新城疫疫苗的研究进展

综述了常规疫苗和基因工程疫苗2种类型新城疫疫苗的研究进展,分析新城疫疫苗的发展方向,以促进新城疫疫苗的研究。     

新城疫多联疫苗研究进展

新城疫(Newcastle disease,ND)的防控主要通过生物安全和加强免疫进行预防。目前预防新城疫的疫苗主要有弱毒疫苗和灭活疫苗。为了降低成本、减少免疫次数,达到"一针防多病"的目的,国内外很多学者在新城疫单苗的基础上研制出了一系列多联疫苗。通过对中国新城疫多联疫苗的研究进展进行阐述,分析了疫苗的应用效果,为临床应用提供参考。     

鸡新城疫发病原因

目前，新城疫疫苗免疫保护期逐渐缩短，发病率居高不下，一直困扰着广大养殖户。笔者经常遇到免疫新城疫疫苗十几天后，在临床和剖检中仍表现出非典型新城疫特征的现象，再次免疫新城疫疫苗后，症状才得已消除和缓解。虽然非典型新城疫不至于引起鸡群大批死亡，但当其他病毒与非典型新城疫混合感染时，会导致病情恶化和死亡数量大幅增加，病情更趋复杂化、严重化。     

抗生素对新城疫疫苗病毒影响实验

试验目的:验证5种常用抗生素对新城疫疫苗Lasota毒株的影响程度。方法:将新城疫活疫苗用无菌生理盐水稀释至2羽份疫苗/0.1毫升,然后与等量抗生素混合均匀,置25℃环境,分别在30、60、90、120及150分钟后,经尿囊腔途径接种SPF鸡胚,每胚0.2毫升,于接种后36、48、72、96及120小时,各组分别取3个鸡胚测HA效价。结果:5种常用抗生素对新城疫疫苗Lasota毒株无影响。结论:临床免疫接种新城疫疫苗Lasota毒株时,可用抗生素减缓其副反应,方法可行。     

鸽新城疫病毒的分离鉴定及灭活油乳化疫苗的研制

通过对上海及周边地区鸽新城疫的流行病学调查、临床症状、病毒分离、病毒回归鸽试验及血清学试验，证实了鸽新城疫的广泛流行。利用分离的鸽新城疫毒株研制了鸽新城疫灭活油乳化疫苗，疫苗安全、免疫效果良好，第5周达到抗体高峰7．8log2，免疫持续期较长，能有效地抵御当前流行株强毒的攻击。     

耐热新城疫弱毒株及其热稳定机制研究进展

新城疫严重危害养禽业发展,筛选和创制耐热的新城疫弱毒疫苗株具有重要的经济意义。综述国内外耐热新城疫弱毒株的筛选培育研究进展,概述目前作为疫苗株或疫苗候选株的生物学特性、免疫学特性及其应用情况,讨论国内外关于新城疫耐热株的热稳定机制主要研究结果,对开展新城疫病毒耐热分子机制解析和新型耐热疫苗株创制进行了展望。     

新城疫纳米乳疫苗研制及其免疫效力试验

研制新城疫纳米乳疫苗,并考察其免疫效果。利用伪三元相图法优选配方,并考察其结构类型、形态粒径、稳定性、安全性及免疫效果。结果表明:新城疫纳米乳疫苗为W/O型,澄明均一,乳滴呈球形,平均粒径364 nm;稳定性良好;注射、口服接种安全;每只0.751、.0 mL免疫剂量可产生良好的免疫效果。新城疫纳米乳疫苗安全、稳定、免疫效果好,具有临床应用前景。     

影响新城疫免疫因素及效果跟踪监测

鸡新城疫是一种高接触性的急性传染病,发病率高,死亡率可达100%,对养鸡业的危害巨大,目前使用疫苗免疫预防新城疫是最有效的措施,但疫苗种类不同,接种方式不同,生产中应激因素过多,母源抗体的影响及免疫抑制类疾病等因素都能影响新城疫疫苗的免疫效果,大多数影响因素都对疫苗的免疫效果有抑制作用,但免疫增强剂的使用能有效提高机体内抗体水平,增强疫苗免疫效果。定期监测疫苗免疫效果对优化免疫程序有指导性的意义。本文对生产实践中存在的影响鸡新城疫疫苗免疫效果的几种因素进行了分析总结,并对2013~2016的4年间,南京市江宁区部分养殖场的新城疫免疫效果,做了定点跟踪监测,其结果报告为新城疫疫苗的使用提供参考。     

