乌腺金丝桃HPLC指纹图谱初步研究

为了建立乌腺金丝桃高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,试验采用HPLC法,将样品经甲醇超声提取,选用shim-pack VP-ODS C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);柱温40℃;流动相为甲醇和6 mmol/L磷酸氢二钠(磷酸调至p H值为6.5),梯度洗脱;分段用260 nm、324 nm、408 nm、588 nm检测;流速为0.6 m L/min的系统条件下进行研究。结果表明:此种检测方法的稳定性和重复性均符合要求;通过随机对10批药材样品的监测分析,建立了乌腺金丝桃中药材的HPLC指纹图谱,共标定了24个共有指纹峰。说明所用方法稳定、可靠、重复性好,可为乌腺金丝桃中药材的质量控制提供参考。     

滋阴清热降糖丸HPLC指纹图谱的建立及多成分含量测定

建立滋阴清热降糖丸HPLC指纹图谱,并对多种成分进行含量测定。色谱柱为Agilent 5 HC-C₁₈(250.0 mm×4.6 mm, 5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,采用PDA检测器在190～400 nm处进行全波长扫描,提取最大波长色谱图。对10批样品进行HPLC分析,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价”生成指纹图谱,并对样品中多种成分进行含量测定。试验成功建立了滋阴清热降糖丸HPLC指纹图谱,确定共有峰,同时对9种成分进行含量测定,方法学考察符合要求。本研究建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法操作简便,测定成分全面,重复性好,可为滋阴清热降糖丸质量标准的修订提供参考。     

江苏韩信草HPLC指纹图谱及其芹菜素含量测定

为了建立江苏不同产地韩信草高效液相色谱指纹谱图,测定其有效成分芹菜素的含量,试验采用HPLC-二极管阵列检测器,Agilent Eclipse XDB-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,0.5%冰醋酸水溶液-乙腈流动相,梯度洗脱,检测波长275 nm的色谱方法对10批江苏不同产地韩信草建立HPLC指纹图谱共有模式,并采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件对谱图进行分析。结果表明:江苏10批不同产地韩信草的HPLC指纹图谱中确定15个共有峰,相似度均大于0.91。指认13号共有峰为芹菜素,线性范围为7.00～70.00 μg/mL(r=0.9997),10批样品芹菜素含量均在1.25～1.48 mg/g。说明多批样品具有一致性。所建立的方法灵敏、准确、重复性好,可作为韩信草药材质量控制的参考依据。     

HPLC法测定常山口服溶液的主成分含量

为建立一种同时测定常山口服液中2种主成分的高效液相色谱方法(HPLC),对中药常山及其药物制剂的国家兽药典质量标准提出制修订建议。本研究采用HPLC法,通过方法学验证和不同色谱检测系统的考察,测定常山口服液中常山乙素和常山甲素的含量,明确药物色谱条件的系统适用性要求。包括安捷伦1290型HPLC仪(SB-C₁₈色谱柱)、沃特斯2695型HPLC仪(XTerra@MS C₁₈色谱柱)和岛津SPD-10A型HPLC仪(Amethyst C₁₈-H色谱柱);流动相：乙腈-水-冰醋酸(30∶69.79∶0.21),pH值5.2～6.2,流速：1.0 mL/min,检测波长：265 nm,柱温：25℃,进样量：10μL。三种不同类型的液相系统和色谱柱,所测3批次样品中的主成分含量基本一致,常山甲素和常山乙素的峰型较好,与周围杂质可有效分离。该研究方法可为常山碱口服液质量控制提供参考。     

