30株鸡大肠杆菌ESBLs基因型检测及耐药性分析

采用2倍稀释法检测30株鸡大肠杆菌对常见药物耐药性,用表型筛选和确证试验检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况,并分别用TEM、SHV和CTX-M等3种通用引物进行PCR扩增以确定其基因型.结果显示23株大肠杆菌为产ESBLs株,占76.7%.PCR扩增表明TEM、CTX-M、SHV阳性率分别为73.9%、43.5%和0%,有7株同时检测出TEM和CTX-M基因(占30.4%),3株未检测出TEM、CTX-M和SHV 3种基因(占13.0%).药敏试验结果显示产ESBLs大肠杆菌对药物的多重耐药性明显比非产酶大肠杆菌严重,产酶菌对氨苄西林和头孢噻呋的耐药率最高,为95.7%,对氨基糖苷类、恩诺沙星和复方新诺明的耐药率均高于78%,氨苄西林和三代头孢与酶抑制剂联用或2种不同种类的药物联用均能明显增强抗菌活性.以上结果表明河南省76.7%的临床分离鸡大肠杆菌为产ESBLs株,其基因型主要是TEM和CTX-M,尚无SHV型,β-内酰胺类与酶抑制剂联用或不同种类药物联用是防治鸡产酶大肠杆菌感染的有效措施之一.     

鹤源大肠杆菌ESBLs基因型检测及其耐药性分析

采用K-B法检测40株鹤源大肠杆菌对17种抗菌药物的耐药性。根据耐药表型和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型流行情况,指导临床合理用药。结果表明:15株大肠杆菌为产ESBLs株。扩增出了与预期片段大小相符的TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型基因。产酶大肠杆菌耐药性明显比非产酶大肠杆菌严重。     

鸭大肠杆菌ESBLs的检测及耐药性分析

本文对临床分离的12株鸭大肠杆菌进行了ESBLs检测,并用K-B纸片法测定了其对常见几种抗菌药物的敏感性,以期为抗菌药的临床合理应用提供依据.结果表明:临床分离的12株大肠杆菌中有4株产ESBLs,检出率为33%.产酶菌对β-内酰胺类抗生素阿莫西林、头孢噻呋的耐药率都高达100%,而不产酶菌对β-内酰胺类抗生素阿莫西林、头孢噻呋的耐药率均为87.5%;4株产酶菌中对氨苄西林、氨曲南耐药率分别为75%、50%,而8株不产酶菌对其耐药率分别为62.5%、0.0%,可见产酶菌的耐药率明显大于不产酶菌.同样,对于氨基糖苷类、喹诺酮类等其他抗菌药物也出现此种情况,说明产酶菌对这些药物存在多重耐药性.所以,临床中应注意通过药敏试验合理选用药物.才能取得好的治疗效果.     

鸭大肠杆菌ESBLs的检测及耐药性分析

本文对临床分离的12株鸭大肠杆菌进行了ESBLs检测,并用K-B纸片法测定了其对常见几种抗菌药物的敏感性,以期为抗菌药的临床合理应用提供依据。结果表明：临床分离的12株大肠杆菌中有4株产ESBLs,检出率为33％。产酶菌对β-内酰胺类抗生素阿莫西林、头孢噻呋的耐药率都高达100％,而不产酶菌对β-内酰胺类抗生素阿莫西林、头孢噻呋的耐药率均为87．5％;4株产酶菌中对氨苄西林、氨曲南耐药率分别为75％、50％,而8株不产酶菌对其耐药率分别为62．5％、0．0％,可见产酶菌的耐药率明显大于不产酶菌。同样,对于氨基糖苷类、喹诺酮类等其他抗菌药物也出现此种情况,说明产酶菌对这些药物存在多重耐药性。所以,临床中应注意通过药敏试验合理选用药物,才能取得好的治疗效果。     

