LPS诱导牛乳房炎相关因子及蛋白变化研究进展

乳房感染导致的炎性反应,引起乳汁中的体细胞数量增加,并激活了乳汁中的细菌抑制酶和蛋白.在脂多糖(LPS)刺激时,肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素-1β(IFN-1β)和环加氧酶-2的表达增加.在LPS刺激后的3 h达到最高.乳铁转运蛋白、溶霉素、诱导一氧化氮合成酶、L-选择蛋白、NFκB和凋亡因子caspase-3、caspase-7及Fas(FS-7相关表面抗原)升高,在刺激后6 h达到峰值.而乳汁中的α-乳白蛋白和κ-CN表达量下降,同时导致乳产量和适合制作奶酪的产量下降.     

LPS诱导仔猪腓肠肌相关microRNA在不同时间点的mRNA表达

为研究脂多糖(LPS)刺激后不同时间点断奶仔猪腓肠肌相关microRNA(miRNA)基因的变化规律,试验选取(7.1±0.9)kg杜×长×大断奶仔猪42头,随机分为7个处理组,每个处理6头猪,分别于注射LPS之前(0 h)和注射LPS之后1、2、4、8、12、24 h,屠宰仔猪,取腓肠肌测定相关miRNA的表达.结果...     

谷氨酸对仔猪肝脏能量代谢及关键酶和相关调节因子mRNA表达的影响

本试验旨在研究谷氨酸(Glu)对脂多糖(LPS)刺激仔猪肝脏能量代谢、能量代谢关键酶和相关调节因子m RNA表达的影响。选用24头(28±3)d日龄健康三元杂交断奶仔猪,随机分为4个处理组,每个处理6个重复,每个重复1头猪。4个处理组分别为对照组(基础日粮)、LPS组(基础日粮+LPS)、1.0%Glu组(基础日粮+1.0%Glu+LPS)、2.0%Glu组(基础日粮+2.0%Glu+LPS)。试验期为28 d。试验第28天,LPS、1.0%Glu+LPS、2.0%Glu+LPS组的猪注射100μg/kg BW的LPS,对照组注射等量的生理盐水,4 h后屠宰取肝组织样品待测。结果表明:1.0%Glu显著提高了肝脏能荷(EC)水平(P0.05),显著降低了一磷酸腺苷(AMP)/三磷酸腺苷(ATP)的比值(P0.05),并有降低AMP含量的趋势(P0.10);2.0%Glu显著提高了ATP和EC的含量(P0.05),显著降低了AMP/ATP的比值(P0.05)。1.0%Glu显著降低了肝脏己糖激酶2(Hexok 2)和肉碱酯酰转移酶1(L-CPT1)m RNA的表达量(P0.05);2.0%Glu显著降低了肝脏Hexok 2、丙酮酸激酶(Pyruk)、L-CPT1和柠檬酸合成酶(CS)m RNA的表达量(P0.05),并有降低肝脏丙酮酸脱氢酶(PDH)m RNA的表达量的趋势(P0.10)。Glu显著降低了肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)m RNA的表达量(P0.05)。以上研究结果显示,Glu可以缓解LPS刺激引起的仔猪肝脏能量代谢紊乱,也可以缓解LPS刺激导致的肝脏糖代谢、TCA循环关键酶基因表达的上升,并降低PGC-1α的表达。     

LPS诱导下鹅TLR15及相关免疫因子的表达分析

为探究炎症反应中东北白鹅Toll样受体15(TLR15)的免疫功能及其组织表达特征,本研究采用荧光定量PCR方法,对LPS诱导下的东北白鹅TLR15及相关免疫因子在不同组织的转录水平进行分析;同时利用免疫组织化学技术,对TLR15在不同组织中的表达水平进行检测。结果显示,在LPS诱导下东北白鹅TLR15及其相关免疫因子(IFN-α、IFN-γ、IL-1β和IL-6)的转录水平均高于对照组,其中TLR15、IFN-α和IFN-γ在法氏囊组织转录水平最高(p0.01),IL-6在胸腺中转录水平最高,表明在炎症反应中TLR15及其免疫因子在不同组织的转录水平存在一定的差异。免疫组织化学检测结果显示,与对照组比较,各实验组TLR15在法氏囊、脾脏和肝脏中的表达差异极显著(p0.01),在肺组织和肾组织中的表达差异显著(p0.05),表明在LPS诱导下,鹅TLR15基因的转录和翻译水平一致。本研究为东北白鹅TLR15在炎症反应中的免疫功能分析提供了参考依据。     

