2型猪链球菌毒力因子概述

2型猪链球菌感染已成为影响全世界养猪业的重要问题之一。它主要引起猪脑膜炎、肺炎、心内膜炎、关节炎、败血症等,并可感染人。猪链球菌2型致病机理还不太清楚,至今为止,已知的毒力因子有荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、胞外蛋白因子、溶血素、粘附素等。文章对猪链球菌2型毒力因子做一系统概述。     

猪链球菌2型毒力因子及其检测方法

猪链球菌病是由多种致病性链球菌引起的一种细菌性人兽共患传染病,是由D、E及L群链球菌引起猪的多种疾病的总称,其中以2型猪链球菌病的流行最广。已发现的猪链球菌2型（Streptococcus suis type 2,SS2）的毒力因子包括溶血素（suilysin,SLY）、溶菌酶释放蛋白（muramidase-relased protein,MRP）、细胞外蛋白因子（extracellular factor,EF）、IgG结合蛋白等。 SS2的毒力因子与其致病性密切相关,目前有多种检测SS2毒力因子的方法,常用的有免疫印迹、ELISA和PCR等检测方法。主要就猪链球菌病及其猪链球菌2型毒力因子的检测方法进行概述。     

猪链球菌2型毒力因子研究进展

猪链球菌2型(SS2)是一种重要的人兽共患病病原菌,其主要毒力因子包括荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、溶血素、纤连蛋白结合蛋白、谷氨酸脱氢酶等,但是这些经典的毒力因子不足以解释猪链球菌病发病的临床症状,而且毒力表型往往与实际毒力及临床症状不符。近年来随着研究的深入,鉴定出一系列毒力相关元件,主要有Sao蛋白、存在于89K毒力岛的双信号转导系统(salk-salR)、dltA基因、pgdA基因、srtA基因、Ⅳ型二肽基肽酶(dipeptidyl peptidaseⅣ,DPPⅣ)、毒力调控子R(control of virulence R,CovR)、烯醇酶(enolase)、谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GlnA)等。论文对以上毒力因子研究进展进行综述,以期为SS2毒力因子及致病机制研究提供参考。     

猪链球菌2型毒力相关因子的研究进展

目前,猪链球菌(Streptococcus suis)病已成为严重影响各国养猪业发展和人类健康的一种重要的人兽共患传染病。猪链球菌的血清型众多,有35个血清型,其中猪链球菌2型(Streptococcus suistype 2,SS2)的致病性强、流行范围广,而且它的毒力因子在该菌的致病过程中发挥着重要的作用。但是猪链球菌2型毒力因子认识的缺乏是制约该病有效防制的关键,因此作者对SS2已发现的毒力因子和新发现的一些毒力相关因子进行了广泛深入的论述,为该病的预防、治疗提供科学依据和参考。     

致病性猪链球菌2型的病原分离鉴定及毒力因子的PCR检测

通过对广西某猪场急性死亡的猪进行病原分离,分离到革兰氏阳性球菌,用链球菌快速鉴定试剂条Rapid ID 32 Strep鉴定为猪链球菌2型;并对分离菌进行猪链球菌2型荚膜多糖抗原（cps2J）及其重要毒力因子溶菌酶释放蛋白（MRP）、细胞外蛋白因子（EF）和溶血素（SLY）的多重PCR检测,同时对cps2J基因进行序列测定,与GenBank发表的猪链球菌2型相比,同源性为98.8%,毒力因子MRP、EF和SLY检测均为阳性,证实广西某猪场急性死亡的猪为高毒力猪链球菌2型感染所致。动物试验中,该菌可引起小白鼠部分死亡,家兔体温最高升至40.3℃,最后败血而死。     

