乳牛胎盘硷性磷酸酶的提纯和性质

通过正丁醇抽提、硫酸铵沉淀、DE-52离子交换层析和Con.A—Sepharose4B亲和层析,从乳牛胎盘中提取出硷性磷酸酶(ALP)。提纯倍数为109倍,比活为87金氏单位/mg蛋白。乳牛胎盘提取液经薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳只出现1条酶带,pI值4.5;提取的ALP分子量为168000;对热稳定性差,于56℃下作用10min,其活性丧失84％;对磷酸苯二钠的km值为2.1mmol/L;L—苯丙氨酸和L—色氨酸对该酶有抑制作用,10mmol/L—苯丙氨酸使酶活性抑制27％,10mmol/L L—色氨酸使酶活性抑制49％;尿素对该酶的抑制作用随着尿素浓度的增加而逐渐加强,2mol/L尿素可使酶活性抑制87％;左旋咪唑对该酶有较强的抑制作用,10~(-4)mol/L左旋咪唑使酶活性抑制79％;该酶在pH<7的条件下不稳定,在pH7～11范围内较为稳定;最适pH为10.4;妊娠乳牛血清中不含有胎盘来源的ALP同工酶。     

马骨硷性磷酸酶的提纯和性质的研究

用正丁醇抽提、DEAE纤维素(DE—52)和Con.A—Sepharose 4B柱层析等方法从马骨中分离提取硷性磷酸酶(ALP)同工酶。提纯倍数为24倍。从DE—52柱层析中得到两个有部分交叠的酶活性峰。经等电聚焦电泳鉴别其pI值分别为4.22(酶峰Ⅰ)和4.18(酶峰Ⅱ)。两酶峰的热稳定性较差,于56℃作用10min,活性降低60％以上。作用于磷酸苯二钠的km值分别为25mM(酶峰Ⅰ)和6.67mM(酶峰Ⅱ)。尿素对酶活性的影响随着浓度的增高而加强,3M尿素对酶峰Ⅰ抑制达86％,对酶峰Ⅱ达71％。一定浓度的Mg~(2+)对酶有显著激活作用。Zn~(2+),Ca~(2+)激活不明显,高浓度时却有抑制作用。两峰对Ca~(2+)浓度变化有明显的不同反应。EDTA对酶抑制作用显著,Zn~(2+)、Ca~(2+)在一定浓度下对此抑制有轻度逆转作用。上述结果表明,马骨ALP至少有两种同工酶成分。它们不同的等电点、热稳定性差及对尿素敏感等特性,为临床检测马血清中的骨ALP提供了实验依据。     

鸡蛋黄碱性磷酸酶的提纯和性质

用乙醚抽提、硫酸铵沉淀,凝胶过滤、亲和层析等方法从鸡蛋黄中提取碱性磷酸酶,提纯倍数为470倍。用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测得该酶的等电点为3.85和4.35;用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得该酶的分子量为148000和70500;该酶对热不稳定;聚丙烯酰胺凝胶电泳出现二条带,证明该酶可能存在两种同工酶。     

蛋鸡输卵管碱性磷酸酶的提纯和性质

用硫酸铵沉淀、离子交换层析、亲和层析等方法将蛋鸡输卵管碱性磷酸酶提纯了113倍。等电聚焦电泳该酶出现1条带,PI为4.3,聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得其分子量为127000,以磷酸苯二钠为底物,其Km值为4.76mmol/L,该酶对热稳定,对尿素敏感,对左旋咪唑不敏感,L-苯丙氨酸和L-色氨酸对该酶有较强的抑制作用,EDTA对该酶有一定程度的抑制作用,一定浓度的Mg2+、Mn2+、Zn2+、Ca2+、Cu2+、Co2+、Fe3+、Cd2+、Se4+对该酶均有不同程度的激活作用,除Mg2+和Mn+2外,高浓度的上述阳离子对该酶均有抑制作用。     