富硒麦芽对二乙基亚硝胺致肝癌大鼠低血糖症及相关体液调节因子动态变化的影响

雄性SD大鼠193只，体重100～120g，随机分成5组。组Ⅰ～组Ⅲ，日粮中添加富硒麦芽（SEM）至硒含量分别为0．3、1．0、3．0mg／kg；组Ⅳ，模型组；组Ⅴ，阴性对照组，不加SEM也不诱癌，日粮中分别添加亚硒酸钠至硒含量达0．1mg／kg。组Ⅰ～组Ⅳ，饮水中添加100mg／L二乙基亚硝胺（Diethylnitrosamine，DEN）诱癌，维持DEN摄人量每天约10mg／kg体重，连续16周，然后改饮普通灭菌水至18周末。组V始终以普通灭菌水自由饮用。每4周眼眶采血1次，测定血浆葡萄糖及其相关体液调节因子胰岛素、胰高血糖素、胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）等的含量，统计胰岛素／葡萄糖（IGR1）、胰岛素／胰高血糖素（IGR1）、胰高血糖素／葡萄糖（GGR）值。分析血糖与各相关调节因子间的相关性。结果发现，与同期阴性对照组相比，各诱癌组大鼠血糖和血清胰岛素、胰高血糖素水平及GGR值均显著下降，血清IGF-Ⅱ水平和IGRz值则显著上升，而某些剂量的SEM能有效地抑制血糖、胰高血糖素水平的下降和血清IGF-Ⅱ水平、IGR2值的上升。血糖与上述各调节因子间分别存在显著相关性。结果表明SEM能抑制肝癌大鼠低血糖症的发生，该作用可能是通过对诸多相关调节因子的共同调节而实现的。     

烟碱对LPS诱导的兔子宫内膜上皮细胞炎症因子及前列腺素分泌的影响

试验旨在探索α7烟碱乙酰胆碱受体（α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAChR）的高亲和力激动剂烟碱对脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导的兔子宫内膜上皮炎症的作用机制。分离发情后期兔的子宫内膜上皮细胞,用100 ng/mL LPS对细胞进行炎性刺激12 h。用CCK8法检测不同浓度烟碱（5、10和20 μg/mL）对细胞存活率的影响,筛选合适浓度的烟碱进行后续试验。将细胞分为对照组（CON）、LPS、LPS+烟碱、LPS+烟碱+甲基牛扁碱（MLA）（α7nAChR的特异性颉颃剂）组,通过ELISA法检测细胞培养上清液中白细胞介素-1β（interleukin 1β,IL-1β）、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor,TNF-α）、前列腺素E₂（prostaglandin E₂,PGE₂）和前列腺素F_2α（PGF_2α）的含量。试验成功分离兔子宫内膜上皮细胞,且传至第5代仍保持良好的生长状态。CCK8检测结果显示,20 μg/mL烟碱组细胞存活率显著降低（P<0.05）,10 μg/mL烟碱对细胞存活率无显著影响（P>0.05）,所以选择10 μg/mL烟碱进行后续试验。ELISA结果显示,与对照组相比,LPS组IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE₂和PGF_2α的含量显著增加（P<0.05）;与LPS组相比,LPS+烟碱组显著降低IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE₂和PGF_2α的含量（P<0.05）,LPS+烟碱+MLA组炎性因子和前列腺素的含量差异不显著（P<0.05）。以上结果表明,烟碱对LPS诱导的兔子宫内膜上皮细胞分泌IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、PGE₂和PGF_2α具有下调作用,推测烟碱通过α7nAChR介导炎性因子和前列腺素分泌下调而发挥抗炎作用,该结果可为研究α7nAChR作为子宫内膜炎治疗靶点的药物选择提供参考。     

双岐因子对仔猪生长的影响

正元恒泰系采用现代生物工程技术开发生产的肠道有益细菌营养剂,它能提高断奶仔猪的生产性能,饲料中添加０．１％的双岐因子,日增重提高１０．３８％,耗料量降低１３．３％,双歧因子对仔猪的腹泻也有一定的预防作用,同时可以取得一定的经济效益。     

双歧因子对仔猪生长的影响

正元恒泰（双歧因子）系采用现代生物工程技术开发生产的肠道有益细菌营养剂,它能提高断奶仔猪的生产性能,饲料中添加０．１％的双歧因子,日增重提高１０．３８％,耗料量降低１３．３％,双歧因子对仔猪的腹泻也有一定的预防作用,同时可以取得一定的经济效益。     

双歧因子对仔猪生长的影响

正元恒泰（双歧因子）是一种肠道的有益细菌营养剂,它能提高断奶仔猪的生产性能,饲产中添加０．１％的双歧因子,日增重提高１０．３８％,耗料量降低１３．３％,对仔猪腹泻也有一定预防作用。     