猪链球菌毒力因子的研究进展

猪链球菌病是一种重要的人畜共患病,给人类和养猪业的健康发展造成极大的危害。猪链球菌的毒力因子包括荚膜多糖(CPS)、溶菌酶释放蛋白(MRP)、胞外因子(EF)、溶血素(SLY)、毒力相关序列(ORF2)、纤连蛋白和血纤蛋白原结合蛋白(FBPS)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、IgG结合蛋白等,它们与猪链球菌的致病性有着密切的关系。笔者通过总结毒力因子对猪链球菌致病机理的影响,以期为猪链球菌病疫苗的研制和治疗提供理论基础。     

猪链球菌2型的分离鉴定及致病性试验

从全国部分猪场采集疑似猪链球菌感染病例脑样品20份进行细菌分离,成功分离到10株细菌,通过猪链球菌及血清类型鉴定,最终确定其中一株为2型猪链球菌。应用猪链球菌7种主要毒力因子特异性基因扩增检测方法检测所分离到的2型猪链球菌的毒力因子分布情况,并应用小鼠攻毒试验对其致病性进行观察研究。结果表明:分离的2型猪链球菌具备7种毒力因子;动物试验表明SS2能引起小鼠的急性败血症及脑膜炎;细菌回归试验结果表明,试验组死亡小鼠的脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有细菌定植,且能分离出攻毒菌。此分离菌株的研究为研制2型猪链球菌病疫苗奠定了基础。     

猪链球菌2型毒力因子及疫苗候选蛋白研究进展

猪链球菌2型（ss2）是一种重要的人兽共患病病原菌,可引起人和猪发生严重疾病。SS2的经典毒力因子有荚膜抗原、溶菌酶释放蛋白、溶血素等。随着研究的深入．又发现了一些与SS2致病性相关的基因和毒力相关元件,以及一些蛋白酶类,这些毒力因子多数具有较好的免疫原性,并在链球菌致病和生长过程中发挥十分重要的作用。通过对一些具有免疫原性的SS2毒力因子蛋白片段进行体外重组表达,有望研制出有效预防SS2感染的基因工程疫苗。     

猪链球菌2型及其毒力因子检测多重PCR的建立与应用

根据相关文献设计并合成引物，建立了能同时检测猪链球菌2型（cps）及其重要毒力因子溶菌酶释放蛋白（mrp）和细胞外因子（epf）的多重PCR方法。目的片段的大小分别为885bp（mrp）、675bp（cps）和443bp（epf）。对参考菌株、人工攻毒病料和临床收集病料的检测结果显示，该多重PCR特异性强、敏感性高，可直接从临床病料中检测出猪链球菌2型，并能鉴定其毒力因子表型。     

辽宁省猪链球菌流行株主要血清型毒力因子检测及其致病性

为了解辽宁省猪链球菌流行菌株主要血清型毒力因子分布特征及致病性,依据猪链球菌属保守基因及血清型特异性基因,从辽宁地区采集猪链球菌疑似病例肺脏、肝脾、脑、关节液等样品进行猪链球菌及其血清类型鉴定;应用猪链球菌6种主要毒力因子特异性基因扩增检测方法,检测所分离到的不同血清类型猪链球菌的毒力因子分布情况,并应用小鼠攻毒试验和病理学技术对其致病性进行观察研究。结果显示:从辽宁地区采集的72个样品中共分离到23株猪链球菌,主要血清型有1,2,7型,其中SS1型4株,SS2型2株,SS7型5株。其余12株未确定血清型。SS1、SS2、SS7型阳性率分别为17.39%,8.69%,30.43%。毒力因子检测结果显示,上述6种毒力因子检出率分别为100%,66.6%,25%,16.7%,75.0%,58.3%,其中SS2均具备6种毒力因子,SS1、SS7和血清型阴性株猪链球菌均具有部分毒力因子,与SS2的差异毒力因子为epf。SS2可引起小鼠的急性败血症以及脑膜炎,SS1、SS7均可引起小鼠发病,但各器官的损伤则较轻。SS1、SS2、SS7脑内接种均可引起小鼠脑膜炎,炎症反应SS2最重,SS1次之,SS7最轻。     

