推广草鱼免疫注射防病技术的几点体会

1988～1990年广东省梅州市进行大面积推广应用草鱼免疫注射防病技术,3年共推广面积67144亩,注射疫苗265.13万毫升,注射草鱼1359.5万尾,草鱼平均成活率达89.5%,共增产量3055吨,增加产值1710.8万元.其中1990年推广面积达27382亩,占池塘面积的52.5%,增加产量1527.7吨,增加产值     

微囊藻毒素对小鼠肝脏的毒性研究

为研究微囊藻毒素(MC)对小鼠肝脏的影响,采用腹腔注射MC抽提物,剂量分别为对照、MC3.33μg/(kg.d)和6.67μg/(kg.d),注射MC抽取物14 d后发现,与对照组小鼠肝脏相比,注射MC抽提物的小鼠肝脏肿大,且随注射剂量的增加,小鼠肝脏的相对质量增加,肝脏的黏连程度更加明显。     

鲤脑垂体匀浆液和人绒毛膜促性腺激_省略_性腺激素及性类固醇激素含量的影响

雄鳗注射５－６次、雌鳗注射９－１０次鲤脑体匀浆液（ＣＰＥ）＋人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）能分别诱导精巢和卵巢发育成熟。在雌雄鳗鲡,注射ＣＰＥ＋ＨＣＧ可显著增加端脑、间脑、中脑和下丘脑ｍＧｎＲＨ的含量,而对后脑和延髓ｍＧｎＲＨ的影响较小;注射ＣＰＥ＋ＨＣＧ增加雄鳗后脑和延髓ｃＧｎＲＨ－Ⅱ含量,对雌鳗脑区ｃＧｎＲＨ－Ⅱ则无显著影响。雌雄鳗鲡每次注射ＣＰＥ＋ＨＣＧ后１天,血清促性腺激素（ＧｔＨ）急剧上升     

镉对鲫脏器系数的影响

研究了鲫胸腔注射与口服感染镉后脏器系数的变化。结果表明，仅有30d高剂量口染组的脾系数才有显著增加，而胸腔注射组和15d、30d口染组的头肾系数和肾系数均显著增加，但头肾系数增加不如肾系数增加明显。增生性病变表明，镉对脾、头肾尤其是肾有一定的损伤作用。     

多氯联苯(PCB1254)对异育银鲫血清和离体卵巢分泌睾酮和雌二醇的影响

采用活体注射和卵巢体外培养添加多氯联苯(PCB1254)两种方式研究了PCB1254对异育银鲫血清中和离体卵巢分泌睾酮及雌二醇的影响.注射PCB1254后,血清中睾酮浓度随作用时间延长而降低,随PCB1254浓度的增加而减小;血清中雌二醇随作用时间延长而增加,随PCB1254浓度增加而增加.体外培养时卵巢时,培养液中雌二醇含量随培养时间延长而增加,随PCB1254浓度增加而增加.结果表明PCB1254促进雌二醇分泌,抑制睾酮分泌.     

眼柄切除及注射黄体酮对中华绒螯蟹幼蟹卵巢发育的影响

采用切除单侧、双侧眼柄及注射黄体酮药物的方法研究对幼蟹卵巢发育的影响。结果表明,切除双侧眼柄可明显增加幼蟹体重、蜕壳频率,极显著提高卵巢指数、肝胰腺指数和卵巢／肝胰腺质量比,极显著增大卵母细胞直径;切除单侧眼柄可极显著增加卵巢指数和卵巢／肝胰腺质量比,极显著增大卵母细胞直径;注射黄体酮药物可极显著增大卵母细胞直径,卵巢指数、卵巢／肝胰腺质量比增加未达统计学上的显著水平。     

