山东省山羊猝死症病因病性研究

采用流行病学调查、毒物检测及微生物学检验等方法，对山羊猝死症的病因病性进行了系统研究。结果证明，本病是由病原菌所致。致病菌为革兰氏阳性杆菌和革兰氏阴性杆菌，经过对这两种菌进行了生化反应等生物学特性研究后，分别鉴定为凝结芽胞杆菌和肺炎克雷伯氏杆菌亚种。实验证明，这两种菌通过协同作用而使山羊发生猝死症。     

由克雷伯氏菌肺炎亚种及凝结芽胞杆菌混合感染引起山羊猝死症

家畜猝死症是近年来我国新发生的病因不明的疾病，在山东省尤以山羊发病较多，损失很大，经过两年多对“山羊摔死症”病因病性的研究，结果表明克雷们氏菌肺炎亚种及凝结芽胞杆菌混合感染能引起“山羊猝死症”。现报告如下：1流行病学特点：1992年冬季，菏泽地区某些县首先发生了“山羊猝死症”，1994年元月份以来，疫情逐渐变扩到济宁、枣庄、济南、德州、滨州、东营、淄博、临沂、日照等十七个地市，造成大批山羊死亡，本病一年四季均可发生，冬春季节发病较严重，天气转暧后，发病率逐渐降低。本病的发生不形成烈性传染，同群羊有的发病…     

山羊4种腹泻病原菌多重PCR检测方法的建立

为建立检测引起山羊腹泻的4种主要病原菌的多重PCR方法,本研究针对产肠毒素大肠杆菌(ETEC)K99基因,沙门菌invA基因,志贺氏菌侵袭性质粒H(ipaH)基因和奇异变形杆菌ureR基因设计4对特异性引物,通过对反应条件优化,建立快速检测引起山羊腹泻的4种主要病原菌的多重PCR方法,并应用该方法检测山羊腹泻样品。结果显示该多重PCR方法对巴氏杆菌等其它6种细菌无扩增;其敏感性分别为ETEC103cfu/mL、沙门菌102 cfu/mL、奇异变形杆菌102 cfu/mL、志贺氏菌103 cfu/mL;经检测该方法稳定性也好。应用该多重PCR方法对21份山羊临床腹泻样品的检测结果与细菌分离鉴定结果一致,无漏检。本研究建立的多重PCR方法可实现从山羊粪便样品中同时检测4种腹泻病原菌,对山羊腹泻病原菌的快速检测提供了技术支持。     

一株致梅花鹿猝死症A型产气荚膜梭菌的分离与基因分型研究

对苏州某梅花鹿场 1头猝死梅花鹿进行了病原的分离与鉴定 ,在死亡鹿体内分离到 1株G+ 、无芽孢、有荚膜、粗大正直的杆菌。通过肠内容物毒素中和试验和多重PCR方法证明所分离到的细菌为A型产气荚膜梭菌。结合流行病学、临床症状和病理变化 ,证实A型产气荚膜梭菌为引起此例梅花鹿猝死症的病原     

山羊痘继发细菌感染病例诊断

采用细菌学方法与分子生物学技术对疑似山羊痘猝死山羊进行病原学检测。结果:以GPV ITR基因特异性引物从皮肤、肠黏膜、蹄部痘疹中均扩增到289 bp目的条带,并从肝脏中分离到1株革兰氏阳性杆菌,经生化鉴定为产气荚膜梭菌,其表现较强耐药性。由试验结果初步判断,该病例为山羊痘病毒(GPV)继发产气荚膜梭菌感染所致。猝死山羊病因的确定性诊断,将对山羊养殖场切断病原传播,预防健康山羊发病提供技术支持。     

山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌双重 PCR 检测方法的建立

为建立一种能够同时检测山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌的双重 PCR 方法，本研究采用2对特异性引物，对退火温度和引物浓度比进行了优化，成功建立了一种能同时检测上述两种病原的双重 PCR 方法。结果显示，该方法具有很好的特异性，仅对山羊支原体山羊肺炎亚种和多杀性巴氏杆菌有扩增，而对其他常见的羊呼吸道病原无扩增；该方法对两种病原的检测限分别为32 pg 和50 pg，与单独 PCR相同；26份临床样品中山羊支原体山羊肺炎亚种的检出率为23．1％，多杀性巴氏杆菌的检出率为26．9％。所建立的双重 PCR 具有特异性好、灵敏度高的特点，为临床上这两种病原感染的快速诊断和流行病学调查等提供了更为有用的手段。     

山东省山羊“猝死症”病理学观察

山东省山羊“猝死症”病理学观察匡宝晓牛钟相朱瑞良叶红丽徐淑玉袁秀林王选方（山东农业大学动科院）（山东省畜牧兽医总站）自１９９２年冬季以来，在山东省的菏泽地区首先发生了山羊“猝死症”。该病发病急，死亡快，并有蔓延趋势，至今，在全省１７个地市均发生了该病...     