鸡骨、肝和肠硷性磷酸酶的提纯和性质

用正丁醇抽提、DEAE纤维素(DE—52)和Con·A—Sepharase 4B柱层析等方法从鸡的骨、肝和肠组织中提取碱性磷酸酶(ALP)。提纯倍数分别为41倍(骨)、391倍(肝)和130倍(肠)。将粗提的ALP进行聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,骨、肝ALP均出现两条带,其分于量为154 000和353 000(骨),187 000和353 000(肝);肠ALP有3个组分,分子量为123 000、235 000和327 000。骨、肝、肠的ATP经DE—52柱层析均得到两个酶峰,其中总活性较大的峰(主峰)进行Con·A—Sepharose 4B柱层析后,其ALP对磷酸苯二钠的km值分别为0.532mM(骨)、0.452mM(肝)和0.472mM(肠)。骨、肝ALP对热敏感,而肠ALP则比较耐热,56℃作用9min,酶活性降低98.8％(骨)、95％(肝)和59.3％(肠)。尿素可抑制骨和肝ALP,肠ALP对尿素不大敏感。4 mol/L尿素对骨ALP活性抑制100％,对肝ALP 95％,对肠ALP仅为47％。2 mmol/L左旋咪唑能抑制骨ALP活性的57.1％、肝ALP的57.7％、肠ALP的15.7％。20 mmol/L L—苯丙氨酸能抑制肝ALP活性的12％、骨ALP的18.5％、肠ALP的57％。低浓度L—苯丙氨酸(1～15mmol/L)对骨ALP几乎没有抑制作用,而对肝ALP有一定抑制作用。上述结果表明,鸡的骨、肝和肠ALP可分为两型:一型为肠ALP,另一型为骨和肝ALP。     

鸡蛋黄碱性磷酸酶的性质

对鸡蛋黄碱性磷酸酶的热稳定性和抑制特性进行了测定，结果表明，蛋黄碱性磷酸酶对热不稳定，５６℃作用１５ｍｉｎ其活性丧失５５％，易受尿素，左旋咪唑和ＥＤＴＡ抑制，不易受Ｌ－苯丙氨酸和Ｌ－色氨酸抑制。     

蛋鸡输卵管碳酸酐酶的提纯和性质

通过电动匀浆、硫酸铵沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤、DE-23离子交换层析和Sulfamylon-Sepharose 4 B亲和层析等方法,从蛋鸡输卵管中提纯了碳酸酐酶(CA)。提纯倍数为171倍。提纯后经聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳鉴定其纯度,结果为1条蛋白带。测定CA分子量为29 800。该酶对热较敏感,于56℃下作用10min,其活性丧失65.5%;氨苯磺胺对CA有较强抑制作用,100μmol/L时使其活性几乎完全丧失;谷胱甘肽在0.5mmol/L时对CA有较微弱的激活作用,以后随着浓度升高则呈抑制效应;半胱氨酸对CA抑制作用较弱,50mmol/L时使其活性丧失10.14%;除Ca2+外,多种金属离子对CA均有不同程度的抑制作用,其中Cu2+、Zn2+、Ca2+、Se4+对CA抑制作用较强,Mn2+、Mg2+、Co2+、Fe3+对CA抑制作用较弱。Ca2+在10-5mol/L时可最大程度地激活CA使其IAR提高到117.7%,以后随浓度升高,激活作用逐渐减弱甚至呈抑制作用。     

鸡胰和十二指肠淀粉酶的提纯和性质

用硫酸铵沉淀、离子交换层析和亲和层析等方法,从鸡的胰和十二指肠中提纯了胰淀粉酶(P-Amyl)和十二指肠淀粉酶(D-Amyl).提纯倍数分别为67.5倍和78.8倍.二者提取液等电聚焦电泳鉴定均出现1条酶带,等电点分别为4.5和4.6.聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测定,二者的分子量均为53500.以可溶性淀粉为底物,测得P-Amyl和D-Amyl的Km值分别为6.20×10~-5和1.16×10~-5mol/L.P-Amyl对热敏感,D-Amyl则较稳定.EDTA强烈地抑制P-Amyl的活性,而对D-Amyl的抑制作用弱.P-Amyl和D-Amyl的最适pH分别为7.0和6.6.对P-Amyl和D-Amyl,Ca~(2+)、Mg~(2+)和Co~(2+)均有不同程度的激活作用,Cu~(2+)和Mn~(2+)有抑制作用;Zn~(2+)对P-Amyl有抑制作用;低浓度Fe~(3+)对P-Amyl有激活作用,高浓度Fe~(2+)对P-Amyl和D-Amyl均有抑制作用.     

