动物体细胞克隆研究概况

介绍了动物体细胞克隆技术的方法，研究现状，指出体细胞克隆动物虽然存在成功率低，死亡率高，生长发育不正常等缺陷，但在快速扩敏优良种畜和转基因动物，保护动物遗传资源，生产用于器官移植的克隆器官等方面有很大的应用潜力。     

转基因克隆动物的研究进展

作者综述了转基因克隆动物的方法、中国转基因克隆动物的研究现状、体细胞克隆动物技术存在的问题及转基因克隆动物的发展前景。     

科技

吉林省首批体细胞克隆羊诞生 日前，吉林省首批两只体细胞克隆绵羊在省农科院畜牧分院诞生。这项最新高端动物生物技术成果．填补了我省该研究领域的空白．对于加速家畜改良速度、加强对野生滟危动物的挽救和保护有着重要意义。     

韩国科学家用骨髓干细胞克隆猪获成功

韩国一个研究小组近日宣布利用骨髓干细胞成功克隆出猪，较之动物克隆研究中大多采用的体细胞克隆，新成果采用的方法可使猪的克隆成功率大幅提升。     

动物体细胞克隆技术的研究进展

体细胞克隆绵羊“多莉”(Dolly)的诞生,表明成年哺乳动物体细胞具有基因组的全能性。本文从“多莉”诞生的背景、体细胞克隆技术的研究现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术目前存在的问题及其在制作转基因动物上的应用等方面,概述了体细胞克隆技术的研究进展。     

动物体细胞克隆技术的研究进展

体细胞克隆绵羊“多莉”（Dolly）的诞生,表明成年哺乳动物体细胞具有基因组的全能性。本文从“多莉”诞生的背景、体细胞克隆技术的研究现状、体细胞核移植过程中的核质互作、该技术目前存在的问题及其在制作转基因动物上的应用等方面,概述了体细胞克隆技术的研究进展。     

FSH 、LH对猪卵母细胞核成熟及体外成熟时间对去核效率的影响

克隆动物(核移植)的原理就是将卵裂球或体细胞核移人去核的卵母细胞或受精卵中,采用各种激活方法使之激活,发生卵裂,移植受体后产生个体。猪的体细胞克隆效率与其他动物(牛、羊)相比较低,需     

动物体细胞克隆机理的几个关键问题

动物体细胞克隆技术是目前生物技术领域研究的热点之一，其科学意义和应用价值重大，本文对动物体细胞克隆的理论基础进行了探讨，阐述了再程序化过程中Ca2 、MPF、DNA的甲基化重要作用，以及核质互作的机理。     

体细胞克隆猪胚胎的研究进展

自"多利"羊问世以来,体细胞克隆研究已取得了很大进展,相继获得了牛、山羊、鼠等克隆动物.相对而言,猪的体细胞克隆研究进展较慢,其主要原因是猪的生殖细胞、胚胎体外显微操作难度较大;妊娠维持有别于其他家畜,需具备一定量的胚胎数.所以直至2000年才有所突破,获得了体细胞克隆后代.然而,猪体细胞核移植的效率很低,用占移植卵母细胞的比例来衡量,只有1%～2%.本文主要就猪体细胞克隆的关键技术加以简要论述,供参考.     

动物体细胞克隆机理的几个关键问题

动物体细胞克隆技术是目前生物技术领域研究的热点之一,其科学意义和应用价值重大,本文对动物体细胞克隆的理论基础进行了探讨,阐述了再程序化过程中Ca2+、MPF、DNA的甲基化重要作用,以及核质互作的机理。     

盐生植物小花碱茅外整流K┼通道SKOR基因片段的克隆及序列分析

为研究小花碱茅(Puccinellia tenuiflora)K+/Na+选择性运输的分子机制，根据已知的外整流K+通道高度保守区设计一对简并性引物，以小花碱茅根总RNA为模板，采用RT PCR方法克隆SKOR基因片段。序列分析结果表明,该基因片段长度为555 bp，编码185个氨基酸；该序列与其他已报道的高等植物SKOR核苷酸序列的同源性在66%以上，氨基酸序列同源性在55%以上。     

哺乳动物体细胞克隆的研究进展

随着克隆技术的发展,哺乳动物体细胞克隆在生物学、医学等领域有着越来越重要的价值,近年来,克隆技术不断完善,克隆方法不断优化,取得了很多重要的成果,但在成功率等方面仍存在许多难以攻破的问题。作者重点阐述了胞质内全细胞直接注射法这一技术在哺乳动物体细胞克隆上的应用情况,旨在阐明国内外哺乳动物体细胞克隆的研究现状,为进一步提高克隆成功率提供参考。     

中国猪瘟兔化弱毒株（C-株）兔脾组织毒主要保护性抗原E2（gp55）基因序列分析

利用反转录（RT）及套式PCR（N-PCR）方法扩增了中国猪瘟兔化弱毒株（C-株）兔脾组织毒主要保护性抗原E2（gp55）基因，成功地将其克隆并测定了核苷酸序列，与国内外已发表的猪瘟病毒（HCV）E2基因序列比较的结果是C-株兔脾毒与C-株细胞（SK6）毒、C-株疫苗（犊牛睾丸细胞，HCLV-C）毒、HCV-SM株（石门）毒、Brescia株（荷兰）毒、Alfort株（德国）毒的E2核苷酸序列同源性分别为98.87％、98.34％、94.58％、91.00％、80.78％；氨基酸同源性分别为98.95％、97.37％、94.22％、91.60％、89.23％。对C-株兔脾毒与C-株细胞毒、经典强毒及国内流行野毒E2上的A、B、C三个中和性抗原区的氨基酸组成进行了比较，其结果为C-株兔脾毒与C-株细胞毒的差异很小甚至没有差异，而与流行野毒及经典强毒在B、C区有较大的差异。我国经典强毒石门毒与国内80年代和90年代流行毒之间有明显的差异，表明我国猪瘟流行毒株发生了变化。     

