湖北省宜昌地区中华蜜蜂种质情况研究

选择具有养蜂传统的宜昌地区作为研究地,对中华蜜蜂(Apis cerana cerana)的种群特征与其多样性,进行基于形态遗传学的调查研究。研究表明,中华蜜蜂的4个主成分均能反映出工蜂形态特征的信息量,多个形态指标也同时反映出对种群间变异的贡献。对湖北省宜昌丘陵山区中华蜜蜂主要分布区域9个样本进行测定和分析,形态标记研究表明,湖北宜昌地区中华蜜蜂具有丰富的遗传多样性。     

不同气候类型下陕西中蜂的形态分化研究

【目的】研究陕西省中华蜜蜂（Apis cerena cerena）的形态多样性以及形态指标与环境因素的关系,为中华蜜蜂种质资源保护提供参考。【方法】采集陕西省8个气候类型地区81个种群中华蜜蜂,利用传统形态学方法,测定第三与第四背板长之和（T3+T4）、吻长（Pro）、右前翅长（FL）、右前翅宽（FB）、右前翅面积（AW）、肘脉指数（Ci）6项形态指标,利用SPSS 23.0软件计算各气候类型下中华蜜蜂6项形态指标的均值和标准差,利用判别分析、系统聚类分析样本的形态多样性,并分析6项形态指标与9项环境因素（2个地理因素经度、纬度和7个气候因素年平均气温、年极端最高气温、年极端最低气温、年日最高气温≥35.0 ℃平均日数、年平均降水量、年平均风速、年均相对湿度）的相关性。【结果】延川中蜂样本的T3+T4、FL、FB和AW皆最大;石泉中蜂样本的T3+T4和FL平均值均最小;黄龙中蜂样本的FB和AW平均值皆最小;佛坪中蜂样本的Pro和Ci皆最大;陇县中蜂样本的Pro和Ci皆最小。判别分析、系统聚类分析显示,8个气候类型地区的中华蜜蜂可分为4个类群：陇县、凤县和千阳为一支,佛坪、黄龙、黄陵和周至聚为一支,延川和石泉均单独聚为一支。形态指标与环境因素的相关性分析显示,T3+T4与纬度呈正相关,与年平均气温、年极端最低气温、年均相对湿度呈负相关;Pro与年平均降水量、年平均风速呈正相关;FL和AW均与年平均降水量、年平均风速呈负相关;FB与年极端最高气温、年日最高气温≥35.0 ℃平均日数呈正相关, 与年平均风速呈负相关;上述指标相关性均达显著水平。【结论】气候因素与陕西中华蜜蜂的特定形态指标的表型可塑性存在着密切的关联。     

东方蜜蜂研究——重新评价中国阿坝地理种群

杨冠煌等（1986）发表蜜蜂阿坝亚种Apis cerana abansis,其亚种学名并没有拉丁化,应为Apis cerana abaensis,因多种原因未得到认可,但形态测定和分子数据分析认可中国阿坝地理种群Aba cerana。笔者介绍蜜蜂种下分类时,测评了38个形态学指标的测量方法、阿坝地理种群研究历史和背景、青藏高原分化出阿坝地理种群的环境条件,以及该种群个体形态特征、生物学和分布;中国是世界东方蜜蜂多样性热点地区之一,提出了中国东方蜜蜂（工蜂）中华亚种Apis cerana cerana、印度亚种Apis cerana indica、海南地理种群Hainan cerana及阿坝地理种群Aba cerana的形态鉴定表,肯定中国东方蜜蜂的多样性;从中国蜂业生产实际出发,首次较好地解决了东方蜜蜂种和种下阶元（亚种和地理种群）的关系,提出保护东方蜜蜂阿坝地理种群的措施。     

