转基因定量检测结果测量不确定度的自上而下评定方法研究及应用

【目的】定量检测标准体系是实施转基因定量标识的基础，而不确定度评定是定量检测标准体系的重要组成部分。急需建立适合一般实验室采用的标准化转基因定量检测结果不确定度的自上而下评定方法，以便检测实验室自行评定定量检测结果的测量不确定度。【方法】测量方法精密度不确定度评定有2种方法，一种是根据“不确定度函数”的一般概念，利用15个不同浓度的常规样品，建立测量方法精密度引入的不确定度评定公式；另一种是重复测量有证标准物质，根据检测数据的中间精密度，计算方法精密度引入的不确定度。用有证标准物质或实验室配制样品作阳性定量质控品进行偏倚不确定度评定，实验室配制样品标称值的不确定度由实验室根据制备过程采用简易程序自行评定。将测量方法精密度引入的不确定度和测量过程的偏倚不确定度合成，评定试样定量结果的标准不确定度，然后乘以包含因子k，获得扩展不确定度。【结果】以转基因玉米DBN9936定量检测方法为例，分别用模拟的DBN9936常规样品和有证基体标准物质（GBW(E)100901）评定测量方法精密度引入的不确定度，分别为0.76%和0.33%，与常规样品相比，用有证标准物质评定的测量方法精密度不确定度显著...     

原子荧光法测定总砷含量不确定度评定

以圆白菜标准物质为材料，评估原子荧光法测定总砷含量的不确定度。根据不确定度分量大小可以得出，砷测定值的不确定度主要来源于测定过程中校准曲线的不确定度。该方法测定总砷含量的扩展不确定度为0.0098 mg/kg，检测结果为(0.066±0.010) mg/kg，在标准物质含量(0.062±0.014) mg/kg的范围内，表明方法的分析过程处于质控状态，结果可靠。     

高效液相色谱法检测饮料中阿斯巴甜的含量的不确定度评估(摘要)(英文)

[目的]评估高效液相色谱法检测饮料中阿斯巴甜含量的不确定度。[方法]用高效液相色谱法测定饮料中阿斯巴甜的含量,对整个测量过程的不确定度来源进行分析,并对不确定度各分量进行了评估和合成。[结果]用GB/T22254-2008《食品中阿斯巴甜的测定》方法重复6次测定饮料中阿斯巴甜平均含量为(0.806±0.038)g/kg,k=2。影响过程不确定度的主要来源为样品称量过程、样品定容体积所引入标准溶液的配制过程、拟合标准曲线所引入的不确定度。①标准工作液的不确定度。标准工作液的合成不确定度为0.013 9,包括标准样品纯度引入的不确定度0.005 8、标准物质称量引入的标准不确定度1.49×10-4、阿斯巴甜标准储备液配制过程中玻璃器具校准产生的相对不确定度0.007 88、标准工作溶液配制过程中玻璃器具校准产生的不确定度0.009 9。②样品试样制备过程引入的不确定度。包括样品称量过程的相对标准不确定度0.009和样品定容过程引入的不确定度0.000 78。③标准曲线拟合过程不确定度。曲线拟合的相对不确定度为0.002 46。阿斯巴甜测定结果的不确定度为0.017 0,合成总的相对标准不确定度为0.023 9,扩展标准不确定度为0.019。[结论]标准溶液、标准曲线和重复性的不确定度分量是不确定度的主要来源,待测样品的称量和定容的不确定度分量占的比例不大。     

液质联用法测定苹果中氧化乐果残留的不确定度评定

本文采用液相色谱质谱联用法,测定苹果中氧化乐果残留含量。对测量不确定度,建立了数学模型,分析引入因素、计算合成,进行不确定度评估。结果表明:标准物质配制、回收率和提取净化的定容等是不确定度的主要来源,也是质量控制的关键。当苹果中氧化乐果残留含量为0.018 3 mg/kg时,扩展不确定度为0.001 0 mg/kg(k=2)。     

