铁皮石斛茎段丛生芽的增殖培养研究

[目的]研究铁皮石斛茎段丛生芽的最适增殖培养方式。[方法]以铁皮石斛茎段为外植体,研究不同基本培养基、植物生长调节剂种类和浓度、有机添加物及培养时间对铁皮石斛丛生芽增殖的影响。[结果]MS培养基优于1/2MS、B5和N6;香蕉对丛生芽的分化有明显的促进作用;培养60 d时丛生芽的增殖倍数最高,生长势好。[结论]丛生芽的最佳增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L+香蕉100 g/L+活性炭0.5 g/L,培养时间以60 d为宜。     

一品红带芽茎段诱导丛生芽的研究

以矮生一品红（Euphorbia pucherima）“天鹅绒”的带芽茎段为外植体,研究了影响丛生芽诱导的组培的主要因素。结果表明：适合带芽茎段诱导丛生芽培养基为MS＋6-BA 1.2mg／L＋NAA 0.05mg／L＋活性炭Ac 0.3％＋琼脂6.5g／L＋蔗糖30g／L pH为5.8,萌芽率高达93.3％,有效芽数2～3个,芽长平均2.7cm。     

甘草带芽茎段诱导丛生芽条件的研究

为建立适宜的甘草植株再生体系,加强甘草种质资源的保护与利用,采用不同激素组合设计,以MS为基础培养基,观察不同激素配比对甘草带芽茎段诱导丛生芽的影响.结果表明:甘草带芽茎段生长发育最适宜培养基为MS+0.5 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA+30 g·L-1蒸糖+8 g·L-1琼脂,株高可达10.83 ...     

树兰的组织培养研究

以树兰茎段为外植体,研究不同植物生长调节物质对其愈伤组织诱导、不定芽增殖及生根培养的影响。结果表明,茎段可同时诱导出愈伤组织、不定芽。愈伤组织诱导以NAA 0.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.4 mg/L效果最好,愈伤组织诱导率达24.44%;以NAA 1.5 mg/L+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.2 mg/L对不定芽的诱导效果最好;生根培养以1/2MS+NAA 1.0 mg/L+活性炭1.0 g/L+蔗糖25 g/L培养基最佳,生根率达93.06%。     

藜麦茎段组培快繁体系的建立

以藜麦带腋芽茎段为外植体,通过外植体消毒、腋芽诱导、不定芽增殖、生根培养和驯化移栽等过程建立藜麦离体再生体系。结果表明,带腋芽茎段的最佳消毒方案为75%酒精30 s、0.1%HgCl₂ 9 min;腋芽诱导最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,该培养基条件下,萌芽率为90.0%,芽体饱满;不定芽增殖最适培养基是MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,该培养基条件下,增殖系数为4.9;最优生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L,该培养基条件下生根率为76.7%,不定根数量多,根较粗壮;最佳移栽基质为蛭石∶草炭土体积比3∶1,该基质条件下,组培苗移栽成活率可达93.3%、生长高度为2.86 cm。     

霍山石斛茎段培养诱导丛生芽的研究

以霍山石斛2 a生嫩茎为外植体,开展霍山石斛茎段离体培养诱导丛生芽的研究。结果表明：在2.5%的次氯酸钠溶液消毒10 min的处理效果较好,污染率26.67%,死亡率23.33%;茎段腋芽在MS、N₆培养基上萌发率均能达到90%,优于1/2MS、1/2N₆;5%土豆泥与10%香蕉泥的组合,添加在MS、N₆培养基中,促进腋芽生长要优于仅添加一种有机物;在MS+5%土豆泥+10%香蕉泥的培养基上调整,0.7 mg/L 6-BA与0.07 mg/L NAA的激素配比对霍山石斛丛生芽继代增殖作用突出,增殖倍数在4.2,且丛生芽长势良好。综合分析,最终筛选出霍山石斛丛生芽增殖最佳培养基为MS+5%土豆泥+10%香蕉泥+0.7 mg/L 6-BA+0.07 mg/L NAA。     

