黄河裸裂尻鱼乳酸脱氢酶同工酶研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术,对黄河裸裂尻鱼的血清、鳃、肝脏、性腺、心脏、鳔、肾脏、眼、脑和肌肉组织的乳酸脱氢酶同工酶(LDH同工酶)进行了研究。试验结果表明,各种组织均表现出明显的组织特异性。黄河裸裂尻鱼是二倍化了的四倍体,可能起源于鲃亚科。     

齐口裂腹鱼染色体核型和同工酶初步研究

对齐口裂腹鱼(Schizothoraxprenanti)的形态特征、染色体核型和同工酶组织特异性进行了观察和分析。结果显示:齐口裂腹鱼形态学可数性状为背鳍Ⅲ-8,腹鳍Ⅰ-9～10,臀鳍Ⅱ～Ⅲ-5,侧线鳞90～109,侧线上鳞17～24,侧线下鳞14～19,鳃耙数为外侧:14～23,内侧:19～31;其染色体数为2n=132,核型为34m+30sm+24st+44t,臂数NF=196。乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶(EST)、醇脱氢酶(ADH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、过氧化物酶(POD)、谷氨酸脱氢酶(GDH)6种同工酶谱在齐口裂腹鱼中有明显的组织特异性。     

白须公与黄颡鱼乳酸脱氢酶比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对红色白须公和黄颡鱼的LDH进行了比较研究。结果表明控制2种鱼LDH酶的位点数相同,为多聚体酶;2种鱼除血清外,肝、肾、肌肉、性腺、眼睛表达的酶谱均不同;组织特异性明显。从遗传学角度为2种鱼的区别提供了可参考的生化指标。     

大鳞鲃鱼同工酶的研究

本实验采用聚丙烯酰胺垂直平板电泳方法,分析了大鳞鲃鱼的肝、肾、眼3种组织中的醋酶（EST）、淀粉酶（AMY）、乳脱酸氢酶（LDH）和苹果酸脱氢酶（MDH）4种同工酶。结果表明各种同工酶具有明显的组织特异性,肝脏酶活性最高,具有所有酶带。     

大鳞鲃鱼同工酶的研究

本实验采用聚丙烯酰胺垂直平板电泳方法,分析了大鳞鲃鱼的肝、肾、眼3种组织中的醋酶（EST）、淀粉酶（AMY）、乳脱酸氢酶（LDH）和苹果酸脱氢酶（MDH）4种同工酶。结果表明各种同工酶具有明显的组织特异性,肝脏酶活性最高,具有所有酶带。     

雅鲁藏布江拉萨裂腹鱼、异齿裂腹鱼及其自然杂交种的形态与COI基因条形码分析

2015年5月,在西藏雅鲁藏布江中游的桑日、朗县段水域开展鱼类调查,发现了1种疑似为拉萨裂腹鱼(Schizothorax waltoni)和异齿裂腹鱼(Schizothorax o’connori)的自然杂交种群体。形态学研究显示,该种的吻、口部、下颌、须等头部上的形态特征居于拉萨裂腹鱼和异齿裂腹鱼之间,并明显区别于双亲,且群体中个体的头部形态稳定一致,均具有典型的中间型特征,个体间没有明显差异。基于线粒体COI基因条形码分析显示,在杂交种群体共15个样本中,有4个与拉萨裂腹鱼为同源,其余11个与异齿裂腹鱼为同源,各自间的亲缘关系很近,即杂交种群体中既有属于拉萨裂腹鱼遗传基因的个体,也有属于异齿裂腹的遗传基因的个体。综合以上研究表明,拉萨裂腹鱼和异齿裂腹鱼在雅鲁藏布江中游的桑日等自然水域中能够自由杂交而产生后代,且两者都可以互为父母本,但以异齿裂腹鱼为母本产生的杂交种在群体中占多数,推测特殊的生态环境可能促使拉萨裂腹鱼和异齿裂腹鱼在自然水域中容易杂交。     

