竹鼠源棒状杆菌分离鉴定及致病性分析

从病死竹鼠体内分离到1株细菌,通过形态学观察、生化试验鉴定、16S rDNA基因测序分析及系统进化树构建等方法对分离菌种属进行确定,并采用纸片扩散法进行药敏试验,PCR方法检测耐药基因和毒力基因,人工感染小鼠试验确定分离菌的致病力。病原鉴定显示,分离菌为革兰阳性杆菌,16S rDNA基因测序及BLAST比对显示其与棒状杆菌序列相似度达92.1%～99.2%,结合生理生化鉴定结果确定分离菌为棒状杆菌;药敏试验显示,该分离菌对氟苯尼考、头孢氨苄和青霉素等药物敏感,对复方新诺明、四环素和红霉素等药物表现耐药,耐药基因检测结果显示为oqxB、tetX、sul1和ermF阳性,与药敏试验表型一致;该菌对小鼠有致病性,毒力基因检测发现,分离菌携带fyuA和papA。本研究为竹鼠棒状杆菌病预防及合理用药提供依据。     

不同禽源里氏杆菌分离鉴定及同源性比较

对安徽部分地区疑似传染性浆膜炎的病鸭、鹅脑组织进行病原菌分离鉴定及病理学观察;经PCR鉴定,确定为鸭疫里氏杆菌。分别对5株分离菌的16S rRNA基因和Omp A基因进行核苷酸序列测定,同源性分析,构建系统进化树。结果表明:20株不同来源鸭疫里氏杆菌的16S rRNA基因和Omp A基因均分为2个群,安徽地区的5株分离株在不同群中的不同分支,同源性高达97.4%~100%。     

牦牛源干燥棒状杆菌的分离与鉴定

一只牦牛屠宰后肝有干酪样结节,为了探究其形成原因,本研究对该牦牛肝进行细菌的分离培养,对所分离可疑致病菌的16SrRNA以及rpoB基因序列进行扩增和序列分析,并用Vitek 2全自动微生物鉴定仪进行生化表型的鉴定,用K-B法进行药敏试验。结果显示,经细菌分离培养得到一株革兰阳性、棒状、可疑致病菌;其16S rRNA扩增片段大小1 483bp,GenBank序列编号为MH000696,该菌的16SrRNA与干燥棒状杆菌GD34株(KF928790.1)等的相似性最高,序列一致性为99%,系统进化树显示,本菌与干燥棒状杆菌在同一进化分支上;rpoB基因扩增片段大小434bp,GenBank序列编号为MH006608;Vitek 2全自动微生物鉴定仪鉴定为变异库克菌,可信度为93%。该菌对妥布霉素、氨曲南、头孢哌酮、米诺环素等多种药物高度敏感。综上所述,分离的细菌为干燥棒状杆菌,但基因序列,如rpoB等以及生化表型均存在一定程度的变异,本研究为兽医临床上该菌的分离和鉴定提供了依据,且为该菌的致病性研究奠定了基础。     

竹鼠源棒状杆菌的分离鉴定及毒力基因检测

为查明患病竹鼠死亡原因,本实验采集死亡竹鼠心脏、肝脏、肾脏等实质器官进行分离纯化,结果显示,在接种死亡竹鼠肝脏、肺脏样品的鲜血琼脂平板上均长出1株呈光滑、圆润、湿润、乳白色不透明、中等大小的革兰氏阳性杆菌菌落;进一步结合生理生化实验与细菌16S rDNA基因测序结果确定其为棒状杆菌,并命名为GZ-BZGJ.对分离菌株进...     