HPLC法测定植物源杀螨浴剂(外用)中氧化苦参碱的含量

[目的]建立HPLC法测定植物源杀螨浴剂(外用)中的氧化苦参碱含量。[方法]采用Waters XBridge C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钠(含0.5%高氯酸钠)(15∶85),流速为1.0mL/min,检测波长为220nm,进样量为10μL,柱温为30℃。[结果]氧化苦参碱质量浓度在0.020592~0.45747mg/mL(Y=5.72e+006X+1.13e+004,R^2=0.9998)与峰面积积分值呈良好的线性关系;精密度试验RSD为0.3%(n=6);重复性试验RSD为1.0%(n=6);回收率试验RSD为1.6%。[结论]该法测定氧化苦参碱含量简便、快捷,稳定性好,重复性高,可用于控制植物源杀螨浴剂(外用)的质量。     

不同产地当归药材HPLC指纹图谱的建立及2种主成分含量测定

目的:建立不同产地当归药材HPLC指纹图谱,并测定药材及其提取物中2种主成分的含量。方法:以Phenomenex Gemini C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相梯度洗脱,建立当归药材的HPLC指纹图谱并对药材及其水蒸汽提取物进行含量测定;采用中药指纹图谱相似度评价系统(2012版)对16批样品进行相似度评价分析;通过SPSS 21.0统计软件采用聚类分析(CA)和主成分分析(PCA)对HPLC指纹图谱进行模式识别研究。结果:建立了当归药材指纹图谱,16批不同产地当归药材的相似度均≥0.937;确定共有峰12个,并且药材中主成分阿魏酸含量为0.89～1.71 mg/g,藁本内酯含量为11.77～31.20 mg/g。CA将不同批次当归药材分为5类,反映了甘肃16个不同产区当归药材的质量特征;通过PCA筛选出累计贡献率达到91.093%的4个主成分,得到决定当归药材质量的4个化学成分。结论:建立的HPLC指纹图谱结合含量测定、CA、PCA方法可以客观、全面、有效地用于当归药材的质量评价,为当归配方颗粒的制备提供参考依据。     

HPLC法测定枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸含量

为了建立枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法,选用色谱柱Agilent Ecilpse plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.1%氨水(70∶30)磷酸调p H=8.0,流速为0.8 m L/min,检测波长210 nm,柱温25℃。齐墩果酸和熊果酸能达到基线分离,分离度R2.5,齐墩果酸在0.20~7.94μg、熊果酸在0.21~8.49μg范围内呈良好的线性关系。试验证明该方法操作简单,灵敏度高,重现性好,可用于枇杷叶药材的质量控制。     

不同产地甘草的HPLC指纹图谱研究

目的:研究甘草的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法:利用HPLC方法,梯度洗脱。色谱条件为:Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速0.8 m L/min,柱温30℃,流动相A为乙腈,流动相B为(pH值3)磷酸溶液,流动相A梯度洗脱(10%~90%乙腈),分析时间为65 min。结果:HPLC指纹图谱分析显示,21个不同批次和产地的甘草样品在276 nm处共获得包括甘草苷(5号峰)在内的10个共有峰,相似度分析结果均在0.99以上。方法学考察表明,精密度、稳定性、重现性均良好。结论:甘草的指纹图谱特征性及专属性强,可用于全面控制甘草的质量,确保每批产品的均一性。     

高效液相色谱法测定中药复方健胃分散片中延胡索乙素的含量

旨在建立测定新型中药复方健胃分散片中主要成分延胡索乙素含量的HPLC方法,利用建立的方法测定并比较中药提取机混提法与单提复配法制备的中药复方健胃分散片中延胡索乙素的含量。采用Agilent SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇—磷酸盐(65∶35)缓冲液( 值=6.0)为流动相,等度洗脱,于280 nm波长处进行检测。结果表明,延胡索乙素在0.1~1.0μg/m L范围内线性关系良好,r=0.9989,平均回收率为99.99%,RSD=0.91%;中药提取机混提法与单提复配法制备的中药复方健胃分散片中延胡索乙素平均含量分别为2.430 7 mg/g(RSD=0.57%,n=6)和1.937 5 mg/g(RSD=2.17%,n=6)。建立的HPLC方法灵敏度高,操作简便,结果准确,重复性好,可用于中药复方健胃分散片中延胡索乙素含量测定,并且中药提取机混提法所制备的中药复方分散片中延胡索乙素含量较高,效果较好。     