云南裂腹鱼人工繁殖初步研究

对从弥苴河中捕获的性成熟野生亲鱼进行挤卵干法授精 ,受精率 50 %。将受精卵分别在室内静水 (水温 1 1 0～ 1 8 5℃ )和室外流水 (水温 1 2 5～ 1 4 8℃ )条件下孵化 ,孵化 1 99h ,室内的受精卵开始出膜 ,而室外的受精卵大量出膜 ,室内孵化率为 71 1 % ,室外为 79 2 %。用轮虫等作为开口饵料培育鱼苗 ,饲养 40天 ,鱼全长达 2 3 5mm。     

鄱阳湖鳜鱼不同组织中乳酸脱氢酶同工酶的比较研究

采取聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术 ,分析了鄱阳湖鳜鱼心脏肌、骨胳肌和肝脏 3种典型组织中乳酸脱氢酶 (LDH)同工酶。结果表明 :①鳜鱼 3种组织中的LDH同工酶存在明显的组织差异 ,都是由A、B两个基因编码。②在肝脏中没有发现Ldh -c基因编码的LDH同工酶 ,这与鲈形目和鲽形目鱼类的情况相同 ,而与鲤形目和鲇形目鱼类的情况相反 ,据此 ,作者认为Ldh -c基因在肝脏中是否表达可以用来判断鱼类的进化水平。     

新疆两种裂腹鱼形态学和COI基因的比较分析

运用多变量形态度量学方法结合线粒体COI基因序列,比较分析了新疆和田河两支流（喀拉喀什河、玉龙喀什河）塔里木裂腹鱼（Schizothorax biddulphi）和厚唇裂腹鱼（S.irregularis）的遗传差异。对这两种鱼67尾的31个测量指标进行分析,其中5个性状表现出极显著差异（P〈0.01）,6个性状表现出显著差异（P〈0.05）。在主成分散点图中,这两种裂腹鱼个体间存在交叉现象,没有明显界限,二者外部形态差异较小,难以有效区分。分析了627bp的COI基因序列碱基组成,均表现为G碱基含量最低而C碱基含量最高,A＋T含量大于C＋G含量。26尾塔里木裂腹鱼和厚唇裂腹鱼共检测到6种单倍型和5个核苷酸多态位点,其单倍型多样度分别为0.733和0.556,核苷酸多样度分别为0.00158和0.00089,其中417bp处的C/T转换为二者特有。     

昆明裂腹鱼繁殖生物学研究

研究昆明裂腹鱼繁殖生物学周年变化,为开展昆明裂腹鱼人工繁殖、养殖以及对自然水域鱼类资源的增殖和保护提供理论基础。2014年7月-2015年5月,每月定期采集雌、雄昆明裂腹鱼各10尾。样品鱼为2008年子一代,均为6龄。雌鱼体长26~48 cm,体重380~1 600 g;雄鱼体长29~46 cm,体重425~1 250 g。结果显示:昆明裂腹鱼成熟系数雌鱼为(7.07±0.04)%,雄鱼为(3.72±0.01)%;属一次性产卵类型,繁殖期为2-4月,盛期为3-4月;Ⅳ期卵巢卵径1.6~1.8 mm占35%。绝对繁殖力为(9263±5241)粒,与体长呈曲线相关(F=2E-11L7.427,R2=0.912),与体重呈线性相关(F=0.017W-10.19,R2=0.958);相对繁殖力为(9.5±3.9)粒/g,与体长、体重均呈曲线正相关(Fw=0.05e0.156L、R2=0.846,Fw=14.37ln W-90.57、R2=0.871)。     

马氏珠母贝不同组织同工酶的比较

采用聚丙烯酰酰胺凝胶水平平板电泳技术,研究了马氏珠母贝的８种组织７种同工酶的酶谱表型,结果表明：所测组织中未检出α－磷酸甘油脱氢酶（α－ＧＰＤＨ）和醇脱氢酶（ＡＤＨ）,乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）只在肝脏一条微弱谱带,苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）、苹果酸酶（ＭＥ）和超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）部分组织间有显著差异,而酯酶（ＥＳＴ）则具有明显的组织特异性。     

