山东地区禽舍空气中大肠杆菌分离鉴定及血清型调查

为了解山东地区鸡舍内空气中大肠杆菌的血清型,用伊红美蓝培养基对山东地区大型养殖场空气中大肠杆菌进行分离,通过培养特性、染色镜检、生化特性、PCR试验对分离菌株进行鉴定;对鉴定的大肠杆菌用平板凝集试验进行血清型鉴定。结果表明:共分离到202株大肠杆菌,其中有89株未能定型,占分离株的44.06%;定型了113株,占分离株的55.94%。定型的大肠杆菌共分为24个血清型,优势血清型为O_2、O_(14)、O_1、O_(11)、O_(78)和O_(20),占已定型分离株的76.99%。     

温州市鸭肠道大肠杆菌血清型鉴定及耐药性分析

为了调查温州市鸭肠道大肠杆菌的血清型和耐药情况,从温州市11个县市区14个养鸭场采集泄殖腔拭子166份,进行大肠杆菌分离培养鉴定。结果表明:共鉴定出鸭大肠杆菌156株,在分离菌株中有112株确定了血清型,分别属于8个血清型,其中O_(145)、O_(169)、O_(142)占分离菌株的44.23%(69/156),为优势血清型。分离菌株对阿米卡星、大观霉素、头孢哌酮/舒巴坦、氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、头孢曲松、头孢噻肟、头孢唑林、妥布霉素、庆大霉素12种抗生素均呈现不同程度的敏感性;在156株分离菌株中,对3种以上抗生素耐药的菌株占82.05%(128/156),呈现多重耐药性。说明温州市健康鸭肠道大肠杆菌血清型众多,多重耐药问题严重,应引起重视,加强各地畜禽大肠杆菌耐药性的监测。     

禽优势血清型大肠杆菌部分相关毒力基因的检测

为研究禽大肠杆菌的致病性及相关生物特性,试验对湖北省各地方养殖场送检的病料,通过分离培养及生化鉴定,分离得到232株禽大肠杆菌。18个O因子血清鉴定结果显示,优势血清型为O_(20)(19)、O_(78)(27),这两种血清型菌株合计46株,占血清型定型菌株的25.99%(未定型菌株为55株)。对优势血清型禽大肠杆菌菌株进行毒力基因检测,结果表明fimH、iroD、iucD、estA和ibeA基因携带率分别为87.88%、57.58%、48.49%、36.37%、0%。研究结果为湖北地区大肠杆菌防控和疫苗的研制提供数据支撑,并为阐明大肠杆菌的致病机理奠定基础。     

新疆阿拉尔垦区鸡致病性大肠杆菌的分离与鉴定

从新疆阿拉尔垦区的不同鸡场和屠宰点收集典型病变的病料100份,从中分离出大肠杆菌26株,并进行血清型鉴定,其主要血清型主要有O_(127)、O_(111)、O_(55)、O_(26)、O_(126)、O_(128)、O_(125)、O_(4),动物回归试验显示所分离的6种血清型的菌株对3～5日龄内雏鸡具有很强的致病作用,多数菌株可使接种雏鸡94.4%死亡。通过药敏试验结果表明,所分离26株大肠杆菌对头孢唑林钠最敏感,为该垦区鸡的大肠杆菌病诊断和预防提供技术支持。     

云南撒坝猪源大肠杆菌优势血清型强毒力岛的检测及其致病性

为研究撒坝猪大肠杆菌强毒力岛(HPI)的致病性,对撒坝猪致病性大肠杆菌进行了分离和血清型鉴定,获取优势血清型,采用PCR检测HPI,进行同源性比较,并通过耐药性试验和致病性试验对分离菌株与HPI的相关性进行分析。结果显示:分离得到101株大肠杆菌,确定血清型84株,其中O_3、O_4、O_(24)为优势血清型;HPI阳性率为88.64%,与GenBank登录的参考序列同源性比较大于99.3%;氨基糖苷类药物耐药性试验结果显示分离菌株普遍耐药,而HPI阳性株耐药性强,并检出含aac(3)-Ⅱa基因12株,含有aac(6′)-Ⅰb基因21株;致病性试验表明含irp2的菌株致病性强,而具有fyuA-irp2基因簇的菌株致病性更强。结果表明:HPI对大肠杆菌的毒力有增强作用。     

