交感神经对小鼠排卵和早期胚胎发育的影响

为了研究交感神经对妊娠的调控作用,给小鼠连续5 d腹腔注射交感神经化学损毁剂——6-OHDA(100 mg/kg),将交感神经化学性损毁,然后通过阴道涂片法和显微解剖的方法,对交感神经损毁后小鼠发情周期的变化、排卵的数量和妊娠发生后胚胎数量及大小进行了观察。结果表明:交感神经化学损毁后发情周期和排卵的数量没有明显的变化,但是胚胎的数量明显减少,小鼠胚胎数量在妊娠第7天比对照组同期减少了64.4%,在妊娠第9天比对照组同期减少了69.9%;对胚胎的大小进行测量时发现,交感神经损毁组在妊娠第7天与对照组同期相比,长径减小了0.51 mm,短径减小了0.56 mm;妊娠第9天时,交感神经损毁组与对照组同期相比,长径减小了0.37 mm,短径减小了0.47 mm,差异显著(P<0.05)。说明交感神经主要影响胚胎的早期发育,对发情周期和排卵没有明显的影响。     

交感神经阻断小鼠妊娠早期子宫内肥大细胞的分布

为了研究交感神经对哺乳动物早期胚胎发育的影响机制,通过腹腔注射6-羟多巴胺使交感神经阻断后,观察了小鼠妊娠前期胚胎早期发育和肥大细胞数量和型别的变化。结果显示,交感神经阻断后,不仅对胚胎早期发育有影响,使胚胎着床数降低64.4%,而且影响子宫内肥大细胞的数量及其型别分布。妊娠4d(E4)时肥大细胞数量明显升高(P<0.01),同时肥大细胞分型也有所变化,即黏膜型肥大细胞主要存在于胚胎着床前和着床后,结缔组织型肥大细胞没有明显差异,混合型肥大细胞主要存在于着床期间。这一结果表明,妊娠早期子宫肥大细胞数量与型别的变化可能是交感神经影响早期胚胎发育的途径之一。     

副交感神经对妊娠早期大鼠子宫组织胺和血清LIF水平的影响

为研究大鼠副交感神经对妊娠早期子宫内组织胺(HA)和血清白血病抑制因子(LIF)的影响,选取180~200日龄健康性成熟Wistar雌性大鼠20只,随机分为对照组和处理组,处理组采用腹腔注射阿托品阻断副交感神经,对照组腹腔注射0.9%生理盐水。结果表明:阿托品处理后妊娠5d子宫囊胚数量明显减少、囊胚发育延迟;妊娠6d虽然囊胚数量接近正常对照组数量,但胚胎凸起仍小于正常妊娠6d状态。子宫肥大细胞(MC)释放HA结果显示,阻断副交感神经激发MC释放的HA量显著高于正常状态,且与MC自发释放的HA变化趋势不同;正常对照组血清LIF含量的变化趋势是随着妊娠时间的增加而减少,而处理组出现相反的趋势。试验结果提示,在着床窗口期副交感神经通过对MC释放HA等介质调控子宫的生理功能,HA和LIF分泌规律紊乱对胚胎着床的影响更为显著,导致囊胚发育延迟,甚至丢失。     

Nupr1 mRNA在小鼠早期妊娠子宫中的表达

试验旨在研究核蛋白1(nuclear protein 1,Nupr1)mRNA在小鼠早期妊娠子宫中的表达,探讨Nupr1与小鼠胚胎着床的相关性。通过建立小鼠早期妊娠模型、假孕妊娠模型、延迟着床及激活模型、人工蜕膜化模型和激素处理模型,采用原位杂交的方法检测Nupr1mRNA在小鼠各种模型子宫组织中的定位表达情况,并应用实时荧光定量PCR法检测早期妊娠模型和假孕妊娠模型中Nupr1mRNA的相对表达量。结果显示,Nupr1mRNA在小鼠早期妊娠第1~4天子宫的腔上皮和腺上皮表达,第5~8天表达于蜕膜区域;假孕妊娠第1~5天,Nupr1mRNA主要表达于小鼠子宫腔上皮和腺上皮;延迟着床模型中信号表达于在小鼠子宫的腔上皮和腺上皮,与正常妊娠第4天结果相似;延迟激活模型中信号表达于蜕膜区,与早期妊娠第5天表达结果相似;人工蜕膜化模型中信号表达于蜕膜区,而蜕膜对照组中信号表达于腔上皮和腺上皮;17β-雌二醇(oestrogen,E2)处理组信号表达于腔上皮和腺上皮,信号增强,孕酮(progesterone,P4)和E2共同处理表达无明显变化;实时荧光定量PCR结果显示,正常妊娠第2天Nupr1mRNA相对表达量较高,假孕妊娠第2天Nupr1mRNA相对表达量也较高。本研究结果表明,Nupr1mRNA在小鼠子宫中的表达与小鼠早期妊娠过程相关,Nupr1mRNA在腔上皮和腺上皮的表达可能受激素调节,在子宫基质中的表达与蜕膜化及活化胚泡相关。     