海沃德猕猴桃带芽茎段的组织培养快繁技术

以海沃德猕猴桃带芽茎段为外植体直接诱导再生芽,对继代增殖和生根等培养基进行筛选试验,建立海沃德猕猴桃组织培养快繁技术。结果表明:75%乙醇30 s+0.1%氯化汞8 min为最佳消毒方法;诱导再生芽培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;继代增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,其增殖系数为3.60;生根培养基为1/2MS+0.7 mg/L IBA,生根率达100%,平均生根数达7.8条。     

湿地松丛生芽增殖的研究

以湿地松无菌苗顶芽为外植体，诱导湿地松丛生芽的形成，诱导率可达100％．研究激素水平、基本培养基、继代周期、蔗糖浓度对湿地松丛生芽增殖的影响，结果表明：当6-BA为1mg／L，NAA为O．03mg／L时，最高增殖率可达85．71％，最高增值倍数为4．11；在5种基本培养基DCR，WPM，1／2MS，1／2GD，P6中，DCR比较适合丛生芽的增殖和生长；当培养基中蔗糖浓度为4％时，能够形成健壮的丛生芽；每隔20天继代1次，既能保持外植体的幼嫩状态．也能提高丛生芽的生长速度．     

不同激素对甘草带芽茎段诱导丛生芽的影响

采用单因素变量和不同激素组合设计,观察不同激素配比对甘草(Glycurrihiza uralensis Fisch.)带芽茎段诱导丛生芽的影响.结果表明,诱导丛生芽的最佳激素组合为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT,其丛生芽的平均增值倍数达到(5.00±1.61)倍.适宜的激素配比有利于甘草带芽茎...     

金线莲组培快繁技术体系的研究

通过设置不同的试验来优化金线莲的组培条件,结果表明:金线莲外植体消毒处理以75%乙醇(浸泡30 s)+0.1%HgCl(浸泡8 min)的效果较好,诱导芽培养基以MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L的处理效果最优,芽丛生增殖培养基以MS+BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L的效果最优,在增殖培养基中添加20%香蕉泥对芽苗的增殖及壮苗培养均有极大的促进作用。在芽体分化培养过程中,在MS+BA 0.05 mg/L+NAA 0.5 mg/L的培养基中,接种密度为每瓶10颗和800lx的光照处理效果较为理想。     

蝴蝶兰“V31"品种花梗腋芽快繁体系的建立

以蝴蝶兰"V31"品种花梗腋芽为试验材料,通过筛选丛生芽诱导、增殖、生根及移栽各阶段最适培养基,建立其快繁体系。结果表明,最佳腋芽诱导丛生芽培养基MS+8.0 mg·L-1 6-BA+2.0 mg·L-1 NAA+15 g·L-1椰子粉,诱导率84.57%;最佳丛生芽增殖培养基MS+10 mg·L-1 KT+0.6 mg·L-1 NAA+0.2 mg·L-1 2,4-D,增殖倍率7.94;最佳生根壮苗培养基1/2 MS+0.1 mg·L-1 NAA+1 mg·L-1 6-BA+20 g·L-1蔗糖+10 g·L-1香蕉粉,平均生根数9.47;最佳栽培基质为经过0.1%高锰酸钾浸泡0.5 h的水苔+玉米棒(比例为1:1)。     

