虎杖不同组织部位及其愈伤组织中白藜芦醇含量的测定

通过超声波提取虎杖根状茎中不同组织部位及其不同愈伤组织中的白藜芦醇，并采用HPLC方法检测分析白藜芦醇含量。结果表明：在虎杖根状茎不同组织部位中，白藜芦醇含量（质量分数计）依次为：根状茎芽〉髓〉木质部〉韧皮部〉周皮，其中根状茎芽中白藜芦醇质量分数高达0．4251％，髓中白藜芦醇质量分数为0．2664％。在同一批根状茎芽诱导的不同颜色愈伤组织体系中，棕褐色愈伤组织中白藜芦醇质量分数最高为0．0550％，淡黄绿色愈伤组织中仅为0．0005％。光照培养条件下的愈伤组织中白藜芦醇质量分数为0．0104％，黑暗培养条件下为0．0075％。不同外植体诱导的愈伤组织中白藜芦醇质量分数依次为：根状茎芽〉茎〉叶，以根状茎芽诱导的愈伤组织中白藜芦醇的质量分数最高，为0．0550％。不同组织部位诱导的愈伤组织中白藜芦醇质量分数为：鲜茎（根状茎中韧皮部）〉根状茎中木质部〉根状茎中髓，鲜茎中达到0．0090％。     

虎杖不同组织部位及其愈伤组织中白藜芦醇含量的测定

通过超声波提取虎杖根状茎中不同组织部位及其不同愈伤组织中的白藜芦醇,并采用HPLC方法检测分析白藜芦醇含量.结果表明:在虎杖根状茎不同组织部位中,白藜芦醇含量(质量分数计)依次为:根状茎芽＞髓＞木质部＞韧皮部＞周皮,其中根状茎芽中白藜芦醇质量分数高达0.425 1%,髓中白藜芦醇质量分数为0.2664%.在同一批根状茎芽诱导的不同颜色愈伤组织体系中,棕褐色愈伤组织中白藜芦醇质量分数最高为0.055 0%,淡黄绿色愈伤组织中仅为0.000 5%.光照培养条件下的愈伤组织中白藜芦醇质量分数为0.0104%,黑暗培养条件下为0.007 5%.不同外植体诱导的愈伤组织中白藜芦醇质量分数依次为:根状茎芽＞茎＞叶,以根状茎芽诱导的愈伤组织中白藜芦醇的质量分数最高,为0.055 0%.不同组织部位诱导的愈伤组织中白藜芦醇质量分数为:鲜茎(根状茎中韧皮部)＞根状茎中木质部＞根状茎中髓,鲜茎中达到0.009 0%.     

红豆杉愈伤组织诱导试验初探

以1年生红豆杉的茎段、芽尖及种子作为外植体,以MS和B5培养基添加2,4-D、NAA、KT进行愈伤组织诱导试验。结果表明:最适宜红豆杉愈伤组织诱导的条件为以茎段为外植体,消毒时间6 min;B5 NAA1.0 mg/L KT0.2 mg/L GA0.75 mg/L培养基;25℃左右培养;接种后外植体暗处理1～2周效果更佳,诱导率高,且诱导出的愈伤组织质量好。     

耐冬山茶愈伤组织诱导研究

重点探讨耐冬山茶愈伤组织诱导过程中不同植物生长调节剂、培养基pH值、不同培养基及不同类型外植体对愈伤组织诱导效应的影响。研究结果表明:MS+6-BA 2.0 mg.L-1+2,4-D 0.5 mg.L-1培养基是耐冬山茶愈伤组织诱导的最佳培养基;耐冬山茶愈伤组织诱导培养基pH值以5.5较为合适;耐冬山茶叶柄作为外植体,诱导率和生长状况最佳。     

篦子三尖杉愈伤组织的诱导

以篦子三尖杉的幼茎和嫩叶作为外植体进行组织培养,研究不同激素及不同浓度组合对其诱导愈伤组织的影响,结果表明:篦子三尖杉幼茎比嫩叶的愈伤组织诱导率高;MS+NAA 1 mg.L-1+6-BA 0.15 mg.L-1+2,4-D 1 mg.L-1是诱导幼茎愈伤组织的最佳培养基,诱导率达100%;MS培养基相比B5培养基更适合篦子三尖杉嫩叶愈伤组织的诱导;幼茎在75%的酒精中消毒1 m in,在0.1%的升汞溶液中浸泡15 m in,其消毒效果最佳。     