新城疫的克星—新流

新城疫是养殖业中的一个难题,新城疫是由其毒株来决定新城疫的发病情况的,强度型新城疫会使得养殖户损失惨重,强度型的新城疫的死亡率很高,一旦发病,有时控制不及时,死亡率100%。一、肉鸡新城疫的预防1.对1月龄内小鸡,用鸡新城疫EV系疫苗5—10倍量肌注;1月龄鸡用E系疫苗3倍量肌注,     

重组鸡IL-18对新城疫疫苗免疫增强作用的研究

将200只1日龄鸡随机分为4组,每组50只鸡,分别为空白对照组,新城疫疫苗组,新城疫疫苗+重组IL-18组,新城疫疫苗+空载体对照组。所有免疫组鸡均于8日龄免疫接种相应疫苗,并分别于免疫后的第3,7,14,21,28天和第35天对各组鸡随即抽取4只,对其血清的抗体效价、外周血的T淋巴细胞转化水平和γ干扰素含量进行测定。免疫18 d后每组鸡随机取20只进行动物攻毒保护试验。结果表明重组鸡IL-18蛋白不仅能够显著增强新城疫疫苗所诱导的细胞免疫和体液免疫反应,而且还可以明显提高疫苗的保护率     

商品蛋鸡新城疫免疫技术研究

通过对比不同鸡新城疫（ND）疫苗免疫商品蛋鸡后HI抗体的消长规律,确立了ND弱毒苗＋ND灭活苗联用是商品蛋鸡首选的疫苗组合,并制定了ND最佳免疫程序（8日龄首免→60日龄二免→120日龄三免→以后每隔3个月免疫1次）。经田间试验和小区应用试验证实,将该ND免疫程序加入常规免疫程序中,其免疫效果基本不受其他疫苗免疫等因素干扰;在不同养鸡场实施该免疫程序,其免疫效果差异不显著。因此建议大面积推广应用。     

抗生素与新城疫疫苗联合应用对肉鸡抗体生成的影响

为探讨抗生素与新城疫I系疫苗联合使用对肉鸡抗体生成的影响,选取青霉素、链霉素、利高霉素和头孢噻呋分别与新城疫I系疫苗联合使用,测定各组疫苗稀释液的pH值,并对9日龄鸡胚接种,检测鸡胚尿囊液血凝(HA)效价。同时对20日龄的肉鸡进行肌肉注射免疫,并于免疫当日及免疫后第7、14、21、28 d采血,测定血清抗体血凝抑制效价(HI)。结果表明,各加药疫苗稀释液的pH值与生理盐水疫苗组对比差异极显著;各加药疫苗组的鸡胚HA效价、HI效价与生理盐水疫苗组对比均无无显著差异。研究表明,青霉素、链霉素、利高霉素和头孢噻呋与新城疫I系疫苗联合使用不会降低免疫效果,可以联合使用。     

表达传染性法氏囊病毒超强毒流行株VP2基因重组新城疫病毒LaSota疫苗株的构建

 【目的】重组新城疫病毒（newcastle disease virus,NDV）作为新型的活病毒载体疫苗具有巨大的优势和应用前景,本研究旨在探讨新城疫病毒作为防制传染性法氏囊病超强毒（very virulent infectious bursal disease virus,vvIBDV）及新城疫重组二联活病毒载体疫苗的可行性。【方法】采用单股负链RNA病毒反向遗传操作技术,救获野生型NDV LaSota疫苗株rLaSota及表达vvIBDV Gx株VP2基因的重组疫苗株rLaSota-VP2,分别经滴鼻点眼途径免疫SPF雏鸡,免疫后21 d分别以vvIBDV Gx超强毒和新城疫强毒进行攻击。【结果】rLaSota及表达vvIBDV－VP2基因平均鸡胚致死时间均大于120 h,脑内致病指数（ICPI）分别为0.4和0.36,静脉内致病指数（IVPI）均为0;接种后72～96 h每毫升尿囊液EID50则分别达到109.0以上。rLaSota-VP2以106.0 EID50一次免疫7日龄SPF鸡雏,免疫后3周对新城疫强毒致死攻击100％保护,对vvIBDV攻击免疫保护率达90％以上。 【结论】重组病毒rLaSota-VP2保持了LaSota亲本疫苗株高滴度的鸡胚生长特性和低致病性及遗传稳定性,免疫雏鸡对新城疫强毒和传染性法氏囊病毒超强毒株的致死均形成有效免疫保护。本研究为研制传染性法氏囊病－新城疫重组二联活载体疫苗奠定了基础。     