产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）乳牛乳腺炎大肠杆菌的检测及其基因型分布

为了解采自内蒙古和上海地区的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）乳牛乳腺炎大肠杆菌的流行特点、耐药性和基因型分布,采用美国临床实验室标准化委员会（CLSI）2005年推荐的初筛及纸片确认方法对内蒙古地区的58株和上海地区的22株乳牛乳腺炎大肠杆菌进行了ESBLs的检测及耐药性分析,并采用PCR扩增和PCR产物测序方法对产ESBLs菌株进行基因分型。结果显示,内蒙古地区检出6株产ESBLs菌株,阳性率为10.34%,其中,有1株菌携带TEM-1基因,有1株携带CTX-M-14型基因,而有3株同时携带TEM-1型和CTX-M-14型2种基因,只有1株菌未检出上述基因。上海地区未检出产ESBLs菌株。结果表明,产ESBLs菌株多表现为多重耐药,对各种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株。     

鸡大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检测及药物敏感性分析

β-内酰胺类抗生素是临床常用的控制鸡大肠杆菌病的抗生素。对河南省两地区分离的11株鸡大肠杆菌进行了ESBLs检测并研究其对12种抗菌药的敏感性,以便了解该两地区鸡大肠杆菌产ESBLs的流行情况,并为临床合理选择抗菌药和防止耐药菌散播提供部分依据。     

鸡源大肠杆菌ESBLs的检测

β-内酰胺环类抗生素具有广谱、高效、低毒的特点，有很广阔的应用前景，但耐药菌株的出现使其应用受到很大的限制。超广谱β-内酰胺酶（Extend spectrum β-lactamses，ESBLs）的产生是革兰阴性菌对新型广谱β-内酰胺类抗生素产生耐药性的重要机制之一。ESBLs在革兰氏阴性菌中常见，细菌产生ESBLs后，对临床常用的青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类和喹诺酮类抗生素都可耐药，耐药谱可因小同地区使用抗生素的差异而变化很大。     

小檗碱消除ESBLs大肠杆菌耐药性的研究

为了研究小檗碱消除超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌耐药性的效果，试验以3株ESBLs大肠杆菌作为研究对象，采用二倍稀释法测定小檗碱作用3株ESBLs大肠杆菌前后的MIC变化，然后采用琼脂糖凝胶电泳、ELISA法和实时荧光定量PCR方法分别检测小檗碱作用后大肠杆菌R质粒、ESBLs活性、生物被膜形成及外排系统AcrA mRNA、AcrB mRNA转录水平的变化。结果表明：3株ESBLs大肠杆菌对小檗碱的MIC均为2.00 mg/mL;经小檗碱作用后有2株ESBLs大肠杆菌对头孢噻肟的MIC从32.00 mg/mL降至8.00 mg/mL,有1株ESBLs大肠杆菌对头孢噻肟的MIC从32.00 mg/mL降至16.00 mg/mL。经小檗碱作用后有2株ESBLs大肠杆菌质粒条带消失2条，有1株ESBLs大肠杆菌质粒条带消失1条；3株ESBLs大肠杆菌的ESBLs活性均极显著降低(P<0.01),碱性磷酸酶活性均极显著升高(P<0.01);3株ESBLs大肠杆菌外排系统AcrA mRNA转录水平极显著降低(P<0.01),2株ESBLs大肠杆菌外排系统AcrB mR...     

肉牛源产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药基因检测

从黑龙江省齐齐哈尔市周边肉牛场分离出一株肺炎克雷伯菌,对其进行药敏试验,发现其对β-内酰胺类药物有很强的耐药性。通过PCR探究其携带的耐药基因,发现其携带CTX-M-2耐药基因,表明该株细菌为CTX-M型的产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯细菌,通过产生β-内酰胺酶水解内酰胺环使药物失去作用,达到耐药。     

鸡大肠杆菌临床菌株耐药性的初步检测

用试管二倍稀释法检测5株临床分离鸡大肠杆菌对常见药物的耐药性,同时检测其是否产β-内酰胺酶和超广谱β-内酰胺酶。结果表明:5株临床鸡大肠杆菌对12种常见药物均产生不同程度耐药,其中两株山东分离株最严重,但均未发现产超广谱β-内酰胺酶菌株。     

