生防菌BH-2发酵液中抑菌成分的定位及提取研究

为了明确生防菌BH-2发酵液中的抑菌成分及其提取方法,采用管碟法,通过抑菌活性的测定,对其发酵液中抑菌物质及其提取进行了研究。结果表明,生防菌BH-2发酵液中的抑菌作用大致分为活体的抑菌作用和和代谢活性物抑菌作用,且胞外的抗菌代谢物有较好的热稳定性,而胞内不产生抑菌物质。此外,有机溶剂的萃取试验表明,代谢活性物质的极性较强;不同浓度的硫酸铵和乙醇均不能使其沉淀;酸沉淀法基本上可以将其提取出来。这为该菌株的进一步研究和产品开发提供了理论依据和技术支持。     

马铃薯早疫病拮抗细菌的筛选、鉴定及抑菌物质研究

【目的】为获得拮抗马铃薯早疫病菌的优良生防菌株,研究其抑菌活性物质对马铃薯早疫病菌的影响。【方法】利用平板对峙法对生防菌进行筛选,通过形态学特征和分子生物学的方法对生防菌进行鉴定,并检测其分泌生防作用相关的酶的能力。通过扫描电镜观察生防菌次级代谢产物对早疫病菌丝影响,利用高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)技术对生防菌次级代谢产物的活性成分进行鉴定,结合琼脂扩散法进一步验证活性成分。【结果】将筛选得到的生防菌株鉴定为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis),命名为C16。菌株C16能分泌淀粉酶和表面活性素,具有固氮能力,发酵液和脂肽粗提物能显著抑制马铃薯早疫病菌丝的生长,发酵液的抑菌圈可达31.5 mm, 10 mg/mL脂肽粗提物的抑菌带可达12.67 mm。早疫病菌分别与发酵液和脂肽粗提物共培养后,经扫描电镜观察发现,菌丝扭曲变形,表面产生褶皱,以及出现囊泡化等现象。对脂肽粗提物进行成分分析,发现其含有表面活性素Surfactin和伊枯草素Iturin两种物质,通过琼脂扩散法测定两种活性物质的抑菌活性,发现伊枯草素Iturin为主要抑菌活性成分。【结论】本研究筛选获得拮抗马铃薯早疫病菌的优良生防菌株为贝莱斯芽胞杆菌C16,其主要抑菌物质为伊枯草素Iturin。本研究结果为利用微生物菌剂防治马铃薯早疫病提供了备选菌种资源,同时为菌株C16的开发利用奠定了基础。     

生防菌弗氏链霉菌K-7所产抑菌物质的稳定性研究

为探明生防菌弗氏链霉菌K-7发酵液上清中抑菌物质的成分及其在功能性肥料中添加使用的可能性,对生防菌弗氏链霉菌K-7所产抑菌物质分别通过60和80℃高温处理4h和100g·L~(-1)的高浓度KH_2PO_3处理48h后,采用菌丝生长速率法测定发酵液上清抑菌物质的抑菌效果来研究K-7所产抑菌物质的稳定性。结果表明:生防菌弗氏链霉菌K-7所产抑菌物质经过60和80℃高温处理4h抑菌活性无明显变化,说明所产抑菌物质对高温稳定;和100g·L~(-1)的高浓度KH_2PO_3复配后抑菌活性显著优于单独发酵液上清,显著优于单独的亚磷酸二氢钾溶液,说明所产抑菌物质在高盐条件下稳定。为所产抑菌物质的纯化、成分分析及在功能性肥料中添加使用提供了一定的理论基础,具有较广的应用前景。     

线虫生防菌产业化关键技术研究与应用

<正>该项目以农业生产中最难防治的植物病原线虫为目标,对该团队前期筛选获得的5株高效生防菌株开展了深入研究,成功构建了分离纯化发酵液中杀线虫活性物质的技术体系,解决了生防菌剂产业化中菌株活性退化变异的关键技术问题,优化了线虫生防菌剂的发酵工艺,制定了规模化生产标准,为线虫生防菌的产业化快     

关于堆肥对植物病害防治的探讨

堆肥原料成分复杂,彼此互补性好,经过固体废弃物减量化无害化,以及资源化最有效的处理堆肥过程中会产生各种中间代谢产物及各种营养类型的微生物群落,针对性强的微生物如降解纤维素、木质等难降解物质的微生素,它们是潜在的生防菌.     

