苹果茎沟病毒研究进展

苹果茎沟病毒在仁果类果树上的感染较普遍,且一般不产生明显症状,给生产带来严重损失。对于该病毒病害,较为可行的控制措施是实行检疫控制其扩展和培育与栽培无病毒苗木。较为系统地综述了国内外苹果茎沟病毒的分布与危害、生物学特性、基因组结构与序列分析及检测方法等方面的研究进展。     

用离体微嫁接法快速检测苹果潜隐病毒

用离体微嫁接法同时检测了苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒和苹果茎痘病毒。由于苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒，症状是在叶部表现黄斑，试管内不易观察，病毒检出率较低，检测带毒率分别为37.5%和61.1%，在检测苹果茎痘病毒上取得成功，检出率达81.3%以上。用木本指示植物跟踪检测了带毒品种，试验证明采用离体微嫁接法检测果树病毒比用木本指示植物检测所需时间短，病毒检出率基本一致。     

利用苹果组培小苗繁育多侧枝大苗的关键技术

近年来,陕西省千阳县依靠农民专业合作社及生产大户利用苹果组培小苗(图1)繁育多侧枝大苗(图2),具有成本低、繁育速度快、苗木质量好等优点。其技术措施如下:1选地选择自然条件优越的区域作为育苗地,要求20年内未栽植过苹果、梨等仁果类果树,周围1千米内没有仁果类的有病毒果园,且地面平整、地势高燥、土壤肥沃、以沙壤土为宜,园地不易落霜、非冰雹带;具备充足水源,可安装滴灌设施,灌溉及时方便。     

苹果病毒的研究现状

苹果病毒病在世界各地分布广泛,目前已报道的苹果病毒有39种,中国已鉴定明确的苹果病毒有17种。根据病毒危害特点,通常把苹果病毒分为潜隐性病毒和非潜隐性病毒,其中潜隐性病毒主要有苹果褪绿叶斑病毒(A C LSV)、苹果茎痘病毒(A SPV)、苹果茎沟病毒(A SG V),非潜隐性病毒主要有苹果锈果病毒(A SSV)、苹果花叶病毒(A PM V)。苹果病毒侵染果树,主要表现为叶片失绿、畸形、生长量减少、产量下降、品质变劣等现象,严重时树体死亡。1苹果主要病毒的特性1.1苹果褪绿叶斑病毒(A pple chlorotic leaf spotTrichovirus)曾被归为长线形病毒…     

3种苹果潜隐病毒多重RT-PCR检测体系的建立

 研究建立了能同时检测苹果茎沟病毒(Apple stem grooving virus, ASGV) 、苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus, ACLSV) 和苹果茎痘病毒(Apple stem pitting virus, ASPV) 的多重RT-PCR方法。以复合感染3种病毒的苹果‘望山红’组培苗为试材, 对影响多重PCR的反应条件进行了一系列的调整和优化。多重RT-PCR体系灵敏性测验显示, 最低能从RNA总量187.5 ng的样品中检测3种病毒的存在。多重RT-PCR产物的序列与报道的病毒序列有较高的同源性, 12个田间苹果样品的多重RT-PCR检测结果与单一PCR的结果一致, 初步证明了多重RT-PCR检测的准确性。     

我国仁果类三属果树色染体研究概述

我国是世界上果树种质资源主要的起源中心之一。仁果类果树种类丰富,蔷薇科(Ro-saceae)的苹果属( Mains)植物,世界公认为36种,我国原产的就占24种。世界梨属(Ryrus)植物有30余种,至少东亚种群的大多数种原生于我国,共13种之多;山楂属(Cratagus)植物我国原产也有17种。在这些原产果树中,有许多优良的砧木,也选育了众多的优良品种,为我国现代果树栽培和果树育种奠定了坚实的物质基础。 自本世纪二十年代以来,国外对苹果属中的大多数种、梨属中的大多数种以及山楂属中的少数种的染色体数目进行了研究。随着研究水平的提高和研究手段的改善,我…     