马占相思开放式组培体系的建立

【目的】研究基本培养基和不同质量浓度植物生长调节剂在开放组培条件下对马占相思(Acacia mangium)芽诱导、增殖和生根的影响,为建立马占相思开放式组培体系提供技术支持。【方法】以马占相思含饱满腋芽的带叶茎段作为外植体,研究MS、1/2 MS、1/4 MS和1/8 MS培养基加入不同质量浓度6-BA(0.5,1.0,1.5 mg/L)对马占相思芽诱导的影响;采用L₉(3⁴)正交试验设计,探讨不同质量浓度6-BA (1.5,2.0,2.5 mg/L)、IBA (0.1,0.5,1.0 mg/L)和IAA (0.10,0.25,0.50 mg/L)组合对马占相思芽增殖的影响;同时,研究不同质量浓度IBA (0.5,1.0,1.5, 2.0 mg/L)和NAA (0.1,0.5,1.0 mg/L)组合对马占相思组培苗生根的影响。【结果】马占相思最佳芽诱导培养基为1/8 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 g/L百菌清,芽诱导率为91.87%;影响马占相思增殖的生长调节剂主次顺序为6-BA>IAA >IBA,最佳增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.25 mg/L IAA+0.2 g/L百菌清,增殖倍数为3.38;马占相思最佳生根培养基为2.0 mg/L IBA+1.0 mg/L NAA+0.2 g/L百菌清,生根率为80.00%。【结论】初步建立了马占相思开放式组培技术体系,为马占相思无性系产业化扩繁提供了一种新方法。     

葡萄风信子外植体直接再分化花芽和营养芽的研究

【目的】探索葡萄风信子直接再生花芽体系的建立,为葡萄风信子外植体直接再分化花芽研究提供参考。【方法】以葡萄风信子‘亚美尼亚’花蕾外植体为材料,MS为基础培养基,在均添加0.1mg/L 2,4-D的条件下,分别用不同质量浓度的6-BA(0,0.5,1,2,3,4mg/L)、GA3(0,0.5,1,2,3,4mg/L)和玉米素(0,0.05,0.1,0.5,1,2mg/L)处理,筛选出诱导花芽的最佳激素及最适质量浓度;以MS+6-BA(或玉米素)2mg/L+2,4-D 0.1mg/L研究开花时花瓣切片、花葶、叶片以及叶片诱导的愈伤组织诱导直接再分化花芽的情况。【结果】用MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D处理葡萄风信子花蕾时,可在花蕾基部直接再分化出具有蓝色的花芽,且花芽分化率最高,达60.2%。花葶、花瓣切片、叶片和愈伤组织在同样条件下只能诱导产生愈伤组织、营养芽。说明花蕾是诱导花芽分化的最佳外植体,且最适培养基为MS+2mg/L 6-BA+0.1mg/L 2,4-D。【结论】建立了葡萄风信子外植体直接再分化花芽体系。     

福建柏组织培养体系的建立及优化

【目的】探究福建柏不同外植体再生过程中最适激素配比,为建立福建柏组织培养体系提供技术支持。【方法】以福建柏鳞叶和茎段作为外植体,在饱和洗衣粉液浸泡20 min和体积分数75%酒精浸泡30 s条件下,研究体积分数0.1% HgCl₂浸泡不同时间(5,8,10,12,15 min)后的消毒效果;以福建柏鳞叶和茎段为材料,通过单因素试验,研究生长素（NAA和2,4-D）对不同外植体愈伤组织诱导的影响,再通过正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA不同配比对外植体愈伤组织诱导的影响;以福建柏愈伤组织为材料,采用正交试验研究NAA、2,4-D、6-BA、KT对愈伤组织继代增殖的影响;以福建柏带芽茎段为材料,研究细胞分裂素6-BA对芽诱导和萌发的影响;以福建柏分化苗为材料,采用正交试验研究6-BA、2,4-D、KT对分化苗继代生长的影响;以福建柏无根苗为材料,研究无根苗扩增繁殖的效果。【结果】（1）福建柏鳞叶最适消毒配方为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 10 min,污染率为16.67%;茎段为体积分数75%酒精30 s+体积分数0.1% HgCl₂ 15 min,污染率为23.33%。（2）鳞叶愈伤组织诱导最适配方为MS培养基+NAA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,诱导率为81.67%;诱导出的愈伤组织白色近透明,长势良好。而茎段为MS培养基+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,诱导率为78.33%,诱导出的愈伤组织淡绿色,长势良好。（3）愈伤组织最适增殖配方为MS基本培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L,增殖质量为1.984 g,褐化率23.33%。（4）芽诱导萌发最适配方为MS基本培养基+6-BA 2.0 mg/L,平均诱导芽数2.05个,平均萌动数1.70个,分化率100%。（5）分化苗生长和扩繁的最适配方为1/2MS基本培养基+2,4-D 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,平均生长长度为2.241 cm,无褐化,扩繁成活率为95.50%,扩繁系数为3.18。【结论】福建柏以带芽茎段作为芽增殖再生途径外植体,鳞叶作为愈伤组织再生途径的外植体进行组织培养效果最佳,长势好且稳定。     