55株鸡大肠杆菌超广谱β-内酰胺基因的检测分析

通过ESBLs初筛实验方法和以blaTEM, blaSHV、blaCTX-M为引物的ESBLs耐药基因扩增,检测出55株大肠杆菌分离株有46株呈ESBLs表型,37株携带至少一种bla基因。其中26个分离株携带TEM基因,32个分离株携带CTX-M基因(16个CTX-M-15,10个CTX-M-55,6个CTX-M-3),没有分离到携带blaSHV基因的大肠杆菌。另外有9株不含blaTEM, blaSHV或blaCTX-M中的任何一个基因。结果显示多数大肠杆菌分离株呈产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型,ESBLs基因分型以TEM型、CTX-M型为主,45.6%的菌株同时携带两种基因。     

48株大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型检测

为了解重庆地区部分鸭场大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因分布情况及抗生素的应用对鸭场环境菌的影响。本试验采用PCR技术,对48株大肠杆菌(包括20株病料分离株和28株鸭场土壤分离株)的ESBLs基因TEM、SHV、CTX-M进行检测。结果表明,TEM、SHV、CTX-M型基因在病料分离株中的检出率分别为100%、30%、25%,鸭场土壤中的检出率分别为57.1%、21.4%、28.6%。不同来源的菌株均能检测出耐药基因,且部分细菌携带两种以上耐药基因;病料分离株和鸭场土壤分离株中携带的ESBLs基因均以TEM型为主。     

鸡源大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

为探明泰州地区鸡源大肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及耐药情况,对13株分离自泰州地区的鸡源大肠杆菌进行ESBLs检测,并采用微量肉汤稀释法测定不同药物对产ESBLs菌和非产ESBLs菌的最小抑菌浓度(MIC).结果显示,13株分离菌中有5株被确定为产ESBLs菌株,阳性率为38.5%.产ESBLs菌对β-内酰胺类抗菌药的耐药性极其严重,耐药率明显高于非产ESBLs菌,二者对氨苄西林的耐药率分别为100%和62.5%,对头孢噻呋的耐药率分别为100%和12.5%,对头孢曲松的耐药率分别为80%和20%,产ESBLs菌对其他抗菌药物的耐药率也明显高于非产ESBLs菌.氨苄西林与舒巴坦(2:1)联用与单用氨苄西林相比,对产ESBLs菌的MIC值降低至单用氨苄西林时的1/16~1/8,但对非产ESBLs菌的MIC值没有明显变化.氨苄西林与阿米卡星(1:1)联用与单用两者中的任何一种相比,对产ESBLs菌和非产ESBLs菌的MIC值均降低至单药时的1/16~1/2.结果表明,临床可选择β-内酰胺酶类抗生素与β-内酰胺酶抑制剂的混合制剂来治疗产ESBLs鸡大肠杆菌的感染,也可尝试将不同种类、不同作用机理药物联合应用来治疗鸡大肠杆菌感染,尤其是耐药性鸡大肠杆菌感染.     

犬源大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因检测

犬源大肠杆菌是引起犬的乳房炎、子宫蓄脓、肺炎、脓皮病的一类病原菌。通过对犬的上述4种疾病类型的病料进行分离培养,研究分离菌株的形态染色特性、培养特性、生化特性、对抗生素敏感性、血清型特性,并测定它们的TEM、SHV、CTX-M-1、CTX-M-9型超广谱β-内酰胺酶基因特性,探讨犬源大肠杆菌的致病机理,为预防和控制犬源大肠杆菌病提供理论依据。     

中药野菊花提取物与抗菌药联合对产ESBLs大肠杆菌抑制效果研究

试验旨在探讨野菊花提取物与抗菌药联合作用对产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamases, ESBLs）大肠杆菌的体外抑制效果,为野菊花的进一步开发利用提供理论依据。采用2倍微量稀释法和中西药联合诱导传代法测定野菊花提取物、抗菌药及联合作用后的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）。结果显示,野菊花水提物对该耐药大肠杆菌的MIC值为250 mg/mL,且在野菊花水提物亚抑菌浓度（1/2 MIC）作用下进行中西药联合传代,其与头孢曲松钠、头孢噻呋钠、头孢噻肟钠、氟苯尼考、痢菌净、阿米卡星、林可霉素7种抗菌药联合作用后,抗菌药的MIC值明显降低。表明野菊花水提物能够显著降低产ESBLs大肠杆菌对部分抗菌药的敏感性。     