不同n-6/n-3多不饱和脂肪酸比值对LPS诱导的断奶仔猪肠道形态的影响

为探讨n-6/n-3多不饱和脂肪酸(PUFA)比值为10或20对断奶仔猪生长性能及LPS诱导的肠道形态的影响,试验选用24头28 d断奶、平均体重(6.8±0.55)kg的荣昌小公猪,采用2×2因子试验设计,日粮类型(n-6/n-3PUFA比值为10和20)和免疫应激(注射LPS和生理盐水),试验期21 d。第21天,每日粮处理组一半的仔猪腹膜注射大肠杆菌脂多糖(LPS)或生理盐水,3 h后屠宰仔猪采集肠道样品。结果表明:在试验的0~7 d和0~21 d,采食n-6/n-3 PUFA比值为10日粮的仔猪饲料转化效率显著高于采食n-6/n-3 PUFA比值为20日粮的仔猪(P<0.05);注射LPS显著降低了断奶仔猪空肠绒毛高度与隐窝深度的比率(P=0.01),但两种n-6/n-3 PUFA比值的日粮对LPS诱导的仔猪肠道形态损害没有缓解作用。     

脂多糖对小鼠乳腺组织中Toll-like Receptor4表达的影响

将40只雌性ICR小鼠,受孕后随机分为试验组和对照组。雌鼠产后10-11d,试验组经第4对乳头灌注LPS,对照组灌注生理盐水,分别于灌注后不同时间采集样本,组织学分析乳腺病理变化;分析对各组乳腺组织中TLR4和TNF-α mRNA表达变化。组织学结果显示,灌注1．5h后乳腺组织中炎性细胞增多,6、12h乳腺腺泡内有大量的炎性细胞浸润,腺泡结构崩解;6h TLR4 mRNA表达极显著高于对照组（P〈0．01）;4个试验组中TNF-αmRNA表达极显著高于对照组（P〈0．01）。试验结果表明LPS能够增强TLR4和TNF-α mRNA表达。     

银杏内酯A对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用

为了研究银杏内酯A对非特异性肺损伤小鼠的保护作用,采用脂多糖（LPS）滴鼻法建立了小鼠急性肺损伤（ALI）模型。于造模前1h给予银杏内酯A（50,100mg/kg）,在LPS滴入后18h检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平,观察肺部组织学的病理变化。结果表明：银杏内酯A可以显著抑制肺组织中炎性细胞的浸润,抑制肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素1β（IL-1β）炎性细胞因子的产生。由此得出结论,银杏内酯A对LPS诱导的小鼠ALI具有一定的保护作用。     

猪GM-CSF基因对猪圆环病毒2型DNA疫苗诱导仔猪免疫反应的调节作用

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）能够诱导树突状细胞的成熟和存活，并提高其抗原递呈功能，是非常有潜力的分子佐剂之一。为了探讨猪GM-CSF对猪圆环病毒2型（PCV2）DNA疫苗诱导免疫反应的调节作用，本研究将表达猪GM-CSF和PCV2衣壳蛋白的重组质粒混合物（pcDNA3．1-gm-csf和pcDNA3．1-orf2）及在同一载体上表达PCV2衣壳蛋白与猪GM-CSF的双表达重组质粒（pIRES-orf2／gm-csf），分别接种于7日龄健康仔猪，共肌肉注射3次，每次间隔2周。结果表明猪GM-CSF基因能够明显增强PCV2DNA疫苗诱导的特异性体液免疫反应，提高外周血淋巴细胞（PBLC）对ConA刺激的增殖活性，增强NK细胞的杀伤功能，影响细胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4和IL-10的表达水平。但GM-CSF基因单独表达和与PCV2衣壳蛋白基因在同一载体上表达，对上述4个细胞因子表达的影响有一定差异。     

细菌脂多糖诱导的急性免疫应激对肉仔鸡肉品质的影响

本试验利用细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导急性免疫应激,研究短期注射不同剂量LPS对肉仔鸡肉品质和脂质代谢的影响。选取32只体重相近的21日龄肉仔鸡随机分为4组,其中3个试验组分别在21、23和25日龄经腹腔注射LPS生理盐水稀释液,剂量为250、500和1 000μg/kg BW,对照组注射等量生理盐水。26日龄取试鸡血液制备血浆,测定血浆胆固醇、甘油三酯和丙二醛的含量;取胸肌和肝脏,测定pH、乳酸、脂肪、丙二醛含量。结果表明,LPS处理对胸肌化学指标和血脂指标有显著影响。与对照组相比,显著提高乳酸含量(P<0.05),显著降低胸肌pH及水分含量(P<0.05),显著提高胸肌和肝中脂肪含量及血浆中胆固醇和甘油三酯的含量(P<0.05)。LPS处理也显著提高了血浆和胸肌脂质过氧化物水平(P<0.05)。     