LHRH-A缓释剂促进雄性赤点石斑鱼性类固醇激素分泌和精巢发育与排精的研究

研究了促黄体生成素释放激素类似物(LHRHA)不同处理方式对雄性赤点石斑鱼性类固醇激素分泌和精子生成及精子排放的影响。对照组在0、7d二次注射生理盐水(50μg·kg-1BW),注射组在0、7d二次注射LHRHA(50μg·kg-1BW),埋植组在0d埋植LHRHA缓释剂(100μg·kg-1BW)。结果表明,通过埋植LHRHA缓释剂,血清睾酮(T)和11-酮基睾酮(11-KT)水平快速增加,显示血清睾酮和11-酮基睾酮水平与赤点石斑鱼精子生成和精子排放有密切关系。组织学观察表明,在21d,对照组和注射组鱼精巢充满了精子细胞、精母细胞和精原细胞,而在同一时间,LHRHA埋植组鱼精巢含有大量精子,表明精子排放仍在进行。在40d期间采集精液总量为对照组<注射组<埋植组,差异显著。当注射组在处理14d后精液量逐渐回落到对照组水平时,埋植组仍然维持较高精液量水平。各组采集的精子的活力与采集的精液量呈正相关,而精子密度没有显著差异。数据显示,LHRHA缓释剂能显著增加赤点石斑鱼的精液量及延长精子排放时间而不改变精子的质量。     

一株松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性及其灭活疫苗保护作用

为探究松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性及其灭活疫苗保护作用,本实验设计了注射感染实验、投喂感染实验和灭活疫苗保护实验,通过组织病理学观察、实时荧光定量PCR(qPCR)和酶活性检测等方法进行分析。结果显示,注射实验中鲫全身性出血、肝脏充血肿大,96 h LD50为5×10⁶ CFU/mL。投喂含不同浓度JS-1的饲料后,鲫肝脏、脾脏、肾脏出现病变,细胞坏死;血清中转氨酶呈先增加后减少的趋势,高浓度(HG)组降低趋势最明显,溶菌酶活性显著升高;鲫肝脏和脾脏中TNF-α和IFN-γ表达量均先增加后减少,且显著高于对照组。注射灭活疫苗后,血清中溶菌酶活性显著高于对照组,而碱性磷酸酶、转氨酶、超氧化物歧化酶活性显著低于对照组,过氧化氢酶活性显著升高;经灭活疫苗免疫后的血清中,特异性IgM和总IgM与对照组相比都显著增加,注射感染JS-1 10 d后鲫的存活率达83.3%。研究表明,松鼠葡萄球菌JS-1对鲫的致病性强,其灭活疫苗可为鲫提供有效的保护,为松鼠葡萄球菌疫苗的开发提供了理论基础。     

注射多巴胺对中华绒螯蟹打斗行为的影响

选同一家系规格相似、健康有活力的中华绒螯蟹新品种“光合1号”1龄雄蟹100只,分为4组,放入直径20 cm、高40 cm PE管(底部均匀钻12个直径为5 mm的孔洞)中,PE管置于120 L水槽中。用2个不透明烧杯将2只中华绒螯蟹分别倒扣于试验容器中,置于PE管两侧1 h。在中华绒螯蟹第三步足的动脉膜中分别注射20μL生理盐水(对照组),10^-8 mol、10-7 mol和10-6 mol的多巴胺液,利用闭路摄像头记录4 h内2只中华绒螯蟹打斗时长、次数、打斗分数及胜负关系等指标。打斗结束后,迅速取出中华绒螯蟹血淋巴,用ELISA酶联免疫法测定多巴胺含量。试验结果显示,对照组中华绒鳌蟹打斗时间最长,与各注射组差异显著(P<0.05);注射组中,随注射量的增加,打斗时长下降。对照组中华绒螯蟹打斗强度低于10^-8 mol组,高于其他注射组,与各注射组间差异显著(P<0.05)。注射组中,随注射多巴胺量升高,打斗强度下降,10^-8 mol组打斗强度最高,各组间差异显著(P<0.05)。对照组打斗次数与10-7 mol组差异不显著(P>0.05),与其余各组差异显著(P<0.05)。注射组中,随注射量的增加,打斗次数下降,10^-8 mol组与其余各组差异显著(P<0.05),10-7 mol组与10-6 mol组差异不显著(P>0.05)。打斗结束后,胜利方体内多巴胺含量与正常水平差异不显著(P>0.05),但显著高于失败方(P<0.05)。试验结果表明,注射多巴胺极显著影响中华绒螯蟹打斗行为(P<0.01),随多巴胺注射量的升高,中华绒螯蟹打斗行为整体下降。     

