山核桃雌花发育的解剖学研究

为掌握山核桃(Carya cathayensis)雌花花芽分化规律,从超微结构、显微结构和外部形态变化多个层次上综合研究雌花发育过程。结果表明,雌花发育过程从3月下旬开始到5月中旬基本完成,历时约35 d,整个过程可分为未分化期、分化初期、花序分化期、总苞形成期和雌蕊形成期共5个时期。未分化期雌花芽外部形态与叶芽无区别;分化初期生长点趋于半圆形;花序分化期3个小花原基形成;总苞形成期每一小花周围形成1个总苞片和3个小苞片;雌蕊形成期小花继续发育,胚囊形成。     

薄壳山核桃雌花发育的解剖学研究

为掌握薄壳山核桃(Carya illinoinensis)雌花花芽发育规律,应用了石蜡切片技术,从显微水平上对浙江省建德市12年生薄壳山核桃花芽发育各阶段特征进行观察,结果表明:薄壳山核桃马罕(Mahan)雌花发育过程可分为4个时期,分别是分化初期、花序分化期、雌花总苞形成期和雌蕊形成和发育期,在分化初期雌花芽与叶芽无区别,顶端呈圆球状;花序分化期形成两个以上椭圆状小花原基;雌花总苞形成期总苞略呈四方形,中央部位形成雌蕊原基并进一步分化出胚珠原基;雌蕊形成和发育期胚珠继续发育,胚囊形成.准确确定薄壳山核桃马罕雌花发育各个关键时期可为合理品种配置及人工授粉提供依据.     

卡特兰花芽分化与发育的解剖学研究

    采用石蜡切片方法,研究卡特兰'Blc.Shinfong Princess'花芽分化、发育进程以及新芽生长的外部形态与花芽分化之间的联系.结果表明:卡特兰花芽的分化进程可以分为花序原基分化期、苞片原基分化期、花蕾原基分化期、花萼原基分化期、花瓣原基分化期、合蕊柱原基分化期6个时期.卡特兰花芽的分化顺序为从外到内.卡特兰新芽长至12 cm左右时,花芽开始分化,当新芽长至36 cm左右时,分化基本结束.     

文冠果雄蕊发育的解剖学及雄性不育蛋白的研究

研究文冠果雄性不育机理 ,该文观察了文冠果雄蕊发育的形态及解剖结构 ,并通过双向电泳方法对花药蛋白进行差异分析 .结果表明 :①两性花花药和雄花长、短花丝花药中均含有具萌发能力的花粉粒 ,但两性花的饱满花粉粒比雄花的饱满花粉粒少 ,两性花花粉败育可能发生在双核花粉粒时期 ;②雄花的短花丝后期能伸长 ,花药能正常开裂散粉 ,而两性花的花丝始终不伸长 ,花药不能开裂 ,这表明文冠果雄性不育的症结主要在于花药不能正常开裂 ,其次在于部分花粉败育 ;③在蕾期 ,两性花花药蛋白与雄花花药蛋白无差异 ;至开花期 ,至少有 2个多肽(B1 ,B2 )的表达存在差异 .对B1 进行了纯化和测序 ,序列为AGSDDVKVPIHPGSG .经蛋白质数据库检索 ,尚无与之同源的序列 .     

"赣华79-9”脐橙生物学特性研究Ⅱ雄蕊发育的细胞学观察

对"赣华79-9”脐橙雄蕊发育过程进行细胞学观察,结果表明"赣华79-9”脐橙的花药表皮分化发育正常;其药壁组织分化形成4～5层中层细胞,未见纤维层细胞的分化形成;花药发育过程中,直至开花始终未见绒毡层和中层细胞解体消失,花药成熟后花粉囊也不开裂.花粉母细胞分化形成后不再进入减数分裂,导致其花粉囊不产生花粉,或产生极少数透明、色淡、无发芽能力的空粒花粉.药壁组织异常分化和花粉母细胞不进行减数分裂是造成"赣华79-9”脐橙雄性高度不育的主要原因.     

