中国梨品种自交不亲和新基因的分离鉴定

采用分子生物学技术、田间杂交试验和生物信息学方法研究了中国梨自交不亲和基因和品种的S基因型.从中国白梨和沙梨品种中分离鉴定了15个梨自交不亲和新基因;分析了新S基因的序列特征;确定了中国白梨中至少存在17个S等位基因,中国沙梨中至少存在10个S等位基因;鉴别了34个梨品种的S基因型.这些新S基因的发现和品种S基因型的确定为中国梨品种的优化配置、丰产栽培和遗传改良提供了科学依据.     

基于基因芯片的梨品种S基因型鉴定的技术方法

梨是典型的配子体自交不亲和植物,梨品种自交不亲和基因型(S基因型)确定的研究对于梨的栽培和遗传改良具有重要的意义.综合分析了运用杂交授粉试验、PCR-RFLP技术、DNA序列分析、cDNA克隆等技术在确定梨品种S基因型方面的优点和不足之处,提出了运用基因芯片技术确定梨品种S基因型的新方法,并分析了该技术的优势以及在梨品种S基因型确定方面的应用前景.     

梨自交不亲和性研究进展

综述了梨自交不亲和性的研究进展,主要包括梨自交不亲和性的表现,梨花柱S糖蛋白的分离鉴定与作用机理,梨自交不亲和基因的克隆以及S基因型的确定等方面的研究成果,并提出了梨自交不亲和性研究中有待深入研究的问题.     

梨自交不亲和性研究的技术进展

综述运用杂交授粉试验、蛋白质产物分析、PCR-RFLP技术、DNA序列分析和cDNA克隆等技术确定梨品种自交不亲和基因型研究的技术进展,分析了这些技术在确定梨品种自交不亲和基因型确定方面的优点和不足之处,总结了运用这些技术研究梨自交不亲和性的成果,从基因型的确定和自交不亲和基因的应用角度提出了研究的前景.     

沙梨之冠——苍溪雪梨

苍溪雪梨又名神州雪梨,果皮黄色,肉色如雪、味甜如蜜、耐贮耐运,属全国三大梨系中沙梨系优良品种之冠,被誉为神州特产。四川省通江县铁溪技术中心技术员张明富同志引种苍溪雪梨获得成功。该品种适应     

日本梨品种在湖南丘陵地栽培适应性研究

2001年春开始,对湖南丘陵地5个日本梨品种进行栽培试验,分别对其生长习性、经济性状、抗性、产量等多项指标和因子观察、调查,较系统地研究了引入品种的适应性及丰产性。结果表明,以丰水梨品种适应性较强,其次为湘南、新世纪、幸水,而金20世纪适应性较差。同时,对以后湖南梨生产提出了合理化建议。     

11个中国梨品种S基因型的鉴定

采用梨自交不亲和基因的特异引物"FTQQYQ"和"anti-IIWPNV",对11个梨品种的基因组DNA进行了特异PCR扩增,对扩增片段进行回收、克隆和测序。利用生物信息学软件对各序列进行比对分析,最后确定了各品种的S基因型,即早熟句句、新疆黄梨、绿句句、魁克句句等4个新疆梨品种的S基因型均为S22S28;圆香为S16S15,福安尖把为S16S22,晋蜜梨为S21S28,兰州软儿为SdS12,迟咸丰为S5aS18,红秀2号为S1S12,鸭广梨为S19S30。     

梨S基因检测芯片的oligo探针设计

为给梨品种S基因芯片的制备及梨品种自交不亲和性S-RNase基因和S基因型的检测奠定基础,结合已有的对梨自交不亲和S-RNase基因的研究成果及Genbank中梨S-RNase基因信息,利用生物学比对软件Genedoce对梨S-RNase等位基因序列进行比对,得到等位基因HV区的特异序列;用oligo6.71、Premier Premier 5.0和Clustal.W等生物学软件设计特异性高、解链温度Tm值接近、长度均一的oligo探针,获得了24条32 mer的oligo探针。     

