无角陶赛特羊细管冻精质量检查初报

羊冻精的质量是影响羊群冷配受胎率的关键因素,对羊人工输精的效果和羊冷配技术推广有重要影响.我们在实施良种肉羊细管冻精研制项目中,按照国家技术监督局发布的<山羊冷冻精液质量检测方法>(GB20557-2006)对采用我们制定的细管冻精生产工艺流程生产的无角陶赛特羊细管冻精进行了冻精质量检测,测定了冻精解冻后精子的活力、前进运动精子数、畸形率、顶体完整率、每剂量细菌数、精子存活时间,测定结果表明无角陶赛特羊细管冻精质量指标均达到国家标准.     

不同剂型及稀释精液平衡时间对藏獒冻精品质的影响研究

为了探讨每剂含不同前进运动精子数(≥1 000万个和≥2 000万个)和稀释精液不同平衡时间(1 h、2 h、3.5 h)对藏獒冻精品质的影响,试验比较了0.25 m L细管剂型藏獒冻精解冻后精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率、精子37℃存活时间。结果表明:每剂含前进精子数≥2 000万个与≥1 000万个相比,藏獒冻精解冻精子活力、精子顶体完整率、精子畸形率差异不显著(P0.05);而每剂含前进运动精子≥2 000万个组的藏獒冻精解冻后37℃存活时间优于每剂含前进运动精子数≥1 000万个组,且差异显著(P0.05)。藏獒稀释精液平衡2 h组的冻精活力显著高于平衡1 h组和3.5 h组(P0.05),而平衡1 h组和3.5 h组间差异不显著(P0.05)。冻精顶体完整率以平衡2 h组最高,为(41.00±1.47)%,与平衡3.5 h组间存在显著差异(P0.05)。平衡2 h组的冻精畸形率低于平衡1 h组和3.5 h组。说明藏獒0.25 m L细管剂型以每剂含前进运动精子数≥2 000万个,稀释精液平衡时间以2 h为宜,可获得较好的冷冻效果。     

青海牦牛和藏羊冷冻精液顶体完整率研究

为了研究牦牛、藏羊离体精子遭受低温打击和冷冻伤害差异,试验对牦牛、藏羊的鲜精采用最佳的冷冻程序进行细管冻精,比较其鲜精及冻后精子顶体完整率差异,并分析冻后精子顶体完整率降低的原因。结果表明:牦牛的冻精顶体完整率显著低于藏羊的(P0.05)。牦牛精子冷冻后,精子顶体完整率为53.92%,较鲜精精子顶体完整率降低30.90个百分点;藏羊精子冷冻后,精子顶体完整率为84.93%,较鲜精精子顶体完整率降低8.53个百分点。牦牛离体精子抗低温打击和冷冻伤害能力显著低于藏羊。     

不同品种纯种肉用绵羊精液品质比较

选取饲养管理水平、年龄、采精频率、季节等条件一致的无角陶赛特羊、萨福克羊、夏洛莱羊、特克塞尔羊4个品种种公羊,采取相应精液进行品质比较。结果表明,所选种公羊的采精量、精子密度、鲜精活率、畸形率、顶体完整率都有差异,但采精量、鲜精活率、畸形率3个指标之间均差异不显著(P>0.05),而密度与顶体完整率两个指标间差异显著(P<0.05)。4个品种中萨福克种公羊的精子密度最高,其次为特克塞尔种公羊和夏洛莱种公羊,最低的为无角陶赛特种公羊。4个品种中无角陶赛特种公羊的精子顶体完整率最高,其次为特克塞尔种公羊和萨福克种公羊,最低的为夏洛莱种公羊。     

提高肉牛受胎率的技术措施

(一)选择冻精在选择购买冻精时,除随机抽取一定冻精进行品质检查(包括精子活力、密度、顶体的完整率等指标),还需注意根据本地母牛的品种结构,选择与之受胎率高,生产综合性能好的冻精品种.     

奶牛性控冷冻精液品质和转染外源DNA的特点

本研究分析了奶牛性控冻精与普通冻精解冻后精液品质和转染外源DNA的特点。奶牛性控冻精与普通冻精解冻后,分别检测精液品质和精子超微结构,并与地高辛标记的线性化pEGFP-N1质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率。结果表明:性控冻精与普通冻精相比,有效精子数少(P0.01),精子活力、顶体完整率差(P0.05);2组精子超微结构都出现一定程度的顶体破裂、脱落等形态变化;2组精子都具有自动结合和转运外源DNA的能力,性控冻精转染率极显著高于普通冻精(P0.01),分别为(11.34%±2.41%)和(7.30%±2.14%)。     

犬冷冻精液技术的试验研究初报

介绍了犬微型细管(0.25 mL)冻精制作方法,优选出冷冻稀释液及稀释操作程序。制作结果:冷冻精液解冻活力达0.405±0.058,精子顶体完整率为(43.58±6.73)%,复苏率达54.6%。精子畸形率为(13.80±4.26)%;不同品种公犬鲜精和冻精品质差异不大,但个体差异显著,有的耐冻性很差;不同初始冷冻温度下,解冻效果各异,以-111~-130℃冷冻效果较好;冷冻时间10~15 min为好;稀释方法还待进一步探讨。     

波尔山羊除精浆冷冻精液的试验研究

以波尔山羊精液为试验材料,通过二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000 r/min离心处理,制作细管冻精,并进行活力、顶体完整率、存活时间以及超微结构的观察分析.结果表明,经离心处理的冻精精子活率显著优于对照组(P<0.05),精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),精子存活时间处理间差异不显著,除精浆可使精子所受冷冻损伤大为减轻,显著提高冻后精子品质.     

