数字PCR技术及对动物疫病检测应用

数字PCR是近年发展起来的一种核酸绝对定量的检测技术,与传统的PCR和荧光PCR技术相比,数字PCR具有较好灵敏度、准确度和重复性,可实现绝对定量分析,为动物疫病的早期诊断和病原的定量检测提供了一个新平台。本文介绍了数字PCR的技术原理,并对该技术在动物疫病检测领域的中应用进行综述。随着数字PCR技术的发展,相关动物疫病配套检测试剂的研发,数字PCR技术将在动物疫病中得到广泛应用。     

数字PCR技术在动物疫病检测中的应用

为了支持动物疫病流行地区的控制及消除计划,以及在动物疫病非流行地区进行有效筛查,必须使用更加准确灵敏的诊断手段。数字PCR可实现绝对定量及痕量核酸的检测,与传统检测方法相比具有不依赖参考物或标准品、对抑制剂具有较高耐受性、灵敏度和精准度更高的优点。数字PCR作为一种定量分析的核酸检测新方法,在动物疫病检测中得到了应用,围绕数字PCR技术的原理、应用、存在的问题及发展趋势等进行综述及分析,为数字PCR在动物疫病检测中的进一步应用提供参考。     

纳米PCR技术及其在动物疫病检测领域的应用

纳米聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术是将纳米材料应用PCR所形成的一门新兴技术,提高了PCR检测的准确性、可靠性。本文重点介绍了主要用于PCR反应的纳米材料及其特性,纳米材料增强PCR反应的机制,及其在动物疫病检测中的应用和未来发展前景。     

多重荧光定量PCR在动物检测中的应用

多重荧光定量PCR技术可以利用一次反应,同时检测、鉴别出多种病原体,在临床混合感染的诊断上具有独特优势和很高的实用价值。与实时荧光定量PCR技术结合,可以定量拷贝数、省去PCR后处理,减少交叉污染,整个检测过程耗时短、准确、高效、特异。因此本文对多重荧光定量PCR技术的分类及各种方法的优缺点做了简要概述,并对近年来多重荧光定量PCR在动物中的应用概况及其研究进展,如在动物性食品卫生中的应用、细菌病诊断、病毒病诊断、饲料中动物源性成分的检测、抗性基因检测及肿瘤早期诊断等有关方面进行概述,旨在为该技术的进一步开发应用提供理论参考。     

荧光定量PCR技术及其在动物营养中的应用

实时荧光定量PCR技术是一种通过检测PCR荧光信号的变化进行核酸定量的技术。目前,该技术已经应用于病原微生物、基因表达、基因组变异和多态性检测等许多方面。本文综述了定量PCR技术的基本原理及其在动物营养中的应用。     

数字PCR技术在动物疫病诊断中的应用进展

数字PCR技术是一种能够进行绝对定量的核酸检测技术,与实时荧光定量PCR技术相比,该技术敏感性更高、定量不依赖于标准曲线、对反应抑制物的耐受能力也更高。目前,该技术在转基因检测、物种鉴定、疾病诊断、病原微生物鉴定和精确定量分析等领域具有较广阔的应用前景。论文对数字PCR的发展历史、原理、优缺点及在动物疫病诊断中的应用进行了综述,以期为提高动物疫病诊断能力的提供借鉴。     

多重核酸检测技术在动物疫病诊断和食品安全监测领域的研究进展

核酸检测技术是目前动物疫病诊断和食品安全监测的重要手段。多重核酸检测技术可同时检测多种病原,具有通量高、损耗低的优势,在疫病诊断和食品安全监测等领域的应用越来越广泛。目前已研发出多种多重核酸检测技术,包括聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)多病原核酸检测技术、环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)多病原核酸检测技术、生物芯片多病原核酸检测技术、高通量测序多病原核酸检测技术等。由于检测原理不同,不同方法之间的检测性能存在较大差异。本文通过概述基于PCR/RT-PCR、LAMP/RT-LAMP、生物芯片、高通量测序建立的多重核酸检测技术,全面分析其在动物疫病诊断和食品安全监测领域中的特点和具体应用策略,以期推进病原检测技术的创新和发展,为动物疫病诊断及食品安全监测提供技术支持。     

