一株H9N2亚型禽流感病毒鸡胚培养工艺研究

为了探讨H9N2亚型禽流感病毒在鸡胚上最佳培养工艺,试验采用H9N2亚型禽流感病毒分离株以不同稀释倍数接种不同鸡胚(SPF及普通鸡胚)、不同日龄鸡胚及不同培养时间收获鸡胚尿囊液,比较不同培养条件下制备出的鸡胚尿囊液的产量及病毒效价。结果表明:H9N2亚型禽流感病毒接种无禽流感病毒(H9亚型)HI母源抗体鸡胚的最佳病毒稀释倍数为1×10~(4 )～1×10~5倍,接种带有禽流感病毒(H9亚型)HI母源抗体鸡胚的最佳病毒稀释倍数为1×10~3～1×10~4倍,最佳接种日龄为10日龄,最佳培养时间为96～120 h。说明采用优化的鸡胚培养方法生产H9N2亚型禽流感病毒可以得到高质量、高产量的病毒液。     

牛BVD/MD活疫苗在奶牛上的抗体应答和胎儿感染

用牛BVD/MD活疫苗(NO.12—43株)接种92头牛的抗体应答:接种时牛的抗体价在4倍以下者,对任何病毒株的抗体应答率几乎都是100％;接种时抗体价在8倍以上者对NO.12株、Nose株的抗体价高的牛其抗体应答率低下。抗体阴性牛接种疫苗后第2个月对各病毒株的平均抗体价分别是NO.12株4806.5倍,Nose株1170.0倍,KS 86-1株121.4倍,北海道野外分离的3株分别是460.2、135.0、135.5倍,并发现疫苗株以外的病毒株的抗体也上升。1年后的平均抗体价(n=6)分     

利用血清和唾液确定猪圆环病毒2型的最佳接种日龄

血清是用于评估猪圆环病毒2型(PCV2)抗体和基因组检测的最常用样品.然而,相比于唾液采样,血液采样对猪只的伤害比较大.唾液(OF)是检测猪群中的抗体和病原体的一种经济且易于取得的样品.此外,对仔猪进行PCV2接种的最常见周龄是3~4周龄.然而,当我们计划母猪和仔猪接种策略时,有必要考虑延迟仔猪接种疫苗,以获得更高的疫苗效力.     

猪伪狂犬病母源抗体衰减规律及适时首免试验

试验采用伪狂犬病gB抗体ELISA试剂盒,分别检测3日龄和1、2、3、4、5、6、7、8、9、10周龄未免疫猪伪狂犬病母源抗体和相应日龄免疫后3周的伪狂犬病gB抗体,以gB抗体阳性率和S/N值分析猪伪狂犬病母源抗体衰减规律和最佳首免时间。结果表明,母猪分娩前1个月免疫伪狂犬病gE基因缺失弱毒苗,所产仔猪能获得高水平的母源抗体;随着仔猪日龄增加,抗体水平逐渐降低,能维持到10周龄。仔猪在5周龄前免疫伪狂犬病疫苗,母源抗体干扰主动免疫,5周龄后免疫抗体水平均有上升;该场仔猪伪狂犬病最佳首免时间为35~42日龄。     

猪瘟抗体消长规律及仔猪猪瘟免疫程序的研究

选取51窝经产母猪后代,每窝选3头健康仔猪随机将其分为L组、M组和H组,通过跟踪三组试验动物不同周龄血清中猪瘟抗体阳性率的变化,确定猪瘟疫苗的使用的种类、免疫次数及首免时间。结果表明:仔猪母源抗体在5周龄时开始下降,6~7周龄内迅速下降且离散度高。第7周时阳性率降至20%以下且离散度较高;较早注射(3、4周龄)疫苗不能改变猪群母源抗体在5~7周时下降趋势;30日龄仅免疫一次进口猪瘟疫苗不能使猪群后期产生较好抗体(H组);14周龄时L组阳性率最高,抗体均匀,效果最好。免疫一次的H组阳性率最低,抗体均匀度差。     