液相色谱串联质谱法测定乳制品中双酚A和壬基酚

研究利用液相色谱-串联质谱法(LC-ESI-MS/MS)快速准确测定乳制品中双酚A和壬基酚。通过一系列试验对样品前处理进行了优化研究,样品经乙酸乙酯∶环己烷(1∶1,体积比)提取净化后,采用HPLC-ESI-MS/MS检测分析,在多反应监测模式(MRM)下,采用内标法定量。方法的检出限为1μg/kg,在1~200μg/kg范围内线性关系良好(相关系数r>0.99),平均添加回收率为75%~85%,该方法简便、高效、准确,各项技术指标均满足国内外有关双酚A和壬基酚检测要求,可用于乳制品中双酚A和壬基酚的分析测定。     

超高效液相色谱-串联质谱同时测定盐碱胁迫金银花中3种内源激素

建立同时测定金银花中水杨酸(SA)、脱落酸(ABA)和茉莉酸(JA)的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,并应用于盐碱胁迫下的金银花分析。激素经异丙醇/甲酸溶液(99/1,体积分数)提取后,通过固相萃取(SPE)柱净化。色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse Plus C_(18)柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为0.1%甲酸溶液-乙腈;体积流量为0.4 mL/min;进样量为3μL;质谱采用电喷雾离子源负离子模式(ESI~-),多反应监测(MRM)进行测定。3种内源激素具有良好的线性关系(R~2≥0.998),最低定量限均为0.5μg/L,稳定性良好,提取回收率在81.5%～93.8%之间,精密度的RSD值为2.7%～7.9%之间,该法快速可靠,可适用于其他植物中SA、ABA和JA的含量检测。利用该方法测定盐碱胁迫下金银花中的3种内源激素,比较分析它们在盐碱胁迫下的含量变化规律,为内源激素对植物的逆境调控机制提供研究基础。     

SPE-GC/MS法同时测定蔬菜中克百威和三羟基克百威残留

采用乙腈提取,经石墨化碳黑氨基复合柱净化,GC/MS测定,采用内标法定量,建立了蔬菜中克百威和三羟基克百威残留的SPE-GC/MS同时测定方法。克百威的添加质量分数为0.16、0.4、1.0mg/kg,方法平均回收率为94.3%、99.1%、97.7%,变异系数在5.0%、4.7%、5.1%,检出限0.0016mg/kg;三羟基克百威添加质量数为0.16、0.4、1.0mg/kg,方法平均回收率为96.3%、100.1%、95.9%,变异系数4.0%、4.2%、8.7%,检出限0.0012mg/kg。     

草鱼体内氯氰菊酯残留GC-ECD测定

运用GC-ECD法测定草鱼肌肉组织中氯氰菊酯农药的残留量。采用内标法,对草鱼体内农药残留采用石油醚提取,提取溶液干净,通过弗罗里硅土层析柱净化,GC-ECD测定。结果表明：草鱼肌肉组织中氯氰菊酯的添加回收率为98.32%-101.57%;RSD为2.3～3.1;最小检出限为0.001mg/kg。此方法具有选择性强,操作简单,分离效果好,回收率和灵敏度高等特点。     

GC-MS内标法测定苹果中哒螨灵残留量不确定度的评定

介绍了气相色谱-质谱内标法测定苹果中哒螨灵残留量不确定度的方法,建立了不确定度评定的数学模型,分析了不确定度的来源,并对不确定度分量进行量化和合成。评定结果表明,标准曲线拟合、标准溶液配制和量取体积所产生的不确定度分量较大;苹果中哒螨灵含量为0.0900mg/kg时,其扩展不确定度为0.0044mg/kg(k=2)。     

同位素内标液质联用法测定动物源食品中的氯丙嗪残留量

建立测定动物源食品中氯丙嗪(Chlorpromazine)残留量的液相色谱串联质谱同位素内标方法。样品用乙腈和水(80/20)超声波提取后,用Waters Oasis PRi ME HLB小柱净化,Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱分离。以乙腈和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,用电喷雾正离子(ESI+)多反应监测、基质校准同位素内标法进行定量分析。方法在0.1~20μg/L范围内具有良好线性,相关系数r=0.998。样品在低、中、高3个浓度水平下的平均回收率为89.1%~93.5%,相对标准偏差(RSD)为2.5%~4.8%。检出限(S/N=3)为0.1μg/kg,定量下限(S/N=10)为0.3μg/kg。     