LAMP技术研究进展及其在动物疫病检测中的应用

本文从技术原理、研究进展及在动物疫病检测中的应用三个方面对环介导等温扩增(LAMP)技术进行了阐述。与普通PCR、荧光定量PCR相比,LAMP技术具有不需要精密仪器、肉眼即可判定、操作简单、所用时间短、灵敏度高等优点,在水生和陆生动物的细菌病、病毒病、寄生虫病的检测中得到广泛应用。LAMP技术与其他技术的联合应用以及LAMP检测仪器的出现,更加促进了LAMP技术的发展和应用。     

血清学检测与PCR技术在生猪常见疾病防控中的应用进展

血清学检测和PCR技术是生猪常见疾病防控中常用的检测方法。血清学检测主要通过检测动物体内的抗体水平来评估免疫效果和疫情流行情况,而PCR技术则是通过检测病原的核酸来直接检测病原体的存在。本文就两种方法在生猪常见疾病防控中的应用进展进行综述。     

数字PCR技术在猪病检测中的研究进展

数字PCR(digital PCR,dPCR)技术是继常规PCR、实时荧光定量PCR(real time fluorescent quantitative PCR, qPCR)之后的第三代PCR基因检测技术,该技术不需要设置标准曲线,可实现绝对定量分析,具有敏感性和准确性高等特点,越来越多地被用于动物疫病的快速、准确检测。笔者主要介绍了dPCR技术的演变、原理、优缺点,尤其是在非洲猪瘟(African swine fever, ASF)、猪圆环病毒病(porcine circovirus disease, PCVD)、猪伪狂犬病(pseudorabies, PR)、猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome, PRRS)、布鲁氏菌病(brucellosis)等常见猪病检测中的应用,以期为dPCR在动物疫病诊断中的推广应用提供参考。     

套式PCR在支原体检测中的应用

支原体(Mycoplasma)是一类缺乏细胞壁的原核微生物,它对猪、牛、禽以及实验动物等具有广泛的致病性,主要以侵害呼吸系统和生殖系统为主,还能引起关节炎、乳腺炎以及眼部感染.由于它为难培养的微生物,因而限制了一般实验室对其深入的研究.目前,其检测方法主要有分离培养法、电镜法、血清学方法以及核酸探针法等[1],但都存在着种种不足.进入20世纪90年代之后,国内外众多学者在PCR技术广泛应用的基础上,发展并形成了套式PCR方法(nested PCR,nPCR)来研究支原体.目前,应用套式PCR技术已在组织细胞培养中的支原体污染、动物支原体病诊断和人类疾病与支原体感染中得到了广泛的应用.     

动物疫病诊断的多重PCR技术应用分析

科学技术的发展使现阶段动物疫病的检测和诊断手段变得更加多样化,且对于动物养殖有着重要的现实意义。多重PCR技术是一种能够在一次检测中诊断和检验出多种动物疫病的检测手段,不但本身的检测准确率较高,而且应用范围也更广,值得推广使用。     

PCR在动物支原体检测中的应用

PCR是近年来发展起来的一项分子生物学新技术 ,具有灵敏、特异、快速、简便和适用面广等优点 ,因而在分子生物学检测与研究中具有广阔的应用前景。目前 ,PCR被广泛应用于众多领域 ,其在支原体检测中的应用与发展已经取得了可喜的成绩。文章简要介绍 PCR在动物支原体检测中的应用 ,包括应用通用 PCR引物与特异性引物检测支原体 ,以及 PCR在禽类、牛和猪支原体检测中的应用现状。表明在实验室和临床中应用 PCR检测支原体是一种有效的方法。     

数字PCR技术在动物疫苗研究中的应用前景

数字PCR(digital PCR,dPCR)技术是基于“有限稀释”和“泊松分布”原理迅速发展的第三代PCR技术,无需标准品即可实现样品的绝对定量,灵敏度高、操作简单,在疫病检测、转基因鉴定、食品检测等方面得到快速发展,而在动物疫苗研究领域也被越来越多用于质控、筛查和定量。本文从动物疫苗研究的角度,阐述了数字PCR在动物疫苗基因变异检测、基因定量、效价测定、疫苗效果评价等方面的发展潜力。该技术将有助于解决动物疫苗研究过程中的病毒生长曲线和疫苗效价测定以及基因变异分析等重点难点问题,未来将成为疫苗研发的有力工具。     