山羊淋巴结炎病原菌的分离鉴定及多重PCR检测方法的建立

旨在对重庆地区山羊体表型淋巴结炎病原菌进行分离鉴定,并建立相应检测方法。无菌采集山羊患病部位脓液,进行病原菌分离鉴定,依据菌株16SRNA基因序列构建系统进化发育树,同时设计特异性引物,建立PCR检测方法。结果表明,从病料中主要分离到3种病原菌,分别为伪结核棒状杆菌、化脓隐秘杆菌和金黄色葡萄球菌;依据伪结核棒状杆菌磷脂酶D、化脓隐秘杆菌16SRNA和金黄色葡萄球菌nuc保守核苷酸序列设计引物,建立的多重PCR检测方法,可以从3种菌株混合基因组中扩增出大小分别为507、1 378和278bp的对应菌株特异性序列,该方法最低检出浓度为103cfu·mL-1;对采集的80份临床样品进行多重PCR检测,发现伪结核棒状杆菌与金黄色葡萄球菌混合感染检出率为12.5%,伪结核棒状杆菌与化脓隐秘杆菌混合感染检出率为3.75%,三种菌混合感染检出率为7.5%。成功分离到山羊淋巴结炎的3种主要病原菌,并建立多重PCR检测方法,为该病的防控及治病机制研究奠定了基础。     

绵羊肺炎支原体、丝状支原体山羊亚种和山羊支原体山羊肺炎亚种多重PCR检测方法的建立

为同时快速检测绵羊肺炎支原体(Mo)、丝状支原体山羊亚种(Mmc)和山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp),本研究根据Mo的P80基因,Mmc的MLC_1760和Mccp的arcA基因序列,设计合成了3对特异性引物,建立了同时检测Mo、Mmc和Mccp的多重PCR方法。该方法可以同时扩增出Mo、Mmc和Mccp的特异性片段,而对大肠杆菌、巴氏杆菌、羊传染性脓疱病毒等常见羊病病原无交叉反应,对Mo、Mmc和Mccp的最低检出量分别为3.62×10~4拷贝/μL、4.03×10~5拷贝/μL和6.78×10~5拷贝/μL。应用该方法对75份临床样品进行检测,结果与单一PCR检测结果一致。对32份临床样品同时用该多重PCR方法与分离鉴定法进行检测,结果显示,两种方法对Mo、Mmc、Mccp的检测符合率分别为87.5%、100%、100%。本研究建立的多重PCR方法特异性强、敏感性较高,适用于Mo、Mmc和Mccp临床快速检测及流行病学调查。     

多重PCR检测产气荚膜梭菌方法的建立及其临床应用

产气荚膜梭菌是牛羊猝死和肠出血症的重要病原之一。本研究根据其常见的A、B、C、D四种菌型菌株编码α、β和ε毒素的保守序列,分别设计合成了针对这3种毒素的特异性引物,建立了多重PCR检测不同血清型产气荚膜梭菌的技术方法。通过对参考菌株的分型检测表明,该方法不仅快速、客观,而且具有良好的特异性和敏感性。对羔羊猝死症中分出的菌株进行检测,确定其为产气荚膜梭菌A型和D型混合感染;对产后母牛血痢病料中分离的菌株进行检测确定其为产气荚膜梭菌A型。     

应用多重实时荧光PCR方法对8种动物毛纤维种类鉴别的研究

本研究旨在利用多重实时荧光PCR方法对水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物毛纤维进行物种鉴定研究。利用碱裂解法加入二硫苏糖醇,并结合硅珠吸附核酸法来优化动物毛纤维DNA的提取;根据8种动物16S rDNA基因特异核苷酸序列设计通用PCR引物和特异性TaqMan荧光探针;通过优化引物和探针浓度及退火温度等PCR反应体系和条件,建立了多重实时荧光PCR检测体系;并对多重PCR体系的特异性、灵敏度、重复性和适用性进行评估。结果表明,使用SDS-二硫苏糖醇DTT-蛋白酶K结合Chelex-100法,并利用硅珠纯化提取动物毛纤维DNA效果最佳,满足实时荧光PCR检测要求。本方法 DNA灵敏度为0.01ng,混合样本方法检出限为1.0%。因此本方法能够从动物毛纤维提取高质量DNA,建立的多重实时荧光PCR检测体系具有特异性强、重复性好和灵敏度高等优势。本方法可用于水貂、狐狸、骆驼、兔、山羊、绵羊、鸭和鹅8种动物及其混合物毛纤维的鉴定,为拓展动物毛纤维在物种识别、分子进化研究、分子标记辅助育种和遗传资源评价等领域中的应用奠定基础。     