UPLC-MS/MS法测定动物源性食品中16种非甾体消炎药残留量

[目的]建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)定量检测动物源性食品中16种非甾体消炎类兽药残留量的方法.[方法]样品用甲酸-水-乙腈混合溶液提取,净化后经C18色谱柱分离,UPLC-MS/MS法测定.[结果]样品由基质匹配标准曲线进行定量,所检测的16种非甾体消炎药在1～200 ng/g线性关系良好(R2>0.995).分别添加1倍定量限、2倍定量限和10倍定量限3个水平的混合标准溶液进行回收率试验,各个浓度水平加标回收率在70％～105％,相对标准偏差(RSD)均在15％以下(n=6).[结论]该方法简便、稳定、准确,具有良好的重现性,适用于测定动物源性食品中16种非甾体消炎类兽药残留量.     

GC-MS/MS测定葡萄中高效氯氟氰菊酯

以GC-MS/MS测定葡萄中高效氯氟氰菊酯,乙腈提取样品后,采用QuEChERS盐析,氮吹至近干,正己烷涡旋溶解后经GC-MS/MS法检测。结果表明,高效氯氟氰菊酯在0～800 ng/mL浓度范围(样品含量0～1.0μg/g)内,线性关系良好,相关系数(r)0.995 0,高效氯氟氰菊酯的检出限为2.43 ng/g,回收率为87.3%～93.8%,同时选择QuEChERS Fatty sample净化包,氮吹后溶液体积为0.1 mL时,回收率达95.62%。     

原子吸收分光光谱法测定肉类罐头中锌的不确定度评定

介绍原子吸收光谱法测定肉类罐头中锌的不确定度的评定方法,为建立有效的质量控制方法提供科学依据。通过评定样品消解液的定容体积产生的标准不确定u(V),样品溶液中锌浓度产生的标准不确定度u(C),合成标准不确定度u(x)和扩展不确定度,最后合成整体。原子吸收分光光谱法测定肉类罐头中锌的不确定度为1.0 mg/kg(包含因子k=2)。通过对各不确定度分量的量化分析可以看出,拟合直线求溶液浓度是该方法不确定度的主要来源,其他不确定度分量相对很小,可以忽略。     

QuEChERS-HPLC-MS/MS测定猪肉猪肝中苯乙醇胺A

建立了猪肉、猪肝中苯乙醇胺A的QuEChERS结合高效液相色谱-串联质谱的检测方法。匀浆后的样品用乙腈提取后,上清液用正己烷除脂,加入无水硫酸钠除水,N-丙基乙二胺（PSA）吸附剂分散固相萃取净化后,以高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）进行定性和定量分析。采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7 μm),以甲醇-0.1%(v/v) 甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,串联质谱在多反应监测（MRM）正离子(ESI+)模式下进行检测,以苯乙醇胺A-D3为同位素内标进行定量。结果表明,苯乙醇胺A在0.1～40 μg/kg的浓度范围内,猪肉、猪肝的基质匹配标准曲线线性关系良好,定量限为0.1 μg/kg,检出限为0.05 μg/kg。     

湿法消解-原子吸收光谱法测定玉米粉中铜·锌含量的不确定度

[目的]评定原子吸收光谱法测定玉米粉中铜、锌含量的测量不确定度.[方法]结合检验实际工作,对原子吸收光谱法测定玉米粉中铜、锌含量的测量不确定度进行评价,建立数学模型,分析该试验过程中测量不确定度来源,对样品检测过程中的样品称量、标准物质溶液转移、稀释定容、曲线拟合以及仪器测量重复性等影响不确定度的分量进行了分析.[结果]试验得出,在合成标准不确定度的各个分量中,标准曲线拟合和重复性试验引入的不确定度是对其影响最大的2个分量,必须严格控制好标准曲线校准和样品的重复测定过程.最终计算出玉米粉中铜、锌含量的扩展不确定度分别为(1.38±0.08) mg/kg、(10.20±1.20) mg/kg,取包含因子k=2.[结论]研究可为系统分析检测结果的准确程度和方法的可靠性研究提供参考.     