Ⅰ群禽腺病毒FAdV-4和FAdV-8灭活疫苗的制备及免疫效果

为提高鸡心包积液-肝炎综合征(hydropericardium hepatitis syndrome,HHS)和鸡包涵体肝炎(inclusion body hepatistis,IBH)疾病的防控能力,研制有效防控Ⅰ群禽腺病毒(FAdV)疫苗。本研究将实验室分离鉴定的FAdV-4 SN2016株和FAdV-8标准毒株,采用鸡胚增殖方式,优化最佳接种剂量、收获时间及甲醛的灭活条件,病毒抗原以3∶1比例混合,制备双价油乳剂灭活疫苗,检验疫苗性状、监测免疫后雏鸡的抗体水平及对其免疫保护效果。病毒采用卵黄囊接种,尿囊液中病毒粒子含量分别达到4.6×10~8和7.8×10~7拷贝/mL;灭活条件为终浓度1.5‰的甲醛灭活24 h;制备的疫苗为油包水剂型,物理性状稳定,无菌检测合格,4℃保存期可达12个月;雏鸡免疫抗体水平监测结果显示,免疫后3～4周抗体水平达到高峰,第6周依然维持较高水平,制备的双价油乳剂灭活疫苗可以有效抵抗单病毒和双病毒的攻击。研究结果显示制备的FAdV-4 SN2016和FAdV-8双价油乳剂灭活疫苗性状稳定、保存期长,免疫效果好,能有效抵抗病毒攻击,为HHS和IBH疫病的防控提供有效手段。     

犬传染性肝炎病毒母源抗体及其对免疫接种的影响

仔犬主要通过摄入初乳获得犬传染性肝炎病毒(ICHV)母源抗体(MAb)。血清ICHV抗体效价高的母犬,其初乳抗体效价也高,仔犬可获得较多的MAb。生后48小时内,仔犬MAb效价达1:256～1:4096;7周龄时,效价下降至1:4～1:128,平均为1:19.9。仔犬MAb效价≥1:64时,3/5接种ICHV灭活疫苗的犬不产生免疫应答:MAb效价≤1:32时,8头仔犬均产生免疫应答。仔犬于第7、9周龄时两次接种灭活疫苗,抗体效价分别上升0～64倍和4～32倍。妊娠母犬于产前20天接种ICHV灭活疫苗,其仔犬于第7、9周龄时两次接种灭活疫苗,在12个月内,未发生犬传染性肝炎。     

鸡鸭鹅新城疫病毒毒力及生物学特性的研究

为了测定鸡、鸭、鹅新城疫病毒的毒力强弱。测定其血凝价、血凝素热稳定性试验、血凝解脱试验、氯仿敏感性试验、耐酸性试验,并对3株病毒进行理化特性测定;测定其1日龄雏鸭脑内接种致病指数、6周龄鸭静脉接种致病指数和对13日龄非免疫鸭胚的半数感染量(EID_(50))。结果鸡、鸭、鹅新城疫病毒的血凝价依次为2~9、2~8、2~8;血凝素热稳定性指数分别为5、15、15 min;血凝均为快速解脱型;对氯仿敏感;对p H值3.0、p H值5.0均敏感;1日龄雏鸭脑内致病指数分别为0.59、0.84、1.04;6周龄静脉接种致病指数均为0;对13日龄鸭胚的半数感染量(EID_(50))分别为:10~(-5.31)/0.1 m L、10~(-6.5)/0.1 m L,10~(-7.79)/0.1 m L。表明鸡新城疫为中等偏弱毒力毒株,而鸭、鹅新城疫病毒均为中等毒力毒株。     

