12周龄大围山微型鸡与艾维茵肉鸡肌肉营养成分及LPL基因表达差异研究

为研究云南地方鸡种大围山微型鸡与艾维茵肉鸡肌肉营养成分中粗脂肪含量与脂蛋白脂酶(LPL)基因mRNA表达差异,屠宰同批12周龄大围山微型鸡和艾维茵肉鸡各20只,测定肌肉营养成分含量和LPL基因表达量。结果显示:在胸肌和腿肌中,大围山微型鸡粗灰分含量、粗蛋白含量、粗脂肪含量均显著高于艾维茵肉鸡,在胸肌和腿肌中大围山微型鸡水分的含量显著低于艾维茵肉鸡,且胸肌和腿肌中大围山微型鸡LPL基因表达量分别为3.98、5.72,均高于艾维茵肉鸡的3.70、3.54。可见,大围山微型鸡肌肉粗蛋白、粗脂肪等营养成分优于艾维茵肉鸡,LPL基因促进脂肪沉积,因此LPL基因可作为影响家禽脂肪沉积的重要候选基因。     

TNF-α基因表达量对大围山微型鸡及武定鸡股骨强度的影响

家禽骨质特性是家禽重要的经济性状指标,研究显示肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人类及动物骨代谢有显著影响。为了揭示影响家禽骨强度的主效基因,研究以体重较轻、体型较小的大围山微型鸡以及大型鸡种武定鸡为研究对象,和艾维因肉鸡作对比,通过检测骨强度以及骨骼中TNF-α基因的表达量,研究TNF-α基因的表达量对大围山微型鸡和武定鸡股骨强度的影响。结果显示,4~16周龄大围山微型鸡股骨强度均显著高于武定鸡和肉鸡(P0.05),且武定鸡股骨强度高于肉鸡;每一阶段大围山微型鸡股骨软骨中TNF-α基因m RNA表达量显著低于其它两个鸡种(P0.05);相关分析显示TNF-α基因的表达水平与股骨强度指标呈负相关。可见,TNF-α基因对家禽的骨强度有重要影响,是影响家禽骨强度的重要候选基因。     

大围山微型鸡生物学特性及保种利用价值

大围山微型鸡(Daweishan Mini Chickens)仅分布在云南省红河哈尼族彝族自治州屏边县境内300~1 500m的中低海拔山区地带,尤以屏边县大围山为中心的玉屏镇、白河乡、湾塘乡居多,是我国具有独特遗传特性的亚热带型早熟地方家禽品种。综合红河州畜牧技术推广站、屏边县畜牧兽医局及云南农业大学相关研究报道认为:①大围山微型鸡来源于屏边县大围山系特有的野生原鸡;②大围山微型鸡属于目前所报道的我国地方鸡种中体重较轻的地方鸡种;③大围山微型鸡群体平均杂合度和群体平均多态信息含量较低,纯合度较高,未受到其他外来血液的混杂,是一个封闭的原始群体,具有较高的遗传一致性;④从屠宰性能指标显示,大围山微型鸡具有较高的屠宰率;⑤大围山微型鸡每千克体重所产当日枚蛋重相对大,饲料转化率相对高。     

大围山微型鸡生长曲线分析与拟合比较分析

采用Logistic模型、Gompertz模型和Bertallanffy模型对大围山微型母鸡0~18周龄生长曲线进行分析和拟合研究。结果表明,三种非线性模型都能很好的拟合大围山微型鸡的生长曲线,拟合度(R2)均在0.99以上,其中Gompertz模型的拟合度最高(R2=0.9990),因此认为Gompertz模型是大围山微型鸡生长拟合的最佳模型。     

