摩拉、尼里水牛与本地水牛成胚后的胚胎移植研究

为了在建立稳定的水牛胚胎体外生产技术的同时,开展胚胎移植技术研究,探讨水牛体外胚胎质量、安全性、移植方法以及移植效果。实验采用摩拉（Murrah）、尼里／拉菲（Nili／Rivi简称尼里）水牛冻精与本地水牛卵母细胞进行人工体外受精生产的鲜胚和冻胚,分别以本地母水牛、摩拉和尼里母水牛为受体,进行胚胎移植。结果表明：鲜胚移植受胎率为44．40％（36／81）,平均每头受体移胚1．83次,产下36头犊牛,繁殖率为83．7％（36／43）;冻胚移植受胎率为32．0％（8／25）,平均每头受体移胚1．67次,产犊8头,繁殖率为53．3％（8／15）,犊牛全部成活,其中双胞胎3例,采用人工授精与胚胎移植共生的双胞胎1例。     

试管水牛技术研究

水牛卵巢卵母细胞经体外成熟培养、体外受精和受精卵在体外培育的胚胎移植给受体母水牛,结果表明：①卵母细胞体外培养成熟率71．6％、受精分裂率52．8％、囊胚率(占授精卵母细胞)27．2％。②双鲜胚移植受胎率36．2％(30．0％～44．8％),双胎率24％;双冻胚移植受胎率20．0％;生产试管水牛24头,全部成活,其中冻胚试管水牛3头;双胞胎3对。③胚胎冷冻方面：采用玻璃化胚胎冷冻技术,冷冻胚胎解冻后存活率64．4%。     

奶水牛活体采卵胚胎移植的应用

主要探讨利用胚胎移植技术加快优良奶水牛的繁育。本研究共进行175头次胚胎移植,受胎44头,流产8头,产下36头健康犊牛,受胎率为25.14%(44/175),流产率为18.18%(8/44)。数据分析,受胎率方面,后备牛>干奶牛>挤奶牛;鲜胚移植受胎率优于冻胚;自然发情移植受胎率与同期发情移植受胎率相差不显著;两种同期发情（CIDR+PG和GnRH+PG+GnRH）方法处理移植受胎率相当。流产率方面,挤奶牛>后备牛>干奶牛;鲜胚移植流产率与冻胚移植流产率基本一致;自然发情流产率小于同期发情流产率;CIDR+PG移植流产率高于GnRH+PG+GnRH移植流产率。结论：OPU胚胎移植技术可用于育种扩群。胚胎移植前后,加强饲养管理,减少应激,纠正内分泌平衡,有利于提高受胎率和降低流产率,获得更好的经济效益。     

影响水牛体细胞克隆胚胎移植的因素

从不同发情方式、不同胚胎类型、不同胚龄以及不同季节来探讨影响水牛体细胞克隆胚胎移植的效率。结果显示,自然发情与同期发情方法对水牛体细胞克隆胚胎的移植受胎率有显著影响。鲜胚和冻胚移植后受胎率没有显著差异,其受胎率分别是9.79%、14.5%。在移植中,不论是鲜胚还是冻胚,6日龄胚胎移植受胎率最高。而且不同日龄(5、6、7、8～10d)克隆胚胎移植受胎率差异不显著(鲜胚P=0.260 7,冻胚P=0。065 2)。克隆胚胎在秋季移植时受胎率最高,受胎率是16.06%,比其他季节高,且差异显著(P<00.05).其次是春季,但夏季和冬季克隆胚胎移植后受胎率差异不显著(P>0.05)。结果表明,水牛体细胞克隆胚胎在胚胎移植中是可行的,但效率比较低。     

不同胚胎移植方法对天祝白牦牛受胎率的影响

为提高胚胎移植技术在牦牛上的运用效果,选用51头甘肃省天祝县健康黑牦牛作为受体,以纯种天祝白牦牛作为供体生产胚胎,分别对同期发情处理和自然发情的受体牛进行鲜胚和冻胚移植试验。结果,同期发情处理的受体牛鲜胚移植的受胎率显著高于冻胚移植的受胎率(P0.05),分别为52%和38.5%;在自然发情受体牛的胚胎移植中也得到了相似结果,鲜胚和冻胚的移植受胎率分别为60%和50%,同期发情处理牛的平均妊娠率则低于自然发情受体牛的平均妊娠率(P0.05),二者分别为47.5%和54.5%。结论,牦牛鲜胚移植的受胎率明显高于冻胚移植的受胎率,而且自然发情受体牛的受胎率高于同期发情处理牛。     