加拿大红枫愈伤组织诱导研究

以健康生长的加拿大红枫的叶片、叶柄、顶芽、侧芽为外植体,采用愈伤组织诱导培养方法,通过比较不同的外植体、光照时长、温度、湿度和植物生长调节剂及其配比对加拿大红枫愈伤组织诱导的影响。结果表明:愈伤组织诱导的最适外植体是顶芽;愈伤组织诱导的最适培养基是1/2MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA3 0.1mg/L;生长的最适培养条件为温度(25±2)℃,湿度65%,光照24h/d,光照强度15 00～2 000lx。     

直立冬青愈伤组织诱导及其分化研究

冬青属植物种子由于坚硬的种皮和未成熟合子胚的双重休眠,具有隔年发芽的特性,为了克服远缘杂交不亲和性,获得远缘杂交品种,打破种子休眠,缩短其育种周期,采用组织培养技术进行直立冬青种苗的快速繁殖。为了建立直立冬青愈伤组织诱导及分化体系,以直立冬青幼胚为外植体材料,采用单因素试验,通过对愈伤组织诱导培养基、不同植物生长调节剂种类及质量浓度、不同采种时间,研究影响直立冬青愈伤组织诱导和分化的条件因素。结果表明:1)基本培养基并不影响直立冬青未成熟合子胚的愈伤组织诱导,而果实的采种时间以及植物生长调节剂对直立冬青未成熟合子胚愈伤组织的诱导起着重要作用;2)当在基本诱导培养基1/4 MS+3%蔗糖+0.65%琼脂上添加生长素2,4-D 0.5～2.0 mg/L或者NAA 1.0 mg/L和2.0 mg/L时,最有利于未成熟合子胚愈伤组织的诱导,而细胞分裂素单独使用时,对未成熟合子胚愈伤组织的诱导不能起到积极作用;3)在培养基为1/4MS+3%蔗糖+0.65%琼脂+0.5 mg/L 2,4-D上时未成熟合子胚的分化率最高,达70.37%;在添加2.0 mg/L ZT的培养基上,其分化率最高,达到58.15%。     

枣树组织培养愈伤组织诱导的研究

将枣树不同品种的不同器官及其部位的外植体接种在含有不同激素的培养基中培养．对其愈伤组织诱导条件进行了研究．结果表明；灌阳长枣（中国）和普通枣（日本）为较适宜组培的品种．胚、嫩枝顶部、芽为适宜组培的器官；以MS（NO3）作基本培养基、并添加3μmol左右Zeatin和约30μmolNAA或IAA可以获得数量较多、质量较好的愈伤组织；叶所产生的愈伤组织颜色较深，数量也较少，并在初代培养时易产生不定根．     

板栗愈伤组织的诱导

通过组织培养技术,研究了不同基本培养基、不同外植体、不同植物生长物质对板栗品种韶栗18号愈伤组织诱导的影响;结果表明,韶栗18号的适宜培养基为WPM 0．5mg／L6-BA 0．2mg／LNAA,以其胚培养的诱导率较高,成愈率为79．0％。     

金边瑞香离体培养中芽和愈伤组织诱导初步研究

以MS为基本培养基，附加激素KT、NAA、6-BA、IAA、ZT进行试验，发现不同的激素组合、不同的激素水平处理对芽及愈伤组织诱导影响较大，其中以MS附加ZT1．0mg／L的培养基上芽的诱导率最高．高达94％．且诱导时间短，芽生长健壮。     

野葛愈伤组织诱导与不定芽分化

采用MS为基本培养基，附加NAA、6-BA和IAA3种激素．诱导野葛不同外植体愈伤组织形成；再将愈伤组织接种在不同浓度6-BA的MS培养基上．分别在光照和黑暗条件下进行不定芽的诱导。结果表明．野葛幼叶、茎段和顶芽在适宜激素的诱导下均能形成愈伤组织，但不同激素组合其愈伤组织诱导率不同。幼叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA1．0mg/L．其诱导率为75％．茎段愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA3．0mg／L IAA0．2mg/L，其诱导率为70％。不同外植体形成的愈伤组织其不定芽的分化诱导率不同．茎段愈伤组织在不同浓度6-BA下均能诱导出不定芽；光照有利于芽的分化．在光培养条件下，茎段愈伤组织不定芽平均诱导率为66．7％。     

