利用玉米种子盐溶蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定品种

利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对不同品种的玉米种子中盐溶蛋白进行分析,并在研究过程中对电泳条件进行了改进。结果表明:改进后使不同玉米品种盐溶蛋白电泳谱带差异更明显.各玉米种子盐溶蛋白的电泳图均有鲜明特征,彼此可以区分,视作它们各自的“指纹”。     

利用种子蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定玉米种子纯度的研究

利用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术,对2份玉米母本 种子的蛋白质进行电泳分析,结果表明,它们的母本种子蛋白质电泳图谱差异明显,特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定结果之间纯度达97;以上,该技术可作为玉米杂交种和自交系种子纯度鉴定的一种手段。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳操作注意事项研究

[目的]得到清晰的特异性条带,更好地分析SRAP标记产物。[方法]对聚丙烯酰胺电泳的上样量、电压条件进行了梯度试验,同时就灌胶方式、银染时间、显影剂调配等各步骤的操作进行了详细地探讨。[结果]上样量7μl、电压1 000 V最合适,能得到DNA条带清晰、特异性条带区分效果明显的条带。[结论]为后续电泳操作及分析过程奠定技术基础。     

黑猪血清蛋白质及碱性磷酸酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

用聚丙烯胺凝胶圆盘电泳分析了黑猪血清蛋白质和碱性磷酸酶同工酶生化位点多态性的分布。结果：血清蛋白质可分离出１０－１２条区带,血红蛋白分离出１－２条区带,结合珠蛋白分离由４条区带,铜蓝蛋白分离出１５条区带,糖蛋白分离同７－９条区带,脂蛋白分离４条区带,光密度扫描黑猪血清蛋白质相面积比分别为白蛋白占３１．９０％,α１蛋白占１１．１６％,α２蛋白占２４．４２％,β蛋白占１１．３１％,γ蛋白占２１．１８％     

微卫星DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术的探讨

采用PCR一非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸银染色检测DNA片段。结果表明,该方法检测DNA具有灵敏度高、背景浅、条带清晰等突出特点。聚丙烯酰胺凝胶电泳后采用银染技术分析,方便快捷,易长期保存,且减小了对人体、环境的毒害作用。     

仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系的优化

[目的]优化仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系。[方法]以25份仁用杏和3份食用杏为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术筛选出多态性高、可重复的SSR位点。并比较不同因子对电泳体系的影响,探索仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系。[结果]仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系为：聚丙烯酰胺凝胶的浓度为6%,丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为29∶1,1000V下电泳2～3h,0.1%AgNO3染色15min后显影。[结论]该优化体系为仁用杏资源微卫星标记遗传分析奠定了技术基础。     

琼脂糖与聚丙烯酰胺凝胶电泳在SSR鉴定杂交油菜种子纯度中的比较

对3对候选引物SR85、SR332、SR407所扩增的秦优33杂交种及其父母亲本的DNA-SSR片段进行琼脂糖与聚丙烯酰胺凝胶电泳分离.两种电泳检测结果比较表明,(1)利用琼脂糖凝胶电泳分离后,3对候选引物对杂交种所扩增的SSR条带均为父母亲本条带的互补.其中引物SR332所获的两条互补条带的迁移率相差大,电泳图谱能清晰鉴别出父本、母本及杂种植株.引物SR85和SR407杂交种的互补条带迁移率相近,在鉴定中易出现人为误差.(2)利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,引物SR332所扩增条带未能区别杂交种与父本植株.引物SR85和SR407对杂交种所扩增的条带均为父母亲本所扩增条带的互补,相互差异显著,条带清晰稳定.可见,琼脂糖与聚丙烯酰胺凝胶电泳都是SSR技术鉴定种子纯度的有效途径,种子纯度分析应根据区别材料的遗传关系和引物分析表现来选择不同的电泳介质.     

仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系的优化

[目的]优化仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系。[方法]以25份仁用杏和3份食用杏为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术筛选出多态性高、可重复的SSR位点。并比较不同因子对电泳体系的影响,探索仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系。[结果]仁用杏微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系为：聚丙烯酰胺凝胶的浓度为6%,丙烯酰胺与甲叉双丙烯酰胺的比例为29∶1,1000V下电泳2～3h,0.1%AgNO3染色15min后显影。[结论]该优化体系为仁用杏资源微卫星标记遗传分析奠定技术基础。     

