三七总皂苷的溶血性及体外生物免疫活性研究

[摘 要]　　目的：研究三七总皂苷（PNS）的溶血性及体外生物免疫活性。方法：乙醇回流法提取PNS粗提物,经有机溶剂除杂后,通过大孔树脂柱层析分离纯化;溶血性试验测定PNS作用后红细胞的溶血率;脾淋巴细胞增殖反应测定PNS的生物免疫活性。结果: PNS的半数溶血率HD50大于4mg•ml-1;体外显著促进了刀豆蛋白（Con A）和脂多糖（LPS）诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应。结论：PNS安全性好,体外免疫活性较强。     

三七总皂苷的溶血性研究

三七总皂苷(PNS)是五加科人参属植物三七的主要有效活性成分,含有多种单体皂苷,具有扩张血管、降低心肌耗氧量、延长凝血时间等药理作用.近年来,随着对其研究的不断深入,又发现其具有抑癌作用,因此越来越受人们的重视.     

硫酸化人参总皂苷体外对免疫活性细胞功能的调节

采用MTT法及形态学观察法研究4种硫酸化人参总皂苷衍生物对体外ConA促淋巴细胞增殖、转化的影响,并采用乳酸脱氢酶释放法探讨了其对NK细胞杀伤活性的影响.结果表明,人参总皂苷对淋巴细胞增殖影响不明显,较高质量浓度(>150 mg/L)能抑制淋巴细胞增殖(P<0.01);硫酸化人参总皂苷衍生物2、3在一定质量浓度下都能明显或极明显增加淋巴细胞(鸡的外周血淋巴细胞,小鼠脾淋巴细胞)增殖活性(P<0.05,P<0.01),且所试质量浓度硫酸化人参总皂苷衍生物的D值显著或极显著高于同质量浓度人参总皂苷(P<0.05.P<0.01);人参总皂苷、衍生物2、3都能提高小鼠NK细胞的活性(P<0.01),且衍生物2、3的作用比人参总皂苷更强(P<0.05,P<0.01).结果提示,人参总皂苷经硫酸化修饰后,在体外能明显增强免疫活性细胞功能.     

三七总皂苷对罗非鱼体成分及非特异免疫的影响

试验研究了饲料中添加不同水平的三七总皂苷对罗非鱼肌肉营养成分和血清及肝胰脏非特异免疫的影响。选取同一放养批次健康的罗非鱼,随机分为6组。其中第1组为空白对照组,饲喂基础饲料,其余5组为三七总皂苷组(2～6组),分别饲喂添加50、100、200、400和800mg/kg三七总皂苷试验饲料。每组3个重复,每个重复70尾,进行60d的养殖试验。结果显示:试验组与对照组相比,肌肉基本营养成分差异不显著(P0.05),4、5、6试验组与对照组相比,肌肉丙二醛含量和胆固醇含量显著降低(P0.05);添加适宜水平的三七总皂苷,可以显著提高罗非鱼血清溶菌酶活性、血清及肝胰脏酸性磷酸酶活性和碱性磷酸酶活性,增强罗非鱼血清及肝胰脏非特性免疫功能。     

三七总皂苷对异育银鲫非特异免疫及抗氧化性能的影响

试验饲料中添加不同水平的三七总皂苷对异育银鲫血清非特异免疫和抗氧化性能的影响。选取同一放养批次健康的异育银鲫,随机分为5组。第1组空白对照组饲喂基础饲料,其他4组为三七总皂苷组,分别添加80、160、320和640mg/kg三七总皂苷试验饲料。每组3个重复,每重复30尾鱼,试验期60d。养殖结束后采集血清、肌肉和肝胰等样品进行血清非特异免疫和抗氧化性能的分析测定。试验结果表明:添加适宜水平的三七总皂苷能显著提高异育银鲫的非特异免疫功能,添加320和640mg/kg的三七总皂苷可显著提高异育银鲫的抗氧化性能。     

三七总皂苷的提取及纯化

三七主要产于云南、广西等地,其总皂苷（PNS）具散淤止血、活血化淤、消肿止痛等功效。为了避免三七根中淀粉糊化,目前主要采用醇提和提取液水沉、大孔树脂纯化的工艺,乙醇消耗量大,有效成分损失多,有人提出采用内部沸腾法提取植物有效成分。为了降低提取温度,有人提出了减压内部沸腾的方法。     

