大蒜花梗组织培养再生植株

取生殖期大蒜花梗,在N_6+2,4-D 2mg/L+KT 1mg/L培养基上暗培养30天后,得到微黄色愈伤组织。将愈伤组织转到N_6+2,4-D 0.5mg/L+KT 0.5mg/L培养基上继代二次,然后于N_6+BA 5mg/L+KT 1mg/L+IAA 0.01mg/L,MS(1/2大量元素)+BA 5mg/L+KT 1mg/L+IAA 0.01mg/L和MS+BA 5mg/L+KT 1mg+IAA 0.01mg/L培养基上光照培养。3周后愈伤组织上出现绿色丛生芽,将小芽转到MS(1/2大量元素)+NAA 0.01mg/L培养基上,一周后发生白色根并形成完整植株。2,4-D和KT对大蒜花梗愈伤组织发生是必要的,高浓度的细胞分裂素和低浓度的生长素有利于芽分化,高浓度NH_4~+有利于根分化,低浓度NH_4~+有利于芽分化。愈伤组织低温处理对芽的分化是必要的。另外,对花梗愈伤组织发生进行了细胞学观察。     

‘黑珍珠’番茄植株再生体系的研究

为了研究‘黑珍珠’番茄植株再生,以‘黑珍珠’番茄幼嫩叶片为外植体诱导愈伤组织,通过愈伤组织诱导培养、愈伤组织分化培养、不定芽增殖培养、生根培养和试管苗移栽,建立高效快速的‘黑珍珠’番茄再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片愈伤组织的培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,叶片外植体愈伤组织诱导率最高可达98.2%;诱导出的愈伤组织在MS+ 1.5 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L IBA培养基上能很好的分化出不定芽;MS+4.0 mg/L KT+ 0.01 mg/L IBA 培养基可实现不定芽芽增殖;最适宜的生根培养基为1/2MS+ (0.05~0.08) mg/L NAA,试管苗移栽成活率达92%。     

大花绣球‘无尽夏’组培苗叶片再生植株的研究

为建立大花绣球’无尽夏’规模化无性繁殖和高效遗传转化体系,以’无尽夏’组培苗叶片为外植体,研究叶位、暗培养时间及不同激素组合等因素对叶片诱导形成愈伤及分化不定芽的影响。结果表明,’无尽夏’组培苗植株中上部叶片的愈伤诱导效果好,适宜的外植体取样叶位为第3～6位叶片。初始暗培养有利于叶片形成愈伤,暗培养15～25天的效果最佳。诱导’无尽夏’组培苗叶片形成愈伤的适宜培养基为MS+CPPU 3.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L,其愈伤诱导率达到98%以上;愈伤增殖与不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0～2.25 mg/L+IBA 0.1 mg/L。     

粗肋草‘中国红’植株再生体系的建立

为建立相对稳定、高效的‘中国红’粗肋草植株再生体系,本研究以‘中国红’粗肋草的嫩茎腋芽原基、嫩叶为外植体,对诱导愈伤组织的初代培养基、芽增殖分化培养基的激素种类和配比以及生根培养方法等进行筛选优化。结果表明:适宜建立‘中国红’粗肋草体细胞胚发生途径再生体系的外植体为腋芽原基;最佳诱导愈伤组织的初代培养基为1/2MS+2,4-D 0.2 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织诱导率分别为:腋芽原基83.3%,嫩叶为23.9%;适合腋芽原基愈伤组织分化培养基的激素配比为6-BA/IAA组合,愈伤组织分化率为65.7%~67.6%、主要以体细胞胚性途径形成再成芽、芽增殖系数5.3~5.8;适宜的生根接种、培养方式为体细胞胚植株断根促根培养,生根苗生根率99.2%。本研究已初步建立和优化以腋芽原基为外植体的稳定‘中国红’粗肋草体细胞胚发生途径的植株再生体系,可进一步改良优化,为今后‘中国红’粗肋草工厂化及规模化生产提供理论和技术指导。     

花生体细胞胚诱导及植株再生研究

为了建立花生体细胞胚诱导及植株再生体系,为花生分子育种提供技术支撑,以花生品种‘桂花30’和‘桂花771’为材料,采用预培养3天的种子胚小叶、下胚轴、子叶节为外植体,在添加外源激素的MS培养基中使体细胞脱分化形成体细胞胚,再分化成植株。结果表明,在所设定2,4-D浓度（3,5,10,15,20 mg/L）范围内,胚小叶最容易诱导形成体细胞胚,2,4-D的适宜浓度为10 mg/L,经过约30天培养,可产生大量体细胞胚,‘桂花30’和‘桂花771’的平均诱导率分别为55.37%和36.72%。平均每个外植体产胚量分别为5.68个和4.27个。将诱导形成的体细胞胚转接到6-BA浓度由5 mg/L逐渐降低到1.5 mg/L的MS培养基中,体细胞胚萌发再生成无根小苗,正常植株再生率‘桂花30’为32.6%,‘桂花771’为23.5%。将无根苗转接到生根培养基中可获得完整植株。花生是较难诱导体细胞胚形成的作物之一,筛选合适的基因型、外植体和激素浓度是获得较高体细胞胚发生率和植株再生率的关键技术。     