小麦醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的改进及应用

在国际种子检验协会(ISTA)及国家农作物种子检验规程(GB/T3543—1995)颁布的小麦种子醇溶蛋白PAGE电泳技术鉴定品种的标准程序基础上,对溶液的配制、凝胶浓度、电泳方式等影响电泳效果的主要因素进行了研究和改良,使其操作更加简单快捷、凝胶质量好、剥胶容易、分辨率高,比原方法更具可操作性。     

微芯片电泳与聚丙烯酰胺凝胶电泳的比较分析

聚丙烯酰胺凝胶电泳是目前实验室常用的分离寡核苷酸的电泳技术,微芯片电泳是近几年新兴起的DNA/RNA快速分析系统。对玉米自交系8112、黑糯等SSR分子标记的PCR扩增结果进行两种方法的比较,旨在分析检验微芯片电泳在重复性和分辨率上的可靠性。与聚丙烯酰胺凝胶电泳相比,微芯片电泳无毒性、操作更简单、灵敏度和准确性高,而且重复性良好,今后在科研工作中将拥有更加广阔的前景。     

刺槐根系可溶性蛋白SDS-PAGE分离方法的改进

在利用常规SDS-PAGE方法分离刺槐根系可溶性蛋白的过程中,将样品处理液中的SDS、β-巯基乙醇、丙三醇的含量均增加50%。这样改进后的方法得到了分离效果明显较常规方法好的电泳图谱。经分析得出:常规SDS-PAGE方法中样品处理液的SDS和β-巯基乙醇浓度不足以充分溶解刺槐根系中的可溶性蛋白,丙三醇的浓度也不足以将样品很好地沉聚于点样槽底部。该试验为植物组织可溶性蛋白的SDS-PAGE分离提供了一套效果较好的参考方法。     

玉米贮藏蛋白质的提取及亚基电泳分析

采用SDS-PAGE,浓缩胶浓度为5%,分离胶浓度为12%,对2种新品种玉米——强盛49和奥玉3101的贮藏蛋白亚基进行了电泳分析,并对组成2种玉米贮藏蛋白的各亚基的分子量和含量进行了分析。结果表明,分离胶浓度为12%的电泳图谱最佳。2种玉米蛋白的亚基组成相同,都含有14个亚基,二者分子量分布范围也接近,但是亚基含量差别较大,尤其是亚基13差别最为显著。在玉米蛋白的亚基组成中,以低分子量亚基为主,玉米蛋白亚基分子质量范围约为1.0×104～8.0×104Da。     

山西省壳斗科植物资源及园林应用策略

壳斗科植物是极具潜力的北方园林新优乡土树种。通过实地调查和文献查阅,对山西省野生壳斗科植物资源分布、观赏特性及园林用途进行了探讨,分析了国内壳斗科植物引种育种情况,提出了壳斗科植物的园林应用策略。     

适于SDSPAGE分析的高粱叶片蛋白质提取方法

为了探索适于高粱叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的样品制备方法,对TCA/丙酮沉淀后的蛋白质分别用裂解液Ⅰ(尿素+硫脲+CHAPS+DTT)和裂解液Ⅱ(尿素+DTT)2种裂解液进行裂解,用改良的Bradford法进行定量分析,并进行SDS-PAGE分离检测。结果表明,裂解液Ⅰ所得蛋白质质量浓度(2.538g/L)高于裂解液Ⅱ所得蛋白质质量浓度(1.905g/L),且两者呈极显著差异(P<0.05),但裂解液Ⅰ所得蛋白质电泳条带出现1条杂带;而裂解液Ⅱ所得蛋白质能满足上样要求且电泳条带清晰无杂带。因此,TCA/丙酮沉淀并用裂解液Ⅱ进行裂解的方法适用于高粱叶片的SDS-PAGE分析。     

黑麦属贮藏蛋白的SDS-PAGE分析

对72份黑麦属材料的贮藏蛋白进行了SDS-PAGE分析。结果表明,黑麦属贮藏蛋白与普通小麦不同,可明显区分为4种组分:HMW、-γ75k、ω和-γ40k。黑麦属72份材料共有54种贮藏蛋白带型,每个材料可分离出7~11条带,多数为9~10条。在HMW区检测到6种亚基,22种不同组合。-γ40k区多为3条带,其他区域均以2条带最为普遍。各区域均可反映一定程度的变异,但以HMW-GS和-γ45区变异最大,揭示的材料间的遗传相似系数(GS)分别为0.622和0.776。72份材料平均GS值为0.748,变幅为0.450~1.000。森林黑麦(S.sylvestre)种内的GS值最高,达0.970,而普通黑麦(S.cereale)种内的GS值最低,为0.797。森林黑麦与普通黑麦的种间GS值最低,为0.633,与其他2个种的种间GS值也均较低(<0.700)。瓦维洛夫黑麦(S.vavilovii)与森林黑麦(S.cereale)的种间GS值高达0.785。该结果说明,SDS-PAGE可以有效地揭示黑麦属贮藏蛋白丰富的遗传差异,并可在一定程度上反映黑麦属种间的亲缘关系。     

