鸡马立克氏病发病过程中肝肾细胞凋亡的电镜观察

通过透射电镜对人工诱发的马立克氏病病鸡的肝、肾细胞进行了细胞凋亡观察,其肝、肾实质细胞发生了细胞凋亡.细胞凋亡呈现多阶段的过程:早期,染色质发生凝聚和边集;中期,染色质凝集十分明显,核变成致密小体,随后裂解成数个团块;后期,凋亡小体形成.肿瘤细胞浸润越严重,细胞凋亡也越明显.凋亡的细胞细胞质内自噬体和同心板层小体形成,内质网扩张成空泡状.细胞膜完整,线粒体无明显变化.     

MD疫苗免疫增强剂对HVT雏鸡免疫活性细胞的影响

用鸡马立克氏病疫苗免疫增强剂与马立克氏病火鸡疱疹病毒苗（HVT）同时免疫雏鸡，然后观察免疫器官中免疫活性细胞（ANAE^T淋巴细胞，PMG^ 浆细胞）的变化情况，结果显示：1日龄雏鸡HVT免疫后，加MD免疫增强剂雏鸡免疫器官中的T淋巴细胞和浆细胞数同相应不加增强剂的雏鸡相比呈现明显的增多，尤其是在第7天和14天这种增多表现更突出。     

MDV感染鸡羽毛根病毒抗原和DNA的动态检测

１０羽１４日龄鸡分别以马立克氏病毒（ＭＤＶ）ＢＪ－１株接毒，采集羽毛根作为ＭＤＶ琼扩抗原和ＭＤＶＤＮＡｄｏｔ－ｂｌｏｔ杂交的动态检测样品。接毒后第１０ｄ至第８周的检测结果显示，鸡羽毛根ＭＤＶ琼扩抗原及ＭＤＶＤＮＡ可分别在接毒后第１４ｄ（３７．５％，３／８）和第１２ｄ（３３．３％，３／９）检出；接毒后第１７ｄ至第５周，鸡羽毛根ＭＤＶ琼扩抗原的阳性检出率均大于８０％；第６，７和８周时，则分别降至６６．７％（４／６），５０％（３／６）和４０％（２／５）。而ＭＤＶＤＮＡ的检测，除１只鸡直到第４周才呈阳性外，其余在接毒后第１４ｄ至第８周中均保持１００％的阳性检出率。     

鸡马立克氏病（MD）胚肿免疫组织学基础

本试验应用火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ）疫苗对孵化至１８日龄的鸡胚进行胚胎免疫注射，胚胎免疫后出壳雏鸡淋巴脏器的组织学、组织化学和超微结构显示，１８日龄胚胎免疫鸡对淋巴器官的早期发育具有明显的免疫促进作用；马立克氏病胚胎免疫是以细胞免疫为主，同时有体液免疫和巨噬细胞积极参与的联合免疫。另外，本试验对鸡胚淋巴器官的组织发育进行了较详细的描述。     

BclGs对肿瘤细胞促凋亡功能的初步研究

为了探讨仅含有BH3结构域的促凋亡蛋白BclGs的促凋亡机理,从人睾丸cDNA文库中克隆BclGs基因编码区,将其与pEGFP-C1载体连接,构建载体pEGFP-BclGs,转染COS7细胞和多种肿瘤细胞(如Hela、HepG2和MCF7等),研究BclGs对肿瘤细胞的促凋亡功能。结果表明,pEGFP-BclGs可以诱导不同的肿瘤细胞凋亡,但凋亡率存在差别;BclGs在不同细胞的线粒体中均呈点状分布。线粒体是诱导肿瘤细胞凋亡的有效细胞器,BclGs在线粒体中呈点状分布。     

ROS-generating mitochondrial DNA mutations can regulate tumor cell metastasis

Mutations in mitochondrial DNA (mtDNA) occur at high frequency in human tumors, but whether these mutations alter tumor cell behavior has been unclear. We used cytoplasmic hybrid (cybrid) technology to replace the endogenous mtDNA in a mouse tumor cell line that was poorly metastatic with mtDNA from a cell line that was highly metastatic, and vice versa. Using assays of metastasis in mice, we found that the recipient tumor cells acquired the metastatic potential of the transferred mtDNA. The mtDNA conferring high metastatic potential contained G13997A and 13885insC mutations in the gene encoding NADH (reduced form of nicotinamide adenine dinucleotide) dehydrogenase subunit 6 (ND6). These mutations produced a deficiency in respiratory complex I activity and were associated with overproduction of reactive oxygen species (ROS). Pretreatment of the highly metastatic tumor cells with ROS scavengers suppressed their metastatic potential in mice. These results indicate that mtDNA mutations can contribute to tumor progression by enhancing the metastatic potential of tumor cells.     