牛胚胎移植技术发展概况

家畜胚胎移植是家畜胚胎工程的重要组成部分,目前已成为一项比较成熟的生物技术。我国目前在牛的超数排卵、同期发情、胚胎移植、胚胎冷冻、胚胎分割、性别鉴定等技术已与国外基本同步。在正常情况下,平均每头供体牛获可用胚5．6枚,鲜胚移植受胎率为55％～70％,冻胚移植受胎率为45％～60%．每年移植受体牛在5000头以上。     

应用体细胞克隆技术和胚胎移植技术生产克隆水牛

为了解决克隆水牛技术在供核细胞、受体细胞中的选用问题,探索不同条件对移植受孕的影响,完善克隆技术的理论体系。试验以摩拉奶水牛的耳成纤维细胞作为供核细胞,本地水牛卵母细胞为受体胞质进行细胞克隆构建重组胚胎;将发育5～10 d的重组胚胎移植于本地水牛、杂交水牛的子宫内,观察不同发情方式、胚胎类型、胚龄及季节对移植受孕的影响。结果表明:水牛的克隆胚胎妊娠率较低,分别为12.05%、12.04%、13.95%。自然发情和同期发情对克隆胚胎移植受胎率的影响差异不显著;鲜胚胎移植186头,受胎22头,受胎率为11.83%(22/186);冻胚胎移植174头,受胎23头,受胎率为13.22%(23/174)。克隆水牛从出生至12月龄体尺增长明显高于本地水牛;水牛克隆胚胎移植受胎在秋季最好,秋季受胎数占全年的53.33%,显著高于其他季节。     

繁殖技术在盈江县水牛改良中的应用

文章对1997-2005年人工授精技术、2002年胚胎移植技术、同期发情技术在盈江县水牛生产中的应用效果进行了总结.结果1997-2005年盈江县应用水牛人工授精改良德宏水牛11 431头/次,受胎率50.81%;改良二品种杂交水牛660头/次,受胎率40.16%,德宏水牛的受胎率高于(P＞0.05)二品种杂交水牛,但差异不显著(P＞0.05);用国产氯前列烯醇(PG)0.6mg/头·次处理后,水牛的同期发情率经产水牛高于青年水牛,(P＞0.05),杂交水牛高于德宏水牛(P＞0.05),体重401～530kg水牛高于体重300～400 kg水牛(P＜0.05);发情明显水牛的可用率极显著高于发情不明显的水牛(P＜0.01).经超排所获4枚可用鲜胚分别移植3头受体,90 d检查时的妊娠率为33.33%,但最终未产犊.     

马鹿胚胎移植技术的试验研究

以新疆塔河马鹿为供体鹿和受体鹿 ,经过同期发情、超数排卵、人工授精、胚胎采集和胚胎移植后 ,供体鹿 3年共超排 2 7头 ,获可用胚 116枚 ,同期发情处理受体母鹿 2 2 8头 ,发情母鹿 171头 ,同期发情率 75 % ,采用人工输精后 ,进行胚胎移植 ,其中人工授精受胎率平均达 5 5 .7% ,移植 6 8头 ,受胎数 36头 ,鲜胚移植受胎率 5 2 .9%。     

水牛胚胎移植技术研究试验报告

选用摩拉杂交水牛一代为供体,进行超数排卵,用摩拉水牛冻精进行人工授精生产水牛胚胎。试验共超排供体牛7头,非手术法冲胚5头,获胚胎7枚及未受精卵13枚,胚胎中可用的A级胚2枚,B和c级胚各1枚,退化胚3枚;移植受体牛4头。     

