葡萄的成花过程及其影响因素

成花过程是葡萄生长发育过程中的重要转折时期,葡萄的成花过程受众多内外因素的调控。葡萄的成花过程可分为花序分化、花器官分化两个阶段,具体可分为营养生长、花诱导、花决定、花发端、花序及花器官的发生成熟、开花等步骤。对影响葡萄成花的因素分外部环境条件、内部因素和激素3个方面进行了讨论。综述了温度、光、湿度等外部环境因素及器官效应、碳水化合物等内部因素对葡萄成花的作用。植物激素水平,尤其是GA_3/CTK的平衡关系在控制葡萄成花过程中起重要作用。     

华东葡萄抗白粉病杂种后代cDNA文库的构建及EST序列分析

以抗白粉病的华东葡萄杂种后代6-12-4株系为试材,利用SMARTTM技术构建了白粉病病原菌诱导的全长cDNA文库。经检测,原始文库滴度为2.50×106pfu·mL-1,重组率达到99%,扩增文库滴度为3.0×109pfu·mL-1,重组率达到95%,插入片段长度在500～2000bp。随机挑取300个克隆,测序获得260条质量较高的ESTs,聚类及拼接后,共得到183个一致序列(所获序列已经提交GenBank,登录号为FG579859-FG580039)。经蛋白功能预测分析,获得含有TPR结构域的小的富含谷氨酰胺的蛋白、MYB类转录因子、水通道蛋白、富含脯氨酸蛋白、亲环素蛋白、ACI14蛋白、转脂蛋白等抗病相关基因,涉及到植物的信号转导,胁迫诱导,防卫反应等方面。这些EST序列为利用中国野生华东葡萄进行抗白粉病育种研究和利用提供了有价值的抗病基因片段,为丰富世界葡萄属植物抗白粉病基因提供序列数据。     

成花基因研究进展

成花过程是植物生长发育过程中的重要转折时期,花发育过程受众多基因的调控。控制植物花发育过程基因有分生组织特性基因、调控花器官形成基因、定域基因及成花计时基因。综述了这些基因的作用、表达部位和相互联系。植物的MADS盒基因家族在控制花发育过程中起重要作用,模式植物MADS盒基因结构、功能及作用机制对研究园艺植物MADS盒基因具有重要的理论指导意义。     

基于EST数据库的葡萄APETALA2基因cDNA克隆及其表达分析

APETALA2(AP2)是拟南芥生长发育特别是花器官发育过程中重要的调控基因。利用生物信息学方法以拟南芥APETALA2基因cDNA序列作为模板,对葡萄EST数据库进行同源检索筛选,电子克隆出葡萄AP2基因(Vv-AP2)cDNA序列。以香悦葡萄花cDNA为模板,根据电子克隆的葡萄AP2基因cDNA序列设计特异引物,分别利用RACE技术和特异PCR技术获得该基因3’末端和5’末端,序列拼接后获得葡萄的APETALA2基因的cDNA全长。该cDNA的全长为2 208 bp,命名为Vv-AP2。Vv-AP2核苷酸序列有一个1 536 bp完整的开放读码框(ORF),其5’与3’末端非翻译区分别为268 bp和376 bp。其中,3’末端含有28 bp的Ploy+(A)。该基因在GenBank基因数据库的注册号为FJ809943。氨基酸推导结果表明该cDNA共编码了511个氨基酸,具备完全保守的核定位信号序列(KKSR)以及2个高度保守的重复序列即AP2结构域。分别采用半定量RT-PCR和SYBR Green I实时定量RT-PCR初步分析了Vv-AP2在葡萄叶、茎、花序、花等不同器官中的表达水平。其中,Vv-AP2在花序和花中的表达量明显高于叶和茎。     

广州阳光玫瑰葡萄冬芽休眠与成花及枝梢淀粉含量季节动态研究

[目的]掌握葡萄冬芽的休眠状态、成花状态、碳素营养储备的变化规律对调节花期乃至熟期具有重要指导作用.[方法]以4年生平棚架式阳光玫瑰葡萄为研究试材,在不同月份进行不同节位修剪,探索冬芽休眠与成花的季节动态;于5月下旬对花穗以上4～5节位以铝箔纸进行遮光处理,8月下旬对该节位以上修剪,观测冬芽萌动情况;同时,在8月底取平...     