不同解冻方法对猪冷冻精液品质的影响

为优化猪冷冻精液解冻方法、提高精液利用效率,试验采用两种不同的解冻方法解冻0.5 mL猪细管冷冻精液,一种在38℃水浴直接解冻30 s(1组),另一种在50℃水浴解冻16 s后再放到30℃水浴中静置40 s(2组)。对解冻后的精液分别进行精子活力、生存时间、顶体完整率的测定和顶体形态观察。结果表明：2组解冻精液的精子活力、顶体完整率极显著高于1组(P<0.01),但两组的生存时间差异不显著(P>0.05);精子顶体形态学观察发现,两组冻精的精子顶体膨胀、缺损情况都较严重。说明与38℃慢速解冻冷冻精液相比,50℃快速解冻的猪细管冷冻精液的精子活力好而且顶体完整率高。     

用于细管冻精生产的陶赛特种公羊选定程序

探讨了用于细管冻精生产陶赛特种公羊的选定程序,使陶赛特羊的细管冻精质量在源头上得到了保证。     

稀释方法、孵育温度和时间对冷冻—解冻后猪精液质量的影响

试验以精子冻后活率、质膜完整率和顶体完整率三项指标评价了一步稀释法(Ⅰ组)和两步稀释法(Ⅱ组),以及不同保存温度和时间对解冻、稀释后的猪精液质量的影响。结果表明,采用两步稀释法对解冻后的猪细管冻精进行稀释,精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别达到82.6%、89.4%和90.3%,极显著高于一步稀释法(P0.01)。用两步法稀释后的精液36℃保存5 min、10 min和15 min时精子活率分别为81.2%、80.8%和80.9%(P0.05),40 min时为50.1%;精子质膜完整率和顶体完整率未见显著下降(P0.05);17℃保存15 h时精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别为81.1%、88.9%和91.4%(P0.05);60 h时分别为50.4%、61.4%和61.6%,均极显著低于初始的各项指标(P0.01)。     

多浪羊细管冷冻精液制作技术的研究

为保存和利用优秀地方品种多浪羊的遗传资源,试验在多浪羊原产地进行了细管冻精制作试验.用采集的多浪羊种公羊精液,比较5种冻精保存液配方的细管冻精冷冻效果,测定解冻后精子活力.结果表明:4.83%乳糖保存液解冻后精液的活率平均为36% ,优于其它4种保存液,且差异极显著(P<0.01),解冻后精子的畸形率也均低于其它4种稀释液,差异极显著(P<0.01).表明4.83%的乳糖保存液配方是理想的绵羊细管冻精稀释液.     

牛精子冷冻前后的形态学对比试验

精子畸形率和顶体完整率是牛冷冻精液国家标准所规定的必须检查的两项指标,标准(GB4143-84)规定:鲜精的畸形率不得高于15%、冻精的畸形率不得高于20%、冻精的顶体完整率不得低于40%.精子畸形率和顶体完整率的测定不仅是衡量精液品质优劣的两项重要指标,同时也是影响受胎率的主要因素.本文通过研究牛精子在冷冻前后的形态学上的差异,从而找出引起此种形态变化的因素,以便在冻精生产过程中更好地控制这两项指标,达到提高冻精品质的目的.     

湖羊精液冷冻对受胎率的影响

本试验利用前期筛选的湖羊精液冷冻稀释液及冷冻保护剂制作湖羊冻精,对比冻精和鲜精的精子活力和顶体完整率。同时,对40头初产母羊和40头经产母羊进行同期发情处理,然后分组进行鲜精和冻精输精试验,跟踪受胎率。结果表明,冻精的活力和顶体完整率分别为0.396和49.2%,显著低于鲜精;初产母羊和经产母羊的冻精受胎率分别为41.7%和33.3%,也显著低于鲜精。说明湖羊精液冷冻对湖羊精子质量和母羊受胎率都存在显著影响。     

不同保护剂对藏羊冷冻精液品质影响的研究

本实验研究了不同保护剂对藏羊细管冷冻精液的品质影响。结果表明:含T ris的柠檬酸盐缓冲液可以提高冷冻-解冻后的精子活率(0.41±3.23)和精子顶体完整率(74.45±1.45),以等体积乙二醇替代甘油作防冻剂制作的细管冷冻精液,解冻后的精子活率(0.41±2.87)和顶体完整率(81.23±1.45)。稀释液中添加维生素B12对提高冷冻后精子活率(0.44±3.26)与保护顶体完整率(83.33±1.93)具有良好的作用。     