影响马胚胎移植成功率的关键因素分析

旨在探讨影响马胚胎移植效率的几种关键因素。本研究统计了国内北京马场、河北马场和山东马场2013-2018年胚胎移植数据,3个马场供体马数量分别为15、21和25匹,受体母马数量分别为56、50和75匹。所有母马年龄为3～12岁。统计供体马冲胚时间对胚胎回收率的影响;胚胎日龄对移植后受体马妊娠率的影响;供、受体母马排卵同期化程度对移植后妊娠率的影响;受体母马居住移植基地时间对移植后妊娠率的影响。结果显示,母马在配种季节注射前列腺素(PG)+GnRH类似物或PG+hCG诱发排卵,发情周期分别为(14.5±0.8)和(14.3±1.1)d,显著低于对照组的((20.5±2.6)d,P0.05);排卵后第8天冲洗子宫的胚胎回收率均高于第7天,但差异不显著;8日龄胚胎移植后受体马的妊娠率均高于7日龄,差异不显著;供体母马排卵比受体母马早1d时,胚胎移植后的妊娠率最高;受体母马在移植基地居住时间大于1年时,移植后妊娠率高于居住时间小于0.5年的受体马。根据以上结果,本研究得出如下结论,PG与hCG或GnRH类似物联合使用可缩短母马发情周期,母马排卵后第8天的胚胎回收率和移植后妊娠率较高,胚胎移植时选择居住时间大于1年且排卵时间比供体晚1d的母马作受体。     

番茄红素对限制应激着床期孕鼠子宫内膜发育和胚胎着床的影响北大核心

试验旨在探究番茄红素(LYC)对限制应激孕鼠着床期子宫内膜发育和胚胎着床数目的影响。选择8周龄昆明系孕鼠80只,在妊娠第1 d随机分为4组,每组3个重复,每个重复10只,分别为对照组、限制应激组(RS组)、玉米油+应激组(CRS组)、LYC+应激组(LRS组)。将LYC按10 mg/kg (体重)剂量给孕鼠灌胃(0.5 mL/只),灌胃2 h后进行限制应激处理(4 h/d),连续处理5 d,即胚胎着床期第5 d时,取血清和子宫组织。结果显示,与RS组相比,LRS组孕鼠血清中去甲肾上腺素含量降低10.00%,胚胎着床数增加47.92%,子宫指数增加83.36%(P<0.05),子宫内膜结构趋向对照组,表现为子宫内膜疏松,在靠近子宫腔附近细胞出现明显蜕膜化,子宫腺数量增多。进一步经荧光定量PCR和分光光度法检测发现,LYC预处理能够显著增加应激孕鼠子宫核因子红细胞相关因子2 (Nrf2) mRNA表达,改变Nrf2下游信号抗氧化酶水平。与RS组相比,LRS组着床期子宫中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性分别增加21.10%、82.60%,总抗氧化能力(T-AOC)显著增加64.50%,而丙二醛(MDA)含量显著降低65.60%(P<0.05)。研究表明,LYC可增加限制应激孕鼠着床期子宫中Nrf2表达,降低子宫局部氧化应激水平,提高子宫局部免疫水平,进而缓解应激对子宫内膜蜕膜发育的不利影响,增加胚胎着床数目。     

当归对诱导性流产小鼠子宫局部细胞免疫的影响

为了探讨保胎中药当归对流产小鼠的保胎效果,及当归对妊娠小鼠子宫局部细胞免疫的影响,试验将小鼠通过自然交配发生妊娠,将怀孕小鼠随机分为3组,每组10只,其中两组使用米非司酮(RU486)诱导小鼠流产,制作试验小鼠流产模型,即空白对照组(A组)小鼠于孕第1～7天,每天灌服纯化水,0.5 mL/只,在孕第7天,经颈部皮下注射丙二醇0.1 mL/只;流产模型组(B组)小鼠于孕第1～7天每天灌服纯化水,0.5 mL/只,在孕第7天,经颈部皮下注射RU486,0.1 mL(0.025 mg)/只;当归治疗组(C组)小鼠于孕第1～7天每天灌服当归水煎剂,0.5 mL(相当于0.5 g生药)/只,在孕第7天,经颈部皮下注射RU486,0.1 mL/只。通过统计流产小鼠胚胎丢失比例,评价中药的保胎效果;采用流式细胞技术检测流产与成功妊娠小鼠子宫组织中Th17细胞、Treg细胞及比例,并测定小鼠子宫组织中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)及转化生长因子-β(TGF-β)的含量。结果表明：RU486造模后,C组小鼠流产率下降至40%,胚胎吸收率减少至34.92%,子宫组织中Th17细...     