东方蜜蜂研究——重新评价中国阿坝地理种群

杨冠煌等(1986)发表蜜蜂阿坝亚种Apis cerana abansis,其亚种学名并没有拉丁化,应为Apis cerana abaensis,因多种原因未得到认可,但形态测定和分子数据分析认可中国阿坝地理种群Aba cerana。笔者介绍蜜蜂种下分类时,测评了38个形态学指标的测量方法、阿坝地理种群研究历史和背景、青藏高原分化出阿坝地理种群的环境条件,以及该种群个体形态特征、生物学和分布;中国是世界东方蜜蜂多样性热点地区之一,提出了中国东方蜜蜂(工蜂)中华亚种Apis cerana cerana、印度亚种Apis cerana indica、海南地理种群Hainan cerana及阿坝地理种群Aba cerana的形态鉴定表,肯定中国东方蜜蜂的多样性;从中国蜂业生产实际出发,首次较好地解决了东方蜜蜂种和种下阶元(亚种和地理种群)的关系,提出保护东方蜜蜂阿坝地理种群的措施。     

龙栖山中华蜜蜂种群分化形态遗传分析

对龙栖山国家级自然保护区及其周边地区的中华蜜蜂31个形态指标进行测定,发现6个形态指标存在显著差异.与周边地区人工饲养的中华蜜蜂相比,龙栖山野生中华蜜蜂的翅长、蜡镜长、蜡镜间距分别为8.6655、1.1568、0.2083 mm,分别减少0.0728、0.0382、0.0730 mm;翅脉角D7为95.6°,增大1.8°;翅脉角N23和J16分别为83.3°和101.2°,分别减小4.0°和3.2°(P<0.05).对采用判别式分析得到的样点重心的判别函数值进行聚类分析的结果显示,龙栖山中华蜜蜂已从周边地区的中华蜜蜂种群中分化,形成独立的种群.     

云南省中西部地区东方蜜蜂形态特征研究

 为了研究不同地理环境下东方蜜蜂的特征规律,测定了云南省中西部的武定、永胜、大姚、祥云和姚安5个地区的16群东方蜜蜂(Apis cerana)的第6背板覆毛长度、第3背板长、翅钩数和小盾片颜色等38个形态特征指标,并同云南省其他地方的东方蜜蜂形态数据进行比较。结果表明,云南省中西部地区的东方蜜蜂为一个小类群,与德钦、宾川和丽江的亲缘关系较近。在云南省范围内,德钦的东方蜜蜂体型最大,云南省中西部地区的东方蜜蜂体型蜂次之,东南低纬区的东方蜜蜂体型最小。该地区的东方蜜蜂形态特征呈现广泛性,是云南省镜内两大东方蜜蜂类群的中间过渡带。     

乌蒙山系东方蜜蜂的形态学及分类地位研究*

 从云南水富县太平乡（4群）和贵州六盘水市盘县（3群）共采集了7群东方蜜蜂Apis cerana样本,每群测定分析15只工蜂,每只工蜂总共有38个测定的形态特征。测定的性状特征数据进行主成分分析,聚类分析和因素分析,并与云南省内其它县东方蜜蜂A.cerana的相关数据进行比较。结果发现,水富东方蜜蜂A.cerana个体较大,体色较浅,贵州六盘水东方蜜蜂A.cerana个体较小, 体色较浅,与云南省内南部东方蜜蜂A.cerana分开,与德钦东方蜜蜂A.cerana形成一个类群。     

武夷山中华蜜蜂形态特征与微卫星DNA标记的相关分析

利用18个微卫星标记对武夷山中华蜜蜂群体进行多态性检测,同时测定个体的前翅长、前翅宽、前翅面积、肘脉指数、吻长和第3、4背板总长等形态特征,采用方差分析法对微卫星DNA标记与形态性状进行相关性分析.结果表明,位点A088对前翅宽、前翅面积有显著影响;位点Ag005 a对第3、4背板总长有显著影响;AP043、AT101对前翅长有显著影响;AP297对吻长有显著影响(P<0.05).     