鹿花盘蛋白质的提取与生物活性测定

采用盐提、热变性处理及凝胶过滤法从鹿花盘中提取 鹿花盘蛋白质(PSAB)。PSAB经SDS-PAGE电泳呈现5条谱带，测定其分子量分别为65.57KD、2 8.179KD、21.265KD、16.758KD、13.79KD；氨基酸分析表明，鹿花盘蛋白质含有17种氨基酸 。动物实验表明，鹿花盘蛋白质能显著地增强机体的抗疲劳作用和提高肾上腺功能；对油漆 应激小鼠有明显保护作用，能显著增加小鼠红细胞数和血红蛋白的含量。表明PSAB具有滋补 强壮、养气补血的作用，是鹿花盘的活性成分之一。     

家蚕核型多角体病毒IE-1基因启动子的克隆和序列分析

利用ＰＣＲ方法扩增了家蚕核型多角体病毒苏州株（ＢｍＮＰＶｓｕ）的ＩＥ－１启动子全序列并进行克隆和序列分析，结果表明ＢｍＮＰＶｓｕ的ＢｍＮＰＶｓｕ启动子符合真核生物启动子特点，在其序列中有典型的增强子类似元件、加帽位点、ＴＡＴＡ盒等基序。与ＧｅｎＢａｎｋ报道的其它几种ＮＰＶ病毒基因组中的ＩＥ－１启动子序列进行同源性分析表明ＢｍＮＰＶｓｕ与ＩＥ－１（家蚕核型多角体病毒Ｔ_３株）、ＡｃＭＮＰＶ（首蓿尺蠖核型多角体病毒）、ＯｐＭＮＰＶ（黄衫毒蛾核型多角体病毒）、ＬｄＮＰＶ（舞毒蛾核型多角体病毒）的同源性分别为９９．５％、９６．４％、６６．２％和５０．２％。根据各ＮＰＶ基因组中ＩＥ－１启动子序列分析了几种ＮＰＶ的进化关系。     

鸡腺胃型传染性支气管炎（综述）

1996年9月份以来，中国青岛及附近地区养鸡场20－90日龄蛋用育成鸡连续发生了一种以流泪，肿眼，伴有呼吸道症状，极度消瘦，拉稀，死亡为特征的一种新的呼吸道传染病。主要剖检表现为腺胃肿大如球状，腺胃壁增厚，腺胃粘膜出血溃疡，腺胃乳头平整融合，轮廓不清，可挤出脓性分泌物的腺胃炎症变化。本病病原通过鸡胚盲传5－6代，电镜观察到典型的冠状病毒。因为引起腺胃的特征性的病理变化，因此将此病暂定名为腺胃型传染性支气管炎。我们青岛地区鸡场的分离株定为QXIBV株。本篇从病原学、临床症状、发病机理和流行病学、免疫学、实验诊断和疾病控制方面进行综合论述。本病与肠型传支在理化特性、形态和毒力上相似，可能是同一种新的IBV变异株。     

体细胞克隆猪的研究与展望

用体细胞核移植的方法生产的克隆猪诞生至今已近5年，虽然同胚胎细胞核移植相比，体细胞核移植技术难度大，成功率低，但近年来用体细胞核移植技术克隆猪有了更深入的研究，在体细胞核移植基本机理和关键技术上取得了一定的进展。综述了用核移植的方法生产体细胞克隆猪的技术关键和难点及应用情况，并对提高猪体细胞核移植效率的策略进行了分析。     

bcl—2在鸡马立克氏病肿瘤中的表达

用来克亨SPF鸡复制马立克氏病（Marek‘s disease,MD)肿瘤模型，取肿瘤和相应正常组织，液氮保存。AGPC（Acid Guanidinium Thiocyanate-Phenol-Chloroform)法的取组织总RNA（TRNA），紫餐测定其浓度，甲醛变性胶电泳观察其纯度。将一个含鸡bcl-21.2kb片段的质粒（PTTCB1），经转化扩增，提取质粒DNA，限制性内切酶（RE）消化，回收纯化bcl-2片段，放射性α^32P标记，制成探针。通过Northern分子杂交检测MD肿瘤组织中bcl-2的表达，并与相应的正常组组织比较。结果：鸡MD肿瘤组织和相应正常组织中均有bcl-2的表达；MD肿瘤组织中bcl-2 的表达显著高于相应的正常组织。结合已进行的凋亡研究表明,bcl-2表达产物通过阻遏细胞凋亡促进MD淋巴瘤的形成。     

牛体外牛黄发生器内培植牛黄技术研究

利用48头健康黄牛同时施行胆总管结扎术、胆囊插管术、十二指肠插管术和体外安装牛黄发生器，将原胆汁流通径路改建为肝脏→胆管→胆囊→引胆汁管→牛黄发生器→十二指肠，在体外牛黄发生器内和胆囊内同时培植牛黄。结果表明，植黄牛胆汁pH值降低，胆酸含量下降，牛黄发生器内胆汁粘度低于胆囊内胆汁粘度。胆囊内注入新洁尔灭，可减少胆汁中细菌数量，减轻胆囊炎症反应。全棉材料牛黄床的牛黄产量高于锦纶66和涤纶材料牛黄床，以网眼状全腔充盈型牛黄床的牛黄产量高、质量好。在5～7个月的培植期内，每头牛能生产牛黄14.1～19．6g，牛黄胆红素含量为29.05％±7．51％。