鸡组织滴虫病的流行特点与防治

鸡组织滴虫病又称盲肠性肝炎或叫黑头病,是由单鞭毛科、组织滴虫属(Histomouas)的火鸡组织滴虫(H.meleagriidis)寄生于禽类盲肠和肝脏内而引起的一种原虫病。近年来,鸡组织滴虫病在河南各地农村及一些养鸡厂时有发生和流行,严重影响养鸡业的持续发展。根据该病流行情况及病理表现,采用中西药结合的防治办法,取得了较好的效果。1发病机理及症状鸡感染组织滴虫后的发病率和死亡率均很高。组织滴虫虫体在鸡盲肠内进行无性繁殖产生大量的组织滴虫,使盲肠细胞遭到大量破坏,溶解、脱落,鸡出现下痢,排淡黄色或深绿色粪便,严重时粪中带血及脱落的组…     

Knockdown of the Meq gene in Marek's disease tumor cell line MSB1 might induce cell apoptosis and inhibit cell proliferation and invasion

Marek's disease (MD), a highly cell-associated and contagious disease of chickens caused by Marek's disease virus (MDV) can result in neural lesions, immunosuppression and neoplasia in chicken. The Meq gene is an important oncogene in the MDV genome, and it is expressed highly in MD tumor tissues and MD T-lymphoblastoid cell lines. An experiment was conducted to elucidate the role of Meq in MD tumor transformation. RNA interference technology was used to block its expression, and then analyzed the biological effects of Meq knockdown on the MD tumor cell line MSB1. A small interfering RNA with an interference efficiency of 70% (P<0.01) was transfected into MSB1 cells to knock down the expression of Meq gene. The cell proliferation, cycle and apoptosis were detected post-Meq knockdown. The results showed that MSB1 cell proliferation was downregulated remarkably at 48 h (P<0.01), 60 h (P<0.05) and 72 h (P<0.01) post-Meq knockdown. The cell cycle was unaffected (P>0.05). B-cell lymphoma 2 gene (BCL2) was anti-apoptotic and caspase-6 was the effector in the apoptosis pathway. The activity of caspase-6 was upregulated (P<0.05) significantly and BCL2 gene expression was downregulated (P<0.05) significantly post-Meq knockdown, suggesting cell apoptosis might be induced. MSB1 cell migration did not exhibit any obvious change (P>0.05) post-Meq knockdown, but the expression of two genes (matrix metalloproteinase 2 (MMP2) and MMP9) that are correlated closely to cell invasion was downregulated (P<0.05) remarkably post-Meq knockdown. The Meq knockdown might affect the main features of tumorous cells, including proliferation, apoptosis, and invasion, suggesting that the Meq gene might play a crucial role in interfering with lymphomatous cell transformation.     

藏鸡屠宰性能及肉质特性

为研究藏鸡的内用开发价值,测定了150 日龄藏鸡的产内性能、,肉质指标、氨基酸和肌苷酸含量.结果表明,藏鸡公、母屠体率分别为88.95%和88.74%,半净膛率分别为75.55%和74.65%,全净膛率分别为56.30%和55.34%,胸肌率分别为15.00%和15.97%,腿肌率分别为23.69%和23.09%.胸肌滴水损失分别为2.68%和2.62%,肉色分别为3.52和3.74,剪切力值分别为2.95和3.08 kg,熟肉率分别为72.03%和71.12%,氨基酸质量分数分别为20.67%和19.78%,肌苷酸分别为2.32和2.50mg/g.与我国其他地方鸡种比较,藏坞屠宰性能低,但胸肌和腿肌率高,氨基酸含量高,人体必需氨基酸和鲜味氨基酸比例大;因此藏鸡具有肉质鲜美的特点,是发展具有高原特色优质养殖业的良好品种.     

鸡ANP32家族蛋白亚细胞定位及其在免疫器官中的表达特征分析

【目的】明确鸡ANP32家族蛋白的亚细胞定位及在不同月龄鸡免疫器官中的表达特征,为后续研究鸡ANP32家族蛋白与新城疫病毒（NDV）复制及其致病性的关系打下基础。【方法】分别构建鸡ANP32家族基因重组真核表达载体,转染HEK-293T细胞后进行诱导表达,利用Western blotting检测融合蛋白表达情况,并通过荧光观察分析融合蛋白亚细胞定位;同时采用实时荧光定量PCR检测ANP32家族基因在1～6月龄鸡免疫器官（脾脏、胸腺和法氏囊）中的表达水平。【结果】成功构建了鸡ANP32家族基因重组真核表达载体pEGFP-C1-ANP32A、pEGFP-C1-ANP32B和pEGFP-C1-ANP32E,转染HEK-293T细胞后得到正确表达,获得携带EGFP标签的融合蛋白EGFP-ANP32A、EGFPANP32B和EGFP-ANP32E,其分子量分别为60.0、57.9和56.9 k D。亚细胞定位分析结果表明,融合蛋白EGFP-ANP32A、EGFP-ANP32B和EGFP-ANP32E的荧光与细胞核荧光完全重合,即主要定位在细胞核。实时荧光定量PCR检测结果表明,ANP32家族基因...     