PCR技术在动物医学方面的研究进展

PCR技术是20世纪80年代中期发展起来的一种体外特异性扩增DNA片段的新技术,在分子生物学检测与研究中得到广泛应用。本文扼要介绍了PCR技术的基本原理,并对该技术在动物疫病诊断和免疫预防等应用方面的新进展作了综述。     

PCR技术及其在禽流感诊断中的应用

目的:分析PCR技术原理并探讨其在禽流感诊断中的应用价值。方法:回顾分析近几年PCR(多聚酶链式反应)技术在禽病中的应用研究资料,并对该技术的特点进行总结。结果:PCR技术具有比较好的灵敏性、特异性等优点,操作十分迅速便利。既可单独运用于实验、检测中,还可同其他技术相配合,其应用对象比较广泛,几乎覆盖了所有生物,在DNA检测和RNA扩增检测中同样适用。结论:PCR技术在禽流感诊断中具有较高的应用价值,对禽流感病毒检测十分灵敏准确,可在实际诊断过程中予以利用和推广。     

信息快递

通过实时定量PCR技术检测公猪精液中的具重要经济意义的病毒目前英国一家动物疾病研究机构进行了一项研究,这项研究的目的是通过实时定量PCR来检测公猪精液里的5种在经济上具有重要意义的病毒,即:伪狂犬病毒(PRV),猪瘟病毒(CSFV),口蹄疫病毒(FM D V),猪水泡病毒(SVD V)猪繁殖与呼吸系统综合症病毒(PRRSV)。实时定量荧光PCR检测方法有着高特异性和极佳敏感度(几乎达到检测极限)的特点,这些特点已为人们所公认研究人员将特定病毒人工感染实验动物,然后分别采用常规病毒分离方法和实时定量PCR检测方法同时检测病料,并对实验结果进…     

影响实时荧光定量PCR技术的因素及对策

<正>实时荧光定量PCR技术以其特异性强、灵敏度高、重复性好、自动化程度高、检测速度快等优点在动物疫病的监测、检测和诊断中发挥巨大的作用,但是影响实时荧光定量PCR技术的因素却不容忽视。试验就实时荧光定量PCR技术的影响因素及相应对策进行综合分析,以提高动物疫病监测、检测和诊断的水平。1样品处理因素1.1样品的采集应按照活体动物样品的采集要求采集猪扁桃体、家禽咽肛拭子、牛羊食道-咽部分泌物(O-P液)、     

实时定量PCR技术在动物疫病研究中的应用

实时定量PCR（real-time quantitative PCR）是在PCR技术基础上发展起来的一种高度灵敏的核酸定量技术。实时定量PCR继承了PCR技术灵敏、快速、特异的优点，同时又克服了PCR技术中存在的假阳性率高、易污染、EB染料对实验人员的危险以及不能进行准确定量等缺点。实时定量PCR实现了PCR从定性或半定量到准确定量的飞跃，目前，已经成为分子生物学和医学研究等领域的重要工具。本文就实时定量PCR技术及其在动物研究领域中的应用作一综述。     

转基因动物及其产品检测技术研究进展

为探索可靠、灵敏的转基因动物及其产品检测技术,从核酸检测和蛋白检测两个方面,综述了转基因动物及其产品不同检测技术的原理、特点及应用,提出了每种检测技术的不足及今后转基因检测技术的发展趋势和研究方向。目前,已经研发的核酸检测技术主要包括多种PCR方法、环介导等温扩增技术、Southern blot技术和染色体原位杂交技术等,蛋白检测方法主要包括酶联免疫吸附检测技术、免疫层析试纸条、Western blot技术、免疫组织化学和免疫荧光技术等。三代测序技术是近年来提出的一种新型基因检测技术,适用于对未知序列转基因动物的分析。随着转基因技术的发展,转基因动物及其产品越来越多,高通量、高灵敏度和低成本的检测技术将成为未来转基因动物及其产品检测的研究重点。