多氯联苯(PCB1254)对异育银鲫血清和离体卵巢分泌睾酮和雌二醇的影响

采用活体注射和卵巢体外培养添加多氯联苯（PCB₁₂₅₄）两种方式研究了PCB₁₂₅₄对异育银鲫血清中和离体卵巢分泌睾酮及雌二醇的影响。注射PCB₁₂₅₄后，血清中睾酮浓度随作用时间延长而降低，随PCB₁₂₅₄浓度的增加而减小；血清中雌二醇随作用时间延长而增加,随PCB₁₂₅₄浓度增加而增加。体外培养时卵巢时，培养液中雌二醇含量随培养时间延长而增加，随PCB₁₂₅₄浓度增加而增加。结果表明PCB₁₂₅₄促进雌二醇分泌，抑 制睾酮分泌。     

β-1,3-葡聚糖及其羧甲基衍生物对海湾扇贝免疫功能的影响

对海湾扇贝注射酵母β-1,3-葡聚糖及不同取代度的羧甲基葡聚糖（包括CMG1、CMG2、CMG3和CMG4,取代度分别为0．335,0．556,0．732和0．857）,分别于注射后24、48和72h测定血清蛋白含量及血清和血细胞中酚氧化酶（PO）、超氧化物歧化酶（SOD）、溶菌酶（LSZ）活力,比较β-1,3-葡聚糖及羧甲基葡聚糖对扇贝免疫功能的影响。结果显示：1）与对照组相比,葡聚糖组血清蛋白含量无显著变化,CMG2、CMG3和CMG4组注射后48h有显著提高;2）葡聚糖和CMG4可以迅速持久地增加扇贝血清PO活力,CMG的取代度越大,提高血细胞PO活力的能力越强;3）在提高扇贝血淋巴SOD活性作用中,CMG4组效果要优于其余试验组;4）CMG4组注射后24、48h,血清LSZ活力分别有极显著和显著提高,72h后所有试验组与对照组无显著差异,CMG3组注射后24h血细胞LSZ活力极显著增加,CMG4组注射后24、48和72h有显著提高。表明羧甲基化不但提高了葡聚糖的水溶性,而且影响其对扇贝的免疫增强效果,取代度为0．857的CMG4对扇贝的免疫增强效果最为显著。     

卵内注射氨基酸提高雏鸡体重

日本和美国科技人员研究了孵化卵内注射氨基酸对胚胎发育及孵出雏鸡体重的影响。在孵化7d时，用注射器向卵黄囊注射0．5ml氨基酸溶液，溶液中含有与卵内相同的18种氨基酸，注射后即用石蜡封住针孔，并将卵送回孵化器中继续孵化。试验结果表明，在孵化7d时向卵黄囊中注射氨基酸溶液对孵化率没有影响，但是，相对于孵化前蛋重相同的雏鸡体重显著提高。出现这种情况，可能是由于注射增加了卵黄中氨基酸的含量或者是提高了鸡胚对氨基酸的利用。     

