大花蕙兰原球茎增殖影响因素的研究

[目的]为探明组培过程中大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素。[方法]以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了MS培养基浓度、BA浓度及培养方式对原球茎增殖和生长的影响。[结果]1MS基本培养基适合大花蕙兰原球茎培养;在振荡培养时MS培养基中加入BA1．5mg／L时,原球茎生长良好,显著好于其他浓度处理;在液体培养基中培养原球茎明显优于在固体培养基中培养,液体培养基培养的原球茎鲜重和增殖系数均为固体培养的1．75倍。[结论]培养基配方为Ms＋BA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖30g／L且振荡培养时,大花蕙兰原球茎增殖及生长效果较好。     

大花蕙兰原球茎增殖条件研究

采用原球茎（PLB）进行繁殖是大花蕙兰-种重要的再生方式。本研究以大花蕙兰原球茎为外植体进行研究,比较不同基本培养基（1／3MS、1／2MS、MS）、有机添加物（椰乳、香蕉泥、苹果汁）、活性炭和植物激素（6-BA、NAA）等因子对大花蕙兰原球茎增殖效果的影响。结果表明：1／2MS为基本培养基有利于PLB的增殖;有机添加物对PLB的增殖也有影响,其中,以椰乳的增殖效果最好,其次为香蕉泥、苹果汁;1．5g·L。活性炭可以有效减少褐变的发生;低水平的NAA（O．2mg·L-1）和较高水平的6-BA（1．0mg·L-1）对大花蕙兰PLB的增殖具有显著的促进作用。     

大花蕙兰原球茎的诱导和增殖研究

通过对大花蕙兰茎尖和茎段的组织培养,建立了大花蕙兰原球茎的无菌繁殖体系。结果表明:芽诱导的最适培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;原球茎诱导培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+2.5 mg/L 6-BA+100 mg/mLVC;原球茎诱导增殖培养基为1/2MS+0.3 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA+100 mg/mL VC;适宜原球茎增殖培养的外植体为原球茎。     

大花蕙兰再生体系建立的研究

[目的]研究并建立大花蕙兰再生体系。[方法]用75%酒精和0.1%升汞进行表面灭菌,以MS为基本培养基,采用L9(33)正交试验设计进行类原球茎增殖的优选,以继代培养40 d后的增殖系数及幼苗分化率为考察指标。[结果]在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,待长至2~3 cm时,小心切下接入1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+GA31.0 mg/L+香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。[结论]为规模化生产提供依据。     

大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及其解剖结构研究

通过诱导根状茎上的休眠芽萌发,以其茎尖和幼茎段材料为外植体进行组织培养,建立了大花蕙兰(Cymbidium hynridum)的无菌繁殖体系,并筛选出大花蕙兰无菌繁殖的最佳培养基组成。原球茎诱导的较适宜的培养基为MS 1.5 mg.L-16-BA 0.1 mg.L-1KT 0.05 mg.L-1NAA,诱导率达15%;原球茎增殖培养基在诱导培养的基础上添加150 g.L-1香蕉泥,其增殖系数1个月内可达15~35。原球茎是由顶端分生组织后面的薄壁细胞脱分化,形成胚性细胞,经球状胚发育而来。     

大花蕙兰高频再生体系的建立

以大花蕙兰的不同部位作外植体,对其启动诱导;采用正交试验设计等方法筛选大花蕙兰类原球茎诱导、增殖与生根壮苗的最佳培养基。结果表明:在大花蕙兰离体再生过程中,侧芽是最容易启动的外植体;MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L AC 0.1 g/L是类原球茎诱导的最佳培养基;1/2MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.1 mg/L是类原球茎增殖和幼苗分化的最适宜培养基;芽分化后,在1/2MS NAA 1.0 mg/L GA31.0 mg/L 香蕉泥150 g/L培养基中生根壮苗效果最好。     

大花蕙兰原球茎增殖分化影响因素研究

大花蕙兰在供试的MS、1/2MS、KC和VW4种培养基中.其原球茎增殖倍率没有明显差异,在3.51～3.89倍之间,发芽率在MS培养基中最佳,达16.1%.Ad、KT、6-BA等细胞分裂素处理中,以6-BA最有利于原球茎增殖倍数的提高,6-BA浓度在0.1～1.0mg/1范围内对大花蕙兰原球茎增殖没有明显的影响,对幼苗的分化则有一定的影响.原球茎增殖培养基中加入0.5～1mg/1 NAA有利于原球茎增殖倍数与生根率的提高.继代周期以4～6周为宜,培养基中宜加入20～30g/1的蔗糖、10%的椰乳、0.5g/1的活性碳.     