皖北地区禽源大肠杆菌的血清型鉴定与耐药性分析

为了掌握皖北地区家禽致病性大肠杆菌的优势血清型及耐药性表现,从皖北4个市8个县区32个规模化养殖场采集疑似家禽大肠杆菌病的病料64份,通过常规分离培养纯化获取31株致病性大肠杆菌,对31株致病性大肠杆菌进行血清学鉴定和耐药性分析。试验结果表明:31株致病性大肠杆菌分别属于O_(78)、O_(18)、O_(88)、O_2、O_1、O_(143)、O_4、O_(35)、和O_(141)血清型,其中O_(78)9株、O_(18)7株、O_(88)5株,共计21株,占分离株的67.74%,属于本地区的优势血清型。致病性试验结果表明,所分离的31株致病菌中,83.9%具有高致病性,12.9%具有中致病性,3.2%具有低致病性,不同血清型致病性没有明显差异。分离菌株对11种抗生素表现不同程度的耐药性,对复方磺胺甲基异噁唑、磺胺二甲嘧啶、恩诺沙星表现严重耐药,耐药比例在70%以上;对阿莫西林、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、氟苯尼考、环丙沙星耐药比例在16%以上;对头孢噻肟、头孢唑肟、阿米卞星耐药性比例在10%以下。其中,对4、5、6种药物表现耐药比例较高,占分离株的60%以上,对3、7、8、9耐药性居中,所有菌株均表现为多重耐药性。研究结果为皖北地区家禽大肠杆菌病的疫苗防控、药物防治提供了科学依据。     

河南省主要致病性鸡埃希氏大肠杆菌血清学分型初探

经因子血清玻片凝集试验对我省郑州、焦作、漯河、周口、濮阳、安阳等7地市的几十个鸡场分离出的20余株致病性埃希氏大肠杆菌菌株进行了血清学分型。结果表明,我省鸡致病性埃希氏大肠杆菌血清型O_2占优势,占54.5％;其次为O_1,占18.2％;O_(74)和O_(78)最少,各占13.6％和4.5％;未定型的占9.1％。     

貉致病性大肠杆菌分离鉴定及HPI、LEE毒力岛检测

为了解致病性大肠杆菌引起貉腹泻的机理,采用了貉致病性大肠杆菌分离鉴定、检测毒力岛基因HPI(irp2、fyuA)与LEE(ler、eaeA),小鼠腹腔注射检测菌株毒力的方法。结果表明:从腹泻貉体内分离出血清型分别为O_(29)、O_(38)、O_(78)和O_(107)的大肠杆菌,4个血清型中有2个血清型(O_(38)、O_(78))携带有irp2和fyuA,4个血清型均未检测到ler和eaeA;4个血清型的大肠杆菌均可使小鼠不同程度发病,其中以携带irp2和fyuA的菌株毒力较强,可见该菌对貉的健康存在危害。     

规模化养猪场大肠杆菌病流行病学调查

我们对近年以来我省规模化养猪场发生的6次猪大肠杆菌病,进行了临床、病理学和实验室诊断调查,其中仔猪黄痢4次,仔猪白痢2次;总发病猪4135头,病死760头,发病率为34.22%,病死率为18.11%;对采自上述猪场分离获得的76株大肠杆菌,采用大肠杆菌标准抗O型血清凝集试验进行血清型鉴定,其中,仔猪黄痢病料分离菌株血清型分别为O_8、O_9、O_(60)、O_(64)、O_(115)、O_(149)、O_(157),仔猪白痢病料分离菌株血清型分别为O_8、O_9、O_(139)、O_(157)。     

陕西省部分禽源性大肠杆菌的外膜蛋白型

从陕西省部分优势血清型的禽源性大肠杆菌中提取外膜蛋白 (outer membrane protein,OMP) ,用 SDS- PAGE进行 OMP分型。 18株菌共产生了 3种 OMP型 ,其中 4株 O1菌株 ,4株 O2菌株 ,4株 O78菌株和 3株 O89菌株各属2个 OMP型 (OMP- 1,2型 ) ;3株 O75菌株属 3个 OMP型 (OMP- 1,2 ,3型 )。结果表明 ,陕西省分离的优势血清型禽源大肠杆菌具有多样性的 OMP型 ,且多种血清型间具有共同的 OMP型。     