复合菌剂防治草莓根腐病的效果研究

为了获得草莓根腐病病原菌新棒状拟盘多毛孢（Neopestalotiopsis clavispora）的拮抗菌,筛选出3株生防效果好的菌株:贝莱斯芽胞杆菌（Bacillus velezensis-17）、解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefacen-27）和枯草芽胞杆菌（Bacillus subtilis-Y1-7）,进行室内目标病原菌的平板对峙试验和生防效果的广谱性验证试验,对抑菌圈边缘菌丝进行10×4倍和10×10倍的显微镜观察,检测3株生防菌的代谢产物中是否含有吲哚乙酸（indoleacetic acid,IAA）和铁载体等促生物质和脂肽活性类抗病物质,并设计盆栽和田间试验检测其防病、促生和增产效果。室内平板对峙试验显示,供试3株生防菌均对目标病原菌及草莓灰霉病等6种病原菌有拮抗效果,抑菌圈边缘菌丝出现变细、扭曲、分支增多等畸形现象。3株生防菌均产生促生物质IAA和铁载体,菌株胞外粗提物具有拮抗拟盘多毛孢的效果,以上结果初步证明3株生防菌均具有促生抗病潜力。盆栽试验表明,同一生防菌的防病效果优于抗病效果,复合菌的防病促生效果优于单一菌株,防治效果高达7368%。田间试验表明,复合菌处理防病增产效果较优,防治效果高达57.18%~66.00%,每公顷增产12.97%~37.99%。盆栽和田间试验印证了3株生防菌分别具有促生防病及增产效果,以3株生防菌复合效果最优。     

1株解淀粉芽孢杆菌HN011抑菌次级代谢产物的分析

[目的]分离和鉴定生防菌HN011在YPD条件下发酵的次级代谢产物.[方法]HN011少量(1 L)发酵,分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行液-液萃取,通过金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus的活性试验跟踪确定活性部位;通过放大发酵,对活性部位进行分离得到单体化合物.利用核磁共振和质谱等手段,鉴定单体化合物.[结果]生防菌HN011少量发酵后,发酵液经不同极性的有机溶剂液-液萃取,萃取物的活性试验表明,乙酸乙酯部位活性最强,其次氯仿部位,正丁醇部位活性较弱,石油醚部位、水部位活性不明显.通过放大发酵,在活性部位分离出15个单体,结构鉴定表明,主要为小分子的环二肽.[结论]生防菌HN011在YPD的发酵条件下,次级代谢产物主要为一些小分子的环二肽.     

1株解淀粉芽孢杆菌HN011抑菌次级代谢产物的分析

【目的】分离和鉴定生防菌HN011在 YPD条件下发酵的次级代谢产物。【方法】HN011少量 (1 L) 发酵,分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇进行液-液萃取,通过金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus 的活性试验跟踪确定活性部位;通过放大发酵,对活性部位进行分离得到单体化合物。利用核磁共振和质谱等手段,鉴定单体化合物。【结果】生防菌HN011少量发酵后,发酵液经不同极性的有机溶剂液-液萃取,萃取物的活性试验表明,乙酸乙酯部位活性最强,其次氯仿部位,正丁醇部位活性较弱,石油醚部位、水部位活性不明显。通过放大发酵,在活性部位分离出15个单体,结构鉴定表明,主要为小分子的环二肽。【结论】生防菌HN011在YPD的发酵条件下,次级代谢产物主要为一些小分子的环二肽。     

生防菌XM-10对黄瓜枯萎病菌的拮抗机理

采用对峙培养法、菌落直径法,测定了生防菌XM-10菌体及其发酵液各组分对黄瓜枯萎病菌的抑制作用。结果表明,生防菌XM-10对黄瓜枯萎病菌抑制作用较强,抑菌率为83.7%,抑菌带达6.9 mm;其主要的抑菌物质存在于生防菌的胞内,且抑菌活性与其菌体数量呈正相关;通过显微观察,发现其对黄瓜枯萎病菌的菌丝和孢子均有强烈的抑制作用。     

生防细菌H1、H2活性物质的萃取与抑菌活性

通过有机溶剂萃取的方法,获得黄瓜白粉菌生防菌H1、H2的活性物质,采用温室药效试验测定各萃取物对黄瓜白粉菌的抑菌活性,结果表明,生防菌H1石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇萃取物及水相对黄瓜白粉菌的防效分别为62.79％、25.57％、17.11％、13.8％和12.1％,生防菌H2石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇萃取物及水相防效分别为61.71％、36.24％、24.14％、22.30％和13.6％,其中,均以石油醚萃取物对黄瓜白粉菌的防效最为显著.     

辣椒疫病病原真菌拮抗菌的筛选及抑菌活性研究

为有效防治辣椒疫病,采用皿内竞争、拮抗菌发酵液以及紫外线照射菌株代谢产物等方法,对筛选出的4株拮抗菌与16种辣椒疫病病原真菌进行拮抗作用试验以及抑菌活性研究。结果表明：16种靶标病原真菌在与4株供试拮抗菌平皿对峙培养后,均受到不同程度的抑制,其中,LCF-35、LCF-BY1和LCF-BY2同时受到4株拮抗菌较强的抑制作用,平均抑制率分别为52.2%、46.1%和27.3%;供试拮抗菌对靶标病原真菌具有选择抑制作用和不同的抑制能力,其中,BCHK抑制LCF-35生长效果较好,BCHK和KMCG-4抑制LCF-BY1生长效果明显;4株拮抗菌的代谢产物活性成分在紫外照射下不稳定,失去抑制作用,因此,这4株拮抗菌适用于活菌生防制剂生产。     

微生物酶及其在植物病害生物防治中的作用

介绍了生防菌产生的细胞壁降解酶,如几丁质酶、葡聚糖酶和蛋白酶及其生防作用机制,不同细胞壁降解酶之间以及与抗生素等次生代谢产物之间的协同抑菌作用,以及细胞壁降解酶在植物病害生防中的潜在应用。     