中国水牛试管繁殖技术获重大突破

正当人们为我国第一例克隆奶牛在深圳诞生80分钟后便意外夭折而感到惋惜时,中国农业科学院广西水牛研究所却传来了令人振奋的消息:研究人员用完全体外化受精技术受孕的两头母水牛最近产下了3头试管杂交水牛,其中2头小牛犊是龙凤双胞胎.另外有7头利用这一技术受孕的母水牛已进入临产期,即将分娩. 这是自1990年在印度诞生世界上第一头试管水牛以来,科学家采用完全体外化受精培养胚胎移植技术,第一次成功地使多头水牛受孕,并产下多头试管杂交水牛. 据了解,上世纪90年代初日本继印度之后也曾经育成1头试管水牛.1993年,广西水牛专家蒋和生博士主持的研究小组成功地育成了中国第一例试管水牛,但由于这项技术难度高,此后我国再也没有新的试管水牛诞生.中国农业科学院广西水牛研究所于2000年生产杂交水牛胚胎,给20头母牛移植,其中有12头母牛移植成功、妊娠,2头受孕母牛在经过310天正常孕期后生产,其它怀孕的母牛也将在未来一段时间陆续分娩. 主持这项研究工作的研究员黄右军说:"在这项技术上,我们取得了两方面的重大突破,首先是关键技术指标--囊胚率,我们达到28.1 %,远远高于国际公认的23 %～24 %的先进指标,使得移植成功率达到60 %.另外,双胎率可望达到20 %,而自然条件下水牛只有0.09 %的双胎率". 中国农业科学院广西水牛研究所所长、副研究员杨炳壮认为,这项成果将大大加快良种水牛繁殖的速度,产业化前景十分广阔.     

利用杂交牛进行胚胎移植及其效益分析

2004年12月到2005年3月,在广西贺州西牛牧业公司牛场选择10头次西门塔尔牛做超数排卵处理,超排成功率90%(9/10),共获得胚胎(包括未受精卵)102枚,可用胚胎64枚;可用胚胎平均7.1枚/头。利用从山东购进的杂交牛240头作受体进行西门塔尔牛和荷斯坦牛的胚胎移植,结果西门塔尔牛鲜胚移植受胎率平均55%,冻胚移植受胎率平均45.8%;荷斯坦牛冷冻胚胎移植受胎率为41.5%。目前已经产犊134头,其中母犊68头,公犊66头。对其经济效益进行分析,效益较佳。     

梅花鹿新鲜和冷冻胚胎移植技术的研究

实验对12头供体母鹿进行超数排卵,27头受体同期发情后进行胚胎移植,建立梅花鹿胚胎移植技术体系。同期发情经埋置CIDR处理,超数排卵的供体每头分8次注射总剂量320 mg的FSH。供体发情鉴定后8~12 h通过直肠把握法进行人工授精。结果表明:冲胚时的胚胎回收率为74.39%(61/82),所获胚胎中,囊胚、桑椹胚、2-细胞、未受精卵所占的比例分别为1.64%(1/61)、77.05%(49/61)和1.64%(1/61)、19.67%(12/61)。研究将20枚新鲜胚胎移植给14头受体;将28枚胚胎经细管法玻璃化冷冻、解冻后移植给13头受体。鲜胚移植的受体妊娠率为85.71%(12/14),产仔率为64.29%(9/14);冻胚移植的受体妊娠率为61.54%(8/13),产仔率为53.85%(7/13),二者没有显著性差异(P0.05)。     

皮埃蒙特牛超数排卵及胚胎移植试验

用国产激素ＦＳＨ、氯前列烯醇对皮埃蒙特纯种肉牛进行二批次共４头超数排卵，回收胚胎２０枚，平均每头采卵５枚，平均每头采可用胚３．７５枚，超排有效率７５％，用南阳母牛作受体牛，共移植鲜胚１０枚，鲜胚移植受胎率５０％。     

黄体数量对绵羊胚胎移植成功率的影响

黄体对胚胎移植的妊娠率起着至关重要的作用,黄体质量好坏对妊娠率的影响已多有报道,但黄体数量对鲜胚和冻胚妊娠率的比较研究鲜有见报道。本实验在相同季节、饲养管理、同期发情和胚胎移植条件基本相同的情况下,进行了受体移植侧黄体数量对鲜胚和冻胚移植妊娠率影响的研究,实验结果表明,(1)受体移植侧3个黄体对鲜胚移植妊娠率高于2个黄体和1个黄体,妊娠率分别为56.60%、56.32%和62.50%,但各组间差异不显著(P0.05),移植侧1～3个黄体对鲜胚妊娠率稳定;受体移植侧黄体数量1或2个对冻胚移植妊娠率分别为42.24%和45.19%,无显著影响(P0.05),但2个黄体妊娠率高于1个黄体,移植侧1～2个黄体对冻胚移植妊娠率稳定;(3)只要黄体质量好,移植侧1～3个黄体都可以进行移植,本研究进一步量化了移植侧黄体数量对鲜胚和冻胚移植妊娠率的影响。     

