食源性致病菌快速检测技术研究进展

食品安全问题日益受到各国政府和人民的普遍关注。由食源性致病菌引起的食源性疾病是影响食品安全的最主要因素之一。对在食源性致病菌快速检测中应用前景广阔的多重PCR技术、生物芯片技术、酶联免疫法、免疫胶体金技术、蛋白芯片技术及生物传感器技术进行了概述,为食源性致病菌快速检测体系的建立提供依据。     

食源性致病菌的快速检测技术研究进展

畜产食品引发的食源性疾病发病率正日益上升,而致病菌是引发食源性疾病的主要因素,有效地检测出食源性致病菌的存在是食源性疾病预防与控制的关键环节.对近几年发展起来的食源性致病菌的快速检测方法进行系统的综述,同时对今后食源性疾病的快速检测方法进行了展望.     

快速检测生鲜肉中三种食源性致病菌

为同时快速检测生鲜肉中鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌和福氏志贺氏菌3种食源性致病菌,降低检测成本,制备了特异性单克隆抗体和多克隆抗体,研制出能够同时检测以上3种致病菌的胶体金免疫层析试纸条。结果表明,本试验成功筛选出3株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株2E3、2E7和2E8,3种单克隆抗体效价均在1.28×10~6以上,3种多克隆抗体效价均在2.00×10~6以上。制备的胶体金免疫层析试纸条对鼠伤寒沙门氏菌、单增李斯特菌和福氏志贺氏菌3种食源性致病菌的特异性良好,灵敏度均为1×10~4CFU/g。     

食源性致病菌快速检测技术及其应用研究进展

随着食品工业的发展,食品安全成为人们日益关注的公共健康问题。在影响食品安全的因素中,病原微生物是最主要的因素之一。因此,建立食源性致病菌的快速检测技术对确保食品安全和保障人类健康意义重大。传统的食源性致病菌检测方法,如微生物培养法和菌落技术法耗时费力,远不能满足食品安全快速检测的要求。目前已报道多种食源性致病菌的快速检测方法,如免疫学技术、分子生物学技术、生物传感器技术等。本文综述了国内外食源性致病菌的快速检测技术及其应用研究进展,比较分析各项检测技术的特点,为新的食源性致病菌检测技术的开发提供参考。     

食源性致病菌快速检测方法研究进展

食品中的病原微生物是影响食品安全的主要因素之一,传统检测食源性致病菌的方法繁琐复杂、周期较长,因而快速、简便、特异的检测方法成为研究的热点。介绍并分析了几种快速检测食源性致病菌的方法及其特点,就其发展和应用进行了综述。     

三种常见食源性致病菌的多重PCR快速检测

为建立对3种食源性致病菌—大肠杆菌(Escherichia coli)、沙门氏菌(Salmonella typhimurium)和单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)的快速、敏感、特异的多重PCR诊断检验方法,本研究设计了上述3种菌的特异性PCR引物,通过单一、双重及三重PCR反应检测,并对人工感染的饮料和面包2种食品进行验证.结果表明,3种食源性致病菌的单一、双重和三重PCR均成功扩增出目的片断,没有非特异性扩增.人工感染食品的PCR检测也获得了目的菌的特异性片段,并且结果稳定.本研究所建立的多重PCR反应系统具有较好的特异性和灵敏性,为食品中常见致病菌的检测提供了一种快速、简便、可靠的方法,具有重要的理论意义及实践意义.     

食源性致病菌分子检测技术研究进展

世界卫生组织提供的数据表明,全球每年有超过30亿人次患食源性疾病,其中腹泻病例就多达15亿例,有220万人因此而死亡,包括180万儿童。开展食品安全检测技术的研究,建立完善的食品安全保障体系对于确保食品供应链的安全．保障人类健康具有重要意义。     

基于多重PCR的主要食源性致病菌的快速检测

根据单核增生李斯特菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌0157:H7的特异性序列分别设计4对特异性引物,建立了一种快速检测上述4种常见食源性致病菌的多重PCR方法,并对反应体系中的模板、引物、rTaq酶、MgSO_4添加量以及退火温度进行了优化。结果显示:4对引物序列的特异性均较好,利用单重PCR对4种致病菌的灵敏度进行检测,其检测限均达到10~3copies/mL。多重PCR同时检测4种致病菌的灵敏度为10~3copies/ml,对人工污染猪肉中的4种致病菌的灵敏度检测为10~3cfu/mL。该检测方法不与其他菌产生交叉反应,与传统方法相比大大缩短了检测时间,并提高了检测的准确度。     

