兔病毒性出血症病毒分离鉴定

兔病毒性出血症是由兔病毒性出血症病毒（RHDV）引起的急性、败血性、高度接触性传染病。感染病兔多在48-72小时内死亡,给养兔业造成的威胁日益突出。因此,及时准确地对RHDV进行诊断已经成为防治该病的关键。     

兔病毒性出血症病毒“LQ”株的分离鉴定

对成都龙泉某兔场疑似兔病毒性出血症(RHD)发病兔的病料进行细菌学检查以及血凝性、特异性鉴定,并进一步进行致病性鉴定。结果表明:RHDV LQ株对人"O"型红细胞具有高度血凝性,血凝效价达10×212;RHDV抗血清可特异性抑制RHDV LQ株对人"O"型红细胞的凝集;RHDV LQ株对家兔的LD50为10-6.87/mL,是一株对家兔具有高致病力的强毒株。     

兔病毒性出血症病毒的分离和诊治

兔病毒性出血症是由兔病毒性出血症病毒引起的高度接触传染性、急性、致死性的传染病,以传染性极强、呼吸系统出血、肝坏死、实质脏器水肿、淤血及出血性变化为特征,其潜伏期短、发病率和死亡率高,是兔的一种毁灭性传染病。本病的传染源是病兔和带毒兔,可经消化道、呼吸道、伤口和黏膜直     

兔出血症病毒ZB株的分离与鉴定

为确定发病兔场兔的死亡病因并对其病原进行鉴定分析,经临床诊断、病理剖检、病毒分离、纯净性检测、血凝性检测、致病性试验、特异性试验、免疫原性试验以及qPCR和测序鉴定,用病死兔病料组织接种健康易感家兔,成功分离到1株兔出血症病毒。分离株病毒不含细菌、霉菌、支原体;对人"O"型红细泡的血凝效价为1∶1024;分离株病毒能够使健康易感兔在96h内全部死亡兔病毒性出血症;兔出血症病毒阳性血清对分离株病毒具有中和作用;用分离株病毒制备的灭活疫苗具有良好的免疫原性;分离株病毒通过qPCR测序鉴定为RHDV毒株。     

一株无血凝性兔病毒性出血症病毒的分离与鉴定

兔病毒性出血症（RHD）俗称兔瘟,是由兔出血症病毒（RHDV）引起的兔的一种急性、烈性、高度接触性、病毒性疫病,我国农业部兽医局将其列为二类动物疫病。该病传播速度快,发病率和死亡率都很高,兔群中一旦有兔感染该病,则迅速蔓延至整个兔群,给兔场带来毁灭性的灾难。     

一株幼兔出血症病毒的分离鉴定

从临床兔病料中分离鉴定出1株兔出血症病毒,HA试验测得该毒株血凝价为1：640,琼脂扩散试验可见分离株与RHDV高免血清形成清晰的沉淀线,电镜观察可见30nm左右的病毒粒子。     

兔病毒性出血症病毒西藏分离株毒力的测定

对一株兔病毒性出血症病毒(RHDV)西藏株进行血凝性、特异性、致病性及毒力鉴定。结果表明:此株RHDV血凝价高达10240以上;RHDV抗血清可特异性抑制该株病毒对人“O”型红细胞的凝集;RHDV的最小致死量为10-5/mL。说明此分离株是一株具有高致病力的RHDV强毒株。     

兔病毒性出血症病毒YT株的分离及生物学特性鉴定

兔病毒性出血症又称兔瘟,是由兔病毒性出血症病毒引起家兔的一种急性、高度接触性传染病,以呼吸系统出血、肝脏坏死、实质脏器水肿、瘀血、出血和高死亡率为特征。本病于1984年春天首次发现于我国江苏省,迅速蔓延至全国,之后世界各地均有发生。本病常呈暴发性流行,发病率及死亡率极高,给世界养兔业带来了巨大危害,是目前规模化兔场的主要传染病之一。     

兔病毒性出血症研究概况

本文对兔病毒性出血症病毒的形态及理化特性、兔病毒性出血症病毒的分子生物学、兔病毒性出血症病毒的诊断、兔病毒性出血症病毒的疫苗等方面进行了简要综述。     

兔病毒性出血症灭活疫苗的研究

以三株本室分离的病毒作为种毒，研制了免病毒性出血症油乳剂灭活疫苗和氢氧化铝灭活疫苗。所研制的两种疫苗无菌及理化检验均合格。将疫苗大剂量接种实验兔无任何不良反应，两种疫苗免疫实验兔后用强毒攻击，均获得保护，免疫持续期至少5个月。     

兔病毒性出血症病毒高免血清的制备与应用效果

以兔病毒性出血症病毒组织灭活疫苗免疫家兔，经五次免疫之后，抗体效价可达12log2以上，采集兔血清，以此治疗攻毒兔，结果大部分兔都存活，临床应用效果表明：以此血清治疗自然感染兔病毒性出血症病毒的发病兔，治愈率达80％以上。     

兔出血症病毒检测方法研究进展

兔出血症发病率和致死率都很高,感染兔通常48~72 h后死亡,有肝坏死和肺出血为典型特征的组织病变,给养兔业带来了巨大的经济损失。近年来,随着对其研究的不断深入,在兔出血症病毒检测与诊断方面取得了很大的进展。文章系统阐述了兔出血症病毒检测的研究进展,提出了存在的问题和展望,为更有效地防治此病提供了方便。     

