水稻愈伤组织状态的调控

本文研究了胚性愈伤组织继代保持及提高植株再生能力的措施，试验结果表明：脯氨酸对水稻愈伤组织的生长及分化有明显的促进作用，对长期继代的愈伤组织有恢复分化能力的作用。不同类型水稻的愈伤组织对总氮量和之比有不同要求，籼稻的不宜高，粳稻在低培养基中多次继代后，经高刺激，能增加植株再生能力。     

羊草愈伤组织耐盐性初步研究

以野生羊草种子诱导出的愈伤组织为材料，用含有0～200mmol／L NaCl的培养基和含有0～14mmol／L的NaHCO3与Na2CO3的混合盐培养基进行培养，测定羊草愈伤组织的耐盐性。结果表明：羊草愈伤组织对NaCl最大耐受强度为180mmol／L；对NaHCO3与Na2CO3混合盐的最大耐受强度为4mmol／L。中性盐（Naa）与碱性盐（NaHCO3与Na2CO3）对羊草愈伤组织的胁迫机制明显不同。     

羊草愈伤组织耐盐性研究

以野生羊草种子诱导出的愈伤组织为材料,用含0～200 mmol/L NaCl的培养基和含0～14 mmol/L NaHCO3和Na2CO3混合盐的培养基进行培养,研究羊草愈伤组织的耐盐性.结果表明:羊草愈伤组织对NaCl的最大忍受强度为180 mmol/L;对NaHCO3和Na2CO3混合盐的最大忍受强度为4 mmol/L.这说明中性盐(NaCl)和碱性盐(NaHCO3、Na2CO3)对羊草愈伤组织的胁迫机制不同.     

影响羊草愈伤组织分化因素的研究

[目的]探索影响羊草愈伤组织分化及再生的因素,为羊草组织培养及转基因受体系统建立提供理论依据。[方法]选取5种类型羊草种子进行组织培养,研究在愈伤组织继代、分化培养过程中培养基类型、激素种类和浓度、低温处理等因素对分化率的影响。[结果]不同种群的羊草愈伤组织分化率差异极大;在愈伤组织诱导和继代过程中添加2.0mg/L2,4-D有利于羊草胚性愈伤组织再生能力的保持;继代培养时,不同种类培养基对分化率影响不大,低温处理不能提高长时间继代培养愈伤组织的分化率;分化培养时,外源激素对提高羊草分化率作用不大。[结论]影响羊草愈伤组织分化率的因素主要包括种质资源以及诱导和继代过程中的激素浓度。     

小麦愈伤组织状态调控与原生质体培养

 愈伤组织及其细胞的状态可通过调整培养基成分来调控。一般情况下，生长素、还原态氮、KCl促进愈伤组织生长，细胞分裂素、硝态氮抑制愈伤组织生长。绝大多数易培养基因型诱导的愈伤组织往往表现为质地紧硬或外软内硬，不适于进行悬浮培养和原生质体培养。利用不同水平的2，4-D、NH#++#-4、谷氨酰胺、水解酪蛋白、KCl、KT、6-BA、NO#+-#-3等进行处理，可使不适的愈伤组织变成适宜的类型，也可使那些生长过旺而不分化的愈伤组织分化出植株。用这些方法，从6个小麦基因型的原生质体中培养出了再生植株。     