生长抑制剂蘸尖及主蔓环剥对温室葡萄成花的影响

葡萄设施栽培已作为各地农村产业化调整的重要项目，栽培面积逐年增加，但有品种栽后第二年产量较低，不能满足生产需要，如京亚，无核白鸡心，里查马特等。第二年产量都不理想，有时出现 空树现象。为此，我们采取了生长抑制剂（多效唑，乙烯利）蘸尖及主蔓剥处理，并取得较为满意的结果。     

不同修剪方式对红地球葡萄不同芽位成花的影响

红地球葡萄冬季修剪是实现丰产、稳产、优质的一项重要树体管理措施,具有调整树体和枝梢负载能力,调节结果部位和结果枝合理布局,改善葡萄适应性和对不利环境抵抗力等作用。对红地球葡萄宜采用何种冬季修剪方式,目前尚缺少具体而系统的量化研究。本试验通过研究红地球葡萄在不同     

修剪方式对红地球葡萄成花的影响

以5～6年生的红地球葡萄为试材,对不同修剪方式下的修剪反应以及不同芽位的成花效应、剪口粗度与果枝率的关系进行研究.结果表明:红地球葡萄结果母枝的各芽位均可成花,表现出较高的萌芽率、果枝率.不同修剪方式下萌芽率、成枝率随着结果母枝上芽位的升高而逐渐增高.剪口粗度在0.5～1.1 cm范围内,剪口芽的果枝率与枝条粗度呈现极显著的正相关关系;剪口粗度在0.6 cm以下或1.1 cm以上,剪口芽成花较少,考虑到枝条越冬安全和正常成花,建议剪口粗度定在0.8～1.1 cm为宜.     

硝铵态氮不同配比对葡萄幼树生长及成花的影响

以欧美杂交种早熟鲜食葡萄夏黑为试材,向土壤施等量纯氮,对葡萄幼苗分别按T1处理(硝铵比100︰0),T2处理(硝铵比75︰25),T3处理(硝铵比50︰50),T4处理(硝铵比25︰75),T5处理(硝铵比0︰100)5种比例施用NO3--N与NH4+-N氮肥,研究硝铵态氮不同配比对夏黑葡萄生长及成花的影响。结果表明:硝态氮与铵态氮混合配施的T1、T2、T3处理的新梢节间长度、新梢节间粗度、果枝率、结果率、叶绿素含量、可溶性糖及可溶性淀粉均高于T1全硝处理和T5全铵处理。其中T2处理(硝铵比75︰25)的夏黑葡萄新梢节间长度、新梢节间粗度、结果率、叶绿素含量均高于其他处理;T3处理(硝铵比50︰50)的果枝率、可溶性糖的含量均高于其他处理;T4处理(硝铵比25︰75)可溶性淀粉的含量最高。说明T2处理(硝铵比75︰25)和T3处理(硝铵比50︰50)可促进夏黑葡萄幼树的生长及成花。     

‘三月红’荔枝不同温度处理的成花效应

利用控温室研究‘三月红’荔枝(Litchi chinensis Sonn.)成花诱导期和形态分化期不同的温度对成花的影响。结果表明,诱导期较低温(15℃/8℃,昼12h/夜12h),或者中度低温(18℃/13℃)处理,转移到高温(28℃/23℃)条件下,植株成花枝率低,而且也减少了每穗花的小花数和雌花质量。诱导期18℃/13℃,形态分化期15℃/8℃有利于成花。与18℃/13℃和15℃/8℃下发育的花芽相比,28℃/23℃下发育的花芽玉米素(ZRs)含量较低,而生长素(IAA)含量较高。高温处理下花芽中荔枝LEAFY同源基因(LcLFY)表达明显弱于低温处理。对不同温度下的成花与激素,以及与LcLFY表达的关系进行了分析讨论。     