感染桃拉综合症病毒的凡纳滨对虾体内4 种同工酶酶谱的变化

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法,对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）成体的复眼、肝脏、心脏、鳃和肌肉等5种组织中的酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（AKP）、酯酶（EST）和过氧化物酶（POD）4种同工酶进行研究,并将健康虾与感染桃拉综合症病毒（TSV）病虾的同工酶酶谱进行比较。结果表明,这4种同工酶在凡纳滨对虾体内的不同组织均有分布,但在酶活性和条带数量上存在不同程度的组织特异性,其中4种同工酶均在肝脏组织中表达最强,ACP和POD在肌肉中、EST在复眼中表达最弱,AKP在复眼中不表达。感染TSV后,病虾的ACP和AKP均出现酶带数量减少和酶活性降低,如病虾的ACP酶谱在肝脏、心脏和鳃中缺失的酶带数分别为2、1和1条,酶活性也呈现下降;AKP酶谱在肝脏、心脏和肌肉中缺失的酶带数分别为3、4和3条,且酶活性均明显降低;而病虾的EST和POD表达的酶带数和酶活性却均有明显增加,尤其是在肝脏和心脏中,EST分别新增3条和5条酶带,POD各新增1条酶带。总之这4种同工酶的表型在健康虾和病虾之间存在着明显的差异,尤其是在肝脏中的变化最为明显,说明肝脏中这4种同工酶的特异性变化可以作为研究凡纳滨对虾桃拉综合症的生理生化指标。     

奥尼罗非鱼5种组织中4种同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶垂直梯度凝胶电泳法对奥尼罗非鱼肾脏、肝脏、眼睛、肌肉和心脏等5种组织的酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、超氧化物歧化酶(SOD)进行了初步研究,并分析了这4种酶的同工酶位点及酶谱表型。结果表明:奥尼罗非鱼的4种同工酶系统具有明显的组织特异性;EST由7个基因位点编码;LDH酶带多于大多数硬骨鱼典型的5条酶带;MDH和SOD都具有线粒体型和上清液型2种类型。     

Lactate dehydrogenase isozymes in the trunk and cardiac muscles of an antarctic teleost fish,Notothenia neglecta Nybelin

The distribution and kinetics of lactate dehydrogenase (LDH) isozymes in the red and white trunk muscles, and cardiac muscle of an antarctic teleost fish (Notothenia neglecta Nybelin) have been studied. Pyruvate inhibition of LDH in all three muscle types is very low, being less than 50% even at a concentration of 60mM pyruvate. Activity versus pyruvate concentration profiles are not significantly different for LDH in all three muscle types. The Michaelis constant (Km) for pyruvate was not significantly different for all three LDH's. Raising the assay temperature caused an increase in Km of similar form in all three muscle types, while Km was lowest at the lowest assay temperature (–1°C). When samples were run on a polyacrylamide gel, the bands stained specifically for LDH activity appeared at identical positions as those of the H2M2 band of the standards.It would appear therefore that the LDH isozyme found in the red and white trunk muscle ofN. neglecta is identical to that in cardiac muscle. This fact is discussed in relation to the physiological ecology of antaretic fishes, and the metabolic constraints imposed by their habitat, including their apparent low capacity for utilising glycolytic fuels.     

新疆叶尔羌河流域4种裂腹鱼多变量形态学对比分析

为明确叶尔羌河流域4种裂腹鱼的表型差异,实验整合传统形态学和框架分析法2个数据体系,利用多变量形态学统计分析法对叶尔羌河流域裂腹鱼类(4种,494尾,48组参数)开展分析。单因子方差分析结果显示,9个参数同时在4种裂腹鱼中存在显著差异,差异主要位于头部、前躯干部和后躯干部;主成分分析结果显示,重唇裂腹鱼与厚唇裂腹鱼形态数据在PC1轴上差异显著,主要反映头部特征;而框架数据结果显示,塔里木裂腹鱼和宽口裂腹鱼在第一主成分上差异较大,主要体现在后躯干部;2个数据体系逐步判别分析分别选取8个和6个主要参数建立判别公式,初始判别成功率分别为85.7%和75.7%,散点图组质心分离,样品重叠少;聚类分析结果显示,2个数据体系均分为2个分支,其中重唇裂腹鱼单独成一支,塔里木裂腹鱼与厚唇裂腹鱼在形态上距离较近,与宽口裂腹鱼次之。研究表明,2个数据体系中,形态数据表现较优于框架数据;叶尔羌河流域4种裂腹鱼外部形态存在显著差异,利用多元统计方法可以较好区分,但仍存在一定的重叠。     