外源Fe3+诱导罗氏沼虾铁蛋白mRNA的表达

探讨铁蛋白ferritin基因在罗氏沼虾中的组织表达分布及外源Fe3+对ferritin mRNA表达的影响。通过RT-PCR表明,ferritin mRNA在罗氏沼虾精巢、卵巢、肌肉、心脏、中肠腺和血淋巴中均有表达;荧光定量PCR结果证实了ferritin mRNA在中肠腺中表达量最高,其次是精巢。对罗氏沼虾进行FeCl3溶液肌肉注射后,荧光定量PCR结果表明,肌肉中ferritin mRNA表达量在注射后3 h增加了61倍,高水平的表达一直维持到8 h,随后在12 h表达量急剧地下降;卵巢中ferritin mRNA表达量在3 h有近4倍显著增加,在注射后48 h内一直维持在较高水平;心脏ferritin mRNA表达量在24 h后增加了8倍,48 h后表达量开始下降;在血淋巴、中肠腺和精巢注射前后均未发现有显著性差异(P>0.05)。以上实验结果表明,外源Fe3+可以诱导罗氏沼虾铁蛋白mRNA的表达。     

白斑综合征病毒对红螯光壳螯虾幼虾肝胰腺免疫酶活性及其超微结构的影响

利用生物化学方法和电镜技术,研究人工注射免疫多糖及WSSV对红螯光壳螯虾幼虾肝胰腺POD、LSZ、SOD、PO的活性变化及肝胰腺超微结构的影响。试验分对照组、实验组Ⅰ(注射WSSV)、实验组Ⅱ(注射免疫多糖)、实验组Ⅲ(注射免疫多糖48 h后注射WSSV)4组,结果显示,随着处理时间的增加,实验组Ⅰ与对照组相比POD、PO、LSZ活性均呈现明显降低趋势(P<0.01),而SOD活性呈现先升高后降低的趋势(P<0.01);实验组Ⅱ的螯虾4种酶活性呈现先升后降,与对照组相比酶活性增加(P<0.05);实验组Ⅲ4种酶活性均高于实验组Ⅰ(P<0.05),但与对照组相比SOD、POD、LSZ活性降低(P<0.01)。红螯光壳螯虾幼虾肝胰腺组织由肝小管组成,肝小管由基膜和上皮细胞组成。超微结构显示,对照组螯虾幼虾肝胰腺单层柱状上皮细胞的表面微绒毛排列整齐,各细胞器结构完整;实验组Ⅰ上皮细胞微绒毛受损、断裂,核膜解体,细胞核破裂,粗面内质网断裂;实验组Ⅱ上皮细胞粗面内质网核糖体增多;实验组Ⅲ与实验组Ⅰ相比,细胞核结构完整,粗面内质网肿胀,线粒体部分畸变。结果说明感染WSSV的幼虾肝胰腺形态结构受损,并进一步影响其生物学功能。人工注射免疫多糖能提高幼虾免疫相关酶活性,在一定程度上能抵抗WSSV的侵染。     

上海海洋大学学者发现促进性腺再生的新方法

<正>在研究组织可塑性再生和性逆转过程中,上海海洋大学严继舟课题组通过尝试性腺注射各种小RNA和特异基因表达产物,发现某些特定小RNA和Sox9基因表达质粒混合物能促进斑马鱼性腺再生。相关论文日前在《干细胞杂志》上发表。这一研究对于延长鱼类生殖周期和人类抗衰老研究有许多重要启示。研究人员发现,注射miRNA430a+Sox9a混合物能促进精巢精原细胞增加,注射miRNA218a+Sox9b能促进     

副溶血弧菌感染日本蟳后对几种免疫活性酶的影响

用副溶血弧菌悬液和生理盐水(对照)注射感染日本蟳,研究其血清超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、过氧化氢酶(CAT)活性的变化,并进行统计学分析。试验结果表明,注射副溶血性弧菌悬液组12、24、48 h后SOD活性均高于对照组,48 h达到最高;122、4 h CAT活性增加明显,24 h达最高;AKP活性5、12、24 h均有增加,高于对照组,24 h最高;ACP活性12 h开始上升,24 h达最高。在人工感染副溶血性弧菌48 h内,日本蟳体内的免疫因子发生明显的变化,血清中SOD、ACP、AKP、CAT活性在不同时间段均有显著升高趋势,高于对照组。     