兔病毒性出血症病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用

为建立一种快速的兔病毒性出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)病原检测方法,本研究根据GenBank上登录的RHDV VP60基因序列,设计合成内外2对引物,优化PCR反应条件,建立了检测RHDV的巢式RT-PCR方法。该方法对兔轮状病毒、仙台病毒、健康兔肝脏组织的扩增结果均为阴性;该方法第1次扩增的敏感性是10 ng,第2次扩增的敏感性是0.1 ng,第2次比第1次扩增的敏感性高100倍。建立的巢式RT-PCR方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速检测出极低含量的RHDV,将为兔病毒性出血症的病原检测及分子流行病学调查等提供一种快速、简单、高效、特异、灵敏的检测方法。     

兔出血症Dot—ELISA双抗体夹心诊断法及其应用的研究

以建立的斑点酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测兔出血症病毒抗原.结果表明,对23只病兔各脏器病毒抗原检测,以肝、脾的检出率为最高.对人工感染兔各脏器检测,肝脏首先出现病毒抗原,其次是脾脏;各脏器病毒抗原含量依次为,肝>脾>肺>肾>心.用该法从人工感染24h后兔的口腔、鼻腔分泌物及粪便中检出了病毒抗原,表明病兔可通过消化道和呼吸道排毒.与血凝试验对比检测兔出血症可疑标本192份,两者符合率为90.6%.     

应用单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验检测兔出血症病毒

应用建立的单克隆抗体夹心酶联兔疫吸附试验（ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ）,检测了人工感染兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）ＤＪＲＫ细胞毒、肝毒的兔以及自然感染ＲＨＤＶ的兔的组织样品。结果表明,感染死亡兔的肝、脾、肾、骨髓样品病毒抗原的检出率为１００％,淋巴结和肌肉的检出率分别为９７．５％和７９．５％。ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ能检出肌肉中血凝试验不能检出的ＲＨＤＶ抗原。此外,还用ＭｃＡｂ－ＥＬＩＳＡ检测了肝毒人工感染兔血中ＲＨＤＶ的动态,并对１０份兔出血症脏器灭活苗的效价作了滴定。     

应用噬菌体展示技术筛选兔出血症病毒抗原模拟表位

以抗兔出血症病毒(RHDV)的单克隆抗体A3c作为靶物质,应用噬菌体展示技术筛选RHDV抗原表位。将纯化的单抗A3c包被固相载体,经3轮亲和筛选后,挑取25株噬菌体单克隆并扩增,用ELISA测定后,提取阳性克隆单链DNA并测序,用阳性噬菌体克隆免疫小鼠制备高免血清,检测筛选抗原表位的免疫原性。结果表明:3轮亲和筛选后,特异性噬菌体克隆得到了有效富集,25株噬菌体单克隆中有19株为阳性克隆;测序结果表明,获得了与抗原高度同源的序列GTDDMDPGTTAA,即抗原的模拟表位,其中,氨基酸基序DXXDP为表位中的核心氨基酸;制备的小鼠高免血清与抗原具有较好的反应性,阳性噬菌体克隆与兔RHDV高免血清也具有较好的反应性。因此,该表位具有良好的免疫原性和反应原性。该研究为RHDV抗原表位的研究和新型疫苗的探索积累了资料。     

玻片凝集试验快速检测兔出血热病毒的研究

本文进行了玻片凝集试验(SHA)快速检测兔出血热病毒的研究。通过对试验因素的优选,认为以样品稀释液pH7.2、试验温度4～22℃、选用人O或B型红细胞和摇动反应5min等条件为佳.另外,通过对比试验(与血凝试验、HA)、阻断试验和病毒样品及兔出血热疫苗的检测,认为本方法是一个特异性强、敏感性高、重复性好和便于推广应用的有效方法。SHA能在5min报告检测结果。     

兔病毒性出血症病毒 VP60蛋白基因研究进展

兔病毒性出血症病毒（RHDV）是引起兔病毒性出血症（RHD）的病原,严重威胁着世界养兔业的健康发展。在RHDV的感染和免疫研究方面,RHDV 的衣壳蛋白VP60作为具有重要免疫原性的主要结构蛋白备受关注,论文对V P60蛋白基因的结构特征、核苷酸变异情况及在诊断方法建立和疫苗预防研究等方面进行了综述,为RHDV防控相关研究提供有用的参考资料。     

兔病毒性出血症基因工程苗研究概况

由于兔病毒性出血症 (RHD)组织灭活苗涉及的成本、生物安全及动物福利等问题 ,国内外学者正致力于 RHD新型疫苗的研制和开发。以 VP60表达为基础的亚单位疫苗经历了最初的原核、真核表达 ,目前正寻求在转基因植物中进行表达 ,以期获得大量、低成本的口服疫苗 ;而以牛痘、金丝雀痘病毒、黏液瘤病毒等作载体的重组活载体苗 ,无疑使 RHD疫苗正在向更安全、实用及对家兔、野兔均有保护作用方向发展 ,具有很大的发展潜力和前景。国外学者在RHD基因工程苗方面研究较为广泛和深入 ,而国内尚未有此方面报道