血清碱性磷酸酶钙磷和乳成分的相关通径分析

本文对６０头西门干革命牛乳成分中的乳脂，乳蛋白，乳糖和水分进行了分析，并同时对血清中碱性磷酸酶（ＡＫＰ），钙（Ｃａ）和磷（Ｐ）的含量进行了测定。对血液中三个生化指标和乳成分之间的关系进行了相关通径分析。结果：ＡＫＰ，Ｃａ，Ｐ对乳成分作用影响不大，说明血清中ＡＫＰ，Ｃ，Ｐ不是决定乳中脂肪，蛋白，糖和水分含量的重要因素。     

试论乳牛性活动的节律和征状在不孕症诊断中的价值

乳牛不孕症内函障碍繁殖的几类疾病,发生颇为广泛。据我们课题组1980～1987年对我省5个地区12个市县6158头乳牛的调查,不孕牛占调查头数的17.99%;据金穗华报道,我国南方地区不孕症发病率高达55%,低为2.7%;据报道,苏联、美国、日本、捷克、瑞士等国乳牛不孕症发病率均在15%以上。各调查报告说明了乳牛不     

缺磷症和肝功障碍奶牛血清碱性磷酸酶同功酶的诊断价值

本文应用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳分析了81头健康、26头缺磷症、30头肝功障碍和17头缺磷症伴肝功障碍牛的血清AKP同功酶,并以热灭活试验鉴定其组织来源,探讨了该酶对奶牛缺磷症和肝功障碍的诊断价值。结果表明,健康和病牛血清中均有5条带,其中快带(SF)和慢-1(SS-1)存在于全部血清样中,其余3条慢带仅在部分血清中出现。具有诊断意义的SF和SS-1分别来源于肝脏和骨骼。健康牛的肝带和骨带均无弥散现象,两带间有明显间隔;缺磷症牛的骨带弥散并与肝带相连,形成一条宽而着色深的酶带;肝功障碍牛的肝带弥散,着色加深,但与骨带有间隙;缺磷症伴肝功障碍牛的肝带和骨带均有弥散,形成一条很宽而着色很深的酶带。上述酶谱变化可作为奶牛缺磷症和(或)肝功障碍的重要诊断指标。     

乳牛的三大代谢疾病及其防治

产后瘫痪、酮病、胎盘停滞是奶牛最常见的三种代谢病。近些年来,随着奶牛产奶量的不断提高,代谢病的发病率有上升的趋势。代谢病的发生,不但损害了奶牛的健康,而且降低了其生产性能,必须予以重视。 一、产后瘫痪。又名乳热症,多发于产乳性能高的乳牛。从发病的时间看,约有3％的奶牛在分娩前发病,6％在分娩时发病,75％在分娩后1～24小时内发病,12％于分娩后25～48小时内发病,4％在以后的时间内发病。可见,产后瘫痪主要发生在奶牛产后     

奶牛初乳的电导性质

初乳的电导率随奶牛泌乳期的延长呈上升趋势，多数奶牛初乳的电导高于常乳，在２０～６０℃时电导率和温度呈很好的线性关系，初乳电导率受温度的影响和泌乳时间呈例Ｕ型结构，初乳电导率是由脂肪、Ｋ＋Ｎａ＋Ｃｌ二者综合作用结果决定的。     

乳牛环境性乳房炎的特征和控制对策

乳房炎是遍及全世界各地的乳牛群中最常见、多发性的疾病，每年由此造成的损失是不计其数。根据感染病原的种类、对乳腺的亲和力以及在牛群中传播方式和控制方法的不同，可将乳房炎分成二大类，即传染性乳房炎和环境性乳房炎。传染性乳房炎（contagiousmastitis）的病原菌主要是金黄色葡萄球菌（staphylococcusaureus）和无乳链球菌（streptococcusagalactiae），它们对乳腺组织有高度亲和性，可感染于乳房中，在挤奶时可由感染区传染到非感染区，这类乳房炎可通过乳头没浴（teatdipping）和干奶期治疗（drycowtherapy）等管理措施的落实而…