穿心莲在鸡中血清药物化学初步研究

 【目的】对穿心莲在鸡中血清药物化学进行初步研究。【方法】在建立穿心莲超微粉高效液相色谱-质谱指纹分析方法的基础上,分析比较空白对照鸡血清、给药后所得鸡血清样品指纹图谱,鉴定内服穿心莲超微粉血中移行成分、来源及其代谢产物。【结果】鸡内服给药后,在60 min时,有9个组分在血中出现;其中有4个主要成分来源于原药并在给药后0～480 min内维持较高浓度,其余的组分可能是代谢产物。【结论】血中移行成分及代谢产物将成为穿心莲的体内作用基础,对其血清药物化学深入研究将为穿心莲活性成分的进一步研究奠定基础。     

Effect of Toxins Isolated from Exserohilum monoceras (Drechsler) Leonard and Suggs on Echinochloa crus-galli (L.) Beauv.

Exserohilum monoceras (Drechsler) Leonard and Suggs is a potential biocontrol agent for the control of Echinochloa species. This fungus causes leaf blight in Echinochloa species, but does not damage rice. Phytotoxicity of the fungal fermented broth was evaluated through the bioassay and the active ingredients were preliminarily isolated by using silica gel column chromatography (CC) in this study. The most active fraction 5-Ⅲ was obtained and analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). The results show that 5-Ⅲ consisted of many compounds, in which 36 compounds accounted for 94.24% of total peak area. Di-n-butyl phthalate (DBP) displayed the highest activity accounted for 9.24% of the total peak area, suggesting that DBP may be one of the main active compounds produced by E. monoceras.     

Effect of Toxins Isolated from Exserohilum monoceras （Drechsler） Leonard and Suggs on Echinochloa crus-galli （L.） Beauv.

Exserohilum monoceras （Drechsler） Leonard and Suggs is a potential biocontrol agent for the control of Echinochloa species. This fungus causes leaf blight in Echinochloa species, but does not damage rice. Phytotoxicity of the fungal fermented broth was evaluated through the bioassay and the active ingredients were preliminarily isolated by using silica gel column chromatography （CC） in this study. The most active fraction 5-Ⅲ was obtained and analyzed by gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）. The results show that 5-Ⅲ consisted of many compounds, in which 36 compounds accounted for 94.24% of total peak area. Di-n-butyl phthalate （DBP） displayed the highest activity accounted for 9.24% of the total peak area, suggesting that DBP may be one of the main active compounds produced by E. monoceras.     

里西裸囊菌代谢产物对植物幼苗的影响研究(英文)

[目的]对里西裸囊菌代谢产物对植物幼苗影响进行研究,使该具有潜力的生防因子得到有效应用。[方法]以对根结线虫具有很强杀虫作用的里西裸囊菌为试验材料,测定代谢产物对植物活性的影响,代谢产物活性的差异和不同浓度代谢产物对植物活性的影响。[结果]里西裸囊菌代谢产物对不同植物的影响不同;不同培养基培养和不同溶剂抽提的里西裸囊菌代谢产物对植物的幼苗影响不同;不同浓度里西裸囊菌代谢产物对不同植物幼苗生长影响不同。[结论]还需进一步深入研究该里西裸囊菌代谢物在防治根结线虫时所需的浓度和使用时期。     

里西裸囊菌代谢产物对植物幼苗的影响研究

[目的]对里西裸囊菌代谢产物对植物幼苗影响进行研究,使该具有潜力的生防因子得到有效应用。[方法]以对根结线虫具有很强杀虫作用的里西裸囊菌为试验材料,测定代谢产物对植物活性的影响,代谢产物活性的差异和不同浓度代谢产物对植物活性的影响。[结果]里西裸囊菌代谢产物对不同植物的影响不同;不同培养基培养和不同溶剂抽提的里西裸囊菌代谢产物对植物的幼苗影响不同;不同浓度里西裸囊菌代谢产物对不同植物幼苗生长影响不同。[结论]还需进一步深入研究该里西裸囊菌代谢物在防治根结线虫时所需的浓度和使用时期。     

Recent advance of nematophagous fungi from China and with a special case on Clonostachys rosea (Gliocladium roseum)

China is one of the twelve prolific biological diversity countries in the world, and nematophagous fungol resources are very abundant. In this paper, the research advance of nematophagous fungi is discussed from six aspects: resources introduction, biology of nematophagous fungi, the application of biocontrol agents, fungistsis in soils, research on nematicidal metabolites and molecular biology on nematophagous fungi. Concerning Clonostachys rosea, the alkaline protease (designated Lmz1) wa…     

拮抗细菌在植物病害防治中的应用及展望

综述了近年来拮抗细菌在植物病害防治中的研究现状和应用情况,对目前筛选的拮抗细菌的种类及其代谢产物的开发利用进行了详述,并提出了今后生防菌发展的主要趋势是通过基因工程改造产生新型、高效、稳定、适应性强的拮抗细菌。