猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株自然感染病例的病理分析

为探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)变异毒株的致病特点,为其发病机制研究提供重要资料。对临床感染病例的肺脏、脾、肾、淋巴结等组织进行了显微和超微病理结构变化的观察。PRRSV变异毒株的病理损伤以间质性肺炎和全身性急性淋巴结炎为特征,伴有肝、脾、肾、心脏、胃和肠等器官的变性坏死;肺泡巨噬细胞、淋巴结及脾脏中的淋巴细胞和浆细胞均被不同程度的感染,并含有大量病毒包涵体。研究表明,PRRSV变异毒株的组织嗜性与中国典型毒株ch\|1a相比已有较大的改变,其感染会引起全身性免疫抑制。     

猪繁殖与呼吸综合征研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是1987年发现的一种猪的接触性传染病。目前还没有有效的疫苗和治疗措施。2006年夏季以来,我国部分地区陆续发生猪高致病性PRRS疫情,其死亡率高并呈多发态势,为进一步了解该病,本文综述了PRRS病源分子生物学及其防制。     

猪繁殖与呼吸综合征研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是1987年发现的一种猪的接触性传染病。目前还没有有效的疫苗和治疗措施。2006年夏季以来,我国部分地区陆续发生猪高致病性PRRS疫情,其死亡率高并呈多发态势,为进一步了解该病,本文综述了PRRS病源分子生物学及其防制。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒GXA毒株人工感染仔猪的病理学研究

[目的]探讨PRRSV-GXA毒株对断奶仔猪的致病性。[方法]将12头PRRSV/PCV2抗体和抗原阴性的健康仔猪随机分为感染组（9头）和对照组（3头）,感染组通过口服和肌肉注射方式接种PRRSV-GXA株细胞毒（4ml/头）,对照组接种无病毒的细胞培养液（4ml/头）。感染后第11、14和21天分别剖杀感染组3头和对照组1头,根据临床症状、病理学变化、特异性抗体水平以及病毒核酸等判断其致病性。[结果]仔猪感染PRRSV后第6～10天体温稍微升高,随后逐渐恢复至正常。早期出现短暂的精神沉郁,轻度厌食但没有出现典型临床症状。剖检的病理变化仅见于感染后第21天,有2头感染仔猪肺膈叶前缘出现小的局灶性间质性肺炎,镜检肺泡壁间质增宽,有多量单核细胞和淋巴细胞浸润。在感染后第9天检测到PRRSV特异性抗体,并随着时间呈上升趋势,感染后第21天达到较高值。在4头感染仔猪的肺脏及肺门淋巴结检测到病毒核酸,其中1头仔猪扁桃体也检测到病毒核酸。[结论]PRRSV-GXA毒株对仔猪的毒力较弱,但能刺激机体产生较高水平特异性抗体。     

抗体检测对猪繁殖与呼吸综合征预警的试验研究

猪繁殖与呼吸综合征是当前危害养猪业最主要的疾病之一,目前用ELISA方法定期检测其抗体已被猪场所普遍接受。为探讨抗体水平及高抗比例在该病预警中的意义,试验回溯了猪繁殖与呼吸综合征发病场在发病前抗体水平情况,建立预警指标,发现抗体水平尤其低胎次母猪抗体水平提升,高抗比例显著增加至20%以上可以作为一个预警阈值;将其用于其他猪场猪繁殖与呼吸综合征的预警,具有较高的符合度。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展

从遗传变异、检测以及宿主免疫3个方面,对近年来在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)方面的研究进行简要综述。     

免疫胶体金技术检测猪繁殖与呼吸综合征

采用斑点胶体金技术建立一种快速、简便、准确检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的方法。运用RT-PCR技术克隆出PRRSV核衣壳蛋白基因,经原核表达与蛋白纯化获得重组的核衣壳蛋白,作为诊断抗原。采用柠檬酸三钠还原法制备了直径为18~20 nm的胶体金,对兔抗猪IgG抗体进行标记后,进一步组装成斑点胶体金免疫检测试剂。经猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)阴性和阳性血清检测,斑点胶体金免疫检测试剂仅与阳性血清发生反应,特异性强,反应30~40 min内就可以在硝酸纤维膜上出现清晰的红色斑点,其灵敏度和Dot-ELISA法相仿。该检测方法可广泛应用于PRRS的临床诊断和流行病学调查,也可作为研究兽医快速诊断的技术基础。     