中华蜜蜂二倍体雄蜂人工培育及形态测定

【目的】研究中华蜜蜂（Apis cerana cerana）二倍体雄蜂并进行人工培育,测定其形态指标,明确中华蜜蜂二倍体雄蜂的生物学特性。【方法】采用复式移虫方法培育中华蜜蜂蜂王,待蜂王性成熟时进行CO₂麻醉处理后放回原群,用糖水进行奖励饲喂。蜂王产下大量未受精卵,待雄蜂出房后采用颜料进行标记。雄蜂性成熟后,利用蜂王人工授精技术使蜂王与本群子代雄蜂进行母子回交（多雄交配）。控制蜂王产卵,将工蜂巢房中刚孵化的幼虫移至恒温恒湿培养箱（相对湿度：95%;温度：35℃）中进行人工培育。幼虫前3日龄食物配制为：蜂王浆90％,无菌水10％;第4-6日龄食物成分比例为：蜂王浆50％,葡萄糖6％,果糖6％,酵母抽出物1％,无菌水37％;从第7日龄起食物比例为：蜂王浆43％,葡萄糖9％,果糖9％,酵母抽出物1％,无菌水38％,直到幼虫进入排便期为止。采用流式细胞仪对人工培育和蜂群工蜂巢房出房的雄蜂进行倍性鉴定,并对蜂群工蜂巢房出房的单倍雄蜂和二倍体雄蜂进行形态指标测定比较。【结果】室内人工培育的中华蜜蜂总羽化率偏低,平均为36％,其中26.9％为雄蜂;通过流式细胞仪分析雄蜂倍性发现人工培育的雄蜂92％为二倍体,蜂群工蜂巢房中出房的雄蜂82%为二倍体雄蜂;形态指标测定显示,二倍体雄蜂的初生重与生殖器官重分别为99.78和6.05 mg,均比单倍体雄蜂（分别为105.64和7.02 mg）显著偏小,而前翅长、前翅宽、翅钩数等指标差异不显著。【结论】中华蜜蜂近亲交配的蜂群会产生二倍体雄蜂,部分二倍体雄蜂可在蜂群中发育至成蜂出房,其形态指标与单倍体雄蜂存在一定差异。     

金华地区东方蜜蜂的形态特征

从浙江金华8个样点采集40群东方蜜蜂样本进行16个形态特征的系统测量,同时采集吉林和广东东方蜜蜂做对照,利用SPSS 23.0进行因子分析、判别分析、聚类分析以及与环境因子的相关分析。结果表明:金华东方蜜蜂16个形态特征之间均存在极显著的变异性;16个形态指标均极显著小于吉林样本;除翅长、翅宽、基跗节宽和第三背板长与广东样本差异不显著外,其他形态指标与广东样本显著差异。与外群东方蜜蜂遗传分析表明,金华东方蜜蜂和广东样本为1个地理种群,吉林样本单独为1个种群,群体距离与地理距离相符。金华东方蜜蜂内部遗传分化成2个种群,武义新宅、磐安方前、婺城北山、兰溪马涧为1个种群,婺城长山、武义宣平、婺城塔石、永康方岩为1个种群。金华地区东方蜜蜂种群内遗传变异丰富,且变异可能与海拔和温度相关。     

中华蜜蜂奈氏腺粗提物对工蜂采集行为的影响

本研究探讨中华蜜蜂Apis cerana cerana奈氏腺粗提物对工蜂采集行为的影响。结果表明,采用腹部提取法、腺体切除法与注射提取法提取的奈氏腺粗提物对中华蜜蜂工蜂采集行为有影响,采集蜂会在奈氏腺粗提物周围做无规则剧烈飞跃,腹部不断左右摆动,同时伴有振翅现象。风洞试验和室外试验结果表明,腺体切除法收集到的奈氏腺粗提物引诱中华蜜蜂工蜂的效果最好,注射提取法次之。3种不同方法收集到的奈氏腺粗提物均随着其放置距离增加,采集蜂访问的数量呈减少趋势。     