基于EST库的猕猴桃脂氧合酶基因家族成员的克隆

利用猕猴桃EST库及相关生物信息学手段, 从果肉组织克隆了LOX基因家族成员6个, 命名为AdLox1-6。AdLox1、AdLox2、AdLox3和AdLox4 为全长cDNA, 编码区长度分别为2 739、2 595、2 739 和 2 709 bp, AdLox5和AdLox6为cDNA片段, 长度为1 359和1 557 bp。猕猴桃AdLox2和AdLox5氨基酸序列同源性最高, 约74%, 而AdLox3 和AdLox5 仅为49%。生物信息学分析表明, AdLox1、AdLox3、AdLox4 和 AdLox6可能具有132LOX活性, 在N端含有额外约60个氨基酸残基, 而AdLox2和AdLox5则属于92LOX类型。猕猴AdLox1与番茄TomLoxD具有最高氨基酸序列同源性(约80%) , AdLox2和AdLox5与TomLoxA高度聚类, 序列同源性分别为68%和75%, AdLox4和AdLox6与TomLoxC的氨基酸序列同源性分别为62%和63%, AdLox3与番茄LOX基因序列同源性低于55%。     

葡萄次生代谢UDP-糖基转移酶研究进展

UDP-糖基转移酶催化糖基转移反应,将糖基从活化的供体分子转移到受体分子上,从而调节受体分子在细胞内和机体内的性质,如生物活性、溶解性、可转运性。糖苷化是葡萄次生代谢很普遍的修饰反应,在次生代谢产物合成、贮存方面发挥重要功能。综述了与葡萄次生代谢产物生物合成相关的UDP-糖基转移酶的生化及分子生物学研究进展,并对今后这一领域需要进一步研究的问题作了讨论。     

茶树EST-SSRs信息分析

从NCBI公共数据库中公布的茶树表达序列标签中获得12378条茶树EST,通过CAP3软件进行拼接去冗余后再用Bathprimer3 vl.0(http://wheat.pw.usda.gov/demos/BatchPrimer3/)在线软件查找微卫星(Microsatellite,SSR)重复序列。结果表明:通过前处理得到全长为2 307.014kb的无冗余EST4779条,从中检索出27种重复基元类型共207个SSR,分布于156条EST中,出现频率是3.26%。其中包括二核苷酸重复72个(34.78%),三核苷酸重复88个(42.51%),四核苷酸重复31个(14.98%),五核苷酸重复16个(7.73%)。AG/CT和ACC/GGT分别是二、三核苷酸中的优势重复类型,分别占二、三核苷酸重复的86.11%和25.00%。     

牡丹EST序列中的微卫星分析

NCBI的dbEST数据库中2 204条牡丹EST序列经过预处理获得2 048个高质量的序列,经拼接,获得318个Contigs和636个Singlets.其中142条拼接序列共检测出167个微卫星(简单序列重复,SSR),平均1.18个SSR/Contig或Singlet.这些微卫星从二至四核苷酸重复都有出现,二、三核苷酸重复类型占多数(97.61％),其中二核苷酸重复为46.71％,三核苷酸重复为50.90％.二核苷酸重复类型中出现最多的是AG/TC和GA/CT,分别占SSR总数的20.36％和16.77％,三核苷酸重复类型以AGA/TCT、GAT/ATC最多,分别占总SSR的5.40％.最后对含有微卫星的Contigs和Singlets进行基因注释、功能分类.     

藤稔葡萄芽变株系研究

以藤捻葡萄为对照,对藤枪的一个芽变株系的生物学和植物学特性进行观测,并对其幼叶的ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析。结果表明：芽变株系在植物学、生物学特性方面存在着不同程度的变异,尤其生长势明显比对照强;一年多次结果性能好;丰产稳产;果实中的水溶性总糖、还原糖、维生素Ｃ、可溶性固形物含量增加,品质优于对照;且果肉硬度提高,具良好的贮藏性能。从幼叶中提取ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ分析,某些引物的ＰＣＲ产物存在着一定的多态性,表明芽变株系发生了基因型的分化。     