不同ELISA试剂盒检测ALV-A的效果比较

为了比较3种ALV p27抗原ELISA试剂盒对外源性ALV检测效果的差异,本研究将1株滴度为4.64×10~4TCID_(50)/mL的ALV-A毒株GD-13分别以10~0、10~(-1)、10~(-2)、10~(-3)进行倍比稀释(每个稀释度病毒接种含量分别为2.32×10~3TCID_(50)、2.32×10~2TCID_(50)、2.32×10~1TCID_(50)、2.32TCID_(50))接种于24孔板的含10%FBS DF-1细胞悬液中,待细胞长满后换为1%FBS维持液,从更换维持液后第3天开始至第9天每天取细胞上清分别同时用3种不同的ELISA试剂盒(A、B、C)进行检测。结果显示,当病毒接种含量为2.32×10~3TCID_(50)时,A、B试剂盒最早可在换液后第3天检出病毒p27抗原阳性,C试剂盒最早在第4天才可以检出病毒阳性,检测阳性率均为100%(5/5)。当病毒接种含量为2.32×10~2TCID_(50)时,使用A试剂盒在接种后第6天能够检出,检测阳性率为80%(4/5);使用B试剂盒最早在接种后第5天可检测出,检测阳性率为20%(1/5);使用C试剂盒直到第9天才能检测出病毒,而且检测阳性率为20%(1/5)。当病毒接种含量为2.32×10~1TCID_(50)和2.32TCID_(50)时,使用A、B和C试剂盒均检测不出病毒。本研究结果表明,对于ALV-A的检测,无论是在检出时间还是检出率上B试剂盒都优于A、C试剂盒,提示不同商品化试剂盒的灵敏度存在一定的差异。本研究可为禽白血病病原学和净化检测提供参考。     

猪细小病毒S—1毒株的分离和鉴定(二)

S一1毒株在猪肾原代细胞第1～10代之间共进行36次传代,培养物的平均HA价>384,第6代以后对细胞的最小感染量稳定在10~(-6)～10~(-7)之间,第5代PK细胞传代毒在-25℃～-30℃保存180天毒价保持10~(-5)不变,死产胎猪组织(S—1毒株分离猪)在用同样温度保存300天能重复分离到病毒,S—1毒株PK传代毒能适应于胎猪睾丸细胞株(ST)增殖,毒价达1O~(-7),以比利时荧光抗体柒色ST细胞培养物和用比利时PPV阳性血清对ST细胞传代毒作HI测定,进一步证实分离物的特异性。用PK细胞传代毒感染HI抗体阴性怀孕头胎母猪能产生明显的抗体反应。3头感染母猪中,1头(用口服途径攻毒)在感染后2～4天间出现排毒现象;从另一头母猪(用肌肉注射途径攻毒)的胎儿中分离到病毒,证实经胎盘感染的发生。     

规模猪场疫病免疫方案参考

<正>1仔猪1.1 2~3日龄伪狂犬活疫苗,滴鼻免疫0.5头份。1.2 8~12日龄及20~24日龄圆环病毒及喘气病灭活苗混合免疫或同时分部位注射,圆环每次接种0.5头份。1.3 14~16日龄蓝耳病活疫苗,根据猪场实际情况选择性列入免疫计划。1.4 4~5周龄及8~9周龄接种猪瘟单苗或高效价猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联活疫苗(生理盐水稀释),接种1头份;或首免用猪瘟单苗,加强免     

从鸭群分离的新城疫病毒(NDV)的性质

作者从具有NDV红细胞凝集抑制(HI)抗体的鸭群中分离了NDV。其性状通过研究,得到如下结果。 1.从A群105例中有49例(占46.6％)和B群40例中有10例(25％),其HI价在4倍到32倍之间,两群鸭在临床上都未见异常。 2.从A群37例中的9例(24.3％)分离到11株NDV。并作了鉴定。根据能使鸡胚死亡的平均时间,对初生雏脑内接种的病原性和对六周龄鸡静脉接种的病原     