大花蕙兰茎尖组织培养与植株再生研究

文章以大花蕙兰为材料,研究其茎尖组织培养再生体系。结果表明,最佳原球茎诱导培养基为VW+0.8mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA+20g·L-1蔗糖+0.05g·L-1AC,pH5.2。原球茎体分化丛生芽经壮苗生根后可进行移栽,最佳移栽基质为树皮块和水苔藓。     

不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导与增殖影响的研究

[目的]大花蕙兰快速繁殖体系的建立。[方法]以茎尖和带有侧芽的茎段作为外植体,研究不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导和增殖的影响。[结果]结果表明,大花蕙兰茎尖的原球茎诱导率高于侧芽,原球茎诱导的培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋1．0％芦荟汁;原球茎增殖培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋150g／L香蕉泥＋1．0％芦荟汁;“井”字形切割（底部不分开）是原球茎增殖较为理想的切割方式。[结论]该研究结果可为建立大花蕙兰大规模工厂化育苗体系提供依据。     

培养基、激素和添加物对大花蕙兰原球茎诱导增殖的影响

本试验较系统地研究了培养基、激素6-BA和添加物对大花蕙兰“红翡翠”原球茎的诱导、增殖效果的影响。明确了最佳原球茎诱导培养基配方；筛选出较理想的原球茎继代增殖的培养基、6-BA浓度、添加物的配比参数值：1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋100/L椰乳＋3％蔗糖、0．3％活性炭、1．0％琼脂。     

大花蕙兰组织培养和快速繁殖技术研究

该文以大花蕙兰杂交新品种‘西维亚'、‘玛利莲梦露'、‘蒙米拉丝'、‘女皇'为材料,应用组织培养和快速繁殖技术,对适合原球茎增殖、分化的培养基、培养方式进行了系统的研究,提高了诱导成苗率和繁殖速率,降低了成本,建立了一套经济、高效的快繁技术体系.对培养基、激素用量、切割方式、培养方式进行筛选,结果表明:利于原球茎增殖的培养基为改良KC+KT 0.05mg/L+NAA 0.5mg/L,以半固体培养,加香蕉泥为佳,增殖率为4.1.利于生根壮苗的培养基为改良KC+NAA 0.2mg/L,以固体培养为佳.     

外源激素对杂交兰组培快繁的效应

[目的]探讨杂交兰（Cymbidium hybridum×faberi）组培快繁技术,为杂交兰的工厂化生产提供技术支撑.[方法]以杂交兰茎尖和腋芽为外植体,调查不同激素与活性炭（AC）组合对原球茎诱导、增殖分化和生根培养的影响.[结果]6-BA是影响原球茎诱导的主要因素,IBA是影响原球茎增殖和分化的主要因素.原球茎诱导和增殖最适培养基为MS＋6-BA 1.0 mg/L＋IBA 0.5 mg/L＋AC 3.0 g/L＋3％蔗糖;MS＋6-BA 0.5 mg/L＋IBA 0.5 mg/L＋AC 3.0 g/L＋3％蔗糖最适于原球茎分化成苗;壮苗生根培养基为1/2MS＋ IBA 0.5 mg/L＋AC 1.0 g/L＋3％蔗糖＋0.5％琼脂.[结论]在MS基本培养基中,低量的6-BA、IBA对杂交兰原球茎诱导、增殖与分化、生根和移栽成活均有明显促进效应,原球茎不同生长阶段对AC的需求量不同.     