肉仔鸡血浆游离氨基酸浓度变化规律的研究

给４ 组共４０ 只肉仔鸡分别强饲无氮饲粮（ＮＦＤ）、ＮＦＤ＋ ３２ ｇ·ｋｇ－ １酶解酪蛋白（ＥＨＣ）,及以豆粕为惟一氮源的粗蛋白质量浓度为５０ 和２００ ｇ·ｋｇ－ １的饲粮,于强饲后５ ｍ ｉｎ,４,２４,３６ 及４８ ｈ,采集静脉血液,观测去蛋白血浆中诸氨基酸（ＰＦＡＡ）的变化规律。结果表明,ＰＦＡＡ 浓度与采食饲粮氨基酸含量及食后时间呈复杂的函数关系。ＰＦＡＡ 浓度仅可大致估计饲料氨基酸的有效性。     

Investigation of the characteristics of genetic heterogeneity of chicken breeds and experimental populations on the basis of DNA polymorphism analysis

Parameters of genetic similarity, genetic distances, and heterozygosity obtained on the basis of DNA polymorphism analysis has enabled revealing the degree of divergence and effect of directional selection in chicken breeds and experimental populations.     

2种鸡柔嫩艾美耳球虫DNA疫苗的构建及在鸡体内的表达

利用DNA重组技术,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenalla)第2代裂殖子抗原基因MZ5-7的完整 阅读框(ORF,945 bp)克隆到真核表达质粒pcDNA4．0中,构建了DNA疫苗pcDNA4．0-MZ。用同样方法,将鸡成 熟白细胞介素-17(IL-17)基因的完整阅读框(507 bp)与MZ5-7基因串连,使MZ5-7基因位于IL-17基因的上游, 将串连基因克隆到pcDNA4．0中,构建成免疫调节型DNA疫苗pcDNA4．0-MZ-IL-17。2种DNA疫苗纯化后,胸 部肌肉注射免疫1周龄雏鸡(50 μg／鸡),在免疫后3．5,7,15和20 d取注射和非注射部位肌肉组织,分别用RT- PCR和Western blot方法检测抗原基因转录和表达情况。结果表明,在2种疫苗免疫后5,7和15 d,用RT-PCR 方法在注射部位均可检测到MZ5-7基因的转录产物,大小约950 bp,但在免疫第3天和20天的肌肉组织中未检测 到表达产物。相同时间用Western blot方法进行检测,结果在免疫5和7 d的鸡肌肉组织中检测到表达产物,pcD- NA4．0-MZ表达产物大小约36 ku,与理论推测值一致,pcDNA4．0-MZ-IL-17表达产物大小约64 ku,较MZ5-7和 IL-17基因之和的理论推测值58 ku略大。但在非注射部位,两种方法均未检测到转录或表达产物。上述结果表明, 通过肌肉注射后,两种DNA疫苗均可在鸡肌肉组织中得到有效表达。     

热应激对鸡胸腺细胞凋亡的影响及其调节机理

18只AA肉鸡于 2 2℃饲养。 30日龄时 ,随机分成 3组 ,分别进行 0 ,5和 10h的 4 1℃高温应激处理。用流式细胞仪检测胸腺细胞DNA含量、细胞凋亡率以及细胞caspase 3和Bcl 2的表达。结果 :应激处理 0 ,5和 10h时 ,(1)DNA合成期 (S期 )细胞比例分别是 2 77% ,3 2 8%和 2 31% ;(2 )胸腺细胞凋亡率分别是 3 99% ,11 15 %和3 31% ;(3)caspase 3表达阳性细胞率分别为 14 2 4 % ,2 7 0 1%和 10 84 % ,Bcl 2表达阳性细胞率分别是 2 0 5 9% ,15 13%和 2 7 92 % ;(4 )应激 5h与 0和 10h的细胞凋亡率、caspase 3和Bcl 2的阳性细胞表达率均有显著差异 (P <0 0 5 ) ;(5 )应激处理鸡的胸腺细胞凋亡率、caspase 3表达阳性细胞率从 0h到 5h逐渐升高 ,以后又逐渐下降。在高温应激过程中 ,胸腺细胞凋亡率与caspase 3表达阳性细胞率呈平行的变化关系 ,而与Bcl 2表达阳性细胞率呈反向变化关系。这些结果均说明 :高温应激能明显影响胸腺细胞凋亡 ,而这种细胞凋亡的变化受caspase 3和Bcl 2表达的调节。