血吸虫病抗体检测试纸条对实验感染水牛的抗体检测

为明确牛血吸虫病抗体检测试纸条(以下简称试纸条)的检出时限,用试纸条对实验感染血吸虫的10头水牛的抗体消长情况进行了检测。结果显示,6头试验水牛(编号为1号、2号、4号、6号、7和9号)在接种后第4周检测到血吸虫抗体,4头试验水牛(编号为3号、5号、8号和10号)在接种第5周检测到血吸虫抗体。经过吡喹酮治疗后,3头试验水牛(1号、3号和8号)在第16周抗体转阴,4头试验水牛(2号、5号、6号和10号)在第20周抗体转阴,3头试验水牛(4号、7号和9号)在第24周抗体转阴。结果表明,该试纸条最早可检测到水牛血吸虫抗体的时间在感染后第4周,要保证全部检出的时间须在感染后第5周;经治疗后,试验水牛血液中抗体转阴的最早时间是治疗后16周,全部转阴的时间在治疗后24周。说明该试纸条用于水牛血吸虫病早期诊断时间应在感染后4周~5周,用于治疗药物的疗效评价应在患血吸虫病水牛治疗6个月后进行。     

H7N9亚型禽流感油乳灭活苗诱导鸭产生HI抗体的研究

为了解H7N9亚型禽流感油乳灭活苗对不同品种鸭诱导免疫应答的基本能力和不同接种方法诱导各种鸭产生HI抗体的情况,试验采用H7N9亚型禽流感油乳灭活苗对4个品种(番鸭、白鸭、水鸭、麻鸭)的雏鸭进行3种不同程序的免疫试验(2周龄肌肉注射0.3 mL/只为程序1,2周龄肌肉注射0.5 mL/只为程序2,2周龄肌肉注射0.3 mL/只、3周龄肌肉注射0.6 mL/只为程序3)。结果表明,程序1免疫的雏鸭可在免疫后2周产生4.09~5.73 log_2HI抗体,免疫后1~8周均值为4.54~7.03 log_2;程序2免疫的雏鸭可在免疫后2周产生4.20~6.27 log_2的HI抗体,免疫后1~8周均值5.53~6.57 log_2;程序3免疫的雏鸭可在免后2周达到4.91~7.36 log_2,免疫后1~8周均值6.31~7.87 log_2。结果提示,该疫苗对4种鸭都具有良好的免疫原性,免疫后可较快地产生较高水平的抗体,且维持较长时间(8周以上),同时初步建立了鸭H7N9亚型禽流感油乳灭活疫苗的基本免疫程序。     

鸭瘟弱毒疫苗早期免疫的研究——Ⅰ.鸭瘟疫苗早期免疫途径和时间以及程序的研究

本试验对388只含有母源抗体雏麻鸭和118只无母源抗体雏北京鸭分别进行了早期免疫接种。前者进行了不同日龄(1、5、10、15)、不同免疫途径(肌肉,皮下、点滴、饮水)鸭瘟弱毒疫苗的一次性免疫,后者进行了1日龄、不同途径(肌肉、皮下、滴鼻、喷雾)鸭瘟弱毒疫苗的首免和二免。无母源抗体雏鸭可采用肌肉和皮下途径免疫,最佳时间从1日龄开始首次免疫,免疫30天后进行二次免疫。对含母源抗体雏鸭也可采用肌肉、皮下途径,最佳时间从10日龄开始免疫,经过对含母源抗体和无母源抗体免疫雏鸭2个月的观察,前者经得住鸭瘟强毒10~(-8)的攻击,后者经得住10~(-3)的攻击;免疫效果高,免疫期达2个月仍保持着令人满意的免疫力,保护率达100％。含有母源抗体雏鸭,采用饮水和点滴途径免疫,前者最佳时间从1日龄开始免疫,后者从10日龄开始免疫,其安全性好,免疫效力高,免疫期达2个月,保护率达100％。用肌肉和饮水途径接种鸭瘟弱毒苗的方法进行大规模的预防接种,更为简便易行。 在试验中,还对早期免疫程序进行了探讨。     