银鲳不同组织中4种同工酶的表达差异

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了银鲳(Pampus argenteus)脾脏、肝脏、肌肉、心脏、肾脏等5种组织中酯酶(EST)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)、乙醇脱氢酶(ADH)等4种同工酶的表达模式,并对各种同工酶的酶谱进行了分析。结果表明:这4种同工酶在银鲳5种组织中的分布均存在一定的组织特异性,其与各组织的生理机能密切相关。银鲳4种同工酶共记录出61条酶带,其中EST被检测出的酶带数量最多也较复杂,ADH同工酶酶带数量最少,只有6条酶带被检测到,LDH和GDH分别检测到16条和9条酶带;组织特异性主要表现在位点表达和酶活性强弱不同这两个方面,GDH1和ADH2只在肝脏中表达。     

点带石斑鱼不同组织同工酶的研究

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法对点带石斑鱼7种组织（眼睛、肌肉、心脏、肝脏、肾脏、尾鳍、脾脏）的4种同工酶（EST、SOD、LDH、MDH）进行了初步研究,并对4种同工酶的同工酶位点及其酶谱表型进行了分析。结果表明,点带石斑鱼的4种同工酶都具有不同程度的组织特异性：EST由4个基因位点编码,具有多态现象;肌肉SOD与其它组织SOD的差异最明显;眼睛LDH与其他组织LDH的差异最明显;MDH具有线粒体型（m-MDH）和上清液型（s-MDH）两种类型。     

Distribution and properties of lactate dehydrogenase isoenzymes in red and white muscle of freshwater fish

The distribution and kinetics of LDH isoenzymes in red and white muscles of 5 species of salmonids, 4 species of cyprinids and one coregonid species were studied. In all species the white muscles are characterized by the occurrence of only the most cathodic isoenzymes, or groups of isoenzymes. The red muscles contained either the full set of isoenzymes (cyprinids) or a selection in which the anodic forms dominated (salmonids, coregonid). The most striking difference between the two types of muscle was met inCoregonus sp. The temperature profiles of pyruvate affinity are similar in all species of fish studied. On the other hand, K_m(pyr) values and degree of pyruvate inhibition are closely related and vary greatly with temperature, with the taxonomic position (and thus biology) of the species, and with electrophoresic mobility of the isoenzyme. Highest affinity and strongest inhibition occurred in the anodic (H₄) isoenzymes of cyprinids at low temperature; lowest affinity and zero inhibition in the cathodic isoenzymes (M₄ M₄) of salmonids and coregonids at high temperature. In salmonids the more recently duplicated loci of the M-group of isoenzymes possess identical K_m values at all temperatures, whereas the two older M and H loci differ greatly in this respect. Thus the more recent duplication of LDH loci in salmonids and coregonids may be seen as a mechanism by which the tetramers required for LDH activity can be constructed from more closely related subunits than are provided by the older M and H loci.Some problems in connection with the determination of the kinetic constants of the lactate oxidase reaction are discussed and it is suggested that an alkaline, pyruvate trapping system provides conditions which are more realistic than those of other assay systems. The K_m(lactate) values found are in the biological range and, at 20°C, provide further circumstantial evidence that the red muscles of fish should be capable of oxidizing the lactate produced by the white muscles during strenuous exercise. At 4°C the K_m(lactate) values are abnormally high in all muscle preparations and thus are not correlated with the K_m(pyruvate) values which are lowest at this temperature.