中药活性成分皂苷免疫作用的研究进展

皂苷一种从中药中提取出来的三萜类化合物,具有广泛的生理活性。本文从皂苷对机体非特异性免疫、特异性免疫的增强作用以及抗肿瘤活性、作为佐剂等的研究进展方面进行了综述。     

三七不同皂苷的分析条件研究

三七总皂苷含有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re及三七皂苷R1、R2、R3、R4、R6等20多种皂苷成分,其中人参皂苷Re、Rb1、Rg1及三七皂苷R．含量最高。阎萍等对三七总皂苷的研究中,将Rb1、Rg1及R1三种单体皂苷进行了分离。通过实验发现,人参皂苷Re、Rb1、Rg1及三七皂苷R14种单体皂苷相互之间分离条件要求较高。笔者在此基础上对其分离条件进行了研究,利用薄层色谱与高效液相考察了4种皂苷的分离条件,为中药三七提取物制剂质量控制提供依据。     

三七总皂苷的质量控制研究

三七总皂苷(PNS)是五加科人参属植物三七的有效活性成分,含有多种单体皂苷,具有扩张血管、降低心肌耗氧量、延长凝血时间、调节免疫等方面的药理作用,临床上主要用于治疗心脑血管疾病.近年来,随着研究的不断深入,又发现三七总皂苷有抑癌作用,因此越来越受到人们的重视.本试验选用的三七总皂苷由江苏省动物药品工程技术研究开发中心自行制备,为有效控制制剂质量,对其进行了薄层色谱鉴别,并采用香草醛-高氯酸比色法测定了三七总皂苷的含量.现将三七总皂苷的质量控制研究介绍如下.     

6种酚类化合物及胡桃醌的体外抑菌活性

核桃青皮提取物具有较好的抑菌作用,本试验以核桃青皮及叶片中含量较高的7种植物次生代谢物为研究对象,评价其抑菌活性,为解析核桃青皮提取物的抑菌活性及开发新的饲用抗生素替代品提供参考。以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌为受试菌,将7种植物次生代谢物——绿原酸、鞣花酸、丁香酸、芦丁、单宁酸、对羟基苯甲酸和胡桃醌分别稀释至1.000 0、0.500 0、0.250 0、0.125 0和0.062 5 mg/m L,采用滤纸片扩散法,以培养24 h后抑菌圈直径大小反映植物次生代谢物的抑菌活性。结果显示:除大肠杆菌对羟基苯甲酸和单宁酸不敏感外,其他植物次生代谢物对3种受试菌均有不同程度的抑制作用。对大肠杆菌抑制作用的顺序为鞣花酸胡桃醌芦丁=丁香酸绿原酸对羟基苯甲酸=单宁酸;对枯草芽孢杆菌抑制作用的顺序为鞣花酸绿原酸=对羟基苯甲酸丁香酸单宁酸芦丁胡桃醌;对金黄色葡萄球菌抑制作用的顺序为胡桃醌丁香酸芦丁单宁酸鞣花酸对羟基苯甲酸绿原酸。由此得出,绿原酸、鞣花酸、丁香酸、芦丁、单宁酸、对羟基苯甲酸和胡桃醌对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌具有不同程度的抑制作用,其中鞣花酸对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有较强的抑制作用,胡桃醌对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用。     

田七总皂苷的制备及其免疫活性试验

用700mL/L乙醇回流提取、大孔吸附树脂分离纯化得到田七总皂苷(PNS),进行薄层色谱鉴别和含量测定。为评价PNS的免疫调节作用,用环磷酰胺(CTX)为免疫抑制剂建立小鼠免疫抑制模型,分别以4种剂量的PNS(5、25、50、75mg/kg)腹腔注射给药,测定胸腺和脾脏指数以及血清中IL-2、IFN-γ和TNF-α水平,并从组织形态上观察胸腺与脾脏的结构变化。结果表明,PNS能使小鼠胸腺和脾脏指数有所提高,但无统计学意义(P>0.05);25mg/kg剂量能显著升高血清中IFN-γ和TNF-α水平(P<0.05),50mg/kg剂量能显著升高血清中TNF-α水平(P<0.05);PNS处理组能不同程度地对抗模型所致小鼠胸腺和脾脏的萎缩,增加胸腺皮质厚度和细胞数量,增加脾小结大小和淋巴细胞数量,在高剂量组尤为明显。     