天台鹅耳枥的组织培养与快速繁殖

为了首次建立天台鹅耳枥的组织培养与植株再生体系,以其茎段、未萌发的新芽及萌发后的嫩芽、叶片等为外植体进行离体培养试验。结果表明,以新生的嫩芽为外植体,成功诱导不定芽的分化与增殖,最佳培养基配方为1/2 MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PVP 0.2%。壮苗培养基配方为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1;最佳生根培养基配方为1/4 MS+IBA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1。     

君迁子组培体系的建立及优化

【目的】建立君迁子（Diospyros lotus L.）组培快繁体系并进行优化,为君迁子组培苗的生产应用提供技术支持及理论依据。【方法】以污染率、褐化率、成活率为考察指标,设置体积分数10% H₂O₂消毒10,20,30 min和体积分数2% NaClO消毒5 min+体积分数10% H₂O₂消毒10 min 4个处理,筛选君迁子外植体适宜的消毒方法;分别以君迁子萌动芽、春梢、腋芽和休眠芽作为外植体,筛选最合适的外植体材料;分析DKW、（1/2N）MS、1/2MS、MS培养基对组培苗启动培养的影响,筛选组培苗生长的最适培养基;增殖培养中,激素ZT、6-BA均设0,1.0,2.0,3.0,4.0 mg/L 5个水平,IAA设0.05,0.1,0.2 mg/L 3个水平,筛选组培苗继代增殖最适激素配比;最后分析不同质量浓度IBA（0,1.0,2.0,3.0 mg/L）对组培苗生根的影响。【结果】君迁子外植体最适的消毒方法为体积分数2% NaClO消毒5 min+体积分数10% H₂O₂消毒10 min;最佳外植体材料为萌动芽,其成活率可达60.00%;在（1/2N）MS培养基上组培苗生长更加健壮,启动培养效果较好;增殖培养最佳的激素配比为3.0 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA,在此处理下,组培苗2级愈伤占比79.00%,显著高于其余处理,2级和3级株高占比分别为55.33%和44.67%,长势均匀且主茎粗壮,其增殖系数达5.83;君迁子生根培养较为适宜的IBA质量浓度为1.0 mg/L,生根率可达83.33%。【结论】初步建立了较为完整的君迁子组培体系,有助于柿砧木无性系产业化扩繁的推进。     

2种德国鸢尾组织培养体系的建立

【目的】探索2个德国鸢尾品种金娃娃、黑骑士的组织培养条件,为2种鸢尾的种苗产业化和推广应用奠定基础。【方法】以金娃娃、黑骑士2种鸢尾的幼嫩花葶为材料,研究不同外植体、消毒方法和培养基对2种鸢尾不定芽诱导、增殖及生根的影响。【结果】2种鸢尾的花茎节能直接诱导出不定芽,故其为组织培养的最佳外植体;金娃娃外植体以75%(体积分数)乙醇浸摇3s、0.1%(质量分数)HgCl2消毒6min的处理污染率和死亡率均较低;黑骑士则以75%乙醇浸摇5s、0.1%HgCl2消毒8min的效果较好。初代培养中,MS+2.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA是2种鸢尾不定芽诱导的最佳培养基,在该培养基中,金娃娃和黑骑士的不定芽诱导率均最高,分别为86.4%和73.5%。继代培养中,MS+4.0mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA是不定芽增殖的最佳培养基,在该培养基中,金娃娃和黑骑士的增殖系数最高,分别为12.71和8.64。2种鸢尾不定芽生根培养时以培养基MS+0.1mg/L 6-BA+2.0mg/L NAA效果最好。【结论】建立了2个德国鸢尾品种金娃娃、黑骑士的最佳组织培养体系,在该体系下不定芽诱导率、增殖率高,生根情况良好。     