薄壳山核桃‘马汉’雄蕊发育特性及花粉储藏活力

为解决薄壳山核桃Carya illinoensis花期花粉的采集和有效保存等问题,系统观测雄蕊开花习性,采用荧光染色反应(FCR)法研究了不同散粉期花粉生活力差异,以及不同储藏条件(室温密封、室温密封干燥;4℃密封、4℃密封干燥;-70℃密封、-70℃密封干燥)和储藏时间对花粉活力的影响。结果表明:①4月26日薄壳山核桃雄蕊花萼开裂,5月6日花药由绿变黄,5月7-9日雄蕊进入散粉期,5月8日散粉量最大,占花粉总量的75%,至5月10日花粉基本散尽,花药变黑、小花开始脱落;②散粉期花粉生活力大小依次为即将散粉期(花药由绿变黄)>散粉初期>散粉盛期>散粉末期,花粉耐储藏性亦是即将散粉期最优,即将散粉期>散粉初期>散粉盛期>散粉末期。③储藏条件对花粉活力的保持有显著影响,利于花粉生活力保持的储藏条件依次为-70℃密封干燥>-70℃密封>4℃密封干燥>4℃密封>室温密封干燥>室温密封;在任一储藏条件下,花粉活力均随储藏时间而下降,干燥与不干燥差异不显著。室温下花粉活力下降最快,50 d后花粉已经完全丧失活力;4℃下花粉活力次之,120d后花粉已经完全丧失活力;-70℃超低温条件下保存效果最好,与常温、低温储藏差异极显著,储藏360 d花粉还保持43.55%的活力。     

西葫芦雄蕊与雄配子体发育的研究

西葫芦（ＣｕｃｕｒｂｉｔａｐｅｐｏＬ．）雄蕊５枚，由（２）＋（２）＋１的三体组成，花丝粗短，各花药具２个花粉囊，呈Ｓ形弯曲。横切面观察，有３０个花粉囊分布其表面。药隔发达；造孢细胞分裂仅２～３次，小孢子母细胞减数分裂基本同步，四分体时胼胝质壁发达。为四面体型排列，胞质分裂为同时型，小孢子大而明显；雄配子体球形，外壁厚具刺，萌发孔多个，具盖状结构，属于２－细胞型。     

薄壳山核桃‘马汉’雄蕊发育特性及花粉储藏活力

为解决薄壳山核桃Carya illinoensis花期花粉的采集和有效保存等问题,系统观测雄蕊开花习性,采用荧光染色反应（FCR）法研究了不同散粉期花粉生活力差异,以及不同储藏条件（室温密封、室温密封干燥;4℃密封、4℃密封干燥;-70℃密封、-70℃密封干燥）和储藏时间对花粉活力的影响.结果表明：①4月26日薄壳山核桃雄蕊花萼开裂,5月6日花药由绿变黄,5月7-9日雄蕊进入散粉期,5月8日散粉量最大,占花粉总量的75％,至5月10日花粉基本散尽,花药变黑、小花开始脱落;②散粉期花粉生活力大小依次为即将散粉期（花药由绿变黄）＞散粉初期＞散粉盛期＞散粉末期,花粉耐储藏性亦是即将散粉期最优,即将散粉期＞散粉初期＞散粉盛期＞散粉末期.③储藏条件对花粉活力的保持有显著影响,利于花粉生活力保持的储藏条件依次为-70℃密封干燥＞-70℃密封＞4℃密封干燥＞4℃密封＞室温密封干燥＞室温密封;在任一储藏条件下,花粉活力均随储藏时间而下降,干燥与不干燥差异不显著.室温下花粉活力下降最快,50 d后花粉已经完全丧失活力;4℃下花粉活力次之,120d后花粉已经完全丧失活力;-70℃超低温条件下保存效果最好,与常温、低温储藏差异极显著,储藏360 d花粉还保持43.55％的活力.     

雄蕊雌化的研究现状

花发育是植物从营养生长转变为生殖生长的一个重要转折点。雄蕊雌化或称雄蕊心皮化是花器官发育过程中的一种同源异型突变体。本文简述了雄蕊心皮化突变体形成的机理,有关花器官发育模型、雄蕊心皮化的发现和特征及研究现状,并对雄蕊心皮化的原因做了初步探讨,指出了这种突变体在农业生产上的应用前景。     