两步多重RT-PCR快速检测苹果潜隐性病毒

【目的】为建立检测3种苹果潜隐性病毒更为快速准确的方法,【方法】以携带苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的成龄苹果树韧皮部为试材,根据基因库中苹果茎痘病毒(Apple stempitting virus,ASPV)的外壳蛋白基因序列,设计合成了2对特异性引物,分别与合成的苹果茎沟病毒(ASGV)引物和苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)的引物组合配伍,筛选出最佳的引物对组合。对cDNA的合成所用引物和总RNA模板进行遴选和量化,对PCR过程中cDNA的用量、引物对的终浓度、退火温度等主要影响因素进行优化。【结果】结果表明,反转录引物为Oligo(dT)18、总RNA 0.1～3.0μL时,可以得到较好的cDNA;ASPV-FR与ASGV-Pch、ACLSV-Pch引物组合优于ASPV-Pch,并且筛选出4组最佳的终浓度处理组合;cDNA用量为2.0~4.0μL、退火温度为50.0~52.9℃、循环数为35时,扩增效果较好。采用优化的多重RT-PCR体系对采自陕西和山东两省的样品进行检测,并用3种病毒的单重RT-PCR体系进行验证。【结论】结果呈现高度一致性,充分印证了该多重RT-PCR体系的准确性,适用于大量样品的快速检测。     

苹果无融合生殖砧木病毒检测

利用RT-PCR方法检测无融合生殖砧木采种母树的带毒状况。结果表明,平邑甜茶、小金海棠、青砧一号、青砧二号等砧木的采种母树不同程度带有苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)等3种潜隐病毒,带毒株率0~13%。应当重视由此可能给苗木繁殖和研究利用带来的不良影响。     

小金海棠高效脱毒检测体系的探讨

 以小金海棠组培苗为试材，对其进行苹果潜隐病毒接种、脱毒及检测方法的研究，探讨了一种针对小金海棠的快速高效的脱毒检测体系。结果表明，恒温38℃处理20 d或变温38／22℃处理30 d并结合茎尖培养，对脱除小金海棠苹果褪绿叶斑病毒和苹果茎沟病毒的效果较好。离体条件下，指示植物‘苏俄苹果’和‘弗琴尼苹果’不适合检测该两种病毒，而用PAS—ELISA法检测结果较灵敏。     

A蛋白酶联法检测苹果褪绿叶斑病毒和茎沟病毒的研究

<正> 苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是苹果的两种主要潜隐病毒,严重影响苹果的产量和质量。检测苹果潜隐病毒的传统方法是木本指示植物二重芽接鉴定法,但这种方法耗工费时。由于两种病毒不稳定和在苹果树中含量低,用经典的血清学方法不能直接检测苹果植株粗汁液中的病毒。近几年国外采用酶联免疫吸附法(EL     

苹果和梨在整形修剪方面的十个不同点

苹果和梨在整形修剪方面的十个不同点苹果和梨同属蔷薇科果树，按果树栽培学分类法，又同属于仁果类果树，两者在生长结果习性方面，的确有一些共同点。因此有些人就认为，苹果和梨在整形修剪方面也没有多大差别。其实，这是误解，是片面的，尤其在一些新发展的梨产区，按...     

苹果无病毒原种培育研究通过鉴定

<正> 由河北农业大学园艺系、河北省农林科学院昌黎果树研究所和完县林业局合作研究的苹果无病毒原种培育研究课题,经刘福昌、钱菊梅、蔡祝南、陈巽贞、高暄、王培等国内专家、教授审查、验收,于今年6月16日在河北农大通过鉴定。该课题组研究人员经过6年的持续努力,目前已获得了以红富士为主的一套苹果无病毒原种材料(脱除了苹果褪绿叶斑病毒、茎痘病毒、茎沟槽病毒),包括:长富—2、秋富—1、金晕、王林、金冠,同时,通过检测确认了乔纳金、首红、金矮生、M_7M_(26)、MM_(106)等搜集到的无病毒材料的可靠性。     

杏的脱毒及组培快繁研究

杏(Prunus arm eniaca L.)作为主要核果类果树树种之一,在世界各大洲都有栽培。随着研究的深入,研究人员发现,给杏树生产带来严重危害的是病毒,并且已应用ELISA方法检测出杏树病毒有李子苦痘病毒(PPV)、李枯叶坏死坏斑病毒(PNRSV)、李矮缩病毒(PDV)、苹果花叶病毒(ApM V)、苹果     

保加利亚人民共和国的果树栽培

保加利亚人民共和国的果树栽培是从1945年开始有计划的发展。到1957年栽培面积已达11万公顷,大部分栽培区属于合作经营。最近二十年在集约化的基础上对这些果园进行了改建.在合作经营的部分栽培区建立了大型的果树栽培农工联合企业(全国有150个农工联合企业)。 据1976年统计,全国有14.5万公顷果园,其中7.7万公顷已经结果。大部分(12.5万公顷)果园集中在国营部门。主要的果树是苹果(30%)、李子(20%)、桃(15%)、杏(8%)、欧洲甜樱桃(7%)、梨(5%)和樱桃(5%)。每公顷平均产量125公担的仁果类果实,其总产量每年达39万吨,每公顷平均产量90公担的核…     