草莓花药愈伤组织类型与状态调控研究

在草莓花药愈伤组织诱导及继代培养过程中,主要出现了3种类型愈伤组织：I型愈伤组织表现为生长缓慢、淡绿色、块状或粒状;Ⅱ型愈伤组织表现为生长旺盛、鲜白色、松软状;Ⅲ型(胚性)愈伤组织表现为生长较旺盛、鲜黄色、松脆状。草莓花药在F NAA0．2mg／L BA2．0mg／L 水解酪蛋白300mg／L培养基上诱导的愈伤组织多为I型,I型愈伤组织在含2,4-D浓度较高(3．0mg／L)的MS培养基上培养,转变成Ⅱ型愈伤组织,Ⅱ型愈伤组织在MS 2,4-D0．5～1．0mg／L BA0．05～0．1mg/L 水解酪蛋白400mg/L 谷氨酰胺150mg/L KCl 400mg/L培养基上培养,提高了其质量,而后将质量好的Ⅱ型愈伤组织转到附加KNO3 1140mg／L的MS培养基上,培养40d后在愈伤组织块边缘出现了黄色、颗粒状愈伤组织,将此状态的愈伤组织在MS 2,4-D 1．0mg/L NAA 1．0mg/L ZT 0．2mg/L 水解酪蛋白400mg/L 谷氨酰胺150mg／L KCl 400mg／L培养基上培养获得了Ⅲ型(胚性)愈伤组织。I型愈伤组织和Ⅱ型愈伤组织不适合建立细胞悬浮系,而Ⅲ型(胚性)愈伤组织很容易建立细胞悬浮系,并诱导出大量胚状体。I型愈伤组织能再生植株．Ⅱ型愈伤组织不能再生植株,Ⅲ型(胚性)愈伤组织经状态调控成I型愈伤组织后也能再生植株。     

羊草胚性愈伤组织的形成及植株再生

以羊草幼嫩根茎和种子为外植体,在MS、B_5和8114三种培养基上,配合使用生长素2.4-D的浓度水平为1,2,4mg/L,诱导愈伤组织以B_5或MS+2.4-D 4mg/L效果最佳。在继代培养中降低2.4-D浓度,相应提高蔗糖和肌醇含量,能有效地促进愈伤组织质地转变,形成致密的胚性愈伤组织。通过研究证明,羊草种子是羊草组织培养的最佳外植体,其愈伤组织诱导率高,质地优良且幼苗分化率好,并具有易于操作的优点。     

羊草种子愈伤组织的诱导及植株再生

以3种羊草种子为外植体分别接种在含有不同浓度2,4-D(1,2,4mg·L-1)的MS培养基上,讨论其组织培养的条件。结果表明,愈伤组织诱导及芽分化的培养基以MS+1mg·L-12,4-D的效果最好,愈伤组织的诱导率为12%,不定芽分化率为16%;生根培养中,以1/2MS培养基生根效果最好,生根率达到100%。在筛选出的培养基上培养的羊草种子具有愈伤组织诱导率较高、幼苗分化率好、幼苗健壮、生长势好等优点。     

春小麦愈伤组织诱导和植株再生的研究

本研究以５个春麦品种的幼穗为外植体,接种在ＭＳ为基本培养基不同浓度的激素的诱导培养基上,结果发现,铁春２号是最好的基因型,诱导率、分化率最高,不同品种间诱导率存在极显著差异,６－ＢＡ不利于愈伤组织诱导,最佳生长素配比是２０ｍｇＬ－１２,４－Ｄ＋０５ｍｇＬ－１ＮＡＡ。在分化培养中,最好的激素配比为０２ｍｇＬ－１ＮＡＡ＋０１ｍｇＬ－１Ｋｔ。经长期继代的愈伤组织５℃低温处理１０ｄ,显著提高愈伤组织的分化率。     

不同颜色羊草种子对其发芽率及愈伤组织诱导的影响研究

[目的]探讨不同颜色类型羊草种子对发芽率及愈伤组织诱导率的影响。[方法]根据羊草种子的颜色,将羊草种子分为浅黄色、黄色和黑色3种类型,进行了羊草种子发芽、愈伤组织诱导研究。[结果]浅黄色羊草种子的在各颜色类型羊草种子中发芽率、出愈率较高,发芽率、出愈率分别为32.5%、28.5%。通过TTC活力测定、电导率测定,发现种子活力随着羊草种子颜色的加深而降低。[结论]该研究为建立羊草高频再生体系奠定了基础。     

微肥对羊草干草产量及品质的影响

在宁夏盐池县城西滩试验田,以中科2号羊草(Leymus chinensis cv‘Zhongke No.2’)为材料,系统研究了Fe、Mn、Cu、Zn、B、Mo对干草产量、品质及养分吸收的影响。结果表明:施用微肥可显著增加干草产量,施用铜肥产草量为13 216kg/hm2,较对照增产43.7%,其次为施用钼肥;微肥施用增加羊草单位经济产量磷、钾的吸收量,对氮素吸收量影响不大,施硼肥单位经济产量磷吸收量较对照增加25.6%,施锌肥单位经济产量钾吸收量较对照增加10.5%;施用锌肥能有效增加羊草粗蛋白质质量分数,降低粗纤维和无氮浸出物质量分数,粗蛋白质质量分数为9.60%,较对照增加4.5%,粗纤维质量分数为34.39%,较对照降低0.3%;施铜肥经济效益最佳,达14 781元/hm2,较对照增收42.6%。建议在同类地区推广施用。     