辣椒雄蕊雌化的形态解剖学特征

采用形态解剖和石蜡切片法,对雄蕊雌化辣椒花和果实发育过程进行观察。形态学观察结果表明,雌化 花芽较正常花芽肥大,雌化雄蕊可结实但非常小,位于正常辣椒果实果柄处。另外有部分雄蕊雌化和雄蕊全部雌化 两种突变体。显微切片结果显示,雌化雄蕊原基呈扁平叶状突起,后期发育成类似心皮的叶状体,边缘靠合或缝合形 成类似边缘胎座的子房。雄蕊在雌化过程中,形态上表现不同程度雌化,并且表现出一系列的中间过渡类型。另外雌 化“子房”内有“胚珠”,并且雌化雄蕊的“胚珠”与正常子房中的胚珠相似。     

山核桃幼胚不定芽的诱导

以山核桃Carya cathayensis花后60,75和100d的幼胚为外植体,金属硫蛋白（MT）复合维生素＋20g·L^-1葡萄糖＋10mg·L^-1腺嘌呤＋500mg·L^-1水解酪蛋白作为基本培养条件,研究山核桃幼胚的不同发育时期,不同植物生长调节物质及基本培养基对山核桃不定芽诱导的影响。结果表明,山核桃花后60d的幼胚培养56d后未形成不定芽,花后100d的幼胚比花后75d的幼胚诱导产生的不定芽多而且长;植物生长调节物质对山核桃不定芽诱导以0.0100mg·L^-14-氨基-3,5,6-三氯吡啶羧-酸（Picloram）＋3.0mg·L^-16-苄氨基腺嘌呤（6-BA）为启动培养基较佳;当6-BA质量浓度一定时,随Picloram质量浓度增加不定芽数量差异不显著;当Picloram质量浓度一定时,随6-BA质量浓度增加,产生不定芽数逐渐上升,但当6-BA达10mg·L^-1时,不定芽出现明显玻璃化现象;2,4-D的添加不利于外植体不定芽产生;MS（Murashige and Skoog）是最佳基本培养基。     

山核桃SSR反应体系优化

优化SSR反应体系是山核桃SSR遗传图谱构建的基础.通过对PCR反应中Taq聚合酶用量、dNTP浓度、引物浓度、Mg2 浓度和模板DNA量的组合试验,确定了山核桃SSR的最佳反应体系,即在30μL反应体系中,含600 ng模板DNA,1×PCR Buffer,2.0UTaq聚合酶,0.22mmol/L dNTP,1.0 mmol/L Mg2 ,0.13μmol/L引物.     

模拟酸雨对山核桃叶绿素荧光参数、叶绿素和生长的影响

为探明酸雨对山核桃Carya cathayensis叶绿素荧光特性的影响,设置pH 2.5,3.5,4.5和5.6（ck）共4个模拟酸雨处理,于2006年10月,2007年4月、7月、10月,利用叶绿素荧光技术测定了模拟酸雨胁迫后的山核桃的叶绿素荧光参数。结果表明：PSⅡ最大光化学效率（Fv/Fm）,PSⅡ的潜在活性（Fv/F0）,PSⅡ实际光化学量子产量（ΦPSⅡ）和叶绿素的变化都随着模拟酸雨pH值的降低而降低,pH 2.5的处理下降幅度比较大,说明模拟酸雨对这个处理的山核桃有一定的伤害,其他处理之间变化不大。各个月表现基本一致,尤其2007年10月差异明显,说明模拟酸雨处理的山核桃更容易受到低温胁迫,造成伤害。研究还表明,Fv/Fm,Fv/F0,ΦPSⅡ可作为植物受到酸雨影响的重要指标。     

山核桃FLOWERING LOCUS C同源基因鉴定与表达分析

 根据本课题组对山核桃Carya cathayensis花芽454测序获得的CcFLC基因的2个开放阅读框（ORF）分别设计引物并进行聚合酶链式反应（PCR）扩增,获得开放阅读框大小分别为639 bp和612 bp,编码212个和203个氨基酸,GenBank登录号分别为JQ829074和JQ829075,都具有典型的MADS-box结构域,核苷酸和氨基酸序列同源性分别为78%和67%,5′端高度同源,3′端差异较大。与太行花Taihangia rupestris和梨Pyrus pyrifolia等物种的FLC-like基因的氨基酸序列同源性达到40%~57%。氨基酸疏水性分析显示,它们的羧基端都是疏水性氨基酸,而氨基端是亲水性氨基酸,大部分氨基酸残基是疏水性的。实时定量PCR结果显示：CcFLC基因的2个开放阅读框在山核桃的营养枝的幼茎、幼叶、顶芽,以及短果枝的雌花芽和雄花芽中都有表达,但相对表达量存在较大差异,同一组织中ORF1 的表达丰度明显高于ORF2。ORF1 表达量在茎中最高,但在叶和雄花芽的表达量最低;ORF2 在雌花芽中相对表达量最高,茎中表达量最低。图7参23     

