马铃薯脱病毒与快繁技术研究

[目的]获得马铃薯脱毒试管苗及使长期保存导致生长势退化的试管苗复壮。[方法]设置不同的灭菌方法和不同的培养基进行马铃薯茎尖脱病毒及脱毒苗的快繁技术研究。[结果]芽外植体灭菌效果以质量分数5%的NaClO灭菌时间2 min与0.1%的HgCl2灭菌时间3 min组合效果最佳;茎尖诱导的最佳培养基为MS+GA30.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L,平均诱导率为58.25%;从MS液体和MS固体2种不同的培养基来看,MS液体培养基可以起到壮苗的作用;从扦插和平铺2种不同接种方式来看,平铺的接种方式可以加快脱毒苗繁殖速度。[结论]为马铃薯的组织培养快繁提供了参考依据。     

甘薯茎尖脱毒培养技术研究

[目的]探讨利用甘薯茎尖分生组织获得脱毒苗以及脱毒苗鉴定的方法。[方法]以甘薯茎尖分生组织为培养对象,通过蔗糖及外源激素单因素试验研究甘薯茎尖脱毒培养技术。[结果]甘薯茎尖分生组织生长培养基为MS+6-BA 0.50 mg/L+ NAA 0.10 mg/L+蔗糖40 g/L+琼脂6.5 g/L,试管苗生根培养基为1/2MS+NAA 0.20 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂6.5 g/L。在茎尖生长培养基上对25个甘薯品种的茎尖分生组织进行培养,结果表明,8个品种的出苗率为50.0%~79.3%,16个品种的出苗率达80.0%以上,其中,5个品种的出苗率为100.0%。在生根培养基上,试管苗生根率达100%,根多而粗壮,茎叶生长旺盛。试管苗不用炼苗,可直接从培养瓶中移栽至细河沙中,成活率达100%。以巴西牵牛作为指示植物,采用靠接法对试管苗进行脱毒鉴定,脱毒率为79.1%。[结论]该研究为甘薯茎尖脱毒苗生产提供适宜的培养基配方和简便易行的脱毒苗鉴定技术。     

大蒜茎尖脱毒及组织培养研究

采用茎尖分生组织培养技术,获得了大蒜无病毒试管苗。通过激素配比试验,筛选出最佳的培养基组成,进行脱病毒苗的快速繁殖。结果表明:诱导茎尖出芽的最适培养基为MS 6 BA 1.5mg/L NAA 1.0mg/L,诱导生根的最适培养基为MS IAA 2.0mg/L.     

草莓试管内诱导匍匐茎和高温处理结合茎尖培养脱毒技术研究

【目的】获得可用于生产的无病毒草莓种苗。【方法】在试管内对深山草莓花瓣愈伤组织分化产生的优良变异新品种的试管苗进行匍匐茎诱导,并采取试管内高温处理结合茎尖培养对该品种进行脱毒研究,应用均匀设计法对各步骤主要影响因子进行优化筛选。【结果】该草莓新品种试管苗匍匐茎诱导的适宜培养基为:LS+6-BA1.00mg/L+GA31.90mg/L+KT1.00mg/L,其诱导率为99.5%以上;将含有匍匐茎的试管苗在试管内于56℃条件下培养85d后,切取1mm的茎尖在培养基MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L中进行茎尖愈伤组织诱导,然后将茎尖愈伤组织转接到培养基MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.05mg/L中进行愈伤组织芽苗再分化培养,对再生芽苗进行病毒检测,脱毒率为100%。【结论】利用试管内高温处理结合茎尖脱毒的方法可以完全脱除草莓病毒,从而建立了草莓脱毒体系。     

甘薯茎尖脱毒与快速繁殖技术研究

甘薯茎尖分生组织脱毒培养与茎段快速繁殖,对培养条件和几种主要培养因子的反应十分敏感.以MS为基本培养基对甘薯茎尖分生组织与茎段进行不同激素种类和浓度试验,结果表明,IAA:6-BA为1:5～20诱导效果好,最佳诱导分化培养基为:MS+6-BA1mg/L+IAA0.1～0.2 mg/L+GA30.1 mg/L;试管苗株系经指示植物、NCM-ELISA法检测,获得了6个品种的脱毒苗.脱毒苗茎段试管快速繁殖时,不同品种之间有差异,单独使用IAA或与GA3结合使用,在28℃、光照12 h/d、液体培养效果好.     