大围山微型鸡POU1F1基因编码区的克隆及序列分析

大围山微型鸡是我国目前报道的体形最小、体重最轻的地方优良品种,具有较高的屠宰率和饲料报酬。研究通过设计特定引物对大围山微型鸡POU1F1基因的编码区进行PCR分段扩增并测序。利用分子生物学软件对其基因序列及编码产物的结构、功能进行了生物信息学分析,并构建其系统发育关系。结果表明,大围山微型鸡POU1F1基因编码区全长984bp,与原鸡的POU1F1基因（NM〈sub〉2〈/sub〉04319）比对,在836位处发生一次碱基转换（C/T）,但未造成氨基酸改变;其编码产物由327个氨基酸残基组成,分子质量为38801.19Da,理论等电点为8.67;系统发育树结果表明,不同物种间在该基因编码区核苷酸序列和氨基酸序列上有较高的相似性,大围山微型鸡与原鸡POU1F1基因编码区核苷酸序列和氨基酸的相似性分别达到了99%和100%。大围山微型鸡POU1F1基因编码区的成功克隆,为进一步研究POU1F1基因的遗传特性和大围山微型鸡的矮小机理奠定了基础。     

大围山微型鸡骨代谢生化指标与骨密度研究

骨骼发育处于骨代谢的动态平衡过程中,且骨代谢与骨密度紧密相连。为研究家禽骨代谢生化指标与骨密度的相关性,本研究以大围山微型鸡为研究对象,以艾维茵肉鸡作对照,检测骨代谢血液生化指标含量与骨密度。结果显示,在0~150日龄生长期,大围山微型鸡血钙、血磷、碱性磷酸酶含量和骨密度均高于艾维茵肉鸡,而甲状旁腺素含量则相反;相关性研究显示,血钙、血磷、碱性磷酸酶含量与骨密度呈正相关,而甲状旁腺素含量与骨密度呈负相关。研究表明选育或驯化可能是导致不同品种家鸡骨代谢及骨密度差异的重要原因。     

基于RAD-Seq技术的大围山微型鸡遗传进化分析

【目的】 在分子水平上探讨大围山微型鸡的遗传进化。【方法】 以大围山微型鸡与其他18个地方鸡品种及2个国外引进品种为研究对象,每个品种选取公鸡10只,母鸡20只,采血,提取全基因组DNA,进行简化基因组测序(RAD-Seq),鉴定21个品种基因组SNP,计算大围山微型鸡遗传统计量,分析遗传多样性和遗传结构、筛选受选择基因并进行功能富集分析。【结果】 在大围山微型鸡群体中鉴定出331 892个SNPs。大围山微型鸡的平均杂合度(Ho)为0.219、核苷酸多样度(Pi)为0.245,近交系数(Fis)为0.107,与其他18个地方鸡种相比遗传多样性呈中度多态。聚类分析发现,大围山微型鸡与瓢鸡、茶花鸡和藏鸡聚为一类,亲缘关系较近,且与瓢鸡的群体分化指数(Fst)最低(0.0929),亲缘关系最近,与河南斗鸡的Fst最高(0.2179),亲缘关系最远。共筛选出200个受选择基因。GO分析结果显示,这些受选择基因主要富集在运动、刺激应答、信号传导等生物学过程;KEGG分析结果表明,这些受选择基因主要富集在代谢、肌动蛋白细胞骨架的调节、MAPK等信号通路。【结论】 大围山微型鸡遗传多样性呈中度多态,与瓢鸡亲缘关系最近,本研究筛选出了200个受到选择的基因,这些基因在代谢、信号传导、颅骨发育等多个方面发挥作用。     

云南屏边大围山微型鸡肉品质的研究

试验选用14周龄云南屏边大围山微型鸡公母各10只,对其肉品质物理特性指标进行测定分析。结果显示,公鸡、母鸡腿肌的系水率、嫩度、多汁性、红度（a值）、pH及肌纤维密度均显著高于胸肌,而公鸡、母鸡腿肌的剪切力、蒸煮损失和贮藏损失、亮度（L值）、肌纤维直径与胸肌相比显著降低;相同部位不同性别间比较结果显示,公鸡胸肌与腿肌的剪切力、肌纤维直径、胸肌贮藏损失显著高于母鸡,而母鸡胸肌与腿肌的嫩度和肌纤维密度均比公鸡的高。综合对剪切力、蒸煮损失、贮藏损失、系水率、嫩度、多汁性、风味和总体口感等指标分析,公鸡、母鸡腿肌的肉质高于胸肌,母鸡肉质高于公鸡。     

