苹果实生树嫩芽阶段转变相关蛋白质的SDS-PAGE分析

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(SDS-PAGE)分析了5株苹果杂种实生树(红玉×金冠)嫩芽中蛋白质含量随节位升高的动态变化。结果表明,随节位升高蛋白质带发生变化,共发现6条阶段转变相关蛋白质带,分子量估算值分别为17.5、19、33、38、51和55 ku。其中55 ku蛋白质表现为定性变化,随着节位的升高,46节出现,之后保持不变,到达125节后又突然消失。17.5、19、33、38和51 ku等5种蛋白质是定量变化。17.5、33、38和51 ku等4种蛋白质在低节位时含量较低,到达一定节位时突然升高,到达较高节位时又突然降低;19 ku蛋白质在5株实生树上的变化趋势不一致,但定量变化的临界点与上述5种蛋白质相同。     

苹果杂种实生树抗寒性调查

苹果品种的抗寒性是育种和栽培的一个重要指标，而抽条是幼树在冬春之际受寒害的一种表现，以华北地区常见。抽条发生的树龄多为2～7年生，其中以2-3年生树发生较重，其主要原因是幼龄树易旺长，成熟度差。苹果育种过程中，1-3年实生树也经常发生抽条现象，严重影响育种效率。2003年春季气温尤其偏低，昌黎果研所杂种初选圃内实生树抽条严重，为比较不同亲本组合的抗寒性，给苹果抗寒育种亲本选择提供参考依据，调查了圃内实生树抽条情况。     

缩短苹果实生树童期的栽培技术

苹果育种周期漫长，从采花授粉到品系区试需要20多年的时间。为了提高育种效率，缩短育种周期，我所进行了大量杂交育种工作，总结出一套缩短苹果实生树童期的栽培技术。     

新红星苹果花芽蛋白质提取及双向电泳的改良方法

以新红星苹果花芽为材料,探索适合蛋白质的提取方法及其双向电泳的条件。采用物理和化学2种方法充分裂解植物组织细胞,并用低温操作加入PVP等去除植物大量的酚类物质,最后离心去除不溶性杂质的苹果蛋白质组双向电泳(2-DE)样品制备方法,第1向为ISO-DALT等电聚焦,第2向为垂直平板SDS-PAGE。通过对样品制备、双向电泳参数的选择及染色等方面进行优化,电泳图谱可分辨出蛋白质斑点数在519个以上,蛋白质相对分子质量约为14.0～97.0ku,主要分布为14.0～67.0ku;等电点约为3.5～9.0,主要分布在4.0～7.0。     

沙田柚雌蕊不同部位的蛋白质电泳分析

本文利用SDS－PACE平板电泳,分离了沙田柚雌蕊不同部位的蛋白质,发现成熟雌蕊不同部位的蛋白质的种类和含量是有差异的,柱头中蛋白质数量较花柱为多,但各部位之间也出现共同的区带和特异区带,花柱中的D5糖蛋白带是否与自交不亲和性有关？有待进一步研究。     

果树阶段转变的全息现象及全息胚

本将生物全息律与果树阶段转变现象相结合，提出果树阶段转变全息胚的概念，在此基础上对果树生产繁育问题提出自己的看法。     

牡丹亲本及其远缘杂种F_1的SDS-PAGE蛋白质电泳分析

采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法,对牡丹远缘杂交的5个杂种F1及其亲本的蛋白质进行初步分析。结果表明：亲本及其远缘杂种F1的谱带存在多态性,各杂种F1均不同程度地表现父本的特征谱带。     

枣树阶段转变相关microRNA家族的鉴定及其表达分析

与其他果树相比,枣树具有童期短、成花快的特征.已有研究表明,多个microRNA(miRNA)家族参与植物阶段转变和开花时间调控等过程.研究枣树阶段转变相关的miRNA家族对果树童期调控具有重要意义.以枣实生后代植株不同发育阶段(节位)的当年生枝(枣吊)为材料,通过Small RNA测序,在童期、过渡期和成年期等3个时...     