东方百合快繁培养基优化与脱毒技术研究

摘 要：【研究目的】为实现百合种球的国产化,繁育大量的优质种球,笔者以东方百合的西伯利亚和索邦品种为材料,研究东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较不同的组织培养方法的脱毒效果。【方法】设置不同的激素浓度梯度筛选东方百合茎尖诱导、继代增殖和生根的最佳培养基,并比较新鲜百合球茎尖培养、冷藏处理百合球的茎尖培养、鳞片培养、鳞片扦插苗茎尖培养和试管苗茎尖培养等5种组织培养方法的脱毒效果。【结果】试验结果表明,百合茎尖诱导的适宜培养基为MS + 2.0mg/L 6-BA + 0.1mg/L NAA,芽形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA,苗形成的适宜培养基为MS + 1.0mg/L 6-BA + 0.08mg/L NAA,生根的适宜培养基为1/2MS + 0.4mg/L NAA + 4%AC (Active Charcoal)。病毒检测表明试管苗茎尖培养的脱毒效果最好,但成活率较低;冷藏处理百合球的茎尖培养的脱毒效果也较好且成活率较高。【结论】筛选的东方百合各阶段的培养基配方能满足东方百合快速扩繁的技术要求,茎尖培养在东方百合依然是较好的脱毒方法。     

江西省名优地方品种螺田大蒜脱毒快繁研究

[目的]研究螺田大蒜脱毒快繁技术。[方法]以江西名优地方品种螺田大蒜为试验材料,通过茎盘分生组织的培养,获得了螺田大蒜试管苗。通过激素配比试验,筛选出大蒜脱毒苗快速繁殖的最佳培养基。[结果]大蒜茎盘的不定芽诱导率随6-BA浓度的增加而增加,随NAA浓度的增加而降低,培养基中高比例的6-BA有利于螺田大蒜茎盘不定芽分化。利用大蒜茎盘诱导出芽的最适培养基为MS＋6-BA3．0mg／L＋NAA0．1mg/L,诱导生根的最适培养基为^俗＋NAA0．5mg/L.生根后形成试管苗,通过对试管苗的病毒检测,选择不带病毒的植株,移栽得到小鳞茎。[结论]螺田大蒜的脱毒快繁技术可有效去除大蒜的病毒,恢复其种性。     

唐昌蒲茎尖脱毒的研究

1987年～1988年作者以唐昌蒲的茎尖(0.2～5 mm)为外植体,接种于MS+BAl mg/L+NAA1 mg/L脱分化培养基上,诱导其产生愈伤组织。一个月后,将愈伤组织接到N_6+BA0.5mg/L+NAA1 mg/L+0.4～0.6％活性炭的再分化培养基上诱导其生根、成苗。所得试管苗经鉴定脱毒率可达70.8％,其脱毒率大小与接种的茎尖大小有直接关系,茎尖越小,脱毒率越高。茎尖大小与试管苗的成苗途经、成苗率、丛生苗率有一定关系。     

山药茎尖脱毒试管苗分化培养基的筛选

[目的]筛选山药茎尖脱毒苗分化培养基配方。[方法]选用MS为基础培养基,6-BA、2,4-D、NAA为激素处理因素和不同激素浓度处理水平的3因素3水平的试验设计,进行了山药茎尖脱毒苗分化培养基的筛选研究。[结果]MS＋2.0mg/L6-BA＋1.0mg/L2,4-D＋3.0mg/LNAA为山药茎尖脱毒苗最佳分化培养基。[结论]该培养基能达到山药茎尖离体脱分化与分化之间的一种良好的平衡,是一种进行山药茎尖脱毒苗培养适宜的分化培养基。     