葡萄种质资源果形性状的分析

通过分析葡萄种质的果形性状以及不同类型的果形特点,为认识葡萄种质资源果粒形状特点和育种亲本选择提供一定依据。选取820份葡萄种质材料（286份的性状来自田间实地调查,534份来自《中国葡萄志》和《中国葡萄品种》记载）,对不同类型、种（species）和用途的葡萄果形特点、不同果形单果质量的分布、以及质量与其纵径和横径的相关性、不同年代选育不同果形的数量等进行分析。结果表明,倒卵圆形和长椭圆形的果粒较大,而圆形的果粒较小。欧亚种葡萄中长椭圆形和卵圆形的较多,欧美杂种葡萄中倒卵圆形的较多。鲜食葡萄较酿酒、制干和制汁葡萄果形更丰富且更狭长。黑色葡萄以圆形和近圆形为主,白色和红色葡萄中果形较为丰富。从育种进程来看,早期选育的葡萄果形以圆形为主,之后变为以圆形、近圆形和椭圆形为主,现代越来越多果形相继出现。圆形、卵圆形和倒卵圆形果粒的横、纵径与果粒质量拟合度较好。同一个葡萄品种果粒形状可能存在差异,其中椭圆形变化较为普遍。     

葡萄种质资源的RAPD分析

以采自新疆维吾尔自治区葡萄瓜果开发研究中心的180份葡萄材料为试材,采用改良CTAB法提取葡萄DNA,进行了RAPD分析;同时从已发表文章中选出96个适合于葡萄RAPD分析所用随机引物进行引物筛选,旨在对供试葡萄品种进行亲缘关系的分析.结果表明:DNA产率和纯度都较好,产率绝大多数都在100 ng/μL以上,可以用于RAPD分析;筛选出的21个条带较多且清晰的引物,通过聚类分析,180份材料共分为7类.     

葡萄叶片蛋白质双向电泳技术体系的建立

现对葡萄叶片中总蛋白质的双向电泳技术体系进行了初步探讨,比较了不同等电聚集程序、不同pH胶条以及不同SDS-PAGE凝胶浓度的双向电泳效果。结果表明:葡萄叶片蛋白质使用等电聚焦程序B、pH范围为4~7的胶条和12%的SDS-PAGE凝胶可以得到较为理想的双向电泳分析结果;采用7 cm胶条最大可以分离出143个有效蛋白质点。     

基于EST库的枳APETALA2基因cDNA克隆及其表达分析

 根据物种间同源基因相对保守的特点,利用生物信息学方法以拟南芥APETALA2 cDNA序列作为模板,对柑橘EST数据库进行同源检索筛选,克隆了柑橘APETALA2基因的cDNA序列,并以枳[Poncirus trifoliata (L.) Raf.]花cDNA为模板,根据以上cDNA序列设计特异引物,利用RACE技术分别获得该基因的5'和3'末端,序列拼接后获得枳的APETALA2 cDNA全长。该cDNA全长为1 980 bp,命名为Pt-AP2。Pt-AP2核苷酸序列有一个1 539 bp完整的开放读码框(ORF),5'末端起始密码子ATG其始于290 bp,3'末端非翻译区为152 bp,其中含有27 bp的Ploy⁺(A)。该基因已在GenBank基因数据库注册,注册号为EU883665。推导该cDNA编码512个氨基酸,与苹果、矮牵牛和拟南芥中相应序列同源性分别为59.1%,59.7%和63.8%。序列分析表明, Pt-AP2除了具备完全保守的核定位信号序列（KKSR）外,还具有两个高度保守的重复序列即AP2结构域。分别采用半定量RT-PCR和SYBR Green I实时定量RT-PCR方法分析Pt-AP2在枳叶、茎、根、花和果等不同器官中的表达水平,结果一致表明Pt-AP2在各个器官中的表达水平不同, 花中的表达量最高,果实中的表达量最低。     

葡萄品种资源裂果性状调查与分析

选取252 个鲜食葡萄品种（111 个欧美杂种,141 个欧亚种）,分别在转色期、成熟期、过熟期采集果实,通过清水浸泡试验,了解比较其裂果情况。结果表明,葡萄裂果症状有环裂、纵裂、纵环裂和龟裂等,龟裂只在欧亚种葡萄出现;欧亚种葡萄比欧美杂种葡萄裂果严重;成熟期裂果最严重;欧美杂种小果粒葡萄品种更容易裂果;果皮厚、果肉质地软的葡萄不易裂果。不同葡萄品种的裂果倾向性存在较大差异,通过研究清水浸泡后葡萄发生裂果的情况,对葡萄裂果有了初步认识,为葡萄品种选择及葡萄育种亲本选择提供一定理论支撑。