4种食源性致病菌的PCR-SSCP检测技术研究

采用细菌的16S rDNA保守区引物作为通用引物,对常见食源性致泻大肠埃希氏菌(Diarrheogenic Escherichiacoli)、沙门氏菌(Salmonellae)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)进行PCR扩增,产物及其XmnI酶切后产物进行单链构象多态性分析。试验结果显示,4种食源性致病菌的PCR产物经XmnI酶切后进行单链构象多态性分析可以相互区别。因此,PCR-SSCP技术可以方便地用于检测食源性大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌。     

水果中农药残留的表面增强拉曼光谱技术快速检测研究

为了建立水果中农药残留的快速检测方法,通过过氧化氢和浓硫酸处理制备疏水化的硅片基底,采用静电吸附法将金纳米粒子组装到硅片基底表面,形成硅片/金纳米粒子复合基底,将水果中残留的福美双、百草枯和啶虫脒等3种农药经抽提后滴加到复合基底上,采用表面增强拉曼光谱技术进行检测。结果表明,福美双、百草枯和啶虫脒的方法线性范围分别为0.20～2.00、0.05～0.50、0.20～2.00 mg/kg,最低检测浓度分别为0.20、0.05、0.20 mg/kg。该方法应用于苹果、橘子和梨等水果的农药残留量分析,回收率在94.5%～120.0%之间,相对标准偏差均在15%以下。该方法具有较高的准确度和精确度,适用于水果农药残留的快速检测。     

应用表面增强拉曼光谱技术快速检测较大婴幼儿配方奶粉中的香兰素

【目的】香兰素（3-甲氧基-4-羟基苯甲醛）是一种婴幼儿配方食品中常用的食品添加剂,因具有浓郁奶香被广泛使用,但过量使用香兰素会引起婴儿肝肾损伤。目前,国家尚未出台相关检测标准,现场检测手段相对缺乏,建立婴幼儿配方奶粉中香兰素检测方法特别是现场快速检测方法迫在眉睫。本文建立了基于纳米金粒子的表面增强拉曼光谱对较大婴幼儿配方奶粉中香兰素的速测方法,为政府监管提供技术支撑。【方法】本文主要从样品前处理方法优化,增强基底的制备以及上机参数的选择3方面进行研究。比较不同萃取溶剂对香兰素提取效率的影响,确立较佳的样品前处理方法;研究不同粒径的纳米金胶溶液对香兰素的表面增强拉曼光谱信号强度的影响,确定较佳的增强基底;探明pH、离子强度等对上机液的影响,得到较优的检测条件。【结果】确立了较优的前处理方法：首先以饱和醋酸铅溶液作为沉淀剂去除基质中蛋白,之后以二氯甲烷为萃取溶剂对香兰素进行提取,最终使用pH为9的氢氧化钠水溶液对提取液进行纯化;确立了较佳的检测条件：以粒径约58 nm的金胶溶液作为增强基底,同时,在上机液中加入200 μL 1%硝酸溶液、50 μL 1%硝酸钾溶液,此时香兰素特征拉曼信号最强,有利于进行定性定量分析。本文建立的速测方法以1 149、1 497、1 575 cm-1处拉曼位移作为定性依据,以1 531 cm-1峰强度作为归一化标准,绘制1 497 cm-1处峰强度对香兰素浓度的标准曲线,在质量浓度30-300 μg•mL-1内实现定量计算,线性相关系数0.9913,检出限为10 μg•mL-1。在50、100和200 μg•mL-1 3个添加水平下,回收率为80.5%-86.9%,相对标准偏差小于8.6%。【结论】通过实际样品检测并将结果与现有文献报道方法相比较发现,该方法样品前处理简单、分析时间短（单个样品分析时间约5 min）,检测结果可靠,适用于对较大婴幼儿奶粉的现场快速检测,为市场监管提供了新的手段。     

SSEL结合多重PCR同时快速检测生菜中4种食源性致病菌

为实现生菜中肠炎沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌O157:H7和单增李斯菌的同时快速检测,将前期开发的SSEL增菌技术与多重PCR联用,对SSEL的增菌性能、SSEL增菌液的处理方式、多重PCR的灵敏度和特异性进行了分析。结果表明:生菜样品经SSEL增菌24 h后,4种目的菌含量均可达10~5 CFU/mL;以SSEL增菌液及其DNA提取物为模板的多重PCR均能检测出生菜中的4种目的菌,灵敏度分别为10~5 CFU/mL和10~2 ng/μL;SSEL结合多重PCR对测试菌株的特异性达100%。     

冻肉中食源性致病菌的快速检测方法的研究

本文以食源性致病微生物作为目标菌,利用PCR技术,建立一种快速高效检测冻肉中致病微生物的PCR反应体系。并对反应体系的灵敏度和特异性进行检测分析,得到最适合的快速检测食物中致病微生物的方法。     