羊草 CDPK 基因全长 cDNA 的克隆及原核表达

【目的】通过对羊草 Leymus chinensis CDPK 基因进行克隆及原核表达,为进一步研究CDPK基因的功能,探讨羊草适应生境分子机制提供理论基础.【方法】用RT-PCR结合RACE技术克隆了羊草钙依赖蛋白激酶（CDPK）基因,命名为Lc-CDPK;构建了羊草CDPK基因的原核表达载体,转化到大肠埃希菌Escherichia coli BL21(DE3),异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,经SDS-PAGE分析CDPK蛋白的表达情况.【结果和结论】羊草CDPK基因全长cDNA序列为1 704 bp,包括1个1 647 bp的开放阅读框,编码548个氨基酸,从第81~339个氨基酸构成了具有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶催化活性的S-TKc结构域,有4个保守的EF手型结构域;编码区核苷酸序列与其他禾本科作物比对后发现,与小麦CDPK基因的相似性最高,相似度为96%;IPTG诱导表达出相对分子质量为61 350的融合蛋白,表达产物大小与预计理论值相符.诱导7 h蛋白表达量最高,表达量占菌体总蛋白的49.1%.     

宁夏干旱风沙区羊草水肥效应研究

【目的】研究宁夏干旱风沙区水肥耦合对羊草产量、品质及种子产量的影响,为羊草高产优质栽培提供参考。【方法】以中科2号羊草为材料,采用裂区试验设计,主区为灌水量处理,设900,1 800,2 700 m³/hm² 3个梯度,在羊草返青期和抽穗期分2次进行灌水,每次灌水量为总灌水量的1/2;副区为肥料处理,设N-P²O⁵-K²O 为0-0-0 kg/hm²(F₁),75-60-45 kg/hm²(F₂),150-120-90 kg/hm²(F₃),225-180-135 kg/hm²(F₄) 4个梯度,F₂~F₄处理N-P₂O₅-K₂O的比例均为5∶4∶3,肥料在返青期随灌水一次性撒施。在羊草种子成熟时,测定穗长、穗宽、小穗数、小花数、种子产量和千粒质量,统计分蘖数和生殖枝数,计算抽穗率;测定株高、鲜草产量、干草产量及干草营养成分;分别计算种子和干草的灌溉水利用率(iWUE)和肥料偏生产力（PFP）;通过二次多项式回归和空间分析法得出最优水肥用量。【结果】灌水量对羊草种子产量、干草产量、相对饲喂价值（RFV）、种子和干草的PFP和iWUE均有显著或极显著影响;施肥量对羊草干草产量、种子和干草的PFP、干草iWUE、粗蛋白(CP)和RFV均有极显著影响;水肥耦合效应对羊草干草产量、干草iWUE、干草和种子的PFP均有显著或极显著影响。灌水量为900 m³/hm²、施肥量为540 kg/hm²时羊草种子产量最高;灌水量为1 800 m³/hm²、施肥量为540 kg/hm²时干草产量和饲草品质(CP和RFV)最高。【结论】在宁夏干旱风沙区,羊草种植以种子产量和水分利用效率为目的时,灌水量为855～900 m³/hm²、施肥量为342～513 kg/hm²;以干草产量和饲草品质为目的时,灌水量为1 710～1 800 m³/hm²、施肥量为342～513 kg/hm²。     

羊草与克氏针茅氮元素含量对亚洲小车蝗取食选择的影响

选择2种内蒙古草原的优势草种羊草和克式针茅,通过人工饲喂蝗虫取食的方法,分别测定亚洲小车蝗的5龄蝻期以及成虫在未施肥(ON)和施肥(HN)条件下对于2种不同草种的取食量和选择频次,并研究N元素变化对于亚洲小车蝗取食选择性的影响。结果表明,在蝻期,N元素不是其取食选择性和食量的决定因素。而在成虫期,亚洲小车蝗特别是雄性更喜欢低N植物作为其食物。亚洲小车蝗对羊草或针茅的选择取食随发育阶段、性别和草的N含量进行调整,但在进化过程中趋向于选择低氮的植物。     