抗病与感病苹果叶片应答轮纹病菌侵染的蛋白质表达差异分析

从‘鸡冠’与‘富士’苹果的杂交后代中选择对轮纹病抗病的材料1-1-24和感病材料1-2-34的叶片为试材,在叶片正面主脉两侧各针刺一处,分别接种长有轮纹病菌（Botryosphaeria berengeriana f. sp. piricola）菌丝和蘸有无菌蒸馏水的PDA培养基饼。通过对接菌前和接菌后24 h的叶片总蛋白进行2-DE分离筛选和质谱检测鉴定,共获得27个差异蛋白,其中9个为胁迫应答蛋白,1个与防御反应相关,17个参与叶绿体光合作用、细胞代谢、核糖体、羧酸等相关合成或未知反应。对β–1,3–葡聚糖酶、酸性内切几丁质酶和AP15基因进行实时定量PCR分析,结果表明：β–1,3–葡聚糖酶和酸性内切几丁质酶是苹果叶片应答轮纹病胁迫的关键蛋白,抗病和感病的苹果叶片在接菌前关键蛋白含量的显著差异可能是导致抗病性不同的原因之一。     

苹果看树施肥效果好

1 依生长阶段施肥 1．1 幼树 苹果幼树施肥，要以促进树体生长发育、扩大树冠、提早结果为目的。因此，秋梢停长后要早施基肥，一般株施20kg，并适量添加速效氮肥和磷、钾肥；重视春梢、秋梢停长后追肥，生长前期可喷1-2次0．3％的尿素或400倍的氨基酸复合微肥，中后期可喷2-3次500-600倍的磷酸二氢钾或光合微肥。     

苹果MdLsi1基因的克隆及生物信息学分析

以"秦冠"苹果叶片为试材,采用RT-PCR技术,克隆了苹果硅转运蛋白基因MdLsi1,并应用生物信息学分析其特征,以期为进一步深入研究硅促进苹果植株生长的分子机制提供参考依据。结果表明:MdLsi1基因全长873 bp,编码290个氨基酸,相对分子量为30.456 kDa。MdLsi1蛋白包含已知硅转运蛋白所具有的特征结构,6个跨膜结构域,2个天冬氨酸-脯氨酸-丙氨酸序列(Asn-Pro-Ala,NPA模体),1个由甘氨酸-丝氨酸-甘氨酸-精氨酸(GRGS)组成的ar/R选择性过滤器,并且2个NPA模体之间间隔108个氨基酸。MdLsi1基因起始编码位点前1 500 bp序列中除了包含有基本的基因启动子元件外,还含有与多种逆境胁迫相关的顺式调控元件。以上结果提示MdLsi1在苹果植株硅的积累及植株抵御逆境胁迫中发挥重要功能。     

''''宫藤''''富士苹果叶片离体再生体系的建立

以'宫藤'富士苹果组培苗为试材,对叶片离体再生体系进行了研究.不同激素种类、浓度配比及叶片放置方式的试验结果表明:以MS为基本培养基添加5.0 mg/L 6-BA、1.0mg/LNAA叶片远轴面接触培养基(叶片反放)可得到最高的再生效率,为73.3%,6-BA对叶片再生效果要好于TD2,且提高NAA浓度并不能提高TDZ对再生频率和再生叶片平均再生芽数的影响.再生植株在生根诱导培养基(1/2 MS 1.0 mg/L IBA)、生根培养基(1/2 MS)上进行培养后移入营养土成活率可达100%.     

Effects of NAA and Carbaryl on Fruit Set and Return Bloom for Some Apple (Malus domestica Borkh.) Cultivars

Abstract

This research was conducted in 1997 and 1998 to investigate the effects of naphthalene acetic acid (NAA) (5, 10, and 15 ppm), Carbaryl (1-naphthyl N-methylcarbamate) (750, 1000, and 1250 ppm), and NAA + Carbaryl (5 + 750, 7.5 + 750, and 10 + 750 ppm) applications on the return bloom of some standard apple (Malus domestica Borkh.) cultivars grafted on MM106 rootstock. Of these applications, 750 ppm Carbaryl for ‘Starkspur Golden Delicious’, 1250 ppm Carbaryl for ‘Granny Smith’ and ‘Starkrimson Delicious’, and 5 ppm NAA for ‘Jonagold’ increased the mean number of flower buds significantly, compared with the control treatments. The other treatments of Carbaryl, NAA, and NAA + Carbaryl also increased the mean number of flower buds in a nonsignificant sense with a few exception. A negative correlation between the final fruit set and the mean number of next year's flower buds was found for three cultivars. The correlation coefficients were r = ?0.5150 (P< 0.05), r = ? 0.6999 (P< 0.05), r = ?0.0335 for ‘Starkspur Golden Delicious’, ‘Granny Smith’, and ‘Jonagold’ cultivars, respectively. However, this relationship was positive and nonsignificant for ‘Starkrimson Delicious’ (r = 0.1980).     