麝香石竹的组培脱毒技术研究

[目的]探索麝香石竹的组培脱毒技术。[方法]以麝香石竹0.3~0.4 mm长的茎尖为外植体,在分化培养基中诱导丛生芽,丛生芽进行继代培养后,将幼苗进行病毒检测,将无毒幼苗保留继续繁殖,然后将无毒的幼苗移植到生根培养基中诱导生根。[结果]不同大小的香石竹茎尖对丛生芽的诱导有较大影响,以0.3 mm茎尖为最佳。丛生芽的诱导以MS+6-BA 2.0 mg/L+IAA 2.0 mg/L、根的诱导以1/2MS+IAA 0.5 mg/L(或IBA 0.5 mg/L)为最佳培养基。田间比较试验表明,与未脱毒麝香石竹相比,脱毒麝香石竹花的颜色鲜艳,切花品质好,产花量高,花裂萼少。[结论]该研究为扩大麝香石竹的繁殖提供了技术保障。     

长柄扁桃茎尖离体培养研究

[目的]探索长柄扁桃茎尖离体培养技术。[方法]以长柄扁桃试管苗茎尖为材料,接种于QL培养基上,比较不同激素组合对长柄扁桃增殖的影响;将试管苗茎尖接种于不同浓度IBA和1g/L活性炭（AC）的1/2MS培养基暗培养6d,然后转入不含任何激素的1/2MS培养基中,比较不同浓度IBA对长柄扁桃诱导生根的影响。[结果]在QL培养基中分别添加0.2mg/L6-BA和0.6mg/LIBA的增殖效果较好,增殖倍数可达3.96;在1/2MS的培养基中添加30mg/LIBA诱导生根较好,生根率达93.3%。[结论]长柄扁桃试管苗茎尖适宜于增殖的培养基为QL＋6-BA0.2mg/L＋IBA0.6mg/L,试管苗茎尖诱导生根的适宜培养基为1/2MS＋IBA30mg/L＋活性炭1g/L。     

玉环剪豆茎尖脱毒与快繁技术

[目的]研究玉环剪豆的茎尖脱毒及快繁技术。[方法]选用含1～2个叶原基的玉环剪豆无菌苗茎尖为外植体,筛选其最佳脱毒培养基,并建立其组培快繁体系。[结果]玉环剪豆茎尖脱毒及诱导的最佳培养基为MS+1.0μmol/L 6-BA+0.5μmol/L NAA,成活率可达75.0%;RT-PCR检测结果显示试管苗脱毒率超过90%;脱毒苗茎段快繁的最佳配方为MS+10.0μmol/L 6-BA+0.5μmol/L NAA;脱毒苗在MS+20μmol/L NAA培养基上的生根率达80%以上。[结论]该研究建立了一套适宜玉环剪豆地方品种的脱毒快繁体系,为玉环剪豆脱毒组培苗的工厂化生产奠定了基础。     

魔芋茎尖脱毒试管苗培养基的筛选

进行了筛选适宜魔芋茎尖脱毒试管苗培养基的研究。结果表明,MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA30.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L(pH值6.0)的培养基配方茎尖膨大快、愈伤组织形成多、生长势强,是魔芋茎尖脱毒试管苗生产的适宜培养基。     

生姜脱毒快繁与病毒检测技术研究

本文以感染TMV和CMV的湘西本地小黄姜为试材,采用热处理、茎尖培养结合添加病毒唑的方法进行脱毒处理以获得无病毒的优质生姜种苗,运用RT-PCR方法检测病毒,以期探讨出生姜最适宜的脱毒快繁及病毒检测技术。结果表明,将生姜块茎置于40℃条件下催芽,显微镜下剥取0.2~0.5 mm的茎尖进行培养,最佳诱导培养基的配方为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+病毒唑40 mg/L,继代培养基中将MS培养基中的蔗糖浓度调整为80 g/L,即可实现生姜试管苗的增殖、生根及壮苗的一步培养,培养周期以30~40 d为宜。建立了一套生姜CMV和TMV 2种病毒的RT-PCR检测体系,运用该检测方法对生姜脱毒试管苗进行检测,病毒检出率为0,生姜脱毒率达100%。     