蚯蚓粪和菌渣对羊草草原土壤养分及酶活性的影响

针对天然羊草草原退化打草场问题,采用单因素随机区组试验设计,共7个处理组,每个处理设置3个重复:对照组为不施肥处理组(CK);3个蚯蚓粪处理组分别为45(QYh)、30(QYm)和15 t/hm~2(QYl);3个菌渣处理组分别为45(JZh)、30(JZm)和15 t/hm~2(JZl)。结果表明:1)0～10 cm土层中QYh处理下的土壤pH和速效磷含量显著增加,JZh处理下速效钾含量较CK显著增加;10～20 cm土层中在QYh处理下速效氮、速效钾和全钾含量较CK显著增加,其余处理间土壤养分不显著;2)土壤脲酶活性各处理间变化不显著;蔗糖酶活性在QYm处理下较对照显著降低24.35%;在QYh和JZh处理的土壤中碱性磷酸酶活性较对照增加。3)表层土碱性磷酸酶活性与有机质呈显著正相关;10～20 cm土层中过氧化氢酶活性与土壤pH值呈极显著正相关,与速效钾呈显著正相关,与全钾呈极显著负相关;20～30 cm土层中脲酶活性与速效钾呈极显著负相关,蔗糖酶活性与速效氮含量呈显著正相关,碱性磷酸酶活性与速效钾呈极显著正相关,与pH呈显著正相关,过氧化氢酶活性与速效钾含量呈显著正相关。4)土壤酶活性随土壤剖面深度增加而降低。综上,蚯蚓粪和菌渣对羊草草原土壤养分和酶活性有积极影响,蚯蚓粪和菌渣高施肥量处理对土壤养分及酶活性影响较大。     

中华猕猴桃愈伤组织细胞的超低温伤害研究

用５％二甲基亚砜＋１０％葡萄糖或５％二甲基亚砜＋１０％蔗糖作为冰冻保护剂，能有效减轻中华猕猴桃愈伤组织细胞的超低温伤害。以－１℃／ｍｉｎ的速率降温至－６０～－７５℃时，对愈伤组织细胞的伤害作用最小；以大于１６０℃／ｍｉｎ速率快速化冻，愈伤组织细胞的相对存活率最高。愈伤组织细胞伤害的主要温度区域为－２０～－４０℃；－６０～－７５℃为愈伤组织细胞投入液氮时的“安全温度区”，－６０℃和－７５℃分别为“临界上限温度”和“临界下限温度”。     

多枝赖草谷胱甘肽还原酶基因的克隆及分析

以盐胁迫处理的多枝赖草(Leymus multicaulis)植株新鲜叶片为材料,根据其他植物谷胱甘肽还原酶(GR)氨基酸保守区序列设计简并引物,通过RT—PCR扩增到1个408 bp的cDNA片段(Genbank注册号为 AY781786);利用DNAMAN软件将5’和3’RACE获得的5’和3’端序列,拼接成1个全长1 580 bp的cDNA序列,其包含1个1 140 bp的开放阅读框架,该阅读框架编码380个氨基酸;多枝赖草谷胱甘肽还原酶氨基酸序列与其他植物的同源性为77％～92％,定量PCR结果表明,GR基因的表达随着盐胁迫时间和盐浓度的增加而加强。     

马铃薯茎段愈伤组织培养体系的优化

以克新12号、克新13号、东农303和早大白4种马铃薯试管苗茎段为材料,研究各品种的组织培养体系。结果发现,克新13号和克新12号的最适愈伤组织诱导培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D。用上述最适诱导培养基培养,各品种的愈伤诱导率分别为100%,100%,100%和90%。克新13号愈伤组织分化的最佳培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+4.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;克新12号和早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA+1.5 mg/L GA3。用上述最适诱导培养基培养,各品种的分化率分别为80%,90%,100%,76.7%。