半夏类原球茎的诱导及其植株再生研究

研究不同外植体和植物激素对半夏类原球茎诱导的影响,并在此基础上建立半夏高频再生体系。以贵州大方‘圆珠’半夏为材料,进行了半夏类原球茎的诱导、分化和驯化移栽技术的试验研究。块茎诱导类原球茎的适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,诱导率和增殖倍数分别为86.67%和17.40。叶片和叶柄则采用MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L配比的培养基效果较好,类原球茎诱导率均可达50%以上,最大增殖倍数分别为12.80和8.6。炼苗移栽时,选用直径为0.5 cm、根数为9.4个/株、根长为3.71 cm 左右的组培苗,移栽成活率高且植株生长良好。组培苗移栽基质为园土和珍珠岩体积比1：1最好。在适宜的植物激素配比下,可从合适的半夏外植体上诱导出类原球茎,建立半夏高频再生体系,为半夏的种质资源保存、基因工程育种和药用次生代谢产物的生产等奠定基础。     

地被菊花‘珍粉’组织培养与植株再生体系的建立

研究不同因子对地被菊‘珍粉’品种再生体系建立的影响,为地被菊的推广种植打下技术基础。以地被菊‘珍粉’二年生茎段为试材,研究不同消毒时间梯度下2%NaClO和0.1%Hg Cl2对茎段消毒效果、6-BA:NAA和6-BA:KT激素组合对不定芽诱导、不同浓度IBA和NAA对不定根发生,半开瓶和全开瓶两种炼苗方式对移栽成活率的影响。结果显示,2%NaClO消毒效果优于0.1%Hg Cl2,且在6 min时萌发率最高,达到90.00%;外植体腋芽诱导率在6-BA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L组合最高,达到97.67%,出芽指数为6.33,优于6-BA:NAA组合;不同浓度IBA诱导不定根发生率均达100%,高于NAA,但在根系质量和后期成活率上,IBA浓度为0.5 mg/L时最优;试管苗在半开盖炼苗5 d后的移栽成活率达到了100%,且植株长势健壮。     

重庆野生百合花蕾诱导再生植株技术研究

为了重庆野生百合资源的有效保护和开发利用,以重庆地区野生百合花蕾为试验材料,采用植物组织诱导培养的方法对其再生植株技术进行了研究。结果表明：以即将开放的百合花蕾为外植体材料,消毒容易,无污染;通过对花蕾各器官（花冠、花托、花丝、花药、花柱、柱头、花梗）的诱导培养,表明试验所选的1号培养基MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L能诱导花冠、花托、花丝出芽,2号培养基MS+ 6- BA 0.5 mg/L+ NAA 0.5 mg/L仅能诱导花冠出芽;幼芽增殖以MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L的增殖系数最高,为3.2,增殖幼苗生长健壮;生根培养以14号培养基(MS+ NAA 0.4 mg/L)诱导百合生根最佳,生根率为100%;移栽结果以18号培养基(MS+ IBA 0.5 mg/L)的生根培养苗成活率较高,达到了85%。     

菊花外植体分化诱导及植株再生研究初报

菊花是中国十大传统名花和世界四大切花之一,具有观赏、食用、药用等多种价值。笔者就菊花的再生途径、外植体选择、激素种类及配比进行了较为详尽的归纳和分析。结果表明,绝大多数研究者选择叶片或茎段作为外植体直接再生不定芽;常用激素浓度范围为：6-BA：0.5~3mg/L、NAA：0.1~1mg/L、2,4-D：0.5~1mg/L。最后,对目前存在的问题及今后的发展方向进行了探讨。     

甘薯愈伤组织诱导及植株再生的研究

在附加不同植物生长调节剂的MS培养基上接种甘薯茎段、叶柄和叶片诱导愈伤组织及植株再生。结果表明：基因型、外植体和植物生长调节剂影响愈伤组织的生长和分化。“卢选1号”的分化能力比“一窝红”强;茎段愈伤组织分化能力好于其它两种外植体;1.0~2.0mg/L2,4-D与1.0 mg/LKT组合有利于诱导胚性愈伤组织。     