秦公散对LPS活化的内皮细胞表达黏附分子和分泌一氧化氮的影响

为阐明秦公散的抗炎作用机制,本试验采用流式细胞术检测了LPS刺激的内皮细胞黏附分子E-选择素和ICAM-1的表达,用一氧化氮(NO)测定试剂盒检测LPS刺激的内皮细胞培养上清液中NO的含量。结果表明,LPS刺激的内皮细胞可显著提高E-选择素和ICAM-1的表达(P0.01),显著提高培养上清液中NO的含量(P0.05);用秦公散及其含药血清处理后则明显抑制LPS诱导的E-选择素、ICAM-1的表达和NO分泌(P0.05)。表明秦公散可通过抑制黏附分子的表达及NO分泌量发挥抗炎作用。     

鼠源重组UBC13蛋白对脂多糖诱导的小鼠急性炎症的影响

试验旨在探讨鼠源重组UBC13蛋白对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠急性炎症的影响。将24只SPF雌性小鼠随机分成4组:PBS组,LPS模型组,重组UBC13蛋白高、低剂量组(分别为100和25μg/只),每组6只。LPS模型组与各蛋白剂量组腹腔注射20 mg/kg LPS,PBS组腹腔注射等体积PBS;注射结束1 h后,各蛋白组按相应剂量背部皮下多点注射重组UBC13蛋白,PBS组与LPS模型组注射等体积PBS。给予蛋白24 h后处死小鼠。收集小鼠肺脏、脾脏、胸腺及肝脏组织,计算脏器指数,HE染色观察组织病理学变化,实时荧光定量PCR检测肺脏、脾脏、胸腺和肝脏中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA的相对表达量,以及肺脏中iNOS mRNA的相对表达量,综合评价鼠源重组UBC13蛋白对LPS诱导小鼠急性炎症的影响。结果显示,与PBS组相比,LPS模型组小鼠肺脏、脾脏及肝脏指数均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),且肺脏、脾脏和肝脏组织均出现病理变化。实时荧光定量PCR结果显示,与PBS组相比,LPS模型组肺脏、脾脏、胸腺和肝脏中IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA相对表达量均极显著升高(P<0.01),肺脏中iNOS mRNA相对表达量也极显著升高(P<0.01);与LPS模型组相比,UBC13蛋白高剂量组肺脏、脾脏和肝脏中病理变化明显改善,肺脏、肝脏、脾脏中IL-1β、TNF-α、IL-6及肺脏中iNOS mRNA表达量均极显著降低(P<0.01);胸腺中TNF-αmRNA表达量显著降低(P<0.05),IL-6 mRNA和IL-1β表达量极显著降低(P<0.01)。表明鼠源重组UBC13蛋白可下调炎性因子的表达,从而改善LPS诱导的小鼠急性炎症反应。     

家兔乳头管灌注脂多糖诱发血清急性期蛋白的动态变化

检测和分析经乳头管灌注脂多糖(LPS)前后家兔血清急性期蛋白含量的动态变化。11只泌乳家兔(产后7d)经乳头管灌注LPS建立乳房炎模型,在灌注前2h,灌注后6、12、24、48、72h和5、7d分别测定血清中结合珠蛋白(HP)、C-反应蛋白(CRP)和白蛋白(ALB)含量,同时取乳腺组织观察病理变化。组织病理学结果显示,灌注LPS后6h后乳腺组织出现病理变化,腺泡腔中观察到嗜中性粒白细胞;灌注24h时组织损伤加重,乳腺组织结构紊乱,浸润大量嗜中性粒白细胞;48h后乳腺组织开始自我修复,7d时恢复正常。灌注LPS前血清中HP含量低于检出限,灌注LPS后6h时HP含量显著升高(P<0.05),12h时达到峰值,48h开始显著降低(P<0.05);CRP含量在灌注LPS后6～72h内显著升高(P<0.05),12h时达到峰值,72h后逐渐降低,5d时恢复到健康水平;ALB含量在灌注LPS后12～72h内显著降低(P<0.05),5d时恢复到健康水平。结果表明,HP、CRP和ALB含量在灌注LPS前后发生了规律性的变化,其中HP含量对LPS诱导的急性乳房炎反应敏感,提示HP可作为评价乳腺组织炎症程度和乳房炎的早期诊断...     

芩连液与白虎汤对脂多糖致家兔肝损伤的疗效比较

为比较自拟方芩连液和白虎汤对高热病症的治疗效果,通过静脉注射脂多糖(LPS)复制了家兔高热病症,并在两种药物治疗前后分别进行了肝脏组织病理观察与血清生化指标分析。结果显示,15 μg/kg LPS能致家兔肝脏组织产生明显病理损伤,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和尿素(Urea)含量上升,而总胆固醇(TC)含量下降,经白虎汤和芩连液治疗后肝脏组织病理损伤显著减轻,4项血清生化指标向正常水平恢复。结果表明,白虎汤和芩连液对LPS引起的肝损伤都具有显著的治愈效果,且两种组方的疗效各有优势。