慎重选择。     

高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌抗体

为探究高敏荧光免疫层析分析法检测牛分枝杆菌（M. bovis）抗体的可行性，对该方法的特异性、灵敏性、稳定性及临床适用性进行了分析。特异性试验结果显示，该方法能够检出M. bovis抗体阳性血清参考品，而对布鲁氏菌阳性血清、O型口蹄疫阳性血清、A型口蹄疫阳性血清、样品稀释液、结核菌素皮内变态反应（TST）阴性牛血清样品等均为阴性；灵敏性试验结果显示，该方法最低可检测到3 200倍稀释的牛结核（bTB）强阳性血清参考品；稳定性试验结果显示，该方法检测bTB强阳性血清和阳性血清的变异系数分别为5.48%和5.83%；临床样本检测结果显示，该方法与IDEXX M. bovis ELISA抗体检测试剂盒的符合率为86.36%，具有较高的一致性，且差异不显著。以上结果表明，高敏荧光免疫层析分析法特异性强、灵敏度高、结果可靠，可作为TST检疫的补充抗体检测方法，用于bTB的诊断、检疫和净化。     

应用Kappa法检验IHA和ELISA在检测猪瘟抗体中的一致性

[目的]比较IHA和ELISA 2种基层使用较广泛的猪瘟抗体检测试剂盒检测结果的一致性。[方法]用产品A(IHA)和产品B(ELISA)对237份猪血清进行抗体检测,分别计算阳性率、阳性一致性、阴性一致性、符合率,并进行Kappa检验。[结果]产品B检测的阳性率(73.8%)高于A(67.1%),且有统计学意义(p<0.01)。2种试剂盒共同检出128份猪瘟抗体阳性和31份阴性,阳性一致性为80.5%(95%置信区间:74.3%-86.7%),阴性一致性为39.7%(95%置信区间:28.9%-50.6%),符合率67.1%(95%置信区间:61.1%-73.1%);Kappa值为0.214(95%置信区间:0.088-0.339)。[结论]2种试剂盒的检测结果阳性率有差异,结果一致性强度为弱。     

2种蓝舌病ELISA抗体检测试剂盒的比较和分析

为了验证云南出入境检验检疫局检验检疫技术中心自主研发的蓝舌病病毒C-ELISA抗体检测试剂盒(YN BTV C-ELISA)的可应用性,将YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒与美国IDEXX公司研制的蓝舌病病毒VP7蛋白抗体ELISA检测试剂盒对田间牛羊的1 028份血清样本进行对比检测试验,并使用YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒对15份检出的已知背景血清进行批内和批间可重复性试验。YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒相对IDEXX公司蓝舌病病毒ELISA抗体试剂盒的符合率、敏感性、特异性分别是98.44%、98.03%、98.85%,两者一致性用Kappa值表示,Kappa=0.97。批内试验强阳性、弱阳性变异系数在0.23~1.81之间,阴性血清变异系数在3.94~6.64之间,批间试验强阳性、弱阳性变异系数在0.26~2.35之间,阴性血清变异系数在3.55~8.51之间。结果表明:YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒的符合率、敏感性、特异性均较高,具有高度的可靠性、一致性和真实性。YN BTV C-ELISA抗体检测试剂盒的批内和批间有高度的重复性,在蓝舌病的诊断中具有良好的实用价值。     

3种ELISA试剂盒检测抗牛支原体抗体的比较

为比较3种抗牛支原体(M.bovis)血清抗体的ELISA试剂盒检测效果,本实验应用3种检测M.bovis血清抗体ELISA诊断试剂盒对38份阳性样品(自然感染19份,人工感染18份)和37份阴性样品进行检测.结果表明:本实验室制备的HVRI试剂盒与商品化试剂盒Kit 1的检测结果和综合检测结果符合率分别达到92%和96%;而商品化试剂盒Kit 2的检测结果与综合检测结果符合率仅为74.67%.一致性检验结果显示:HVRI试剂盒与Kit 1的一致性较高;Kit 2与HVRI试剂盒、Kit 2与Kit 1有中度的一致性.此外,3种试剂盒对牛传染性胸膜肺炎国际标准血清(PS2)的检测结果显示HVRI试剂盒和Kit 1均为为阴性,Kit 2为阳性.因此,HVRI试剂盒与Kit 1更适于M.bovis检测和开展流行病学调查.     

阿卡斑病毒竞争ELISA抗体检测方法的建立和比较试验

为建立阿卡斑病毒抗体检测方法,本研究以纯化的阿卡斑病毒作为包被抗原,以制备的抗阿卡斑病毒的多克隆抗体与待检血清竞争结合抗原,采用方阵滴定法优化反应条件,建立了阿卡斑病毒竞争ELISA(cELISA)抗体检测方法。通过对60份牛、羊阿卡斑病毒抗体阳性血清和40份阴性血清样品的检测,确定阴阳性样品抑制率(PI)临界值为60%;特异性试验结果显示,该方法对BTV-1、BTV-4、BTV-9、BTV-16、小反刍兽疫、中山病病毒、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、羊痘和O型、A型、Asia-1型口蹄疫病毒阳性血清无交叉反应;敏感性试验结果显示,标准阳性血清1颐128倍稀释时,检测结果仍为阳性,SNT最低检出为,敏感性高于微量血清中和试验(SNT)检测结果(1颐64);批内和批间变异系数(CV)在0.54%~5.27%和0.3%~9.3%之间,具有较好的可重复性;用该方法与法国IDVET公司的同类试剂盒对85份牛、羊血清样品同时检测,结果显示二者符合率为91.76%,可以替代进口同类产品。本研究建立的检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于阿卡斑病毒抗体检测和流行病学调查。     

不同厂家试剂盒检测猪A型口蹄疫抗体的对比试验

为了对不同厂家试剂盒检测猪A型口蹄疫抗体的敏感性及与兰州兽医研究所(以下简称为兰兽研)猪A型抗体试剂盒检测的一致性进行综合比较,试验从湖南省湘潭市某猪场采集血清样本328份(其中母猪血清268份,育肥猪血清60份),使用A、B、C厂家的试剂盒,同时使用兰兽研试剂盒作为对照,按照各厂家试剂盒说明书对所有血清进行猪A型口蹄疫抗体测定及结果判定。结果显示,母猪FMD-A型抗体阳性率数值,试剂盒A试剂盒C试剂盒B兰兽研试剂盒;育肥猪FMD-A型抗体阳性率数值,试剂盒A兰兽研试剂盒试剂盒C试剂盒B;以兰兽研检测结果为参照,FMD-A型抗体阳性符合率数值试剂盒A试剂盒C试剂盒B;FMD-A型抗体阴性符合率数值试剂盒B试剂盒C试剂盒A。综合三种试剂盒的敏感性和一致性来看,试剂盒A的检测敏感性及与兰兽研的阳性一致性最高,试剂盒C次之;试剂盒B与兰兽研的阴性一致性最高,试剂盒C次之;三种试剂盒的检测敏感性及与兰兽研的一致性相差不大。