Aroclor 1254对小鼠胚胎植入的影响

探讨了Aroclor 1254对小鼠胚胎植入的影响。将用无水乙醇溶解的Aroclor 1254母液分别按比例添加到CZB胚胎培养液中,组成0.25、1.25、6.25μg/mL 3个浓度的Aroclor 1254毒性试验溶液,溶剂对照组试验溶液为含无水乙醇(无水乙醇与毒性试验组浓度相同)的CZB胚胎培养液,空白对照组为CZB胚胎培养液。在小鼠配种后第4天上午(dpc 4.5),手术法分别暴露双侧子宫角,分别注入上述试验溶液5μL于子宫角内。于小鼠配种后第8天上午(dpc 8.5),尾静脉注射5 g/L台盼蓝溶液,检测试验小鼠胚胎植入位点。结果表明,溶剂对照组与空白对照组的平均植入位点没有统计学差异;质量浓度为0.25μg/mL和1.25μg/mL Aroclor 1254组的平均植入位点(6.27±1.41和5.83±1.09)与溶剂对照组(6.26±1.63)差异不显著;质量浓度为6.25μg/mL Aroclor 1254组的平均植入位点数(5.07±1.64)极显著低于溶剂对照组(6.26±1.63)(P<0.01),显著低于1.25μg/mL Aroclor 1254组(5.83±1.09)(P<0....     

植物性神经对围着床期大鼠子宫中肥大细胞和组织胺含量的影响

本研究旨在以肥大细胞和组织胺为指标探讨大鼠围着床期植物性神经与子宫局部细胞免疫的关系。选择180日龄,体重为300～350g的性成熟Wistar雌性大鼠90只,随机分为对照、假手术处理和手术处理(n=30)3组,手术处理为孕前切除支配子宫的植物性神经(肠系膜后神经节节后纤维和盆神经丛节前纤维),伤口愈合,开始合笼试验。在妊娠4～6d,无菌条件下,取出大鼠子宫和卵巢,观察排卵、胚胎着床情况变化,通过细胞染色和ELISA方法测定肥大细胞数量和组织胺释放量。结果表明:正常大鼠子宫中组织胺自发释放量和总含量在着床(d5)时最低。肥大细胞数量也呈现相似的变化。神经切除后,自发释放组织胺量在妊娠4～6d数值明显下降,且在妊娠4、6d与对照组相比较差异显著(P0.05);可释放组织胺总含量在着床前(d4)极显著降低(P0.01),且胚胎着床数量明显减少或延迟;肥大细胞数量在着床前后与组织胺总含量有相似的变化。这些结果说明,切除神经降低了着床前肥大细胞数量和组织胺水平,改变了子宫局部免疫水平,进而引起了胚胎着床减少或延迟。综上表明,支配子宫的植物性神经可在着床前上调子宫肥大细胞数量和组织胺水平,控制子宫局部免疫水平,在胚胎着床中起重要调控作用。     

受体母猪排卵状况对体细胞克隆胚胎移植效率的影响

为了确定猪体细胞克隆胚胎的受体母猪最佳发情阶段,本研究比较了供受体同期化方案对猪体细胞克隆胚胎输卵管内移植后30 d受胎率和妊娠足月率的影响。将体外培养2 d的猪体细胞克隆胚胎,移植到发情第1~2天的受体母猪。根据受体母猪卵泡发育与排卵状况将受体猪群分为2个类别:卵泡发育处于即将排卵或正在排卵阶段(组一);卵泡发育处于排卵前阶段或完全排卵阶段(组二)。结果发现:(1)组一6头受体母猪胚胎移植后30d受胎率为100%;而组二10头受体母猪受胎率为40%,二者差异显著(P0.05)。(2)组一6头受体母猪全部产仔,妊娠足月率为100%;组二10头受胎母猪2头产仔,妊娠足月率为20%,二者差异极显著(P0.01)。以上结果表明:体外培养2 d的猪体细胞克隆胚胎发育阶段与即将排卵或正在排卵的受体母猪的子宫环境同期性最好,得到了理想的胚胎移植效率。