接种密度、培养基中蔗糖和活性炭浓度对生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖的影响

为了探明生物反应器内大花蕙兰原球茎增殖生长的影响因素,为大花蕙兰种苗生产中大量培养繁殖材料提供理论依据,以大花蕙兰茎尖诱导的原球茎为外植体,研究了接种量、蔗糖浓度、活性碳浓度对5 L气升式反应器内原球茎增殖和生长的影响。结果表明,大花蕙兰原球茎在5 L反应器内增殖时,接种量为20 g的处理原球茎鲜重显著优于10 g和30 g接种量处理;添加蔗糖30 g/L处理对大花蕙兰增殖生长有促进作用;活性炭浓度0.25 g/L处理原球茎的生长良好,高于0.25 g/L抑制原球茎的生长,增殖系数为7.5。利用5 L气升式生物反应器培养原球茎,接种量为20 g、蔗糖浓度为30 g/L、活性炭浓度为0.25 g/L时,大花蕙兰原球茎增殖较快,生长较好。     

大花蕙兰原生质体分离的影响因素研究

本文以大花蕙兰为材料，采用正交试验的方法进行了取材部位，纤维素酶浓度，甘露醇浓度以及酶液各成分的浓度等不同因素对其原生质体分离影响的研究。结果表明，以叶片为材料，在１％纤维素酶＋０．３％果胶酶＋０．２％半纤维素酶＋１１％甘露醇的组合中酶解，经２５±１℃，３０ｒ／ｍｉｎ，筛网过滤，离心洗涤，漂浮纯化，获得的原生质体产量最高，可达到１０￣６个鲜重。     

植物外源激素对大花蕙兰体胚发生影响的研究

采用正交试验设计方法研究了3种激素2,4-D、萘乙酸（NAA）和激动素（KT）不同浓度对4个不同品种大花蕙兰茎段愈伤组织诱导和体胚发生频率的影响.结果表明:①3种激素对愈伤组织的诱导和体胚发生的影响均达极显著差异;②2,4-D对愈伤组织的发生有非常显著的作用,且随浓度升高,诱导率增加,但高于2.0mg/L时,外植体褐化死亡;③KT是体胚发生的关键因子,其作用受到2,4-D的抑制和低浓度NAA的促进;④体胚的发生受基因型的影响,但其对基因型的依赖性具分组特性.      

大花蕙兰花粉贮藏与离体萌发研究

为解决兰花花期不遇的问题,为杂交育种工作提供参考与借鉴。以大花蕙兰(Cymbidium hybridum)品种JOIC和KK560为试材,筛选适宜的花粉离体萌发培养基配方;检测不同贮藏温度、不同保存时间的大花蕙兰花粉离体萌发率,确定适宜的花粉保存方法。结果显示,大花蕙兰品种JOIC花粉粒离体萌发的最适培养基配方为0.5 MS+30%蔗糖,大花蕙兰品种KK560花粉粒离体萌发的最适培养基配方为0.01%硼酸+0.2%氯化钙+30%蔗糖。建议保存前将花粉块硅胶阴干24 h,-20 ℃保存,期限为6个月。     

大花蕙兰腋芽增殖体系的建立

[目的]建立大花蕙兰腋芽增殖体系。[方法]以大花蕙兰的嫩芽为试材,研究大花蕙兰腋芽增殖的最佳条件。[结果]结果表明,腋芽增值的最佳培养基为B5+6-BA 3.0~4.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AD 2.0 mg/L+YE 100.0 mg/L;生根阶段培养基为1/2MS+2.0 g/L AC+0.3 mg/L NAA生根效果好,生根率为90%,根数3~4条,6-BA添加与否影响不大。[结论]该试验通过腋芽增殖模式,遗传稳定性较高。     

北方地区大花蕙兰花期调控技术研究

对影响大花蕙兰开花的5个主要因素———光照、温度、浇水、施肥和留芽模式进行了研究,结果表明:5月至10月中旬用50%遮阳网遮光,有利于大花蕙兰的生长发育,可促进花芽的形成;7—9月在海拔900 m的山区进行催花越夏栽培,为大花蕙兰的生长提供了一个凉爽的气候条件,使其花芽的形成和生长得以顺利进行;6月上中旬给予10～15 d的干旱处理,使兰株处于严重缺水状态,有益于大花蕙兰的花芽分化;5月底增加磷钾肥比例,减少追施氮肥,有利于花芽的分化和生长;成龄苗在上年10—11月留芽,可使假鳞茎得到充分发育,提高大花蕙兰的开花率。