延边部分地区猪致病性大肠杆菌的分离与鉴定

本文对延边部分地区送检的病死猪、疑似大肠杆菌感染的腹泻病猪采集病料,分别接种在营养琼脂平板、麦康凯琼脂培养基、伊红美兰培养基上,进行分离培养及纯培养,对可疑菌落革兰氏染色,涂片镜检。对初步鉴定的细菌进行生化试验及血清型鉴定。结果从48份样本中,共分离出符合大肠杆菌生长特性的菌株40株。将培养后的40株大肠杆菌菌液分别接种小鼠。结果表明,其中36株为高致病性大肠杆菌、4株呈低致病性。本试验验中对分离得到的大肠杆菌菌株进行血清型分型,结果共分离出37个血清型。其中O6(4/37),O78(5/37)、O90(7/37)、O107(7/37)为优势血清型。     

邵阳地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型鉴定及耐药性分析

为了分析邵阳地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型与耐药性,采用细菌分离鉴定的方法对38家宠物医院中无菌采集的87份腹泻宠物犬肛拭子及粪便样品进行大肠杆菌分离鉴定,采用人工感染动物试验、玻板凝集试验和K-B药敏纸片法分别检测分离菌株的致病性、血清型及耐药性。结果显示:分离得到了49株大肠杆菌,其中34株为致病性;34株致病性大肠杆菌分离株属于9种血清型,以O_2、O_9、O_(13)和O_(20)为主要的优势血清型;34株致病性大肠杆菌分离株对阿莫西林、氨苄西林、美罗培南等4种药物耐药率在82.4%～94.1%之间,对丁胺卡那、头孢他啶、恩诺沙星等6种药物的耐药率在41.2%～79.4%之间,对头孢曲松、头孢噻肟耐药率在14.7%～23.5%之间。研究结果为该地区宠物犬大肠杆菌病防治提供参考。     

鸭致病性大肠杆菌的血清型鉴定及敏感药物的临床应用

本试验对荣昌部分规模化养鸭场分离的77株致病性大肠杆菌进行药敏试验及敏感药物的临床应用。取病死雏鸭的肝脏进行大肠杆菌的分离、纯化,通过细菌的生化试验、血清型鉴定、致病性试验、药敏试验以及敏感药物的临床应用,确定分离菌的种类及致病能力的强弱。结果表明,77株大肠杆菌分属于12种血清型,小鼠致病性试验显示以O_(45)、O_(92)、O_(93)和O_(142)的致病性最强,致死率达到100%,O_2的致死率最低,只有25%,其余血清型的致死率在37.5%~87.5%。分离菌株对氧氟沙星、庆大霉素、诺氟沙星和卡那霉素4种抗菌药物高敏。     

陕西省关中地区鸡大肠杆菌血清分型及防治研究

从陕西省关中１７个县鸡场分离出５３２株大肠杆菌，对其中１３６株进行血清分型，共分出１１个血清型，主要血清型是：Ｏ２、Ｏ７８、Ｏ２６、Ｏ２２、Ｏ５３、Ｏ１。药敏试验利高霉素，丁胺卡娜霉素等１０种药物对大肠杆菌敏感。选大肠杆菌分型分开菌株和重点菌株制备多价苗，用于易感鸡群，效果理想。     

不同动物源食品中大肠杆菌分离鉴定与耐药性分析

为了解辽宁省部分地区不同动物源食品中大肠杆菌种类和耐药状况,2017～2018年采集肉类样品312份,包括牛肉21份、猪肉75份和鸡肉216份,分离鉴定出大肠杆菌222株(71.2%):牛肉16株(76.2%)、猪肉54株(72.0%)和鸡肉152株(70.4%),并对分离的菌株进行血清学鉴定和药敏试验。结果表明,定型的210株大肠杆菌属于14个血清型,其中O_8、O_9、O_(20)、O_(54)和O_(101),共132株,占分离株的62.9%;牛肉和猪肉大肠杆菌分别对5种和9种药物的耐药率超过50.0%,鸡肉大肠杆菌对头孢曲松、阿米卡星外其余抗生素耐药率均大于50.0%,3种动物源食品大肠杆菌均对阿米卡星最敏感;多重耐药性结果表明,动物源食品大肠杆菌以2耐(17.1%)为主;鸡肉大肠杆菌则以4耐(19.1%)和6耐(17.8%)最多。结果表明,本次辽宁地区采集的动物源食品中大肠杆菌污染情况严重,分离菌株耐药性较为普遍。     

猪源大肠杆菌分离鉴定及白头翁汤对其抑菌试验

采用细菌分离培养、革兰染色、生化鉴定、动物试验、血清型鉴定及PCR扩增、药物的MIC测定等方法对48份样品进行处理,检测河南部分地区猪源大肠杆菌流行情况及其白头翁汤对其抑菌作用。结果分离鉴定出6株大肠杆菌,血清型鉴定结果为O_8有1株、O_(64)有2株、O_(157)有3株。动物试验结果显示,6株分离菌均为强毒株。PCR扩增显示,这6株大肠杆菌分离株均含有产生大肠杆菌粘附毒素的eaeA基因。白头翁汤对分离菌株MIC均为0.625 mg/mL、MBC均为1.25 mg/mL。临床治疗病例显示,白头翁汤治愈率96%,从而为临床上有效检测和治疗猪源大肠杆菌提供理论依据。     

