美发网菌子实体和原质团中甾醇类物质含量测定方法研究

建立利用高效液相色谱测定美发网菌子实体和原质团中麦角甾醇和豆甾醇含量的方法。麦角甾醇含量测定色谱条件:岛津Inerlsil ODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇为流动相;检测波长为281 nm;流速为1 mL·min~(-1);柱温为28℃;进样量为10μL。豆甾醇含量测定色谱条件:汉邦ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-水(96:4)为流动相;检测波长为204 nm;流速为0.8 mL·min~(-1);柱温为35℃;进样量为10μL。麦角甾醇在进样量0.2004μg~0.8016μg范围内与吸收峰面积呈良好线性关系,回归方程y=1E+06x-9625.3,r=0.9999。豆甾醇在进样量0.0408μg~0.3208μg范围内与吸收峰面积呈良好线性关系,回归方程y=4E+06x-37149,r=0.9995。应用高效液相色谱法建立的测定方法可以快速准确地测定美发网菌子实体、原质团中麦角甾醇和豆甾醇的含量,可作为美发网菌质量控制方法。     

HPLC双波长法测定小柄马勃子实体、液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮含量

建立HPLC双波长法同时测定小柄马勃(Lycoperdon pedicellatus)子实体与液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的含量,并比较2种不同药用部位中麦角甾醇和麦角甾酮的含量差异。采用岛津InertsilODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱,流动相为甲醇,流速为0.8 mL·min~(-1),检测波长分别为282 nm、 349 nm,柱温为30℃。结果表明,子实体中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.02μg~0.20μg (r=1)、 6.54 ng~65.40 ng(r=1)范围内线性关系良好。液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.305μg~3.05μg (r=1)、6.54 ng~65.40 ng (r=1)范围内线性关系良好。因此所建立的双波长测定法准确可靠、重复性良好,可用于小柄马勃及其液体发酵菌丝中麦角甾醇、麦角甾酮化学成分的含量测定,为控制其质量提供参考依据。     

TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的体系优化

采用薄层层析法(TLC),展开剂为氯仿-甲醇-氨水=8∶2∶0.1;同时采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Ultra IITMC18(5μm×250mm×4.6mm)、流动相为0.01mol/L磷酸盐缓冲液-甲醇(45∶55)、检测波长为216nm、流速为1.0mL/min、柱温为30℃、进样量为10μL;建立TLC和HPLC同时分离测定苦豆子生物碱体系的优化方法。结果表明:槐定碱和苦参碱在200~900μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,R2分别为0.9994和0.9996。平均回收率(n=9)分别为99.47%和99.82%;试验表明可通过TLC和HPLC法同时测定苦豆子总碱中槐定碱和苦参碱的含量,并可用该方法进行苦豆子药材及含苦豆子药用成分的质量控制。     

HPLC法测定柳蘑麦角甾醇含量

目的：建立柳蘑中抗菌成分麦角甾醇含量的测定方法，为柳蘑的质量控制提供依据。方法：运用高效液相色谱法(HPLC),DIKMA C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)，流动相为100%甲醇，流速1.0 mL/min，柱温20℃，进样体积10μL，检测波长为282 nm。结果：麦角甾醇在质量浓度0.0 225～1.1 227 mg/mL线性关系良好(R²=0.9 998)，平均回收率为100.48%,RSD为1.38%。结论：该方法操作简便，测定结果准确，重复性好，稳定可靠，可作为柳蘑中抗菌成分麦角甾醇含量的测定方法。     

反相高效液相色谱法测定瓦尼木层孔菌中柚皮素的含量

采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定瓦尼木层孔菌(Phellinus vaninii)中柚皮素含量。瓦尼木层孔菌醇提物水解后采用RP-HPLC对柚皮素的含量进行测定,色谱条件:Hypersil ODS(4.6mm×100mm,3μm)色谱柱,流动相为1%冰醋酸溶液-甲醇(62∶38),柱温为40℃,流速为0.6mL/min,检测波长为288nm。标准曲线为A=4.18×106 X+40109(r=0.9998,n=5),柚皮素进样量在0.0202～2.020μg间线性关系良好,相对标准偏差(RSD)为1.56%(n=5),回收率为97.8%,重现性实验RSD为1.76%。该法适于瓦尼木层孔菌醇提物中柚皮素的含量测定。     