高效液相色谱法测定二甲基半胱胺盐酸盐纯度

试验建立二甲基半胱胺盐酸盐的高效液相色谱分析方法。样品经过乙腈处理后,用DiamonsilC_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离样品,以1%氨水∶乙腈(60∶40,体积/体积)为流动相;检测波长205 nm,流速0.8 m L/min。结果表明,二甲基半胱胺盐酸盐在10~700μg/m L质量浓度内,峰面积与质量浓度呈良好的线性关系(r=0.999 9),检测限和定量限分别为1.5和4.0μg/m L,具有良好的精密度、重复性和稳定性。该方法简便、快速及准确,适用于二甲基半胱胺盐酸盐的纯度测定。     

高效液相色谱法测定地昔尼尔含量方法的建立

建立用高效液相色谱法(HPLC)测定地昔尼尔含量的方法。采用Hypersil NH2色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相:乙腈∶水(0.1%甲酸)为40∶60,紫外检测波长为270 nm,进样量20μL,流速为0.8 mL/m in,柱温30℃。结果显示,地昔尼尔在0.78～100μg/mL范围内,其峰面积与浓度的线性关系良好,回归方程为:A=329 232 C-44 761,R2=0.999 9。日内、日间精密度RSD均小于2%,稳定性试验RSD为0.61%,重复性试验RSD为1.45%,回收率测定结果为100.72%。本法操作简单,结果准确,分析快速,适用于地昔尼尔的含量测定。     

氟苯尼考纳米乳含量测定方法的建立及稳定性研究

为了建立高效液相色谱法测定氟苯尼考纳米乳中氟苯尼考含量的方法并对其稳定性进行研究,采用Iner Sustain C18(5μm,4.6 mm×250mm)色谱柱,以乙腈-水-磷酸(35∶65∶0.02,V/V/V)为流动相,流速1.0 m L/min,检测波长224 nm,进样量20μL,柱温25℃,考察方法的系统适用性、线性、精密度、加样回收率等,并通过影响因素试验及加速试验考察氟苯尼考纳米乳的稳定性。结果显示:氟苯尼考纳米乳在该色谱条件下,系统适应性良好,在4.12~67.74μg/m L浓度范围内线性关系良好,线性回归方程为:A=49 295C+2 967.2(R2=0.999 9),平均加样回收率分别为101.48%(n=6),RSD为0.26%;氟苯尼考纳米乳在50℃、75%相对湿度(RH)条件下稳定。结果表明:建立的含量检查方法专属性强、准确度高、精密度、重复性良好,适用于氟苯尼考纳米乳含量测定,制备的氟苯尼考纳米乳稳定性良好,强光对其含量略有影响。     

不同采收期对甘草中甘草苷、甘草酸及甘草多糖含量的影响

目的:建立测定甘草中甘草苷、甘草酸及甘草多糖的方法,并比较不同采收时期甘草中甘草苷、甘草酸及甘草多糖的差异。方法:采用HPLC法测定甘草中甘草苷和甘草酸含量,色谱柱为Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱;体积流量为1 m L/min;检测波长为252 nm、276 nm;柱温为28℃;进样量为10μL,并采用紫外吸收光谱法测定甘草中甘草多糖。结果:甘草苷和甘草酸获得良好分离,在0.116 8-1.168 0μg及0.039 3-0.235 0μg与峰面积积分值呈良好线性关系,平均加样回收率分别为98.45%、98.34%,RSD分别为1.52%、1.78%,重现性试验RSD分别为0.35%、0.59%。甘草多糖分离良好,其重现性、稳定性亦良好,回收率较高。结论:本方法操作简便、结果准确、精密度好、分离度良好,为甘草药材的合理应用及其质量控制提供了依据。     