鸡新城疫病毒F基因部分片段克隆表达及其抗体制备

[目的]为进一步研究新城疫病毒的分子结构和基因疫苗奠定基础。[方法]用自行设计的l对引物,通过RT-PCR从接毒的SPF鸡胚的尿囊液中克隆了新城疫病毒F基因部分片段,将该基因片段插入含谷胱甘肽(GST)基因的质粒pGEX-4T-1,构建了重组质粒,对提取的融合蛋白进行亲和层析纯化和琼扩、ELISA及W estern-blot检测。[结果]通过克隆和PCR扩增获得新城疫病毒F基因的部分片段,大小为509 bp;对构建的重组质粒pGEX-4T-1-F509经诱导表达,获得分子大小约为44 000 bp的融合蛋白,其中F基因的部分片段大小约18 000 bp;经亲和层析,获得纯化GST-F509融合蛋白,进一步用该蛋白免疫小鼠,制备了鼠源抗鸡新城疫病毒F蛋白抗体。[结论]琼脂扩散试验、ELISA及W estern-blot检测表明,该融合蛋白中的F片段具有良好的抗原性。     

鸡新城疫-传染性支气管炎-H9亚型禽流感三联灭活疫苗的制备及检验

[目的]制备鸡新城疫-传染性支气管炎-H9亚型禽流感[ND-IB-AI（H9亚型）]三联灭活疫苗。[方法]以NDV La Sota株、IBVM41株、AIV（H9亚型）WD株为毒种,分别接种鸡胚,制备NDV、IBV及AIV（H9亚型）抗原液;采用病毒超滤系统浓缩病毒抗原液,并用甲醛溶液进行灭活;将浓缩灭活后的3种抗原液按一定比例混合（1∶1∶1）,以司本80及吐温80为乳化剂,10号白油为佐剂,乳化制成ND-IB-AI（H9亚型）三联灭活疫苗;对制备的疫苗进行无菌检验和物理性状观察。[结果]共制备了3批ND-IB-AI（H9亚型）三联灭活疫苗实验室制品,经无菌检验为阴性,外观为乳白色,剂型为油包水型（W/O型）,粘度6.36.8 s,离心和37℃放置21 d均不分层。[结论]所制备3批ND-IB-AI（H9亚型）三联灭活疫苗均无细菌污染,其物理性状均能达标。     

商品化鸡传染性法氏囊病三价活疫苗对新城疫疫苗免疫效果影响的试验

试验用商品化鸡传染性法氏囊病三价活疫苗3倍、4倍和5倍剂量分别免疫10日龄法氏囊非免疫雏鸡,免疫后3d、7d、21d剖杀,观察法氏囊的变化;免疫后7 d接种ND疫苗,接种ND疫苗后14 d和21 d分别采血进行ND HI抗体的测定。结果显示,IBD三价活疫苗5倍免疫剂量可引起法氏囊不可逆损伤,并对ND的HI抗体产生干扰作用。     

新城疫F蛋白基因工程疫苗的研究现状

新城疫（Newcastledisease,NDV）是当今世界上最严重的禽类传染病之一,被世界动物卫生组织（OIE）列为必须报告的传染病。同预防其他传染病一样,新城疫的主要防控手段仍是免疫接种。F蛋白是构成新城疫病毒（NDV）致病性的分子基础之一。综述了国内外新城疫F蛋白基因工程疫苗的研究进展。     

鸡新城疫—减蛋综合症—传染性支气管炎三联油佐剂灭活疫苗的研究及应用

用分离、鉴定、筛选出的病毒株 ,研制成鸡新城疫—减蛋综合症—传染性支气管炎三联油佐剂灭活疫苗。通过实验室免疫效力、安全性、免疫期、保存期和攻毒试验 ,该疫苗强毒攻击保护率为10 0 % ,免疫期 2 0 0d以上 ,保存期在 4 50d以上 ,经大范围应用 ,免疫效果良好。     

免疫鸡群新城疫病毒强毒株感染的实验研究

ＳＰＦ试验鸡在８、２５日龄时接受了２次新城疫（ＮＤ）基础免疫，６０日龄时分别以标准新城疫病毒（ＮＤＶ）强毒株、中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒，对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了３０ｄ的连续检测。结果表明：从攻毒后第３ｄ起强毒株试验组检测出多例阳性，检出高峰分别在攻毒后第４～６ｄ和１１～１５ｄ，与鸡群症状表现的时间相一致；中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒可以检测免疫鸡群中ＮＤＶ强毒感染，为ＮＤ的监测提供了新手段。