HPLC法测定松杉灵芝发酵产物中甘露醇和麦角甾醇

目的:建立松杉灵芝发酵产物中甘露醇和麦角甾醇的测定方法。方法:采用HPLC法,甘露醇的色谱柱为SUGAR SC1011柱(300 mm×8 mm,6μm),超纯水作流动相,流速0.5 mL/min,柱温70℃,示差折光器检测。麦角甾醇的色谱条件为汉邦ODS-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇作流动相,流速1.0 m L/min,检测波长282 nm,柱温30℃。结果:甘露醇在6.26~18.78μg内具有良好的线性关系,回归方程为:Y=16708X-2601,r=0.9999,平均加样回收率为98.89%,RSD值为1.67%。麦角甾醇在0.2096~1.4672μg内具有良好的线性关系,回归方程为:Y=1.2E+6X-37700,r=1,平均加样回收率为98.56%,RSD值为0.97%。结论:研究的方法具有较高的专属性、准确性、重现性和可行性,可作为松杉灵芝菌丝体中甘露醇和麦角甾醇含量质量控制的定量方法。     

高效液相色谱法测定苹果、青椒等水果蔬菜中绿原酸的含量

采用高效液相色谱法测定果蔬中绿原酸含量,色谱柱为HYPERS IL-C18(5μm,250mm×416mm),以乙腈(A)和0.5%磷酸溶液(B)进行洗脱,流速为1.0mL/min;进样量为20μL;检测波长为330nm。结果表明,绿原酸在40~200μg/mL范围内线性关系良好,r=0.9997。平均回收率为99.52%,RSD小于2.0%。采用高效液相色谱法测定果蔬中绿原酸含量,方法简便、准确,可以用于绿原酸的检测。     

黄花忍冬花中绿原酸的提取及含量的测定

采用索氏提取法提取黄花忍冬花中绿原酸并用HPLC法测定其中的含量.SHI-MADZUC18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.5%磷酸溶液为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为327 nm.结果表明:绿原酸在0.232～3.48μg呈现良好的线性关系,黄花忍冬花中绿原酸含量3.5%(RSD=0.141%,n=5),平均回收率为100.105%,RSD=1.05%.该方法经济、简便、快速、准确、可靠.     

高效液相色谱法测定油茶肉质果、肉质叶的维生素C

用高效液相色谱法测定油茶肉质果、肉质叶维生素C的含量.采用YWG-C18(10μm,4.6mm×250mm i.d.)色谱柱,以0.02 M醋酸钠缓冲液-甲醇为流动相,在254 nm波长下检测.回收率为:94.8%～101.2%.相对标准偏差小于2%.     

高效液相色谱法测定菠萝果实维生素C含量

本研究用高效液相色谱法测定菠萝果实的维生素C含量。系统采用Venusil XBP-C18柱(4.6×250 mm,5μm),柱温35℃,以0.2%偏磷酸水溶液作流动相,流速1 m l.m in-1,检测波长240 nm,维生素C浓度在0.1~1.0 mg.m l-1范围内有良好的线性关系。该方法回收率99.89%,标准偏差0.91,变异系数2.08%,操作简便、灵敏、可靠,适用于菠萝维生素C含量的测定。     

北五加皮不同时间水提物中绿原酸含量的变化研究

利用HPLC法研究了北五加皮不同时间水提物中绿原酸含量的变化规律。采用色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.4%磷酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱[0～8min 24%B;8～12min 50%B],检测波长278nm,流速为1.0mL/min,柱温为25℃。结果表明:绿原酸的最佳提取时间为2h,该方法简单快速、可行,含量测定准确。     

Lovastatin-induced G1 phase synchronization in human endometrial cancer JEC cells