广西中蜂与云南中蜂杂交子代形态学测定及杂交优势分析

为了解广西中华蜜蜂的形态特征以及分类地位,探究与云南中华蜜蜂杂交后代的形态差异及杂交优势。采集6群广西中华蜜蜂、6群蒙自中华蜜蜂及2群杂交子代,每群测定分析15只工蜂,每只工蜂总共有40个测定的形态特征。测定的性状特征数据进行主成分分析、因素分析和聚类分析。结果表明,广西中蜂个体偏小,第3、4背板较小,翅型偏小,蜡镜和毒囊较小,吻长也短;体色较浅,第2、3、4背板和喙、小盾片的颜色较浅;与蒙自蜜蜂进行对比,浦北县中蜂的个体稍小,体色较浅;子代具有良好的杂交优势,个体比2个亲本较大,颜色居于两者亲本之间;与省内几个地区相比,广西浦北县的中华蜜蜂单独分为一个类群。     

东北地区东方蜜蜂遗传分化和多样性分析

调查我国东北地区东方蜜蜂Apis cerana,分析其遗传分化并探讨隔离机制,明确东北东方蜜蜂种群遗传特征和多样性水平,探究蜜蜂种群遗传分化和遗传多样性相关规律,建立并完善东方蜜蜂种群遗传学。利用33个形态标记和38个微卫星DNA标记,对东北7个样点共461群东方蜜蜂及北京平谷、浙江金华、四川平昌、海南儋州外群作遗传分化、遗传特征和遗传多样性分析。形态标记、微卫星DNA标记分析结果均显示,分布于长白山山脉抚松、安图、敦化、本溪、宽甸东方蜜蜂聚为同一种群。长白山种群肘脉指数、翅长、第五背板绒毛带长、第四腹板长等形态指标数值较高。微卫星各位点等位基因以1、2种为主,频率达80%以上的21个。遗传多样性结果显示,长白山种群的观察杂合度、有效等位基因数、多态信息含量等数值较低。东北地区东方蜜蜂主要分布在吉林、辽宁长白山山区,形成长白山东方蜜蜂种群。该种群与北京、四川、浙江、海南东方蜜蜂发生明显遗传分化,遗传多样性水平较低。分化主要原因为辽宁省长白山以西平原地区,东方蜜蜂逐渐消失,基因流阻断。长白山东方蜜蜂种群遗传多样性水平较低,环境和人为因素导致种群数量减少。     

中蜂与意蜂营养杂交对工蜂苹果酸脱氢酶Ⅱ的影响

本研究以中华蜜蜂(Apis cerana cerana)和意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)为实验材料,进行中华蜜蜂与意大利蜜蜂营养杂交,然后应用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(IEF-PAGE)技术检测亲本和营养杂交后代的工蜂苹果酸脱氢酶Ⅱ的基因型、基因型频率、等位基因频率、杂合度和纯合度,结果表明:经过营养杂交后,杂交后代工蜂的苹果酸脱氢酶基因型发生了变化,并且苹果酸脱氢酶条带位置朝着对方蜂种偏移。     

不同人工育王方式对工蜂的形态差异影响

采集区域产卵和自然产卵2种不同人工育王方式培育下的蜜蜂(Apis L.)群各3群。参照Ruttner提出的38个蜜蜂形态指标进行测定,每群测定15只工蜂,每只测定40个指标。结果显示,18个跟蜜蜂体型大小相关的指标中,有15个指标试验组大于对照组,其中跗节长、第三腹板长的差异达到显著水平;而吻长、胫节长、跗节宽、第三腹板蜡镜长、第三腹板蜡镜斜长、第三腹板蜡镜间距、第六腹板长、第六腹板宽的差异达到极显著水平,说明控制蜂王在特定区域产卵的方法能使其后代工蜂的体型增大;而试验组的肘脉a和肘脉b都减小,11个翅脉角中有7个减小,后翅翅够数也减小,说明不同的育王方式能引起蜜蜂翅型和翅脉的变化,但多数差异不显著。在8个跟蜜蜂体色相关的指标中,试验组的小盾片颜色K、颜色B和喙的颜色Lab1均大于对照组,差异达到极显著水平,而试验组第四背板颜色小于对照组,差异达到极显著水平,说明不同的育王方式能引起蜜蜂体色不同程度的变化。由此表明,不同的人工育王方式能使后代工蜂的形态发生不同程度的改变,这为培育优质蜂王提供了参考。     