山核桃AFLP实验技术体系的建立

以充分展开的山核桃Carya cathayensis嫩叶为材料、利用改良CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）法与CTAB裂解一硅珠吸附法提取山核桃总DNA,对适合于山核桃叶片的AFLP（扩增片段长度多态性）分析体系进行了摸索。结果表明：①改良CTAB法适用于从山核桃叶中提取高质量的DNA,提取的DNA可用于AFLP的分析;②采用EcoR I/Mse I 酶切组合,酶切连接一步法与两步法的效果没有明显的差异,但一步法操作更为简便;③适合于山核桃叶AFLP分析的引物组合为E-ACT＋M-CAT,E-ACT＋M-CTG,E-ACG＋M-CAT,E-ACG＋M-CTG。扩增产物经60g·L^-1变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后进行银染,条带信号强度一致性好,条带分布均匀、清晰,分辨率较高。     

山核桃果皮提取液的抑菌活性研究

[目的]初步研究山核桃果皮提取液的抑菌活性。[方法]通过测定山核桃果皮提取液对供试黄瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum和番茄灰霉病菌Botrytis cinerea Pers.菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用,初步研究了山核桃果皮提取液的抑菌活性。[结果]核桃果皮提取液除了能抑制供试菌株菌丝生长外,对病原菌孢子萌发和芽管生长也具有显著的抑制作用。培养9h后,与对照相比,对黄瓜枯萎病菌孢子萌发的抑制率为73.9%,芽管长的抑制率为63.5%;对番茄灰霉病菌孢子萌发的抑制率为82.7%,芽管长的抑制率为65.1%。此外,山核桃果皮提取液具有明显的促进黄瓜种子发芽的作用。[结论]该研究为山核桃果皮提取物开发为杀菌剂提供理论依据。     

山核桃根插试验

为加快山核桃Carya cathayensis营养繁殖和保持优良性状,以3年生山核桃实生苗主根为材料,用不同种类和不同质量分数的生长调节物质处理后进行扦插繁殖试验。结果表明,山核桃根插属于愈合组织生根型;50~100 mg.kg-1萘乙酸(NAA)处理18 h能有效提高生根率、新根数、新根长和新根根径;但300 mg.kg-1NAA抑制生根,6-苄基腺嘌呤(BA)处理对根插无效甚至不利。探讨了解决山核桃根插条来源的途径及进一步提高生根率的思路。表6参9     

山核桃适生环境研究

在总结分析国内外各种农作物土宜工作及其评价方法的基础上,以将森林资源二类调查数据、DEM、气候气象数据等作为数据源,采用主成分分析法约简山核桃适生环境的评价因子,得到关键因子集;结合层次分析法、模糊数学隶属函数建立山核桃适生环境综合评价模型,为山核桃的引种、扩种和区划提供理论依据和技术支持。     

山核桃干腐病发生发展规律及防治技术

山核桃干腐病Macrophoma caryae是山核桃Carya cathayensis林的一种新病害。研究发现,该病每年3月下旬始发,至11月下旬以菌丝体在病组织越冬。为了有效控制该病的蔓延,选择14种药剂对它们开展单稀释倍数抑菌试验,并将抑菌效果好的3种药剂进行8种梯度稀释倍数试验。再按筛选出的最佳防治药剂及其稀释倍数进行实地防治试验,获得最佳防治药荆和方法。结果表明：当4—5月山核桃干腐病的病原菌孢子发生盛期,在病株上喷洒体积分数为80％402抗菌剂乳油1：100～1：2500倍液、80％乙蒜素乳油1：100～1：2500倍液和95％硫酸铜晶体1：100～1：500倍液的可选配比溶液时,均能有效控制山核桃干腐病病原菌孢子的蔓延：而在8—9月该病病原菌入侵山核桃木质部时,在刮除病斑或在病斑上深划线后,再用80％乙蒜素乳油、80％402抗菌剂和95％硫酸铜晶体中的任何一种杀菌剂的1：100～1：500倍溶液进行喷雾防治,15d后均可见明显的防治效果。图1表3参9