AIM: To investigate the method of inducing G₁ phase synchronization in human endometrial cancer JEC Cells by lovastatin and the cell cycle progress of JEC cells after desynchronization. METHODS: The doubling time of JEC cells was detected by Cell Counting Kit-8 (CCK-8) assay. To determine the best lovastatin concentrations for G₁ synchronization, JEC cells were treated with lovastatin at concentrations of 10, 20, 30 and 40 μmol/L for 1× doubling time, and the cell cycle was detected using flow cytometry (FCM). To determine the best period of lovastatin treatment to achieve G₁ synchronization, JEC cells were treated with lovastatin at the best concentration for 0.5× to 2× doubling time, and the cell cycle was detected every 4 h using FCM. Furthermore, the cell cycle progress of JEC cells after desynchronization was also observed. RESULTS: The doubling time of JEC cells was almost 24 h. Treatment with lovastatin at the concentration of 20 μmol/L for 24 h achieved maximum G₁ arrest in JEC cells. Minimum G₁ phase and maximum S phase were observed after desynchronization for 16 h. CONCLUSION: Maximum G₁ synchronization of JEC cells is induced by lovastatin at the concentration of 20 μmol/L for 24 h. The JEC cells show minimum G₁ phase and maximum S phase after desynchronization for 16 h.     

草莓和蓝莓果实花青素提取及定量方法的比较

 本研究旨在比较果实花青素提取液的提取效果以及花青素分析方法的准确性。用丙酮-水-甲酸（A）、乙腈-乙酸（B）、乙醇-水-乙酸（C）、甲醇-水-乙酸（D）以及含有盐酸的甲醇（E） 等5种提取液分别提取了草莓和蓝莓果实中的花青素,用比色法和液相色谱法分别测定了花青素的含量。试验结果表明：由于提取液中有机溶剂和酸种类的不同,提取效果差异甚大。提取草莓花青素时,以D的提取效果最好,其次是E、C、A,B的提取量最低,还不到D的1/3。提取蓝莓花青素得到的结果与草莓相似。用比色法分析,D、E、C提取液提取的草莓和蓝莓果实的花青素含量明显低于液相色谱分析的结果, 但B提取液比液相色谱结果高2倍以上,A提取液提取蓝莓时比色法与液相色谱法的结果相近,而提取草莓时比色法比液相色谱结果高出约50%。建议花青素的定量方法应尽量使用液相色谱法,对同一种果实,尤其是以低沸点醇类作提取液时可以用比色法。     

早蜜梨果实生长发育期间内源激素含量变化的研究

采用高效液相色谱(HPLC)技术,测定了早蜜梨果实生长发育期间内源生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素(ZT)和脱落酸(ABA)含量及其比值的变化,并分析了各激素与果实发育的关系.结果表明:果肉和种子中IAA含量分别在花后50 d和20 d出现高峰;GA3含量分别在花后20 d和60 d达到峰值;ZT含量的高峰则在花后40 d,而ABA含量分别在花后80 d和90 d最高,随后均呈逐渐下降.IAA/ABA、GA3/ABA和ZT/ABA比值对果实的细胞分裂与膨大起着重要调节作用.     

利用HPLC法对香蕉根中四种内源激素测定方法的优化

研究了高效液相色谱法测定香蕉根中4种内源激素:赤霉素(GA3)、3-吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)和玉米素(ZT)的最佳条件。采用Agilent ZORBAX SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)进行分离测定。结果表明:GA3、IAA、ABA测定的最佳条件是甲醇∶乙腈∶磷酸缓冲液(pH 3.5)为15∶20∶65为流动相,检测波长为210nm。ZT测定最佳条件为:甲醇∶乙腈∶磷酸缓冲液(pH 3.5)为15∶15∶70为流动相,波长265nm。4种激素的进样量为20μL,流速为1mL/min,柱温为35℃。选用外标法进行了定量测定。试验结果表明其回收率高,是一种快速有效的测定方法。     

不同西兰花品种中硫代葡萄糖苷的组分与含量分析

采用 HPLC 法测定分析了29个西兰花品种的硫代葡萄糖苷组分与含量,结果检测到8种硫代葡萄糖苷,包括4种脂肪族硫苷：3-甲基硫氧烯丙基硫苷、2-羟基-3-丁烯基硫苷、4-甲基硫氧丁基硫苷和3-丁烯基硫苷;4种吲哚族硫苷：4-羟基吲哚基-3-甲基硫苷、3-甲基吲哚基硫苷、4-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷和1-甲氧基吲哚基-3-甲基硫苷。总硫苷含量平均为11.27μmol/g,RAA、GBC 和 NEO 是西兰花三种主要的硫苷成分,分别占总硫苷含量的34.78%、25.02%和23.25%。不同西兰花品种的总硫苷含量变异范围5.60～17.04μmol/g,存在较大差异。     