猪肺炎支原体疫苗与猪瘟疫苗联合免疫试验

猪瘟和猪呼吸道病综合征（PRDC）给当前猪场造成重要威胁,猪瘟疫苗和猪肺炎支原体疫苗是重要的防制工具。由于两种疫苗同时注射有利于减少猪群应激并减轻劳动强度,本试验旨在探讨仔猪3周龄时同时注射猪瘟疫苗和肺炎支原体疫苗对猪瘟抗体滴度变化的影响。选择3头同期分娩母猪,将每头母猪所产12头仔猪随机平均分到A、B、C、D这4个组。4个组都在3、8周龄注射猪瘟疫苗。A组只注射猪瘟疫苗;B组和C组在1、3周龄接种猪肺炎支原体疫苗,3周龄时猪肺炎支原体疫苗与猪瘟疫苗同时注射,B组为两种疫苗分点注射,C组为混合注射;D组在2、4周龄注射猪肺炎支原体疫苗。统计分析表明,10周龄和13周龄时4个组猪瘟抗体滴度差异不显著,说明猪肺炎支原体疫苗与猪瘟疫苗同时注射并不干扰猪瘟抗体的生成。另外发现,在母源抗体水平较高的情况下,3周龄接种猪瘟疫苗会受到母源抗体的部分干扰。     

猪肺炎支原体的防疫措施

最佳免疫时间是在临床症状出现前的9星期进行。因此不管是何时首次免疫，与二免的间隔时间应为3星期，二免后需要经过2星期才能产生保护力。因此在此期间，存在支原体免疫的空白期。但主要的灭活苗厂家仍然推荐7／21日龄接种。通过很多现场血清学调查发现，保育猪的第1次接种灭活苗的最适时间是4～7周龄。因此，如果支原体肺炎在断奶结束或转群后发病，首免应该在1周龄，二免则在4周龄；如果发病时间是在13～15周龄，免疫时间应在4周龄和7周龄；如果发病时间在育肥的后期，则免疫时间应为7周龄和10周龄。     

猪细小病毒(PPV)_(S-1)A株弱毒疫苗接种豚鼠的抗体反应

三批PPVs-1A弱毒苗接种豚鼠20只,接种后一周开始产生抗体反应,第五周全部出现抗体反应。HI抗体持续时间至少10个月。弱毒苗分A、B两组接种HI阴性豚鼠共8只,接种HI阴性猪共4只。猪在免疫后一周HI全部阳性,一个月平均HI价1024;豚鼠免疫后四周全部阳性,35天平均HI价395,豚鼠与猪阳性率相符。弱毒苗在4℃保存11个月,-20℃14个月后接种豚鼠,全部产生抗体反应。     

鸡新城疫/传染性支气管炎二联油乳剂 灭活疫苗试验研究报告(Ⅱ)——疫苗制备及其免疫效果试验

根据NDV、IBV二种病毒混合毒种的最适稀释比例,将混合毒种接种9~10日龄鸡胚尿囊腔内(简称同胚培养),使接种鸡胚96h二种病毒毒价同时达到高峰,0.1ml尿囊液含:NDV≥10~8EID_(50)、IBV≥10_7EID_(50).收获同胚培养的胚毒,制备油乳剂灭活疫苗.用三批疫苗分别免疫18日龄雏鸡,免疫后4周二联疫苗的有效抗体分别为:ND血凝抑制抗体(HI)≥1:16、IB中和抗体(VNT)≥1:8,抗体持续时间可达16周;攻毒保护率分别为:ND 8/8、IB 6/8以上,获得十分理想的效果.     

不同保护剂试制的羊痘鸡胚化弱毒冻干苗及其种毒保存期试验

1.用H.G氏液、筋胶液和脱脂乳三种保护剂分别试制的羊痘鸡胚化弱毒冻干苗的近期效价均为10~(-4)/ml。 2.在8～14℃下保存,三种保护剂试制的冻干苗保存18个月时,H·G氏液组与筋胶液组的效价仍达10~(-4),而脱脂乳组则下降为10~(-3);保存至63个月时,H.G氏液组与筋胶液组均为10~(-3)。脱脂乳组为10~(-2)。在0～4℃保存至18个月,三个组的效价均达10~(-4);至63个月时,除H·G氏液组为10~(-4)以外,其他两组均为1~(-3)。在-20～-25℃下保存63个月时,三个组的效价均为10~(-4)。 3.冻干的羊痘鸡胚化弱毒及其通过绵羊反应毒的种毒,在-20～-25℃下分别保存至139个月和92个月,对绵羊的毒价基本无变化。