胚胎移植（综述）

牛的胚胎移植(一)现状众所周知,美国、加拿大以及西欧一些国家牛的胚胎移植已经商业化.在西欧每年移植2.5万头,在北美每年移植10万头以上,其中70%是肉牛,其余是奶牛.非手术移植鲜胚受胎率达60～70%(移植后40天妊检),冻胚受胎率为55～65%;手术法     

引入南非杜泊绵羊冷冻胚胎移植的效果

本文就引入南非杜泊绵羊冷冻胚胎移植的效果进行了报道。共引入冷冻胚胎 2 0 0枚 ,分夏、秋两次进行了移植。用孕激素处理受体羊共 172只 ,36h内有 16 4只发情 ,同期发情率 95 .35 % ;平均移植成功率 36 .84 % ,其中夏季较低 ,为 2 5 .0 % ,秋季较高 ,为 4 4 .5 7% ,差异极显著 (P <0 .0 1) ;移植冻胚数 (单双胚 )对移植效果有影响 ,双胚移植成功率为 4 9.0 2 % (2 5 / 5 1) ,单胚为 30 .6 9% (31/ 10 1) ,差异显著 (P <0 .0 5 ) ;产羔用胚率 ,单胚 30 .6 9% (31/ 10 1) ,双胚 2 9.4 1% (30 / 10 2 ) ,差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,表明移双胚比移单胚可提高移植成功率 ,但不节省胚胎。杜泊羔羊具有典型的肉用体型 ,生长发育快 ,适应性强 ,颇有开发价值。     

黑头萨福克绵羊胚胎玻璃化快速冻胚移植效果分析

本试验应用玻璃化胚胎冷冻方法进行黑头萨福克绵羊胚胎冷冻和移植,比较了受体羊卵巢上黄体数量、受体羊的体况、移植胚胎的数量对受体受胎率的影响。受体羊卵巢上有一个黄体的移植受胎率42.7%与有2~3个黄体受体羊移植受胎率44.4%无显著差异;受体的体况对受胎率有显著影响,中上等(含中等)体况水平的受体的受胎率47.2%显著高于中下等的受体的受胎率43.0%(P0.05);使用玻璃化胚胎冷冻法的冷冻解冻胚胎移植受胎率54.2%显著高于常规胚胎冷冻法的冻胚移植受胎率44.0%(P0.05);移植1枚桑葚胚(1M)的受胎率47.5%略高于移植1枚囊胚(1B)的受胎率44.3%(P0.05)。因此,受体羊黄体数、冷冻桑葚胚和囊胚对胚胎移植受胎率没有显著影响,而受体中上等(含中等)体况水平和玻璃化胚胎冷冻法冷冻解冻胚胎移植受胎率显著提高。     

进口绵羊冷冻胚胎在非繁殖季节的移植试验

在非繁殖季节 5～ 7月份利用从澳大利亚进口的三个品种Dorset、Texel、Suffork绵羊冷冻胚胎对 419只东北半细毛羊进行手术法移植 ,同年 10～ 12月份共得三个品种羔羊 2 0 7只 ,受胎率达 43 2 %,产羔率达 114 3 6%。同时得出以下研究成果 :①移植双胚受体羊的受胎率 ( 5 5 1%)和产羔率 ( 196 3 %)明显高于移植单胚的受胎率 ( 4 2 16%)和产羔率 ( 92 3 1%) (P<0 0 5 ) ;②移植A级胚胎与B级胚胎受体羊的受胎率 ( 4 4 5 6%vs10 1 164 %)与产羔率 ( 4 3 85 %vs13 2 %)之间差异不显著 (P>0 0 5 )。     

安格斯牛胚胎移植的试验研究

以沈阳市奉东优良畜禽繁育基地饲养的纯种安格斯牛为供体,以基地和东陵区农户饲养的杂种牛为受体,进行胚胎移植,共获得169枚胚胎,其中可移植胚胎95枚,平均每头（次）获得可用胚胎数5．9枚。将13枚鲜胚和16枚冻胚移植给同期发情的受体牛,结果为鲜胚的产犊率为38．5％（5／13）,冻胚为43．8%（7／16）;将61枚冻胚移植给自然发情的受体牛时,产犊率为42．6％（26／61）;冻胚的总产犊率为42．9％（33／77）。