甜樱桃茎尖培养脱毒研究

以甜樱桃(PrunusaviumL.)嫩梢芽为外植体进行了茎尖组培脱毒研究,筛选出的增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L+GA30.5mg/L+AgNO35.0～10.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,丛生芽增殖数达到6个以上;确定良好的生根培养基为1/2MS+IBA0.7mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L,生根率达75.1%,移栽成活率可达80.5%以上;利用生物学方法对甜樱桃试管苗进行了初步病毒鉴定,结果表明,0.5～0.8mm茎尖培养对苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和李矮缩病毒(PDA)的脱毒率达39.4%和48.1%;0.5mm以下茎尖培养对ACLSV和PDA的脱毒率达75.8%和78.6%,证明甜樱桃试管苗0.5mm以下的小茎尖培养能有效脱除ACLSV和PDA病毒。     

秦薯5号甘薯茎尖分生组织培养脱毒及种苗快繁技术研究

为获得秦薯5号甘薯脱毒苗用于规模化种苗生产,研究了秦薯5号茎尖分生组织培养各阶段的培养基,适宜的茎尖分生组织芽诱导培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.2 mg/L+GA₃ 0.05 mg/L+蔗糖3%,适宜的试管苗增殖培养基为MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.05 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%, 1/2MS+NAA0.01 mg/L+蔗糖2%+琼脂0.6%适宜生根培养,繁殖倍数可达5.8。试管苗炼苗后移栽至泥炭与珍珠岩(2∶1)混合基质中,成活率可达98%以上。     

草莓试管内匍匐茎诱导技术

[目的]探讨试管内诱导草莓匍匐茎发生的最佳激素浓度配比,为草莓进一步脱毒奠定基础。[方法]应用均匀设计法对影响草莓丰香试管内诱导匍匐茎发生的激素浓度配比进行优化筛选,对各步骤各主要因子和水平的作用进行探讨,进而获得可用于脱毒的草莓匍匐茎茎尖。[结果]草莓丰香试管苗匍匐茎诱导的适宜培养基为：LS＋6-BA 1.00 mg/L＋GA3 1.90 mg/L＋KT 1.00 mg/L,在该培养基上其诱导率达99.5%以上。[结论]在试管内对草莓进行匍匐茎诱导是可行的。该研究为进一步茎尖脱毒奠定了基础。     

亳菊的组织培养快繁技术研究

[目的]探讨亳菊组织培养的快繁技术。[方法]以亳菊的茎尖作为外植体,以MS为基本培养基,附加不同剂量的NAA和6-BA,分别进行丛生芽诱导、增殖和生根培养,考察不同激素配比的培养基对亳菊丛生芽形成与生长的影响,以及对试管苗长势和生根的影响,并根据丛生芽的数量、长势、苗高、根条数、繁殖周期等指标,筛选适合亳菊茎尖离体组织培养的培养基配方。[结果]亳菊诱导分化的最佳培养基配方为MS＋6-BA0.50 mg/L＋NAA0.10 mg/L;增殖培养的最佳培养基配方为MS全量培养基;诱导生根的最佳配方为1/2MS＋IBA0.30 mg/L。将试管苗移栽到土∶泥炭∶珍珠岩为1∶1∶1的基质中,其成活率达99%,大田移栽的试管苗成活率可高达97.9%。[结论]该研究所筛选的培养基配方可作为亳菊脱毒培养的最优技术方案。     

越南紫薯组培快繁及FMV病毒检测

[目的]探究获得大规模的越南紫薯脱毒苗的技术方法。[方法]采用茎尖组织培养快繁技术和RT-PCR技术，探讨不同培养基成分对越南紫薯无毒茎尖的诱导、分化、增殖以及生根的影响和羽状斑驳病毒的检测，建立越南紫薯高效再生体系和病毒检测体系。[结果]筛选出最适越南紫薯不定芽产生的培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L,最佳增殖培养基为1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+CW 2.0 mg/L,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L。[结论]该试验为大田甘薯种苗FMV病毒的高效检测提供了理论依据。     

澄迈桥头地瓜组培苗快繁技术

以澄迈桥头地瓜顶芽茎尖生长点为外植体,对桥头地瓜脱毒苗技术进行研究,探讨不同激素浓度对桥头地瓜生长点诱导及壮苗生根的影响,获得一套澄迈桥头地瓜脱毒苗繁殖方法。结果表明:桥头地瓜顶芽茎尖生长点诱导不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L;继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L;最佳壮苗生根诱导培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L。