四川省部分规模化肉牛养殖场致犊牛腹泻大肠杆菌的血清型鉴定与耐药性分析

为了解四川省规模化肉牛养殖场致犊牛腹泻大肠杆菌的血清型和耐药性,试验采集四川省部分规模化肉牛养殖场腹泻犊牛的肛拭子、粪便等样品151份,采取细菌分离与鉴定,生化试验,PCR鉴定、测序与同源性分析,致病性试验等方法分离致病性大肠杆菌,并采用凝集试验和药敏纸片法分别检测致病性大肠杆菌的血清型和耐药性。结果表明:共分离到72株大肠杆菌,其中50株为致病性大肠杆菌,属于10个血清型,以O_(101)、O_(36)、O_(126)、O_(26) 4种血清型为流行的优势血清型。分离的50株致病性大肠杆菌对头孢克肟、头孢曲松、头孢他啶等的耐药率为14.0%～28.0%,对林可霉素、环丙沙星、丁胺卡那霉素等的耐药率为30.0%～64.0%,对强力霉素、磺胺间甲氧嘧啶、多黏菌素等的耐药率为72.0%～96.0%。说明致犊牛腹泻大肠杆菌流行的血清型复杂,耐药现象严重,且呈现多重耐药现象。     

辽宁地区猪源大肠埃希菌血清型调查分析

为了解辽宁地区猪群中大肠埃希菌流行的血清型,对来源于辽宁省9个不同地区的病料进行了大肠埃希菌的分离培养、生化鉴定,并采用平板凝集法与试管凝集法测定了这些大肠埃希菌的血清型。结果表明:分离鉴定的70株大肠埃希菌中有63株能够定型,分别属于28种血清型,O_(14)、O_(65)、O_(101)为优势血清型,占已定型菌株的44.44%;其次为O_8、O_(92)、O_(153),占已定型菌株的19.05%;4株自凝,3株未能定型。     

鸡源大肠杆菌OMP和OmpT基因与血清型相关性

为了解禽致病性大肠杆菌分离株OMP、OmpT基因与血清型相关性,对6种血清型(O78、O38、O9、O91、O11、O157)的7株鸡源大肠杆菌菌株进行了外膜蛋白(OMP)和外膜蛋白酶T(OmpT)基因的研究.用N-十二烷酰肌氨酸法提取其外膜蛋白,经SDS-PAGE电泳后考马斯亮蓝染色,对鸡源大肠杆菌菌株进行了外膜蛋白分型;用PCR和生物信息学的方法对OmpT基因进行检测与分析.7株大肠杆菌共有3个OMP型,其中,分离株5,32,9主要由相对分子质量接近的2条带组成,为OMP-1型;分离株11主要由相对分子质量接近的3条带组成,为OMP-2型;分离株14,7主要由相对分子质量接近的1条带组成,为OMP-3型.这表明同一血清型的菌株可能属于不同的OMP型,而血清型不同的分离株之间却可具有相同的OMP型.PCR检测结果显示7株鸡源大肠杆菌均携带OmpT基因,与GenBank登录的序列比较发现其同源性为91.9％～100.0％,不同血清型菌株间的同源性为91.9％～98.0％.该试验证实了同一血清型分离株之间可发生遗传分化,而不同血清型分离株之间也可具有不同程度的遗传相关性;不同血清型分离株间的OmpT基因的同源性存在一定的差异.     

引发禽类疾病的大肠杆菌进化机制需要重新界定

英国动物卫生研究所的科研人员对2株O78血清型禽致病性大肠杆菌(APEC)多位点序列类型(ST)-23菌株χ7122和IMT2155进行了序列测定,与一株O78血清型人源ST23产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的序列进行了比较。遗传进化分析显示,与APECO1相比,APECO78菌株与人源ST23ETEC的遗传关系更近,这表明基于肠外或导致腹泻等对大肠杆菌致病类型进行的分型与菌株的遗传进化情况并不相符。APECST23菌株的附件基因组在O1血清型基因组毒力岛和保留毒力相关位点上保守性非常有限。为进一步了解基因组的多样性,