猪群中7种高发传染病多重PCR诊断方法的建立

[目的]建立猪瘟、蓝耳病(又称猪繁殖与呼吸综合征)、圆环病毒2型感染、猪链球菌病、副猪嗜血杆菌病、猪多杀性巴氏杆菌感染和猪支原体感染7种猪病的多重PCR诊断方法.[方法]根据GenBank发表的核苷酸序列设计了分别针对猪瘟、蓝耳病、圆环病毒2型感染、猪链球菌病、副猪嗜血杆菌病、猪多杀性巴氏杆菌感染和猪支原体感染的2套多重PCR特异性引物,优化多重PCR反应条件后进行敏感性与特异性评价.[结果]建立的2套多重PCR诊断方法对其他常见猪病痛原的基因组无特异性扩增,检测病原基因组最低浓度可达到pg级.[结论]该研究建立的2套多重PCR诊断方法可以用于猪群中上述7种猪病痛原的单一感染或混合感染的鉴别诊断.     

肉鸡猝死综合症的诊断和防制

肉鸡猝死综合症的诊断和防制马桂芬吕学章翟宝库刘秀利刘薇（大庆乳业公司畜牧兽医研究所·１６３００１）肉鸡猝死综合症是目前发展肉鸡业中存在的最难解决的三种新病（猝死症、腹水症和骨营养不良症）之一。大庆地区，从１９９６年以来，该病的发生骤然增多，几乎每月都...     

山东省山羊“猝死症”病原和防治方法的研究

用从山东省菏泽地区的山羊“猝死症”病料中分离出的肺炎克雷伯氏菌和凝结芽胞菌做致病性试验证明，肺炎克雷伯氏菌对小鼠的致死量约为１．７亿个活菌，对山羊的致死量约为１７０亿个活菌；凝结芽胞菌对小鼠致死量为０．５５亿个活菌，对山羊的致死量为１６５亿个活菌，免疫试验表明，肺炎克雷伯氏菌和凝结芽胞菌对小鼠和山羊均有较好的免疫原性。用肺炎克雷伯氏菌和凝结芽胞菌制成的混合苗以５ｍｌ和８ｍｌ的剂量免疫山羊，２１disp     

春、夏季引起牛猝死疾病的临床症状与鉴别

猝死症的鉴别诊断较困难，因为家畜无明显异常，畜主发现时牛已死亡或濒临死亡，极少有救治的希望。猝死症的发生常与季节有一定关系。     

山羊传染性胸膜肺炎感染的诊断试验

为了诊断贵州某山羊养殖基地发病羊的病因,试验应用PCR检测及血清学诊断方法,对采集的患羊病理样本进行了确诊。结果表明:该羊场发生的是绵羊肺炎支原体Y98和丝状支原体山羊亚种PG3混合感染。     

家畜“猝死症”(综述)

80年代以来，我国不少地区先后发生一种主要以牛猪突然死亡为特征的家畜疾病，由于当时诊断不明，故根据其突然死亡的特征命名为“猝死症”或“猝死综合征”。随着时间的推移，本病一直未能停止，造成了许多家畜的死亡，给养殖业带来很大的危害。为了诊断与控制本病。各疫区先后开展了对本病的调查研究，揭示了大部分病因。根据我省家畜“摔死症”的发生情况，结合全国各地关于本病的报道，认为：家畜“辞死症”依其病因，主要有以下二种情况：1由中毒原因引起的“猝死症”揭示家畜“猝死症”由中毒引起者于江西、河南、安徽和江苏等省都发…     

山羊脱毛症防治措施

山羊脱毛症是羊养殖过程中常见疾病之一,导致羊出现该种疾病的原因有很多,换季、饲养管理不当、体表寄生虫威胁都会导致山羊脱毛症发生,因此,在饲养过程中需要密切观察山羊生长情况,发现异常及时查找原因,及时采取措施进行防治,避免经济损失进一步扩大。笔者主要结合实际情况就山羊脱毛症诊断和防治进行了分析,希望通过本次研究对同行有所助益。     

宁夏家畜“猝死症”调查及综合防制的研究

１９９１￣１９９５年宁夏回族自治区１３个县（市）发生家畜“猝死症”，经流行病学调查，病理剖解检查以及对病原微生物分离和微量元素监测，并通过诊断性防制的研究，初步调查结果表明，发生在我区的家畜“猝死症”是由魏氏梭菌引起的肠毒血症为主因，硒缺乏是家畜猝死的诱因之一。     

多重PCR技术在寄生虫病诊断上的应用及其建立方法的浅析

对于未知病原体感染和多病原体的混合感染,应用常规PCR方法往往需要多次扩增筛选,相对费时、费力。而多重PCR能够在同一反应体系内扩增多个靶序列,可进行多病原体的快速鉴定。目前多重PCR技术已广泛应用于病毒性、细菌性疾病的临床诊断,在寄生虫病诊断方面,多重PCR的应用也日渐增多,应用前景广阔。