Ultrastructure of epicuticular wax aggregates during fruit development in apple (Malus domestica Borkh.)

Summary

Development of wax platelets on the surface of ‘Delicious’ (Malus domestica Borkh.) apple fruit was investigated throughout the growing season using field emission scanning electron microscopy. At 5,000 and greater, wax crystalline structures appeared to be composed of microtubules (MT), aggregates of individual MT to form single platelets, and of one or more platelets. The thickness of a single wax platelet ranged from 116–128 nm, approximately the diameter of a single MT; whereas multiple-platelet aggregates ranged in thickness from 307–428 nm. Individual platelets, multiple platelet aggregates and MT were visible throughout fruit development, as well as on different apple cultivars. Examination of the cuticle from young fruitlets (receptacle diameter = 3 mm) of ‘Chinese Crabapple’ (M. hupehensis Rehd.), which develops without trichomes, best demonstrated early platelet formation. A model for wax platelet and cuticle development on apple is proposed based on these data.     

Genome-wide analysis of antioxidant enzyme gene families involved in drought and low-temperature responses in Apple (Malus domestica)

Antioxidant enzymes were well-known for reactive oxygen scavenging and protecting cells from oxidative damage in multiple biotic and abiotic stresses. Aimed to overview of antioxidant enzyme gene families and screen for drought and low-temperature response members, the whole apple antioxidant enzyme genes in apple genome were studied. Out of 73candidates in seven antioxidant enzyme gene families among the entire apple genome, a total of 49 genes were identified, showed more antioxidant enzyme gene members than those in other plant species. A phylogenetic tree based on predicted functional domains and motifs of apple and Arabidopsis antioxidant enzymes revealed 19 putative drought or low-temperature response genes, and 9 out 19 genes belong to five families responded to both drought and low-temperature stresses. Subsequently, cis-elements in those nine antioxidant enzyme gene promoters were examined and abundant elements involved in multiple hormone regulation and abiotic stresses response, including drought and low-temperature were found. The tissue expression specificity for those nine members in eight kinds of tissues was also examined. Screening and identifying both drought and low-temperature response genes provide useful information to understand gene functions and promote application of antioxidant enzyme genes in apple abiotic resistance breeding.     

新疆野苹果与栽培苹果香气成分的比较

 以中国新疆伊犁地区巩留县莫合镇的新疆野苹果4个实生株系及国光、红星、富士、金冠等苹果品种的成熟果实为试材, 采用顶空固相微萃取和气相色谱—质谱联用技术, 分析果实香气成分, 旨在为新疆野苹果资源保护与利用提供基本资料。结果表明, ①新疆野苹果含醇类等10类89种香气成分, 这些化合物单株间在种类和含量上均存在显著差异; 新疆野苹果与栽培苹果品种主要香气的种类和成分基本一致; ②但乙醛等12种香气成分在新疆野苹果中没有检测到, 其中7种为栽培苹果特有的特征香气成分;③缩醛类和内酯类化合物在栽培苹果品种中没有检测到, 同时检测到1 - 丁醇、丁酸乙酯、辛酸乙酯和大马酮等4种化合物为新疆野苹果特有的特征香气成分。     

苹果α-法尼烯合酶基因组结构和序列的多态性分析

通过设计引物进行PCR扩增、测序、拼接序列, 以及与GenBank中的cDNA序列(登录号AY182241) 进行比对, 获得α - 法尼烯合酶基因(AFS ) 的基因组序列和内含子/外显子结构。获得的AFS基因序列已在GenBank注册(登录号DQ901739) , 它有6个内含子和7个外显子, 编码一个大小为576个氨基酸的蛋白质。间隔外显子的6个内含子相位分别是0、1、2、2、0、0, 其大小分别是108、113、>1 000、125、220和88 bp, 7个外显子的推导氨基酸序列大小分别是57、89、127、73、48、83和99。编码的蛋白质中有3个序列模式(motif) , RR (X8) W 模式的编码基因序列在基因5′端的外显子1上, RxR 模式和DDxxD 模式的编码基因序列在外显子4上。将获得的AFS基因序列与GenBank中的cDNA序列(登录号AY523409) 进行比对, 结果发现两序列间有6个单核苷酸多态性, 其中4个引起氨基酸突变。有意义的是, 1个氨基酸突变(291R→G) 发生在RxR模式上, 此氨基酸突变以及其它突变是否与苹果α - 法尼烯合成能力和虎皮病发生能力有关, 值得进一步探讨。