三七不同无皂苷的分析条件研究

三七总皂苷含有人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re及三七皂苷R1、R2、R3、R4、R6等20多种皂苷成分,其中人参皂苷Re、Rb1、Rg1及三七皂苷R.含量最高.     

三七总皂苷亚慢性毒性试验研究

[目的]评价三七总皂苷(PNS)用药安全性,为临床用药提供参考依据。[方法]将40只昆明系小白鼠随机分为4组,每组10只,3个药物处理组小鼠通过腹腔注射的方式分别给予11.34、56.70、113.40mg/(kg·BW)的PNS,每天1次,连续给药14d;空白对照组小鼠腹腔注射生理盐水0.3mL/只,连续注射14d。测定并比较各组小鼠在试验期间的体重、脏器指数(肝脏、脾脏、肾脏指数)以及血液生化指标;取各组小鼠肝脏、脾脏、肾脏组织,制备病理组织切片,利用显微镜观察上述组织是否出现病理变化。[结果]3个PNS给药组小鼠在试验期间的体重与空白对照组小鼠相比,均无显著性差异(P>0.05);11.34mg/(kg·BW)PNS组小鼠的脾脏指数显著低于空白对照组(P<0.05);113.40mg/(kg·BW)PNS组小鼠的谷草转氨酶活力和肌酐含量显著低于空白对照组(P<0.05),而尿素氮含量显著升高(P<0.05);病理组织学观察结果表明,PNS对肝脏、脾脏、肾脏组织无明显损伤。[结论]PNS实际无毒,长期用药会产生肾毒性,提示用药不宜过量。     

三七花总皂苷的回流提取工艺研究

为了建立三七花总皂苷含量的测定方法,优化其回流提取工艺,试验采用香草醛-高氯酸法测定总皂苷的含量,以皂苷含量为指标优化其提取工艺。结果表明:人参皂苷Rg1在0.008 3～0.049 6 mg/mL范围内呈良好线性关系(r=0.999 4),平均回收率为99.3%(n=4),变异系数为3.4%;最佳提取工艺条件为将三七花粉末浸泡在10倍量的60%乙醇中12 h,回流提取3次,每次2 h。说明该测定方法简便、准确、重现性好,提取工艺经济、合理。     

三七花总皂苷的回流提取工艺研究

为了建立三七花总皂苷含量的测定方法,优化其回流提取工艺,试验采用香草醛-高氯酸法测定总皂苷的含量,以皂苷含量为指标优化其提取工艺.结果表明:人参皂苷Rg1在0.008 3～0.049 6 mg/mL范围内呈良好线性关系(r =0.999 4),平均回收率为99.3％(n=4),变异系数为3.4％;最佳提取工艺条件为将三...     

三七总皂苷渗透泵控释片的质量标准研究

本试验建立三七总皂苷渗透泵控释片质量标准,采用薄层色谱法鉴别人参皂苷Rb.和人参皂苷Rg,,采用高效液相色谱法测定对三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1进行含量测定.试验结果:在薄层色谱中检出了人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1;在高效液相色谱中,三七皂苷R1平均回收率为99.9%(n=9),RSD为1.00%,人参皂苷Rg1平均回收率为99.9%(n=9),RSD为0.8 3%,人参皂苷Rb1平均回收率为99.4%(n=9),RSD为0.76%.试验表明该鉴别方法专属性强,含量测定方法简便、准确,可有效控制三七总皂苷渗透泵控释片的质量.     