综合防治猪繁殖与呼吸综合征技术

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)又称蓝耳病,是新近发现的由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种急性、高度传染性的疫病。其临床特征是妊娠母猪呈现出发热、流产、死亡、木乃伊胎,仔猪表现出异常的呼吸症状和神经症状及高死亡率。本病还有另一个特点是本病病毒主要侵害巨噬细胞,损害机体免疫机能,致使病猪极易继发各种疾病。目前,已成为猪场的主要疫病之一。文章对该病进行简要介绍,并提出防治措施。     

间接血凝试验检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体

以猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）病毒致敏猪红细胞作诊断液,用间接血凝试验（IHA）检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体。检测了可疑猪场80份血清样本,PRRS阳性32份,阳性率40%,与ELISA试验比较符合率98%。用此方法检测PRRS疫苗免疫猪血清,发现其抗体水平在初免后15天升高,二免后15天达最高峰,二免后45天抗体水平消失。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒对猪免疫力的影响研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)对全世界养猪业而言是一种致命的病毒性疾病。它是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种严重的临床疾病,并且保持终身隐性感染的能力。PRRS也使我国养猪业遭受了巨大的损失,近年来尤其是高致病蓝耳病毒的出现,已严重影响我国生猪养殖业的健康发展。对猪繁殖与呼吸综合征的免疫作用机制及防制措施进行了综述,旨在为其今后的防制提供新的思路与方案。     

猪繁殖——呼吸综合症

本文对猪繁殖——呼吸综合症的病原、致病机理、临床症状、病理变化、流行病学、诊断和综合防治进行了综述。     

猪繁殖与呼吸综合征诊断技术研究进展(综述)

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是能够引起母猪的繁殖障碍和新生仔猪呼吸症状的一种严重危害养猪业的传染病。20世纪90年代以来，此病已几乎传播到世界各养猪国家，造成世界养猪业严重经济损失。此病在中国的流行和分布也日益广泛，危害也日益严重，故受到国内外学者的高度重视，对本病的研究也正在逐渐深入。特别是诊断和检测技术的研究正日益受到关注，并建立起了一些新的方法和技术，如RT-PCR、阻断ELISA、原位杂交(ISH)等，同时，一些传统的诊断检测技术也得到了改进。这都为PRRSV的诊断和检测提供了新的思路和方法。     

HP-PRRS临床病理学分析与比较研究

目的、方法:为探讨猪HP-PRHS致病特点、发病机制和临床病理学表现,应用病理组织学方法对HP-PRRSV病猪进行系统病理观察,同时比较分析HP-PRHS和猪瘟、圆环病毒、伪狂犬、传染性胸膜肺炎及附红细胞体分别混染后,以及经典PRRS与HP-PRRS的病理学表现的差异.结果:HP-PRHS病猪表现高热,皮肤发红,眼睑水肿,肺脏出血、淤血、肉样实变,淋巴结出血,淋巴滤泡单核细胞浸润;与猪瘟或圆环病毒混染,病猪全身组织器官多发性出血.与伪狂犬病毒混染,病猪痉挛,呕吐,肝脏有白色坏死灶.神经胶质细胞内镜检可见嗜酸性包涵体;与传染性胸膜肺炎病原体混染,病猪气管充满泡沫状血色渗出物,肺脏表面有纤维素性物质;与附红细胞体混染,仔猪多发病,可视黏膜苍白,血液稀薄、皮下脂肪黄染;经典PRRS虽然有传染性,但病理变化不明显.结论:HP-PRHSV具有组织泛嗜性,引起多组织出血,导致多器官功能衰竭,故HP-PRRS临床表现明显;HP-PRRS混染其他病原后,临床症状和病理损伤较单纯PRRS严重,且死亡率升高;在临床病理学上,HP-PRRS与经典PRRS可以鉴别诊断.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗弱毒株的克隆与鉴定