迎红杜鹃的花色素组成及花色在开花过程中的变化

分析了迎红杜鹃（Rhododendron mucronulatum Turcz.）的花色素组成,调查了其在开花过程中花色、花色素组成和含量的变化。采用英国皇家园艺学会比色卡和分光色差计测量了不同开花阶段的花色。结果表明,开花过程中花色的明度增加,彩度变小,由红紫（70B）变为淡紫红色（84B）。用高效液相色谱—光电二极管阵列检测技术（HPLC - PAD）和高效液相色谱—电喷雾离子化—质谱联用技术（HPLC - ESI - MS）分析花瓣中花青苷和黄酮醇的组成及含量。在520 nm和350 nm波长下,共检测到15种化合物：5种花青苷、8种黄酮醇和2种芳香酸,推定出了其中10种化合物。花青苷：锦葵素 3-阿拉伯糖苷-5-葡萄糖苷;黄酮醇：杨梅黄素3-半乳糖苷和杨梅黄素3-鼠李糖苷;槲皮素3-半乳糖苷、槲皮素3-葡萄糖苷和两种槲皮素-鼠李糖苷以及山奈酚3-鼠李糖苷;芳香酸：绿原酸及其异构体。未检测到酰基化色素及5-O-甲基化黄酮醇。在6个开花阶段中,虽然花色变化明显,但花色素种类不变,其含量在各阶段差异极显著。从小蕾期到初开期,总花青苷含量（TA）和总黄酮醇含量（TF）迅速减少,花开放后变化平稳。基于花色素组成信息,探讨了耐寒杜鹃的花色育种策略。     

西瓜番茄红素测定方法的研究

西瓜果实中番茄红素含量很高,对人体保健和疾病的预防有着重要的意义。以同基因型不同倍性的西瓜果实为材料,分别用HPLC(高效液相色谱法)和分光光度法测定其中番茄红素的含量并进行比较,确定简便准确测定西瓜番茄红素的方法。结果认为:HPLC法用甲醇-乙腈-二氯甲烷(20∶75∶5)为流动相,502nm为检测波长能较好的对西瓜样品中番茄红素做定性定量分析;分光光度法测得的番茄红素含量平均是HPLC法的1.45倍,2种方法结果基本一致,均可对不同品种间番茄红素含量高低进行比较;另外试验结果显示多倍体西瓜番茄红素的含量要高于二倍体。     

Determination of immunochemically nonreactive urinary albumin by HPLC method and its significance of diagnose on children diabetic nephropathy

AIM: To detect the immunochemically nonreactive urinary albumin and its significance of diagnose on diabetic nephropathy by high performance liquid chromatography (HPLC).METHODS: Urine samples of 58 diabetic children were collected. Urinary albumin was measured by HPLC and by immunoassay respectively.RESULTS: The retention times of albumin of standard and urine samples were 14.3 min. The content of albumin by HPLC and by immunoassay were 9.6-195.1 mg/L and 0-158.6 mg/L, respectively.The level of urinary albumin was higher by HPLC detection than that by immunoassay (P<0.05) in the same sample. The microalbuminuria rates were 70.7% detected by HPLC and 37.9% by immunoassay.CONCLUSION: Total urinary albumin can be measured by HPLC. Microalbuminuria in diabetic children can be observed earlier by HPLC.     

苹果树皮中12种酚类化合物的HPLC测定方法

【目的】为了建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定苹果树皮中没食子酸、儿茶酚、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、表儿茶素、香豆酸、阿魏酸、芦丁、根皮苷、槲皮素、根皮素12种酚类化合物的方法,【方法】选用Eclipse XDB C18色谱柱(150 mm×4.6 mm i.d,5μm),以甲醇和1%乙酸溶液作为流动相进行梯度洗脱,利用VWD检测器,在各种酚类物质的最优吸收波长下进行检测,【结果】得到12种酚类化合物的线性回归方程,相关系数均在0.999以上,检出限(3RSN)分别为0.02、0.02、0.03、0.01、0.02、0.03、0.01、0.01、0.03、0.03、0.05和0.01 mg.L-1。色谱测定方法和包含样品处理方法的加标回收率分别在56.54%～98.83%和90.95%～100.90%。【结论】整个提取和分析测定流程简便、快速、准确,适合苹果树皮中酚类化合物的分析测定。