包被脂肪酶体外活性及稳定性研究

本试验旨在研究包被脂肪酶(CT-LIP)的体外稳定性。以CT-LIP为试验材料,分别研究了其在不同温度、pH和干热、湿热处理以及在模拟的人工胃液、肠液环境等条件下的稳定性,并且以非包被脂肪酶(UC-LIP)为对照组。结果表明:CT-LIP较UC-LIP具有更强的耐高温作用;在pH为3~7的酸性环境中,CT-LIP较UC-LIP具有更强的耐酸性;在pH为8~12的碱性环境中,CT-LIP较UC-LIP具有更强的耐碱性;CT-LIP还具有更强的耐干性和耐湿性,经干热处理后,与UC-LIP相比,CT-LIP的残存酶活性提高了5.67%;经过湿热处理后,与UC-LIP相比,CT-LIP的残存酶活性提高了35.60%。同时,CT-LIP还具有更强的耐人工胃液和人工肠液作用。结果表明,CT-LIP较UC-LIP具有更强的稳定性,具备作为饲料添加剂运用于畜牧生产的潜能。     

甘肃棘豆黄酮抗氧化活性及免疫活性的研究

为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性,通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2(IL-2)和免疫球蛋白G(IgG)抗体形成的影响研究其免疫活性。结果显示,甘肃棘豆黄酮对DPPH自由基清除率最高为32.23%,略高于维生素E(28.55%),低于维生素C(97.05%);对超氧阴离子自由基清除率最高为80.03%,高于维生素E(69.70%),低于维生素C(98.69%);对羟基自由基清除率最高为30.39%,低于维生素C(98.98%)、略低于维生素E(32.57%)。在小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验中,随着甘肃棘豆黄酮溶液浓度的提高,脾脏淋巴细胞相对增殖率也提高,当其浓度为200μg/mL时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖率为23.40%;200μg/mL甘肃棘豆黄酮组IL-2水平极显著高于对照组(P0.01),50和100μg/mL甘肃棘豆黄酮组与对照组无显著差异(P0.05);各甘肃棘豆黄酮组IgG抗体水平均极显著高于对照组(P0.01),其中,50μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于100和200μg/mL甘肃棘豆黄酮组(P0.01),100μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于200μg/mL甘肃棘豆黄酮组(P0.01)。综上所述,甘肃棘豆黄酮具有较好的抗氧化活性及免疫活性。     

三七总皂苷对异育银鲫生长及体成分的影响

饲料中添加不同水平的三七总皂苷对异育银鲫生长和肌肉营养成分的影响.选取同一放养批次健康的异育银鲫,随机分为5组.其中第1组为空白对照组,饲喂基础饲料,其余4组为三七总皂苷组,分别添加80、160、320和640mg/kg三七总皂苷试验饲料.每组3个重复,每重复30尾银鲫,进行60 d的养殖试验.结果表明:试验组与对照组相比,成活率基本相同,肌肉营养成分差异不显著;160、320和640 mg/kg的试验组与对照组相比,增重率、特定生长率和蛋白质效率显著提高,饲料系数和肌肉中的胆固醇含量显著降低.结果表明:在异育银鲫饲料中添加适宜水平的三七总皂苷可以提高异育银鲫生长性能,降低其肌肉中的胆固醇含量.     

甘肃棘豆黄酮抗氧化活性及免疫活性的研究

为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性,通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2（IL-2）和免疫球蛋白G （IgG）抗体形成的影响研究其免疫活性。结果显示,甘肃棘豆黄酮对DPPH自由基清除率最高为32.23%,略高于维生素E （28.55%）,低于维生素C （97.05%）;对超氧阴离子自由基清除率最高为80.03%,高于维生素E （69.70%）,低于维生素C （98.69%）;对羟基自由基清除率最高为30.39%,低于维生素C （98.98%）、略低于维生素E （32.57%）。在小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验中,随着甘肃棘豆黄酮溶液浓度的提高,脾脏淋巴细胞相对增殖率也提高,当其浓度为200 μg/mL时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖率为23.40%;200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组IL-2水平极显著高于对照组（P<0.01）,50和100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组与对照组无显著差异（P>0.05）;各甘肃棘豆黄酮组IgG抗体水平均极显著高于对照组（P<0.01）,其中,50 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于100和200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01）,100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01）。综上所述,甘肃棘豆黄酮具有较好的抗氧化活性及免疫活性。