大围山微型鸡生物学特性及保种利用价值

大围山微型鸡（Daweishan Mini Chickens）仅分布在云南省红河哈尼族彝族自治州屏边县境内,是屏边县大围山系特有的野生原鸡,属肉蛋兼用和竞技观赏型的地方品种,也是我国具有独特遗传特性的亚热带型早熟地方家禽品种。其野性介于当地普遍的品种土鸡和快大肉用白羽型鸡之间,     

加快屏边县大围山微型鸡发展进程的思考与对策

屏边县大围山微型鸡,民间称为“发财鸡”、“香鸡”、“金鸡”、“娇鸡或焦鸡”等。分布在屏边县境内,以大围山为中心的玉屏镇、白河乡、湾塘乡甚多,是民间长期驯养的原始鸡种。其生长速度比一般土鸡或土杂鸡较慢,体型和外貌近似家鸡,与茶花鸡相似,但个体比茶花鸡小,毛色与茶花鸡有明显差异。     

添加鱼油在肉仔鸡饲料中的应用研究

选择40日龄土杂肉仔鸡450只进行为期3周的实验。研究了鱼油在肉仔鸡饲养中的应用效果。结果表明:使用鱼油,对鸡的免疫力无影响,但对肉鸡的生长速度、饲料报酬、肉的品质和经济效益均有明显的提高作用。肉仔鸡日粮中添加2%鱼油效果优于添加3%。     

大骨鸡MSTN基因的表达检测

以大骨鸡为试材,采用RT-PCR法检测了MSTN基因在大骨鸡不同器官中的表达情况。结果表明,MSTN基因在大骨鸡骨骼肌中表达水平较高,在心肌、肾脏、脑、肠、舌中也有微量表达,但在肺、肝脏中未检测出MSTN mRNA,而且在14日龄时表达水平高于35和56日龄。     

静原鸡ELOVL2基因遗传多态性研究

为了探讨静原鸡极长链脂肪酸延伸酶蛋白2（elongation of very-long-chain fatty acids 2,ELOVL2）基因的遗传特性,确定核苷酸的变异位点,本研究采用PCR-SSCP及DNA测序技术对静原鸡ELOVL2基因进行多态性检测。结果显示,静原鸡ELOVL2基因外显子6无多态性,内含子2和6呈中度多态。在ELOVL2基因内含子2扩增片段上共检测到5种基因型：A₂A₂、B₂B₂、C₂C₂、D₂D₂和A₂C₂,4种等位基因：A₂、B₂、C₂和D₂,其中A₂为优势等位基因（0.62）,A₂A₂基因型为优势基因型（0.54）;3个SNPs位点：g.63372228+4918G > A的转换、g.63372228+5024T > C的转换和g.63372228+4928C > A的颠换。在E2e6I6扩增片段上共检测到3种基因型：A₁A₁、B₁B₁和A₁B₁,2种等位基因：A₁和B₁,其中A₁为优势等位基因（0.67）,A₁A₁基因型为优势基因型（0.54）,等位基因B₁存在g.63388000+748G > C的颠换。群体遗传学分析发现,静原鸡ELOVL2基因内含子2、6遗传纯合度均较高,且偏离了Hardy-Weinberg平衡（P < 0.05）。本研究结果表明,静原鸡ELOVL2基因内含子2和6序列突变较高,且呈中度多态,表现出纯合子优势,外显子6上无突变。     