云南省苹果主要病毒与类病毒的调查与检测

系统调查了云南省昭通、马龙与丽江3个苹果产区主栽品种叶部病毒病与果实锈果病的发生情况。结果表明,苹果叶部病毒病与果实锈果病在云南省3个产区都有发生,不同产区与品种发生有明显差异。应用ELISA与RT-PCR方法检测来自以上3个产区苹果主栽品种的主要病毒与类病毒带毒率,结果显示:苹果花叶病毒(ApMV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)与苹果锈果类病毒(ASSVd)分布普遍,在昭通、马龙与丽江3个产区均检出,检出率最高的是苹果锈果类病毒(ASSVd),苹果茎沟病毒(ASGV)只在昭通、丽江产区检出;不同品种对不同病毒与类病毒具有不同的检出率,苹果锈果类病毒检出品种最多,检出率也最高,苹果花叶病毒次之,苹果茎沟病毒与苹果褪绿叶斑病毒分别只在少数品种检出,检出率不高。研究结果为云南省建立无病毒种苗检测体系、指导病毒病防控提供参考。     

苹果锈果类病毒实时荧光PCR检测方法的建立

【目的】建立苹果锈果类病毒(ASSVd)检测灵敏的方法。【方法】根据Gen Bank中ASSVd的RNA序列设计特异性引物ASSVd-F和ASSVd-R,利用实时荧光PCR方法对其进行检测,并对体系的特异性、灵敏性及适用性进行验证。【结果】实时荧光PCR体系能检测至1×10-6的模板浓度,而常规RT-PCR只能检测至1×10-4,由此可知,实时荧光PCR体系灵敏度高于常规RT-PCR 100倍;引物特异性强,能特异检测ASSVd,对苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)均不能检出;适用性广,可检测出植物不同部位的ASSVd。【结论】所建立的方法能够灵敏检测ASSVd,特异性强,适用性广。     

苹果脱毒苗鉴定和无毒苗栽培验收会在山东省寿光县召开

中国农科院果树研究所、农业部植保总站及山东省植保总站等单位主持的苹果病毒脱除和鉴定技术研究以及无毒苗栽培示范推广项目,已于1990年8月上旬在山东省寿光县通过了国内同行专家验收鉴定。采用热处理与茎尖培养相结合的方法,可以提高脱毒苗株率;对于苹果潜隐性病毒,如褪绿斑病毒、茎痘病毒及茎沟病毒,可以分别用R12740-7A(苏俄苹果)、 Radiant(光辉)及 Virginia crab(弗及尼亚小苹果)作为有效的鉴检指示植物。山东省已先后在寿光、临沂、烟台、济南建立无毒苹果母本园9处,占地79.9亩,栽植母树3894株(14个品种),1990年底推广无毒苗达3.7…     

苹果锈果类病毒RT-PCR检测体系的建立

为了开发苹果锈果类病毒(ASSVd)快速、准确的RT-PCR检测方法,以感染苹果锈果类病毒的田间苹果枝条为试材,对苹果锈果类病毒RT-PCR反应体系和程序进行选择和优化,利用优化的检测体系对保定市曲阳县苹果园苗木及3~5年生母本树苹果锈果病的发生情况进行检测,验证该体系的可靠性。结果表明:自行设计引物ASSVd QCxin3特异性最好,优化体系灵敏度达到能够检测3.75 ng新鲜样本中的病毒,可准确、灵敏检测苹果锈果类病毒田间样本;曲阳县苹果园48株苗木中携带苹果锈果类病毒13株,带毒率为27.1%;18株母本树中携带苹果锈果类病毒5株,带毒率为27.8%。     

梨树主要病毒的检测方法

梨树主要病毒的检测方法吴雅琴（河北省农林科学院昌黎果树研究所０６６６００）随着我国果树无毒化栽培的全面推广，梨树病毒病的研究已成为当务之急。据中国农业科学院果树研究所初步调查鉴定，在我国梨的主栽品种中，带有梨环纹花叶病毒、梨脉黄病毒、苹果茎沟病毒和?..     

苹果潜隐病毒脱除技术的改进研究

<正> 目前,已报道侵染苹果的病毒有30余种,其中大部分可在苹果的叶、果实和枝条上引起明显症状。另外,有些病毒在栽培品种上呈潜伏性感染,又称潜隐病毒。已经鉴定出我国苹果潜隐病毒有3种:苹果褪绿叶斑病毒(A-CLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)和苹果茎痘病毒(ASPV)。潜隐病毒由于其潜隐性,在栽培中不易被发现清除,我国苹果主要栽培区上述3种苹果潜隐病毒的感染株率达90％以上,每年使苹果减产约40％～73％。