自美国和荷兰引进的猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）疫苗弱毒株,经MARC-145细胞培养复壮,采取有限稀释法对疫苗株进行纯化克隆,克隆毒株在MARC-145细胞上培养72h出现典型的细胞病变（CPE）。取接种病毒后36h的MARC-145细胞作超薄切片电镜观察,于感染细胞浆内及空泡化内质网内均有散上的病毒培养物初步纯化作用抗原,检测了PRRS可疑猪场的血清80份,其中阳性34份,阳性率为42.5%,并探讨了疫苗毒株作为抗原的可能性。     

4株高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离和鉴定

为了进一步分析本次猪暴发高发病率和高死亡率疫情的病因,本研究利用病毒分离与鉴定方法,将4份RT-PCR鉴定为单纯PRRSV阳性的组织病料,接种Marc-145细胞,经RT-PCR、IFA和电镜鉴定成功的分离到4株PRRSV,TCID50为10-6.5/0.1ml,命名为BJSY-1、BJPG、BJSD和BJBLZ株.本研究建立的方法为PRRS的诊断及防制提供了技术保障.     

猪繁殖和呼吸综合征病毒分离与鉴定

在对国内某地区７个患病猪群流行病学调查的基础上，用Ｍａｒｃ－１４５细胞培养从４个猪群流产胎儿分离到３株导致细胞病变的病毒－Ｊ１，Ｊ２和Ｊ３株。它们对氯仿和热，甲醛，酸，碱均敏感。病毒粒子呈球状，直径３０－８０ｎｍ，负染后病毒粒子大小８０－１００ｎｍ，在Ｍａｒｃ－１４５细胞质内增殖，５－溴－２’－脱氧尿核苷对其元抑制作用。结合血清学试验，鉴定３个毒株均为猪繁殖和呼吸综合征病毒，可能为美洲型ＰＲＲＳＶ     

猪繁殖呼吸综合征病毒(PRRSV)SA毒株的分离与鉴定

从仔猪内脏分离到一株猪繁殖呼吸综合征病毒（PRRSV）毒株，该毒株能在Marc－145细胞上增殖致细胞病变，该病变能被PRRSV美洲型阳性血清所抑制，不被乙脑病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒阳性血清所抑制，经美洲型PRRSV荧光抗体染色呈阳性反应，电镜观察到直径55nm左右的病毒粒子，属RNA病毒，接种阴性仔猪未见临床症状异常，但血清学阳性。命名该分离毒为PRRSV－SA毒株。     

2006年-2008年河南省PRRSV分子流行病学调查

根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株的NSP2,ORF5-7基因的核苷酸序列,设计合成5对特异性引物,用RT-PCR方法扩增出10株PRRSV河南地方株的NSP2和ORF5-7片段,将扩增片段克隆到pMD-18T载体并进行测序。应用DNAStar序列分析软件对分离株的NSP2和ORF5-7基因和其推导的氨基酸序列与不同来源的PRRS毒株进行了同源性比较,结果表明PRRSV河南分离株的NSP2和ORF5-7基因与不同来源美洲型毒株之间的同源性分别为89.1%-98.1%和81.4%-96.1%,而与欧洲型毒株之间的同源性仅为46.7%-61.7%和44.7%-45.9%;同时将PRRSV河南分离株NSP2和ORF5-7基因的推导氨基酸序列与其他美洲型PRRSV毒株进行变异分析比较,证实了PRRSV河南分离株NSP2和ORF5-7基因发生了变异。     

PRRS病毒核衣壳蛋白基因的原核表达

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核酸序列设计1对引物，用RT—PCR扩增出美洲型PRRSV的核衣完蛋白(N)基因，克隆到pGEM—Teasy载体中，再亚克隆到表达载体pGEX—6p—1谷既甘肽—S—转移酶(GST)基因的下游。重组质粒转化大肠杆菌BL21，用IPTG于37℃条件下诱导，经SDS—PAGE和Western blotting分析，GST—N融合蛋白的分子质量约为39．5ku，另3种不同大小的GST—N降解产物，分子质量分别为33．0、30．5和27．5ku，其中39．5和30．5ku的降解产物分别占菌体蛋白的30．9％和15．3％。结果表明：PRRSV核衣壳蛋白基因在大肠杆菌中以GST融合蛋白的形式得到高效表达，且表达产物能与PRRSV抗体阳性的猪血清发生特异性反应，可作为PRRS诊断抗原。