鸡源凝结芽孢杆菌的分离鉴定及耐受性分析

【目的】试验旨在寻找1株性能稳定、环境耐受性强的凝结芽孢杆菌菌株,以在实际生产中发挥其替抗功能。【方法】本研究采集160日龄健康海兰褐蛋鸡的粪便样本,进行细菌分离纯化,并对分离菌进行形态学特征观察、生理生化鉴定、16S rDNA测序分析。通过绘制该菌的生长动力曲线确定其生长规律;利用耐酸、耐胆盐试验分析该菌株的耐受性;通过单因素试验对分离菌株的培养条件进行优化。【结果】分离菌在普通培养基上长出表面粗糙、不规则的灰白色菌落,镜检为杆状、芽孢端生的革兰氏阳性菌。结合生化试验及16S rDNA基因序列分析综合鉴定该菌株为凝结芽孢杆菌,命名为NJ001。生长动力曲线表明,7～24 h为该菌株的对数生长期,24 h活菌数达到顶峰,凝结芽孢杆菌NJ001的最佳培养时间为24 h;耐受性试验结果显示,该菌株pH 3.0温育2 h存活率为59.5%,pH为4.0时存活率达到87.6%以上,对酸有较强耐受力;0.3%胆盐处理2 h存活率为54.0%,胆盐浓度升至0.5%时存活率仍有50%以上,该菌对胆盐有较强的耐受性。单因素试验结果发现,该菌的最佳培养温度为40℃,接种量2%,初始pH 7.0,摇床转速...     

一株肉牛源干燥棒状杆菌的分离鉴定

为了确定河北省昌黎县某肉牛场肉牛发病原因,本研究从呼吸道症状明显的病牛鼻粘液中分离纯化到1株优势菌,采用细菌培养、革兰氏染色、细菌生化鉴定、rpoB基因检测、16S rRNA序列分析方法鉴定,经K-B试纸法检测该分离菌对泰乐菌素、头孢拉定等18种抗生素的药物敏感性。结果显示,分离菌革兰氏染色呈阳性短杆状球菌,在血琼脂培养基上可生长为干燥且粗糙的淡黄色菌落,在LB液体培养基中呈沉淀生长,菌液上层轻微浑浊,下层有颗粒状、片状沉淀;rpoB基因PCR扩增检测结果为阳性;该分离菌具有脂酶、赖氨酸脱羧酶、β-葡萄糖苷酶、α-葡萄糖苷酶活性,能够发酵海藻糖、麦芽糖、蔗糖,结果符合干燥棒状杆菌生化特性;16S rRNA序列比对分析表明,该分离菌与干燥棒状杆菌同源性为99%,一致性为91.6%;对泰乐菌素、头孢拉定等7种药物耐药,对环丙沙星、恩诺沙星等9种药物敏感。试验结果表明该分离菌为干燥棒状杆菌。     

鸡源抗逆性芽孢杆菌的分离鉴定

试验通过对健康肉鸡盲肠内容物高温处理后,筛选获得3株芽孢杆菌疑似菌,并对其进行耐酸、耐胆盐及抑菌试验,最终获得1株抗逆性最强的菌株Y1,并对其进行形态观察、生理生化试验及16S rDNA序列同源性分析,最终确定其为凝结芽孢杆菌。     

河南省鸡源结肠弯曲杆菌的分离鉴定及耐药性分析

[目的]掌握河南省鸡源结肠弯曲杆菌的分布和对抗菌药物的耐药情况。[方法]从养殖场抽取鸡泄殖腔拭子460份进行结肠弯曲杆菌分离培养,采用PCR、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行鉴定,并通过微量肉汤稀释法对分离菌株进行药物敏感性分析。[结果]共分离结肠弯曲杆菌42株,分离率为9.13%;分离的结肠弯曲杆菌对环丙沙星、萘啶酸、阿奇霉素耐药严重,耐药率分别为95.24%、90.48%、71.43%。[结论]河南省鸡源结肠弯曲杆菌耐药情况较为严重,应规范使用抗菌药物。     

化脓棒状杆菌的分离与鉴定

北京动物园的2头斑羚和1头岩羊相继发病死亡。剖检发现肺部均有淤血和化脓灶。经取其肺组织作细菌培养,均分离到纯粹的杆菌。经细菌形态、培养特性和生化特性分析,鉴定为化脓棒状杆菌。     