梨果不同部位中熊果苷的差异分布规律

【目的】阐明熊果苷在梨果实内部的差异分布规律,进一步研究熊果苷在梨果中的代谢规律,以促进梨果熊果苷的开发和应用。【方法】以'玉露香'库尔勒'黄冠'丰水'鸭梨'5个品种梨果为供试材料,采用高效液相色谱法,对其果皮、果肉、果心、果肩、果顶等部位及果肉5个切片部位中熊果苷的含量进行了定量分析。【结果】供试的5个梨品种果实中均富含熊果苷这一酚类物质,其含量为2.17～872.23μg·g~(-1)。在不同梨品种中,果皮中熊果苷的含量最高的品种是'玉露香',其含量为872.23μg·g~(-1);而其含量最少的品种是'黄冠',其含量为171.51μg·g~(-1)。果肉和果心中熊果苷的含量均最高的品种是'鸭梨',其果肉与果心中熊果苷的含量分别为12.94和268.20μg·g~(-1);而其含量均最低的品种是'库尔勒',其果肉与果心中熊果苷的含量分别为2.17和74.45μg·g~(-1)。比较梨果不同部位中的熊果苷含量可知,含量最高的部位是果皮,果心次之,含量最低的部位是果肉;纵向比较可知,果肩和果顶中熊果苷的含量相近。将同一品种的梨果肉划分为5个切片部位进行研究,结果表明,其熊果苷含量为3.44～105.65μg·g~(-1);横向比较可知,'玉露香'各个切片部位间其熊果苷含量无显著性差异,而其余品种果肉各个切片部位间其熊果苷含量存在显著性差异,其中又以靠近果皮处的含量为最高。【结论】熊果苷广泛存在于梨果内,不同品种间果实中的熊果苷含量存在差异,同一品种梨果不同部位间其含量同样存在差异,同一部位不同切片部位间其含量也存在差异。试验结果表明:'玉露香'梨果皮中熊果苷的含量最高,而'库尔勒'梨果肉中熊果苷的含量最低。     

沙梨栽培技术要点

沙梨Pyrus pyrifolia(Burmf)Nakai,为南方梨树的主要栽培种系。主产长江流域以南各省区,适生于温暖多雨地区。栽培品种有安徽砀山酥梨、浙江黄樟梨、四川苍溪梨、贵州金盖梨、木瓜梨、云两宝珠梨,以及由日本引进的丰水、新水、幸水、晚洁、长十郎、二十世纪等。 沙梨又称砂梨,落叶乔木,高达15米,幼枝有毛。叶片卵状椭圆形至卵形,长7～12厘米,两面无毛或幼时被毛;叶柄长3～4.5厘米。果近球形,径2～3厘米。花期4月。果期8月。 1栽培意义     

7个砂梨品种S基因型的确定及1个新S-RNase基因的分离鉴定

砂梨是重要的经济树种,表现出典型的配子体自交不亲和性,在生产和育种上需鉴定品种的S基因犁以确定品种间的亲和性.选取7个砂梨品种为试验材料,使用梨S-RNase(S基因)通用引物进行基因组PCR扩增,产物通过1.8%的琼脂糖凝胶电泳分析.结果表明:‘楚比香'等4个品种中产生了预期的2条电泳条带,而其他3个品种都只产生1条带产物,通过6%的聚丙烯酰胺电泳对该3个品种的PCR产物进一步分析,结果产物被成功分离.将7个品种中分离到的14个条带分别回收、克隆、测序及序列分析,从中鉴别出10个具有梨S-RNase基因序列特征的S基因,其中‘政和大雪梨'中494 bp的基因片段被鉴定为新的S基因,暂命名为S43-RNase(GenBank接受号EF566873).RT-PCR试验证明S43-RNase仅在化柱中特异表达,符合S-RNase的表达特征.通过比对S43-RNase的基因组序列和cDNA序列,确定其内含子大小为294 bp.在推导氨基酸水平上,S43-RNase与苹果亚科其他S-RNase表现出65%～92%的相似性.     

新星梨开花期和结果期优化管理技术

新星梨系从台湾引进的日本梨品种。1997年以来分别在河北藁城、赵县、定兴和山东阳信等县高接观察，拟为河北梨品种更新和农村产业结构调整提供新的适裁品种。通过5a观察研究，表明新星梨具有结果早，易丰产，品质优良，白花结实率高，抗病力强，适应性广，耐贮藏运输等综合优良性状，是适于华北地区栽的中熟优良品种。总结提出了新星梨优质高效管理技术规程。可供梨品种结构调整参考。     