外源性雌二醇对异育银鲫脑垂体-甲状腺轴的影响

运用SYBR Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性雌二醇(estradiol-17β,E2)对异育银鲫脑垂体-甲状腺轴的影响。实验设计时间为10周,实验组每2周注射一次0.5mg.kg-1体重的E2(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%酒精。实验期间没有投喂饲料。在实验条件下,SYBR Green I荧光定量RT-PCR分析结果显示,注射3和5次外源性E2后,促甲状腺激素β亚基mRNA的表达水平与对照组相比均未有显著变化,但随着注射次数的增加,总体呈现升高的趋势。另一方面,RIA结果显示,注射3次外源性E2后,血清中甲状腺激素T3和T4含量水平与对照组相比均显著升高(P<0.05);注射5次后,与对照群相比差异极显著(P<0.01)。以上结果提示,外源性E2影响异育银鲫的正常生理状态。     

雌性特异蛋白复合物促鱼类性腺发育及提高孵化率机制的研究

本实验系用生物化学方法从鲤鱼性腺中提取出一种雌性特异蛋白复合物,氨基酸分析发现该复合物含有全部必需氨基酸;将该蛋白复合物注射到雌性大阪鲫鱼体内,发现鱼的血清中蛋白质含量增加,同时对大阪鲫鱼肝脏分析发现核糖核酸(RNA)含量也增加。     

草鱼出血病免疫注射应提倡夏花鱼种为主

近几年来，由于“草鱼出血病灭活疫苗”广泛用于草鱼出血病的预防，对于提高草鱼成活率，增加鱼种和成鱼的产量起了积极作用。据我县近四年来的实践证明，凡是进行了免疫注射的草鱼种的成活率都在80％以上，高者达92．4％，其中又尤以注射夏花草鱼种的效果更为明显。     

草鱼体内溶血对肝脏氧化损伤的机制

以草鱼为研究对象,系统研究了溶血对肝脏的损伤机制,以揭示血红蛋白对机体的损伤作用。首先在体内注射血红蛋白,通过苏木精-伊红染色(H.E)发现注射血红蛋白组的肝脏组织中坏死细胞明显增多,普鲁士蓝染色揭示肝脏中存在大量的铁沉积,进一步的实时定量PCR (qRT-PCR)检测结果显示,注射的血红蛋白激活了铁代谢相关基因的表达。为进一步探究体内出血对肝脏的影响,实验通过体内注射苯肼模拟体内出血,H.E和普鲁士蓝染色结果表明,大量的溶血导致肝脏细胞坏死和铁的沉积增加,通过检测肝脏中血红蛋白和铁含量发现,苯肼组中,肝脏组织血红蛋白和铁含量随着时间延长而显著增加,而铁含量的增加同时激活了肝脏组织中铁代谢相关基因的表达。其次,实验检测了注射苯肼后肝脏组织中炎症因子的表达情况,qRT-PCR结果显示,高剂量的血红蛋白激活了多种细胞因子的基因表达,如促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6,抑炎因子IL-10以及趋化因子IL-4和IL-8等。为进一步探究高氧化活性的血红蛋白对肝脏组织的氧化损伤作用,实验检测了肝脏组织中丙二醛(MDA)、脂质过氧化物(LPO)以及β-半乳糖苷酶的含量,检测结果表明,鱼体内的出血显著增加了肝脏氧化损伤作用,同时,qRT-PCR和酶活性检测结果揭示,血红蛋白的氧化损伤作用促进了肝脏组织细胞凋亡的发生。最后,实验检测了肝脏组织中抗氧化酶的表达情况,结果显示,体内的出血显著激活了肝脏组织中的抗氧化系统。研究表明,鱼体内大量出血释放的高氧化活性的血红蛋白显著激活了肝脏组织炎症和氧化损伤的发生,促进了肝脏组织中的细胞凋亡,同时也激活了机体内的抗氧化系统。