冷冻稀释液中添加大豆卵磷脂对梅花鹿冻融精子质量的影响

【目的】探究在冷冻稀释液中添加大豆卵磷脂代替10%卵黄对梅花鹿精液冷冻保存效果的影响,为梅花鹿人工授精体系的完善提供参考。【方法】采用电刺激法采集梅花鹿精液,以精液冷冻稀释液中分别添加1%、2%、3%、4%和5%大豆卵磷脂代替10%卵黄作为试验组,添加20%卵黄作为对照组,分别进行各组精液冷冻保存。5 d后,进行精液解冻,检测解冻后各组精子的活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性、存活时间,筛选合适浓度的大豆卵磷脂。选取4～5岁健康雌性梅花鹿,肌肉注射300 IU孕马血清促性腺激素(PMSG)和0.4 mg氯前列醇钠进行同期发情处理,发情后第20 h用20%卵黄组与筛选出的大豆卵磷脂组冻精进行人工输精,输精后30 d使用B超检测仪检测妊娠情况,统计妊娠率。【结果】与对照组相比,1%大豆卵磷脂组冻融后的精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率及线粒体活性均显著提高(P<0.05);随着稀释液中大豆卵磷脂浓度的增加,其冻融后精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率以及线粒体活性呈下降趋势,精子存活时间也随浓度的增加而减少。1%大豆卵磷...     

二甲基甲酰胺对猪精液冷冻保存效果的影响

用二甲基甲酰胺(DMF)完全替代甘油,比较不同平衡时间和不同DMF添加量对猪精液冷冻保护效果的影响。结果表明,DMF能完全替代甘油,获得较好的冷冻保护效果。最佳平衡时间为90 min,解冻后精子活力为(44.57±0.72)%,显著高于对照组和其他组(P0.05)。当DMF添加量为5%时,冻后精子活力、活率、线粒体活性、顶体完整率和质膜完整率分别为(49.91±0.39)%(、46.51±0.26)%、(47.51±0.52)%(、49.84±0.56)%、(46.30±1.61)%,均显著高于2%、3%、6%DMF添加组(P0.05),但与4%DMF添加组相比,冻后精子活力、活率和质膜完整率差异不显著(P0.05)。本试验结果表明,DMF最适添加量为5%。     

提高母羊冻配受胎率的技术

1 选购品质优良的肉羊冻精 冻精的品质优劣,是决定母羊冻配受胎率高低的最基本条件. (1)必须挑选原精子活力0.7以上,并且是耐冻性强的优良种公羊的精液. (2)种公羊要有良好的饲养管理条件,并采精适度. (3)要选择最佳的稀释液配方,并严格按照操作规程制作细管冻精,使每份冻精中的有效精子数不少于3 000万个.     

奶山羊XY精子分离及低剂量输精效果研究

用假阴道法采集6只西农萨能羊种公羊精液,经过7h运输,利用流式细胞仪进行XY精子分离、冷冻.对16只阴道硅胶栓+孕马血清同期发情处理的母羊,撤栓后58～66 h采用腹腔内窥镜子宫角低剂量输入106个有效Y精子,与用同一头种公羊人工授精配种的10只母羊进行对照.结果表明:1份(11号公羊)精液能够达到60%活率,X精子分离速度(4 200 sperm/sec)不同于Y精子分离速度(4 500 sperm/sec),共获得66管冻精(X31管,Y35管),X、Y型冻精活率分别为0.45±0.04和0.43±0.03;2 h存活指数均为0.05;顶体完整率分别为(70.1±10.1)%和(68.9±6.8)%;每管有效精子数为104.85万±6.11万和103.20万±8.31万;性别比分别为94.36%和96.19%.腹腔内窥镜低剂量冻精输精试验中,试验组出生率为25%,而对照组为90%;试验组4只羔羊全部为雄性;试验组和对照组母羊妊娠期、羔羊出生重等差异不显著.因此,利用流式细胞分选和冷冻技术可以获得高纯度奶山羊冷冻X和Y精子,并通过腹腔镜低剂量输精能够获得健康后代.     

液氮蒸汽熏蒸时间对犬精子冷冻效果的影响

本试验研究了0.5 m L细管冷冻保存犬精液过程中液氮熏蒸时间对精子冷冻效果的影响。试验分为5组,将精液细管置于液氮液面上方2 cm处,分别熏蒸0 min(直接投入液氮)、1 min、2 min、4 min、8 min。解冻后通过活率、活力、畸形率及顶体完整率对精子进行评估。结果:液氮蒸汽熏蒸0 min和1 min组精子活率和活力显著低于其它各组(P0.05)。与直接投入液氮相比,在液氮蒸汽中预冷冻超过2 min能够提高精子顶体完整率(P0.05)。本试验表明在使用0.5 m L细管冷冻犬精子时,液氮熏蒸时间在4~8 min较为适宜。