一些小麦品种Waxy蛋白亚基分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(1D-SDS-PAGE)方法分析了227份国内外小麦品种(系)Waxy蛋白的缺失类型,在国内和国外小麦品种(系)中分别筛选到缺失Wx-B1蛋白亚基的小麦品种(系)15份和6份。国内小麦品种与国外相比,在主要淀粉特性上存在着较大的差距,澳大利亚优质面条小麦品种都缺失Wx-B1蛋白亚基,因此,这些缺失品种或品系可作为亲本,用于淀粉特性和面条品质的改良。     

豆状带绦虫抗原的SDS-PAGE及Western-blot分析

为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶段的虫体中分离出5~12条主要蛋白区带,分子质量为25~114ku.以第7周自然感染家兔血清对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在42、57、63ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.以家兔阳性血清中提取出来的IgG免疫球蛋白对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在63ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.说明63ku蛋白带可作为预防兔豆状囊尾蚴病的候选疫苗抗原.试验初步阐明了豆状带绦虫7种不同抗原的部分生化特性,为对该抗原的进一步深入研究奠定了基础.     

陕西壳斗科植物研究(二)

五、栎属Quercus Linn. 乔木,稀灌木,落叶、半常绿、常绿。本届全世界约3O0种,国产约60种,陕西产21种5变种,且分布广,陕北清涧、安塞、志丹等县以南亦有分布。秦岭以北落叶种类为主,秦岭以南常绿种类占有一定比例。     

燕麦麦谷蛋白SDS-PAGE电泳分析

为了研究燕麦麦谷蛋白亚基组成及遗传多样性,本研究采用SDS-PAGE电泳方法对71份不同染色体组型的燕麦材料的麦谷蛋白,进行了电泳分析,并以中国春为参照,按条带迁移距离大小命名,分析条带多态性并以燕麦麦谷蛋白点泳图谱为依据对供试材料进行聚类分析。电泳结果显示燕麦麦谷蛋白主要集中在分子量较低的C区,高分子量麦谷蛋白没有检测到条带。71份燕麦材料共产生20种不同条带,条带g和条带i比较保守,出现的频率分别为64.8%和85.9%。各种条带组合形成62种不同的组合带型,多态性为87.3%。聚类结果显示燕麦麦谷蛋白的电泳谱型与材料的染色体组有很大关系,具有相同染色体组型的同种属的燕麦材料一般先聚为一类,但各材料之间又存在一定的差异。绝大多数六倍体材料在遗传相似性系数约0.68时聚为一类,多数四倍体材料在遗传相似性系数约为0.60时聚为一类,部分二倍体材料在遗传相似性系数约为0.59和0.76时聚为一类。条带a只在六倍体材料AACCDD中出现,而AACC、AABB、CC染色体组的材料中都没有出现,推测可能是D染色体组的特异条带。AsAs和A1A1染色体组存在一定的差异并不完全相同。燕麦麦谷蛋白SDS-PAGE电泳图谱可以作为燕麦指纹图谱。     

蛋白质SDS-PAGE用于螺旋藻分类及突变体鉴定的研究

螺旋藻经SDS提取液提取、冷丙酮沉降后,所得蛋白液的SDS-PAGE图谱条带清晰、信息量大.对10株钝项螺旋藻(Spirulinaplatensis)Sp-D,Sp-Y,Sp-F,Sp-J,Sp-B,Sp-S,Sp-K,Sp-Z及其交变体Sp-Z(S)和Sp-Z(L),所作的蛋白质SDS-PAGE分析表明：①螺旋藻蛋白带主要分布于31kD和188kD之间,各藻株间的蛋白质电泳图谱的特征性差异可作为螺旋藻分类的主要依据之一;②Sp-J和Sp-K的蛋白质SDS-PAGE图谱相同,从而进一步确证它们属同一品系;③Sp-Z(S)和Sp-Z(L)作为Sp-Z的耐盐突变体和直线形突变体,分别比Sp-Z多1条43kD及少1条87kD的蛋白带;④所建立的蛋白质SDS-PAGE分析方法可用于螺旋藻分类及突变体鉴定.