QuEChERS-液质联用法测定水果蔬菜中氯吡脲残留

[目的]采用快速提取-高效液相色谱-串联质谱法(Qu ECh ERS-HPLC-MS/MS)建立水果蔬菜中氯吡脲残留的检测方法。[方法]样品经含0.1%乙酸的乙腈溶液提取,经Qu ECh ERS法净化后采用HPLC-MS/MS法测定其氯吡脲残留量。[结果]该方法下氯吡脲在水果蔬菜中的检出限(LOD)为1.0μg/kg,定量限(LOQ)为5.0μg/kg。在2.0~100.0μg/L范围内线性关系良好(R~20.999)。在10.0~500.0μg/kg的添加水平上,方法的平均回收率介于72.0%~115.0%,方法的相对标准偏差为1.5%~9.8%。[结论]该方法适用于水果蔬菜中氯吡脲的测定。     

QuEChERS-HILIC-MS/MS法快速测定蔬菜中3种强极性植物生长延缓剂

为了完善植物生长延缓剂残留检测技术,建立了快速测定蔬菜中3种强极性植物生长延缓剂(矮壮素、缩节胺和丁酰肼)的QuEChERS-HILIC-MS/MS方法。考察了不同提取剂对蔬菜中这3种植物生长延缓剂的提取效果以及不同吸附剂的净化效果,并以提取后添加法评估了黄瓜、番茄、萝卜、白菜及四季豆中各化合物的基质效应。样品经QuEChERS方法净化后,采用BEHHILIC色谱柱为分析柱,乙腈和10mmol/L乙酸铵水溶液作流动相进行梯度洗脱。质谱分析采用电喷雾正离子电离,多反应监测模式,以基质匹配标准曲线外标法定量。3种植物生长延缓剂在各自浓度范围内线性良好,回收率在80.5%~109.0%之间,相对标准偏差(RSD)在1.1%~8.6%之间。方法操作简便、快速、灵敏度和准确性较好,可满足蔬菜中植物生长延缓剂残留量快速测定的需要。     

大米粉中马拉硫磷测定结果不确定度评定

[目的]对大米粉中马拉硫磷的测定结果不确定度进行评定.[方法]根据JJF1059-2012《测量不确定度评定与表示》技术规范要求,建立数学模型,分析了大米粉中马拉硫磷测定结果不确定度评定的主要来源,对各个不确定度分量进行评估和计算合成.[结果]试验表明,影响测量结果的主要因素为回收率(偏差)、标准物质C、气相色谱(GC)响应值I、I0引入的不确定度;而试样质量、定容体积引入的相对标准不确定度相对较小.测得合成不确定度为0.016 mg/kg,扩展不确定度为0.032 mg/kg (95％,k=2).[结论]研究可为今后提高检验数据的可靠性和一致性提供参考.     

QuEChERS-液质联用法测定水果蔬菜中氯吡脲残留（英文）

[目的]采用快速提取-高效液相色谱-串联质谱法(Qu ECh ERS-HPLC-MS/MS)建立水果蔬菜中氯吡脲残留的检测方法。[方法]样品经含0.1%乙酸的乙腈溶液提取,经Qu EChERS法净化后采用H PLC-MS/MS法测定其氯吡脲残留量。[结果]该方法下氯吡脲在水果蔬菜中的检出限(LOD)为1.0μg/kg,定量限(LOQ)为5.0μg/kg。在2.0~100.0μg/L范围内线性关系良好(R20.999)。在10.0~500.0μg/kg的添加水平上,方法的平均回收率介于72.0%~115.0%,方法的相对标准偏差为1.5%~9.8%。[结论 ]该方法适用于水果蔬菜中氯吡脲的测定。     

高效液相色谱法测定黑枸杞中花青素的不确定度评定

对高效液相色谱法测定黑枸杞中花青素进行不确定度影响因素的分析,为提高花青素检测的准确性提供依据。构建黑枸杞中花青素的不确定度评定数学模型,逐层对不确定度来源进行分析和评定,并对各不确定度分量加以量化和合成。结果表明,测量过程随机效应、标准物质纯度、标准曲线拟合和标准系列工作液的配制所引入的不确定度比较大。分别用标准不确定度和扩展不确定度表示黑枸杞中花青素含量,当黑枸杞中花青素含量介于21.40～2 745.00 mg/kg时,其标准不确定度介于0.87～163.76 mg/kg,扩展不确定度介于1.75～327.52 mg/kg(k=2)。