辽西地区鸡源大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测

为检测辽西地区(锦州、盘锦、阜新、朝阳、葫芦岛)鸡源大肠杆菌的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),选取15种代表药物,采用Kirby-Bauer纸片法、最小抑菌浓度(MIC)法进行药敏试验。结果:分离检测到产ESBLs的37株大肠杆菌,对氨苄西林、头孢噻呋、新诺明的耐药率较高,均高于91.2%,对硫酸安普霉素、阿米卡星、恩诺沙星、复方新诺明的耐药率均高于78.4%,对多西环素、氟苯尼考、克林沙星药物耐药率等于或低于46.0%,头孢吡肟、阿莫西林与棒酸(CA)酶抑制剂联用后耐药率低于8.11%。由此表明,辽西地区鸡源大肠杆菌产ESBLs耐药菌株表现多重耐药现象,但配合ESBLs抑制剂能明显增强抗菌活性,降低耐药率。     

鬼针草与西药对产ESBLs大肠杆菌体外联合抑菌试验

采用二倍稀释法和棋盘法,对临床分离的产β-内酰胺酶（ESBLs）大肠杆菌进行鬼针草提取物和抗生素联合体外抑菌试验,结果表明：鬼针草水煮液抑菌浓度（MIC）为0．5g／mL,在亚抑菌浓度下与头孢类抗生素、阿莫西林、强力霉素、阿米卡星、痢菌净联合作用时均有相加作用,与头孢曲松钠的相加作用特别明显,达到单药的16倍。与左旋氧氟沙星、可林沙星、加替沙星、粘杆菌素有颉颃作用。     

食品动物源沙门菌ESBLs和PMQR耐药基因流行特征分析

本研究对从猪、鸭和鹅分离的31株沙门菌进行耐药性分析,调查ESBLs基因和PMQR基因在沙门菌的流行分布特征.结果显示,31株沙门菌中只检测到CTX-M型ESBLs,3株携带blaCTX-M-14,3株携blaCTX-M-27基因;有13株携带blaOXA型均为窄谱blaOXA-1,6株携带blaTEM型也为窄谱blaTEM-1b.blaSHV、blaPER、blaVEB、blaGES等各型β-内酰胺酶基因均未检出.PMQR基因oqxAB和aac(6′)-Ib-cr检出率最高分别为39%和26%.4株鸭源和1株猪源沙门菌中都检测到qnrA基因,而qnrD基因仅在一种猪源沙门菌中检出.qnrB、qnrC、qnrS、qepA等基因均未检出.研究发现有19株沙门菌同时携带β-内酰胺酶和PMQR,其中一株鸭源沙门菌同时携带CTX-M-14 ESBLs和CMY-2 AmpC酶;有7株同时携带4-5种β-内酰胺酶和PMQR基因.     

猪源产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的耐药性调查与耐药基因型分析

为了解猪源产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum Beta-Lactamases,ESBLs)大肠杆菌的耐药基因型分布情况,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证试验,采用PCR方法ESBLs耐药基因型分析。结果表明,60.21%(112/186)的猪源大肠杆菌菌株为ESBLs阳性。blaCTX-M、blaTEM、blaSHV和blaOXA型ESBLs菌株检出率分别为91.07%、68.75%、4.46%和1.78%。由此可见,河南部分猪场大肠杆菌广泛流行ESBLs,流行的主要基因型为blaCTX-M型和blaCTX-M+blaTEM型,且多为复合基因型耐药菌株。     

鸡肠杆菌科细菌-内酰胺酶和超广谱-内酰胺酶的检测及药敏分析

用全自动细菌鉴定系统对从临床分离鸡致病菌进行了鉴定,并进行了β-内酰胺酶（BLA）和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的检测,同时测定了多种药物的最小抑菌浓度（MIC）。经鉴定9株致病菌中1株为沙门菌,8株为大肠杆菌;9株致病菌均为BLA阳性,其中有1株为ESBLs阳性;9株细菌对部分抗生素耐药,β-内酰胺类抗生素/β-内酰胺酶抑制剂或多种抗生素的联合用药能部分的恢复细菌对药物的敏感性。旨在为新药的开发提供依据。