中国白梨PbSFBB13-gamma基因的分子克隆与序列特征

以5个已知S基因型的中国白梨品种为试材,设计分别对应于梨SFBB-alpha,SFBB-beta和SFBB-gamma 基因的3对引物对这5个品种进行基因组PCR扩增.结果仅引物组合PSFBG-F/PSFBG-R从‘金花'(S_(13)S_(18)),‘金花四号'((S_(13)S_(18))和‘鹅梨'((S_(13)S_(34))中扩增出一约1 300 bp的条带,经回收、克隆、测序后,鉴定其为SFBB-gamma基因,命名为PbSFBB13-gamma(Pyrus bretschneideri SFBB13-gamma),GenBank登录号为EU081892.逆转录PCR结果表明PbSFBB13-gamma仅在花粉中特异表达;序列分析表明该基因不含内含子,编码区含1 191个核苷酸,编码396个氨基酸,预测分子质量与等电点分别为45.4 ku、4.63.PbSFBB13-gamma表现出典型的花粉SFB/SLF基因的基本结构特征,即1个F-box结构域及4个可变区;在推导氨基酸水平上,其与蔷薇科SFB/SLF基因的相似性为17.8%-97.7%.试验结果充分表明PbSFBB13-gamma应为花粉S基因的候选基因.选取蔷薇科34个SFB/SLF基因的全长氨基酸序列,构建进化树研究基因间的进化关系.结果表明,34个SFB/SLF基因形成2个亚科特异的类群,但不形成种特异的类群,其进化规律与蔷薇科S-RNase基因一致,即花粉SFB/SLF基因的形成也是在亚科形成之后、种形成之前.研究结果有助于从分子水平上揭示中国白梨的自交不亲和性机制.     

中国梨新SFBB-gamma基因的鉴定及序列分析

通过分子生物学方法分离鉴定了4个新的梨SFBB-gamma基因,并对其序列进行了生物信息学分析。SFBB-gamma基因的特异性引物对4个梨品种进行PCR扩增结果表明,4个品种均扩增出一条1 250 bp左右的条带;通过DNA测序和生物信息学分析方法从‘鸭梨’、‘红皮酥’、‘中梨二号’和‘兰州软儿’等梨品种中分离鉴定了SFBB21(EU422961)、SFBB26(EU422961)、SFBB31(EU422959)、SFBBd-gamma(EU422962)基因。聚类分析中发现,仁果类SFBB基因和核果类和SFB基因明显的分成两类,仁果类中梨SFBB基因和苹果SFBB基因又各分成一类,这与物种的亲缘关系相符合。新鉴定的梨SFBB基因中从白梨中分离鉴定的SFBB21-gamma基因与梨其他SFBB-gamma基因的亲缘关系最远。该研究为梨自交不亲和机理研究和遗传改良提供理论基础。     

中国砂梨7个自交不亲和新基因的分离与测序

S-RNase是配子体自交不亲和植物雌蕊的基因产物,它降解具有相同基因型的花粉mRNA或rRNA,导致植物的自交不亲和.借鉴日本梨S-RNase基因的分析方法,对中国砂梨5个品种的基因组DNA进行PCR-RFLP系统检测和DNA序列分析,从中发现了7个新的S-RNase等位基因,分别命名为S11-RNase、S12-RNase、S13-RNase、S14-RNase、S15-RNase、S16-RNase和S25-RNase基因,其部分序列已登录到GenBank.     

日本甜柿的引种与研究

日本甜柿是我国从日本引入的果树新品种,2001年南阳市引入次郎、新秋、阳丰、西村早生、兴津20、禅寺丸等6个日本甜柿品种。通过试验研究,筛选出适合我市发展的次郎、新秋、阳丰、兴津20等4个优良品种。     

红酥脆梨的无公害栽培

红酥脆梨是郑州果树研究所以日本幸水梨做母本,用我国民间红梨品种--火把梨为父本,通过人工杂交培育而成的一个晚熟红色梨优良品种.通过几年多点引种观察,该品种表现品质优良、着色好、外观美丽、早果丰产、抗逆性抗病性强,适应性、耐贮性和加工性均表现较好,即可作为晚熟鲜食良种栽培,也可作制汁加工良种发展,具有广阔的市场前景和开发潜力.其无公害栽培技术如下:     

甘肃兰州的冻梨主要品种

介绍了兰州栽培冻梨的种类和分布,主要栽培的优良品种有:栽培历史悠久的特色冻梨品种兰州"软儿"梨,引进筛选出的高档冻梨品种"宁波"梨、"佳白"梨,以及市场上已不多见的古老地方品种"马奶头"梨、"窝窝"梨、"吊蛋子"梨等。     

'凯特'与'新世纪'杏自交不亲和S-Rnase基因的检测及克隆

近几年来,植物自交不亲和性(self-incompatibility: SI)的分子机理研究取得了很大进展(Sassa et al.,1996; 张绍铃等,2001; Wang et al.,2003),一般SI被分为孢子体型自交不亲和性 (sporophytic SI:SSI)和配子体型自交不亲和性(gametophytic SI:GSI)两大类.     

适宜埋土防寒区露地栽培葡萄品种筛选

为了筛选适宜埋土防寒区栽植的葡萄品种,开展了相关研究.通过对'状元红'、'香悦'、'巨玫瑰'等8个品种的物候期、果实性状与经济效益进行了调查分析.结果显示:'状元红'、'香悦'、'巨玫瑰'、'夏黑'、'春光'、'巨峰'、'阳光玫瑰'7个品种可以作为露地配套栽培的优良品种进行大面积推广.