中华蜜蜂生物学特性的初步研究

中华蜜蜂(Apis cerana,Fabricius,一七九三)分布遍及全国各地,适应环境能力极强,极少发生传染性疾病,工作勤奋,是亚洲的优良蜜蜂品种。为掌握中蜂的飼养技术,我們开始对中蜂的形态特征、生理机能和生活习性进行了研究。     

中华蜜蜂mrjp3基因cDNA的克隆及序列分析

 以东方蜜蜂（Apis cerana）mrjp3基因部分片段为探针筛选中华蜜蜂（Apis cerana cerana，简称中蜂）8日龄工蜂头部cDNA文库，得到120个阳性克隆。对这些阳性克隆进行进一步的筛选和序列测定，获得含有中蜂MRJP3 (AccMRJP3)cDNA的阳性克隆，对阳性克隆的插入片段进行测序，得到AccMRJP3的cDNA序列全长。中蜂MRJP3的cDNA全长为1 987 bp（包括10 bp长的poly A尾巴），包含一个长1 779 bp，编码593个氨基酸的ORF，在5'端和3'端各有一个长46 bp和160 bp的非编码区。类似于西方蜜蜂（Apis mellifera）和大蜜蜂（Apis dorsata），由AccMRJP3 cDNA编码的氨基酸序列也存在一个长片段重复区。但比较结果显示中蜂、西方蜜蜂、大蜜蜂MRJP3重复区之间存在一定差异。     

运用RAPD技术检测中华蜜蜂蜂群中亚家庭数量

以中华蜜蜂(Apis cerana cerana)为实验材料,运用随机扩增多态DNA (RAPD)技术和NTSYS聚类软件分析蜂群亲缘关系指数和亚家庭数组成.结果表明:RAPD技术是检测中华蜜蜂亚家庭数量的一种有效方法.     

中华蜜峰群体内温度、湿度及CO#-2浓度的变化及调节研究

采用可以测量瞬时温度、相对湿度及CO#-2浓度值的电子显示仪,对中华蜜蜂（Apis cerana cerana Fab.）群体内温度、湿度及CO#-2浓度这3种生态因素进行测量,在施加入为干扰条件下,这些因素的变化及恢复过程。以意大利蜜蜂（Apis mellifera liqustica L.）作对照。结果表明：中华蜜蜂维持群体内温度及CO#-2浓度稳定性不及意大利蜜蜂,子脾间及箱内空间的相对湿度（RH）高于意大利蜜蜂10%～15%,CO#-2浓度也高于意大利蜜蜂。     

中华蜜蜂抗氧化酶基因的基因组鉴定及其在工蜂行为发育中的表达特征

根据中华蜜蜂(Apis cerana cerana)基因组序列,鉴定抗氧化酶系统的主要组分,并用RNA-Seq数据分析了工蜂行为发育中抗氧化基因在脑组织中的转录水平.研究表明,共有47个抗氧化基因,包括34个抗氧化酶基因和13个硫氧还蛋白基因.比较东方蜜蜂(Apis cerana)、西方蜜蜂(Apis mellifera)和黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的抗氧化基因,抗氧化酶系统的主要组分在进化上保守,但抗氧化酶基因家族的成员存在物种间差异.如东方蜜蜂和黑腹果蝇的SOD基因家族含3个成员,而西方蜜蜂有2个;果蝇有43个GST基因,而东方蜜蜂和西方蜜蜂仅有14和13个.RNA-seq分析显示,抗氧化基因的表达水平随着工蜂行为发育而发生规律性变化.工蜂脑表达的46个抗氧化基因,约有60%在由内勤蜂(哺育蜂和守卫蜂)转变为外勤蜂(采集蜂和侦察蜂)时明显表达上调,说明外勤蜂脑组织清除活性氧的酶促反应速率更高.