4种食源性致病菌多重PCR检测技术的研究及应用

为建立一种利用多重PCR技术检测和鉴定沙门氏菌(Salmonellla spp)、单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的方法,根据沙门氏菌侵袭力蛋白A基因(invA gene)、单核细胞增生李斯特菌蛋白转录调控基因(prfA gene)、金黄色葡萄球菌自溶素基因(alt gene)、蜡样芽孢杆菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB gene)设计引物,进行多重PCR扩增,并对多重PCR反应体系进行优化。在此基础上建立了4种致病菌的多重PCR检测体系,同时以国标法进行对比验证。结果表明,本研究建立的多重PCR检测方法简单、快速、灵敏度高,具有很好的应用前景。     

几种食源性致病菌及其监控

食品安全已经成为世界性的公共卫生问题,食源性致病菌是引起食源性疾病的首要原因。文章详细论述了几种主要引起食源性疾病的致病菌-沙门氏菌、弯曲杆菌、大肠杆菌、李斯特菌霍乱弧菌的治病机理及临床表现,并讨论了食源性疾病的流行病学变化以及监控。     

食源性致病菌对生菜侵染能力检测

在无菌生菜组培苗培养基上分别侵染为108cfu/mL和106cfu/mL的大肠杆菌O157∶H7、鼠伤寒沙门氏菌和猪霍乱沙门氏菌3种食源性致病菌,在温度25℃,相对湿度65%无菌条件下分别培养15d和30d后,用PCR方法对其生菜苗上3种食源性致病菌情况进行检测。主要检测3种食源性致病菌在不同生菜品种、不同菌液浓度及不同侵染时间的条件下对无菌生菜组培苗的侵染能力。结果表明,接种到培养基上的3种食源性致病菌都能从苗上检测到。其中鼠伤寒沙门氏菌侵染能力最强,猪霍乱沙门氏菌次之,大肠杆菌O157∶H7侵染能力最弱。菌液浓度106 cfu/mL和侵染时间30d条件下,三种食源性致病菌的侵染能力最弱。     

表面增强拉曼光谱技术快速测定辣椒粉中的苏丹红Ⅰ号

应用快速溶剂提取前处理方法与表面增强拉曼光谱技术结合建立辣椒粉中苏丹红Ⅰ号的快速定量检测方法.用辣椒粉提取液作空白,用表面增强拉曼光谱对不同浓度的苏丹红Ⅰ号插标辣椒粉提取液进行检测,发现在1 224 cm-1处有明显的拉曼特征峰,用归一化处理后特征峰峰强与苏丹红Ⅰ号的浓度呈良好的线性关系,线性范围为5 ～ 50 μg/mL,最低定量检出限为5 mg/kg,回收率为84.27％～85.51％,相对标准偏差小于5％.结果证明该方法高效灵敏、重现性好、前处理简单、设备方便携带,可以为市场大规模的快速检测提供解决方案.     

表面增强拉曼光谱在农残检测中的应用

农药在现代农业中广泛使用,残留在环境或瓜果蔬菜中的农药会对人体健康产生巨大的威胁,因此农药残留检测在现代农业生产活动中扮演着重要的角色.表面增强拉曼光谱(Surface-enhanced Raman Spectroscopy,SERS)技术在农药残留检测上有操作简单、快速检测、成本低等优势,在农药残留检测领域有着广泛的...     

基于功能化Au@Ag纳米棒的表面增强拉曼光谱检测汞离子

建立了1种基于功能化Au@Ag纳米棒(Au@Ag NRs)的表面增强拉曼光谱(SERS)技术来实现溶液中Hg~(2+)的定量检测。Hg~(2+)存在下,其与Au@Ag NRs表面的2,5-二巯基-1,3,4-噻二唑(DMCT)发生配位作用引起SERS检测探针聚集,产生"热点"效应,致使DMCT在1 360 cm~(-1)处的SERS信号增强。在0.1～10μg/L质量浓度区间内线性关系良好:Y=195.49384X+1676.23663(R~2=0.991),检出限为17 ng/L,低于世界卫生组织(WHO)规定饮用水中Hg~(2+)的限量(1μg/L)。在实际水样中进行Hg~(2+)加标回收检测,回收率为100.1%～106.5%,相对标准偏差为1.23%～7.99%。     

藏红花的表面增强拉曼光谱分析

用光谱分析仪分析藏红花是利用拉曼散射效应,具有检测速度快、简单、可重复、样品无损伤等优点,作为一种在线检测分析技术在农产品检测、食品安全等领域受到了普遍关注和应用。