肉雏鸡与蛋雏鸡法氏囊生长发育规律的探讨

通过测量不同日龄肉鸡与蛋鸡的法氏囊指标研究其生长发育规律。肉鸡分别在10个不同日龄随机选取10只健康鸡。蛋鸡分别在12个不同日龄随机选取健康的公鸡、母鸡各10只。宰杀后,摘取法氏囊称重,测量其长、宽、高,并制作石蜡组织切片进行HE染色,然后显微镜下测量法氏囊滤泡的长、宽、皮质及髓质厚度。结果表明,肉鸡法氏囊重量随日龄的增长不断增加,到49日龄达到最大,其滤泡的生长也符合此规律;蛋鸡的法氏囊重量从1～68日龄不断增长,并且到68日龄时达到最大值,68～96日龄逐渐减小,其滤泡生长也符合此规律,而法氏囊指数与日龄和体重的增加呈现一定规律的正相关。     

MC4R基因表达及其与鸡屠宰性状的相关分析

根据鸡MC4R mRNA和看家基因β-actin mRNA序列,分别设计1对引物,以半定量RT-PCR法研究不同品种鸡肾上腺中MC4R基因mRNA表达水平,并分析了其与屠宰性状间的相关关系。结果表明,京海黄鸡公鸡MC4R基因在肾上腺中的表达水平显著高于尤溪麻鸡公鸡(P<0.05);京海黄鸡公鸡的胴体重、胸肌重、腿肌重与MC4R基因在肾上腺中表达水平存在极显著相关(P<0.01);尤溪麻鸡公鸡的胴体重与MC4R基因在肾上腺中表达水平存在极显著相关(P<0.01),胸肌重、腿肌重与MC4R基因在肾上腺中表达水平存在显著相关(P<0.05)。     

MC4R基因表达及其与鸡屠宰性状的相关分析

根据鸡MC4R mRNA和看家基因β-actin mRNA序列,分别设计1对引物,以半定量RT-PCR法研究不同品种鸡肾上腺中MC4R基因mRNA表达水平,并分析了其与屠宰性状间的相关关系。结果表明,京海黄鸡公鸡MC4R基因在肾上腺中的表达水平显著高于尤溪麻鸡公鸡（P＜0.05）;京海黄鸡公鸡的胴体重、胸肌重、腿肌重与MC4R基因在肾上腺中表达水平存在极显著相关（P＜0.01）;尤溪麻鸡公鸡的胴体重与MC4R基因在肾上腺中表达水平存在极显著相关（P＜0.01）,胸肌重、腿肌重与MC4R基因在肾上腺中表达水平存在显著相关（P＜0.05）。     

IBDV-VP2基因高变区同义密码子在蛋鸡和乌鸡中的偏嗜性

以RT-PCR方法对河南省洛阳地区2000-2002年分别从IBD发病蛋鸡和乌鸡鸡群中分离到的5株和4株IB-DV进行了VP2高变区基因的扩增、克隆和测序。核苷酸和氨基酸序列分析发现，9株IBDV中有4处氨基酸发生了变化，即320位的Gln／His。349位的Val／Ile．375住的Pro／Ser和381位的Lys／Arg。这些氨基酸的变化，不符合变异株的特征。核苷酸序列变化主要表现在同义密码子的置换。分别将分离于蛋鸡和乌鸡的各3个毒株交叉感染乌鸡和蛋鸡鸡胚，盲传7代后取尿囊腔绒毛膜分离病毒进行VP2基因的序列分析。结果表明，IBDV VP2基因高变区某些氨基酸同义密码子在蛋鸡和乌鸡细胞中的选择上有偏嗜性。主要表现在第1亲水区220位的Tyr（TAC／TAT）；224、360、393住的Gly（GGA／GGG）；260及420位的Thr（ACC／ACT。ACA／ACT）；271住的Val（GTA／GTG）；279位的Asp（GAc／GAT）；305位的Ile（ATC／ATA）及328位的Ser（TCA／TCG）。病毒在不同品种宿主中对同义密码子使用的偏嗜性，可能是导致蛋鸡和乌鸡对IBDV易感性不同的一个重要原因，也可能是病毒变异及新毒株产生的一条重要途径。