猪链球菌耐药性产生对其毒力的影响

为探讨猪链球菌2型菌株耐药性产生对其毒力的影响,作者采用次抑菌浓度的青霉素和红霉素诱导猪链球菌2型临床分离敏感株HA9801成为青霉素、红霉素耐药株,并对亲本株与诱导耐药株的半数致死量（LD50）、溶血环、毒力因子溶菌酶释放蛋白（MRP）、胞外蛋白因子（EF）和荚膜多糖（CPS）及对小鼠的组织损伤进行比较。结果显示：次抑菌浓度的红霉素和青霉素可以诱导耐药性的产生,但耐药株与亲本株比较,溶血性、LD50、MRP、CPS、EF及对组织的损伤程度均与亲本株无显著差异（P〈0．05）。结果表明：猪链球菌2型HA9801株在获得耐药性的同时,仍能保持与亲本株相似的毒力,其毒力不会因耐药性的获得而降低。     

猪链球菌2型毒力因子与MLST分型分析

为了解我国猪链球菌2型毒力因子和MLST型的特点,对四川、重庆和山东等地的22株猪链球菌2型进行毒力因子检测和ST型分析。结果显示,78%(17/22)的分离株为sly+mrp+epf+基因型的强毒株,仅山东省的5株分离株为弱毒力型。四川省和重庆市89%(15/17)的分离株为毒力较强的ST7型,而山东省的分离株均为毒力稍弱的ST1型。结合这些地区的猪链球菌病发病情况,分析提示猪链球菌2型的毒力因子和ST分型与菌株的致病性有一定的相关性。     

2型猪链球菌的毒力因子的鉴定及分布

为探讨河南省2型猪链球菌的毒力及分布情况,本实验设计3对引物,分别扩增溶菌酶释放蛋白(muramidase-released protein,MRP)、胞外因子(extracellular protein fateror,EPF)和溶血素(suilysin,SLY)基因,对2016年1月～2016年12月从河南省猪场采集的各种组织病料中分离鉴定出的87株2型猪链球菌进行了初步的小鼠毒力试验和mrp、epf、sly基因的扩增。结果表明,河南省流行的2型猪链球菌的菌株均对小鼠有毒力,共有8种毒力基因型,其中以毒力相对高的sly+mrp+epf+型为主,其次为sly+mrp-epf+型和sly-mrp+epf+型。     

重庆地区表观健康猪中猪链球菌的检测

本研究旨在调查重庆地区表观健康猪的猪链球菌带菌情况,并揭示健康猪群携带猪链球菌的公共卫生学意义。随机采集重庆市17个区县(市)定点屠宰场表观健康猪的腭扁桃体1 360份,进行猪链球菌的分离鉴定,并对致病性较强的1、2、7、9、14型及1/2型进行分型与毒力因子分析。结果共分离到225株猪链球菌,分离率为16.54%;检出猪链球菌2型4株,猪链球菌7型3株,猪链球菌9型3株,猪链球菌1/2型1株;毒力因子谱分析发现多数(10/11)分离株缺失部分毒力因子,但也存在具有全部已知毒力因子的强毒株,且在国内首次检出小片段mrp型猪链球菌1/2型1株和7型2株。结果提示,重庆地区健康猪群带菌现象普遍,且流行菌株具有与国外不同的特点,对屠宰场工作人员健康造成威胁。     

猪链球菌PCR检测技术研究进展

猪链球菌是猪的一种重要病原菌,并且也会引起人的链球菌病。有35个荚膜血清型(1/21、~34),通常自发病或死亡猪体分离获得1,2,7,9型和14型菌株,其中2型是毒力最强的血清型。根据已知猪链球菌16 SrRNA及溶血素(sly)、谷氨酸脱氢酶(gdh)、荚膜多糖(cps)、胞壁蛋白或溶菌酶释放相关蛋白(mrp)、胞外因子(epf)编码基因序列设计特异性引物,建立猪链球菌群和1(14),2(1/2),7型和9型特异性PCR或多重PCR,建立2型致病性菌株和1型高致病性菌株毒力鉴定PCR或多重PCR,用于检测和鉴别临床病料和细菌分离物中的猪链球菌,具有高敏感性和高特异性,与其他致病菌及其他血清的猪链球菌型无交叉反应,为疫病诊断及流行病学的研究提供了快速、简便和有用的工具。     