刺黑竹气生根发育与秆芽的生长发育规律

为了研究刺黑竹(Chimonobambusa neopurpurea Yi)生根和秆芽发育规律,以加强刺黑竹育种和应用的理论基础,以南京引种的刺黑竹为试验对象,通过表观形态学观察以及滑走切片等方法,一方面对刺黑竹气生根的发育机理进行探讨,另一方面对刺黑竹气生根和秆芽在不同部位节间的发育变化规律进行研究。结果表明:高生长结束时,刺黑竹竹秆气生根的发育是自基向顶的,竹秆基部的气生根发育最早,也最先达到成熟,靠近基部为刺状的气生根,表现为木质化程度较高的深褐色刺状组织,越往秆稍则气生根的发育越为迟缓;而刺黑竹竹秆节部芽的生长则表现为竹秆中部17至19节部生长最快,基部和稍部生长相对较慢。切片表明气生根的发育方式为内起源,而秆芽为外起源。刺黑竹幼秆气生根与秆芽的生长及分布具有明显的规律性,了解并利用这种规律将有助于以刺黑竹为主的方竹属竹种的育种与推广。     

Establishment of technique system of rapid propagation through clustered buds pathway of Phalaenopsis

以蝴蝶兰品种＂V31＂为试验材料,研究了消毒时间、基本培养基、外源激素对花梗腋芽诱导的影响,以及外源激素和有机添加物对丛生芽增殖及生根壮苗的影响,结果表明：以0.1%氯化汞溶液消毒处理8 min,花梗腋芽诱导率最高,为85.19%;以1/2MS为基本培养基,花梗腋芽诱导率显著高于MS基本培养基;在1/2MS＋NAA0.5 mg/L＋椰汁100 ml/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂7 g/L培养基上,添加6-BA 5.0 mg/L的处理,增殖系数最高,为5.53;在1/2MS＋6-BA 5.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂7 g/L培养基上,添加椰汁100 ml/L处理的增殖系数显著高于添加土豆泥、香蕉泥的处理。无根苗接种于1/2 MS＋土豆泥80 g/L＋蔗糖20 g/L＋琼脂7 g/L,添加NAA 0.5 mg/L处理的生根数和叶片数显著高于其他处理,分别为4.39条和3.03片;在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L＋蔗糖20 g/L＋琼脂7 g/L培养基上,添加80 g/L土豆泥的处理,生根数和叶片数显著高于添加椰汁、香蕉泥的处理。     

长角豆组织培养繁育技术研究

【目的】探讨长角豆"卡苏达"(Ceratonia siliqua L.‘Casuda’)的组织培养快速繁育技术,为其在我国的成功引种及种质资源保存奠定基础。【方法】以引自西班牙的长角豆"卡苏达"种子为外植体,培养无菌苗后,取其茎段作为组培材料,在筛选出初代基本培养基的基础上,又进行了继代增殖培养基和生根诱导培养基的筛选,最后对长角豆组培生根苗进行了炼苗和移植。【结果】长角豆种子无菌苗在DKW+1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+25g/L蔗糖的增殖培养基上生长最好;最适继代增殖培养基为DKW+0.8mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+60mg/L L-赖氨酸+25g/L蔗糖;最佳生根培养基为1/2DKW+0.4mg/L IBA+20g/L蔗糖,生根率为93.33%,生根苗移栽后的平均成活率达到92.36%。【结论】成功建立了长角豆的组织培养再生体系,为长角豆"卡苏达"的快速繁育提供了技术支持。