TLC法测定虎杖中白藜芦醇的含量

本文建立了虎杖白藜芦醇含量测定的薄层扫描分析方法：以硅胶G为薄层吸附荆，氯仿：丙酮：乙酸：水(4：4：0．5：0．2)为展开剂，在紫外灯(365nm)下观察荧光斑点，在365n／n处并进行扫描测定，线性方程为：Y=(13．826S’10^-6)-0．8698(Y为白藜芦醇浓度ug／ml，S为峰面积)。并对虎杖茎、根、叶进行了含量测定。结果表明：用TIC法测定虎杖中白藜芦醇含量方法简便、快捷、准确度高、重复性好。虎杖鲜根茎中含量达0．548％。     

微波程序控温控压辅助双水相萃取虎杖果实中白藜芦醇与大黄素的研究

以虎杖果实为原料,采用微波程序控温控压辅助乙醇-硫酸铵双水相萃取白藜芦醇与大黄素,对比了该方法与微波辅助提取、微波辅助双水相萃取对提取得率和纯度的影响,并进一步通过红外光谱分析产物结构。结果表明:料液比1∶20(g∶m L)、相分离系数0.5的乙醇-(NH4)2SO4双水相体系,程序控温分为5级,依次为室温、40、50、60和70℃,对应控压为137.9、344.75、689.5、1 034.25、1 379 k Pa,每级微波辐射1.2 min后间歇5 min,进行微波功率自动连续调整,在此条件下虎杖果实中白藜芦醇与大黄素得率为0.694%与2.067%,纯度分别为82.68%与87.25%,提取效果明显优于微波辅助提取和微波辅助双水相萃取,且不会引起生物活性物质失活或变性。该方法能显著提高虎杖果实中白藜芦醇与大黄素提取得率,稳定性好、重复性好、精密度高、回收率高,同时又能简化其分离纯化工艺,降低生产成本,因此该方法适合用于虎杖果实中白藜芦醇与大黄素的提取分离。     

不同生境条件对虎杖白藜芦醇含量的影响

对武陵山区不同地域采集的虎杖植株进行白藜芦醇含量比较测定,结果表明:白藜芦醇含量有较大的差异,以常德2号地区的虎杖白藜芦醇含量最高,为0．337％。通过对30个不同地区、不同地理位置的虎杖生长环境调查,发现虎杖最佳生长条件为:坡向南坡,坡位上坡,土壤种类黄棕壤,土壤质地粘土,土壤母质板页岩,郁蔽度有零星光照。     

虎杖组织培养技术研究

以虎杖带腋芽的茎段为试验材料,研究虎杖组织培养与快速繁殖的适宜条件。试验结果表明,虎杖在MS 6—BA 2.0 mg/L IBA 0.2 mg/L 3%蔗糖 0.7%琼脂培养基上增殖效果最好,培养30 d,增殖倍数达到3.4以上;在1/2MS IBA 0.5 mg/L 3%蔗糖 0.7%琼脂培养基上生根效果最好,生根率100%,平均根长2.0 cm,平均苗高3.5 cm,以圃地表土为基质,在温室大棚内间歇喷雾的移栽成活率达96.25%。     

虎杖规范化种植操作规程

该规程明确规定了宁化虎杖产地环境、种子和种根标准、育苗技术、栽培技术措施、病虫害防治、采收加工、虎杖根干品的农药、重金属残留标准、有效成分含量标准以及包装、贮运方法等.以便科学种植虎杖,指导福建虎杖人工规模化种植.     

红千层愈伤组织诱导及植株再生

以茎段、芽和叶片为材料,研究了红千层愈伤组织诱导及植株再生的方法。结果表明:红千层的茎段、芽和叶片均可诱导出愈伤组织,通过继代培养愈伤组织可发育成绿色和粉红色2种类型,其中绿色、致密的愈伤组织可以分化出不定芽。培养基1/2M S 6-BA 1.0 m g/L NAA 0.1 m g/L适宜愈伤组织不定芽的诱导,在培养基1/2M S IBA 0.25 m g/L上试管苗的生根率可达95%。