猪链球菌2型毒力相关蛋白

猪链球菌 (Streptococcus suis)是重要的猪病原菌 ,并能感染人 ,可致人和猪死亡。猪链球菌病多发于 3～ 12周龄断奶后的仔猪 ,几乎世界各国都有发生 ,对养猪业危害严重 ,同时事关公共卫生。目前已鉴定了 35种血清型的猪链球菌 ,其中最重要、最常见的是 2型 [1 ] 。我国于 1991年在广东省首次证实此菌的存在 ,1998年在江苏的人群和猪群中暴发由 2型所致的链球菌病 [2 ] ,其毒力因子的研究 ,尤其值得关注。1　毒力相关蛋白的发现　　基于传统观念 ,最初有人提出荚膜多糖决定猪链球菌 2型的侵袭力 [3 ,4] ,但后来的研究不能证实荚膜多糖是该菌…     

新疆石河子部分猪场链球菌2型的分离鉴定与毒力因子检测

为了解石河子垦区具有呼吸道病症状的病死猪感染猪链球菌2型的情况,对采集的53份肺脏组织进行了猪链球菌的分离培养、生化鉴定、PCR鉴定以及cps2J、ef、mrp毒力因子的检测。分离出猪链球菌2型21株,其中8株毒力因-T-为cps2J．10株毒力因子为ef,3毒力因子为cps2J／ef;小鼠试验表明cps2J毒力因子的菌株不具有致病性,毒力因子为ef、cps2J／ef的菌株具有致病性。得出结论,石河子部分规模猪场存在链球菌2型感染情况,且部分感染菌株具有致病性,应引起有关生猪养殖场的高度重视。     

猪链球菌毒力因子及抗原性蛋白的发掘方法

猪链球菌是一种重要的人畜共患病原体。毒力因子以及抗原性蛋白的发掘与探索有助于深入研究猪链球菌病的致病机制,并为疫苗研究提供候选基因序列和蛋白片段。国内外学者建立了多种发掘猪链球菌新的毒力因子和抗原性蛋白的方法:转座子诱变缺陷株筛选法、免疫蛋白质组学技术、等位基因置换法、体内互补法、构建和筛选了基因文库、抑制性差减杂交试验等。     

猪链球菌毒力因子研究进展

猪链球菌作为条件致病菌,能引起人兽共患病,该病可在全球广泛流行,并导致严重疫情,研究发现该菌有很多毒力因子与细菌感染和致病密切相关。论文总结了猪链球菌的毒力因子H因子结合蛋白、荚膜唾液酸、猪链球菌富丝氨酸重复蛋白1、血红素结合蛋白SntA、菌毛蛋白、寡肽结合蛋白、烟酰胺单核苷酸转运蛋白PnuC、二肽基肽酶-4、5′-核苷酸酶、猪链球菌IgM降解酶、丝氨酸/苏氨酸激酶、VraSR调控系统、Spx蛋白、murB-potABCD操纵子、virD4-virB4分泌系统的研究进展,期待该菌毒力因子的研究能为疫苗和药物的开发提供思路。     

细菌性人畜共患病之猪的链球菌病

猪的链球菌病≠猪链球菌病,今年7、8月间在四川省部分县市发生的猪链球菌病(Swinestreptococosis),是由携带MRP(溶菌酶释放蛋白)、EF等(细胞外因子)多种毒力因子的R-2型链球菌引起的一种人畜共患传染病,己被大家公认为:“猪链球菌病”,而猪的链球病所包函的