1株鸭源棒状杆菌的分离及鉴定

从四川某鸭场发病种鸭的肝脏组织中分离到1株革兰阳性杆菌,通过形态特征、培养特性、生化特性进行鉴定,并进行药敏试验,应用通用引物对其16S r RNA基因进行克隆与序列分析。结果显示,分离细菌在血琼脂平板生长良好,能发酵部分糖类。系统进化分析显示,分离菌株与棒状杆菌属细菌遗传进化关系较密切,其16S r RNA基因序列与棒状杆菌代表菌株的同源性在87.1%~98.9%之间,分离菌鉴定为棒状杆菌。     

山羊源伪结核棒状杆菌的分离鉴定及其毒力评价

为了确定齐齐哈尔市某山羊养殖场疑似患有伪结核病病羊的病原及其毒力,试验从不同病羊的皮下脓包中采集脓汁病料3份,通过细菌的分离与纯化、生化鉴定、16S rDNA基因的PCR扩增与序列分析确定病原,并通过致病性试验对分离株的毒力进行评价。结果表明：共得到3株分离株,其菌落形态和生化特性菌与伪结核棒状杆菌相符,分别命名为CP045、CP073、CP969;分离株CP045、CP073、CP969的16S rDNA基因序列与伪结核棒状杆菌参考株的相似性分别高达98.8%、100%、99.8%,进一步确定3株分离株均为伪结核棒状杆菌。注射分离株CP073的3只小鼠中有2只于注射后36～48 h陆续死亡,1只精神极度沉郁、食欲不振;注射分离株CP045、CP969的3只小鼠于注射后5 d内均未见死亡,但状态不佳。注射分离株CP045、CP073、CP969的小鼠肝脏均不同程度出血、肿大,脾脏轻微出血;注射分离株CP073的小鼠皮肤表面有黄色脓汁渗出,皮下有黄白色玉米粒大小的结核样脓肿;注射分离株CP045和CP969的小鼠皮下未见明显脓肿。说明该山羊养殖场疑似患有伪结核病的病羊感染了伪结核棒状杆菌...     

江苏地区鸡源弯曲杆菌分离鉴定及耐药性研究

为了解江苏地区鸡源弯曲杆菌的流行和耐药状况,采集养殖场及农贸市场鸡泄殖腔棉拭子样品和超市鸡肉样品进行空肠弯曲杆菌、结肠弯曲杆菌的分离与鉴定,对分离菌株采用纸片扩散法检测其耐药情况。结果显示:泄殖腔棉拭子样品弯曲杆菌总分离率为38.68%(205/530),其中空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌阳性率分别为27.36%(145/530)和11.32%(60/530);鸡肉样品中弯曲杆菌总分离率为45.33%(68/150),其中空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌阳性率分别为30.00%(45/150)和15.33%(23/150)。所有样品空肠弯曲杆菌分离率极显著高于结肠弯曲杆菌(P0.01),就泄殖腔棉拭子样品而言,养殖场样品弯曲杆菌总分离率显著高于农贸市场样品(P0.05),泄殖腔棉拭子样品与鸡肉样品弯曲杆菌分离率无显著性差异(P0.05)。耐药检测结果显示,弯曲杆菌对9大类27种抗生素耐药率在80%以上的有6种,分别为头孢噻肟、头孢曲松、诺氟沙星、环丙沙星、甲氧苄胺嘧啶和克林霉素,所有菌株表现出多重耐药现象,耐药谱主要集中在12耐、13耐和14耐。研究表明,江苏地区鸡源弯曲杆菌流行普遍,分离菌株存在耐药现象且多重耐药情况较严重。     

山羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定

从福建省不同羊场的山羊颈肩部淋巴结脓肿处分离到5株无荚膜、不形成芽孢的革兰氏阳性球杆菌,该菌在含血清的琼脂培养基上,可生长成直径1-2 mm、干燥、中央凸起、不透明、边缘不整齐、伴有β溶血环的菌落,而在普通培养基上生长不良,在麦康凯琼脂培养基上不能生长。根据其形态学、培养特性、生化特性及致病性试验和动物回归试验结果,判定所分离的5株菌为山羊伪结核棒状杆菌。     

林麝化脓棒状杆菌的分离和鉴定

某养麝场的2只林麝1只鼻镜发生脓肿,另一只右颌下发生脓肿,对患脓肿病的林麝无菌采取其两处脓汁进行细菌培养并鉴定。经细菌形态、培养特性和生化特性分析,鉴定为化脓棒状杆菌(Corynebacterium pyogenes)。药敏试验表明:该菌对克林霉素、头孢曲松、头孢噻肟、万古霉素、氯霉素、红霉素和四环素均敏感。     

一株鸡源鲍曼不动杆菌的分离鉴定

在对某肉鸡养殖场蛋鸡死亡病因诊断过程中,从病死鸡肝脏分离到一株优势菌,对该菌进行革兰氏染色、细菌生化鉴定、16S rDNA序列分析、致病性试验以及药物敏感性试验。试验结果显示,分离菌为鲍曼不动杆菌。分离菌感染7日龄雏鸡,雏鸡死亡率为100%。分离菌对诺氟沙星表现中敏;对青霉素、氨苄西林等6类11种抗生素类药物耐药。研究为鲍曼不动杆菌引起的禽病防治提供参考。     

鸡源大肠杆菌的分离鉴定及药敏分析

为分析鸡源大肠杆菌的分子流行特点及其耐药情况,研究采用鸡源大肠杆菌分离培养、形态观察、微生物学鉴定、致病性分型鉴定、多重PCR进化分群鉴定(针对arpA、chuA、TspE4.C2和YjaA基因)、药敏分析等.结果 表明:分离出的菌株均为大肠埃希氏菌,属于肠产毒性大肠埃希氏菌(ETEC)、肠侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC...     

鸡源芽孢杆菌的分离鉴定及小鼠毒性试验研究

本试验从鸡肠道分离出 42 株菌种,通过对菌种菌落培养特性、形态观察、生理生化试验,初步鉴定出 8 株为芽孢杆菌.用这 8 株菌对小白鼠进行为期 20 d 的正常量和加倍量的饲喂,结果表明,试验组小白鼠均未出现中毒现象,所选用的 8 株细菌均较安全,可作为动物微生态制剂的菌种应用.     

鸡源凝结芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

研究旨在筛选方便加工和储存及颉颃性强的乳酸菌菌株,并通过体外共培养法评价其抑菌效果及其发酵特性。试验从邢台山区散养鸡粪便中分离到1株对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有强颉颃作用的产酸芽孢菌,编号为c-4,经形态及生理生化试验鉴定为凝结芽孢杆菌。该菌株具有好氧和厌氧双重发酵特性,可以利用葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇和麦芽糖等多种碳源及玉米浆、酵母粉、蛋白胨和豆饼粉等多种氮源。体外厌氧共培养抑菌试验表明,分别降低大肠杆菌和金黄色葡萄球菌菌数指数2和3个数量级以上,并可显著降低pH(P0.05),具有在肠道中替代抗生素抑制有害菌及调整微生态等多方面的应用潜力。     

鸡李氏杆菌的分离鉴定

2006年3月份,黑龙江省鸡西市某养鸡场蛋鸡突发传染性疾病并大量死亡。临床表现为不食,下痢,病程长的表现痉挛、斜颈等神经症状。病理变化以心肌、肝脏出现广泛性坏死灶居多,脾肿大且呈斑驳状,有的表现为全身性败血症。病死鸡经细菌分离鉴定确定为产单核细胞李氏杆菌感染,现报道