高效液相色谱法测定阿司匹林丁香酚酯咀嚼片的有关物质

【目的】采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography, HPLC)法测定阿司匹林丁香酚酯(aspirin eugenol ester, AEE)咀嚼片的有关物质,建立一种更简便、准确的检测方法,应用于AEE咀嚼片的质量控制研究。【方法】通过HPLC法考察方法专属性、线性范围、检测限与定量限、精密度、重复性、稳定性、回收率、破坏性试验、耐用性试验及样品测定,综合评价AEE咀嚼片有关物质测定方法,并以自身对照法计算AEE咀嚼片有关物质的量。选用Phenomenex Luna C18(150 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,柱温为35℃;流动相以0.5%磷酸水溶液为A相,以乙腈为B相,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为279 nm;进样量为10μL。【结果】AEE咀嚼片有关物质的HPLC测定方法专属性高,被检测峰与其他峰分离度良好;AEE在0.26～26.00μg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好,R²=1(n=7);有关物质杂质A在0.25～25.50μg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好,R<...     

芩黄清肺散的质量标准研究

为建立芩黄清肺散的质量标准,采用显微鉴定和薄层色谱法(TLC)对方剂中黄芩、大黄、枇杷叶和甘草进行定性鉴别。采用高效液相色谱法(HPLC)对黄芩苷进行含量测定,色谱柱为依利特C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);流速1mL/min;检测波长280nm;柱温40℃;进样量20μL。显微鉴定结果表明,韧皮纤维单个散在或数个成束,梭形,长60μm~250μm,壁厚,孔沟细(黄芩);草酸钙族晶,直径60μm~140μm(大黄);非腺毛为单细胞,常弯曲(枇杷叶);木纤维成束,周围薄壁细胞含草酸钙方晶,形成晶鞘纤维(甘草)。TLC结果表明,供试品中,在与对照品或对照药材色谱相应的位置上显示相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。HPLC结果显示,黄芩苷在0.241μg~1.208μg(r=0.999 9)具有良好的线性范围,精密度、稳定性、重复性的RSD3.0%,加样回收率为100.49%(RSD=1.71%,n=9)。该研究所建立标准可用于芩黄清肺散的质量控制。     

溪黄草药材质量控制含量测定方法研究

目的:建立同时测定溪黄草药材中齐墩果酸、熊果酸含量的方法。方法:色谱柱为CAPCELL PAK C_(18)MGⅡ(以十八烷基硅烷键和硅胶为填充柱),流动相为乙腈-甲醇-0.6%乙酸铵(67∶12∶21),流速为1 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。结果:齐墩果酸和熊果酸分别在5.066～50.664μg/mL,9.735～97.352μg/mL范围内呈现良好的线性关系(r=0.998);精密度、稳定性、重复性试验的RSD2.0%;平均回收率分别为99.78%(RSD=0.56%)和100.68%(RSD=0.67%)。结论:该方法操作简单、重复性好、准确度高,可以用于溪黄草药材的质量控制。     

藏药刺柏HPLC指纹图谱及穗花杉双黄酮含量测定

试验旨在建立藏药刺柏的HPLC指纹图谱,运用2种统计方法分析不同产区的刺柏药材质量差异。采用HPLC-DAD技术,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18色谱柱,以乙腈为流动相A,0.1%磷酸为流动相B,梯度洗脱,建立刺柏药材的指纹图谱并对指标性成分进行测定含量。对6批不同藏药刺柏进行相似度评价,并运用聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)对HPLC指纹图谱进行分类分析。结果表明,刺柏药材HPLC指纹图谱共有峰16个,对14号峰进行指认为穗花杉双黄酮;6批刺柏药材的相似度均0.90;CA将不同产地刺柏药材分为3类,反映了6个不同产区刺柏药材的质量特征;PCA结果显示前4个主成分的累积贡献率达到96.13%,6个化学成分代表刺柏药材质量。说明建立的HPLC指纹图谱结合含量测定、CA、PCA方法可有效控制刺柏的质量,为药材质量控制提供科学依据。     

白头翁汤中秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素和秦皮苷同时检测高效液相色谱法的建立及各药味对其溶出的影响

为了考察白头翁汤中其他药味对秦皮主要有效成分溶出的影响,试验采用高效液相色谱法(HPLC)[Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱,以乙腈(A溶液)-0.1%磷酸(含0.2%三乙胺,B溶液)为流动相进行梯度洗脱,0~23 min,流动相中A溶液含量由10%逐渐升为20%,流速0.8 m L/min,检测波长345 nm,柱温30℃,进样量10μL]检测白头翁汤及相关组方中的秦皮素、秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素。结果表明:秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素、秦皮素浓度分别在0.090~22.500,0.120~29.800,0.110~27.100,0.076~19.000μg/m L内,线性关系良好;仪器精密度、方法的重复性、稳定性、加样回收试验的相对标准偏差(RSD)均在2.0%以内;秦皮素溶出率受其他物质影响不大;黄柏和白头翁汤醇提液能明显增大秦皮乙素的溶出;白头翁汤中秦皮苷溶出率都低于秦皮药材;秦皮甲素的溶出规律与秦皮苷非常相似。说明该方法准确灵敏,可用于白头翁汤等相关中药组方中秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素和秦皮素的含量测定;白头翁汤中的黄连、黄柏、白头翁对秦皮中秦皮素、秦皮甲素、秦皮苷、秦皮乙素的溶出都有影响。     

HPLC测定维生素ADE注射液中三种维生素的含量

采用HPLC建立了兽药维生素ADE注射液中维生素A、维生素D3和维生素E的含量检测。采用C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),甲醇为流动相A、乙腈-乙醇-水(60∶25∶5)为流动相B进行梯度洗脱,流速为1.5 m L/min,检测波长为265 nm,柱温为25℃,进样量为20μL。结果表明,在此色谱条件下,维生素ADE注射液中维生素A、维生素D3和维生素E的分离度良好,分别在60.96~1219.20μg/m L、2.56~51.20μg/m L和300.23~6004.60μg/m L范围内线性关系良好(r20.999)。按外标法以峰面积计算进行检测,维生素A、维生素D3和维生素E的平均回收率分别为99.6%、101.1%和99.0%,RSD均小于1.0%;平均重复性分别为105.7%、106.8%和102.3%,RSD均小于1.0%;中间精密度的RSD均小于0.5%;稳定性的RSD均小于1.0%;耐用性中选择流动相A与B变化为17∶83、流速为1.5 m L/min时,在一定范围内三种组分的含量基本稳定;柱温为25℃时,可避免维生素降解。说明该方法简单、快速,适用于维生素ADE注射液中三种维生素含量的测定,具有分离效果好、回收率高和稳定性好的特点。     

HPLC法同时测定葛花中大豆苷、鸢尾苷和染料木素含量的研究

为了建立葛花中大豆苷、鸢尾苷和染料木素3种异黄酮成分的HPLC测定方法,试验采用色谱柱为Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-1‰磷酸水溶液,梯度洗脱(0~20 min,13%乙腈;20~30 min,27%乙腈;30~40 min,32%乙腈;40~50 min,36%乙腈;50~60 min,43%乙腈),流速为0.8 m L/min,检测波长为264 nm,柱温为30℃的HPLC方法进行检测。结果表明:大豆苷、鸢尾苷和染料木素的线性范围分别为0.126~5.040 mg/m L(R2=0.999 7),0.096~3.840 mg/m L(R2=0.999 6)和0.034~1.360 mg/m L(R2=0.999 9);平均回收率分别为99.22%(RSD=1.11%)、103.89%(RSD=1.89%)和99.93%(RSD=1.53%)。说明该方法能够将葛花中多种异黄酮类成分分离,准确可靠,专属性强,结果稳定,可用于葛花药材的质量控制。