半夏类原球茎的诱导及其植株再生

研究不同外植体和植物激素对半夏类原球茎诱导的影响,并在此基础上建立半夏高频再生体系。以贵州大方‘圆珠半夏’为材料,进行了半夏类原球茎的诱导、分化和驯化移栽技术的试验研究。块茎诱导类原球茎的适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L,诱导率和增殖系数分别为86.67%和17.40。叶片和叶柄则采用MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L配比的培养基效果较好,类原球茎诱导率均可达50%以上,最大增殖倍数分别为12.80和8.6。炼苗移栽时,选用直径为0.5 cm、根数为9.4个/株、根长为3.71cm左右的组培苗,移栽成活率高且植株生长良好。组培苗移栽基质为园土和珍珠岩体积比1:1最好。在适宜的植物激素配比下,可从合适的半夏外植体上诱导出类原球茎,建立半夏高频再生体系,为半夏的种质资源保存、基因工程育种,药用次生代谢产物的生产等奠定基础。     

唐菖蒲体细胞胚的诱导及植株再生

以唐菖蒲球茎芽切片为外植体,经体细胞胚发生途径,进行胚性愈伤组织诱导、胚状体的诱导、胚状体发育过程及植株再生的研究。胚状体诱导培养基为MS＋2,4-D1.0mg/L＋TDZ0.2mg/L,诱导率为68.3%;将产生的胚状体首先接种于MS培养基使其充分发育,之后转入MS＋6-BA2.0mg/L培养基中诱导发芽,在转入MS培养基中使其形成完整植株。采用石蜡切片法和临时压片法对胚状体的发育过程进行了观察发现,首先外植体表层薄壁细胞经脱分化恢复分生能力,形成愈伤组织,随后在愈伤组织表面形成许多瘤状突起即胚性细胞团,胚性细胞团继续发育成球形胚、盾形胚,最后发育成熟形成完整植株。     

蓝莓丛生芽的诱导及植株再生

利用蓝莓的茎段作为外植体,在添加各种激素的培养基上培养,研究蓝莓茎段离体繁殖影响因素,筛选出蓝莓离体最佳增殖和生根培养基及培养条件.结果表明:在MS 2mg/L ZT 0.2mg/L NAA的增殖培养基上,经过两次继代培养后蓝莓的增殖系数可达到30～50倍左右,在1/2 WPM 0.5 mg/L IBA的生根培养基上单株试管苗平均可产生7.5条根系,生根率可达到95%以上,通过炼苗和移栽试管苗的成活率可达95%左右,从而建立了蓝莓工厂化育苗技术体系,为蓝莓产业的发展提供了充足的优良种苗.     

二乔刺槐愈伤组织诱导及植株再生研究

以二乔刺槐的幼嫩茎段为外植体进行愈伤组织诱导及植株再生研究。结果表明：二乔刺槐茎段诱导愈伤组织的最适培养基为MS+IBA0.2mg/L+BA3.0mg/L,愈伤组织芽诱导的最适培养基为MS+IBA 0.1 mg/L+BA 5.0 mg/L,根诱导培养基为1/2MS+ IBA 0.4mg/L。     

白芨愈伤组织诱导及植株再生

白芨,兰科植物,多用于药用和观赏,市场需求较大。为了解决白芨资源短缺、繁殖周期长等问题。以白芨种子为外植体,在1/2MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/LNAA液体培养基中悬浮培养20 d后,以白芨膨大的种子为材料,利用植物组织培养技术,研究不同植物生长调节剂对白芨愈伤组织诱导、增殖和分化的影响,建立白芨愈伤组织诱导及植株再生体系。结果表明,白芨愈伤组织诱导和增殖的较优培养基为MS+1 mg/L6-BA+2 mg/L 2,4-D,诱导率为93.24%,增殖倍数可达到4.17倍。白芨愈伤组织分化的较优培养基为MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,分化率为36.50%,将不同的愈伤组织进行分类,分化率最高可达到77.15%。生根的较优培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.8 mg/L NAA,生根率为86.28%。通过愈伤组织诱导建立再生体系,为白芨遗传转化和人工繁育提供了依据。     

大花萱草不定芽直接诱导和植株再生的研究

本研究旨在不通过愈伤途径,直接诱导大花萱草不定芽,并建立相应的植株再生技术体系。实验以大花萱草‘32-1’幼芽为外植体,配制不同激素和活性炭的培养基,考察各因素对大花萱草植株再生的影响。结果表明：不同激素配比对大花萱草‘32-1’初代培养、继代增殖和生根培养影响差异显著。最适初代培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L,启动率和增殖系数分别是100.00%和5.60,可直接诱导出不定芽;最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,增殖系数为3.47;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 1 mg/L+AC 2 g/L。     

钩藤愈伤组织的诱导与植株再生

为了建立钩藤愈伤组织诱导与植株再生体系。以药用植物钩藤[Uncaria rhynchophyllai (Mip.)Jack]嫩茎、嫩枝、嫩叶为外植体,通过优化激素组合,进行愈伤组织诱导和分化、幼苗生根和移栽,初步建立了钩藤愈伤组织诱导和植株再生体系。结果表明,以钩藤嫩枝作为外植体出愈情况较好,污染率低,继代后愈伤组织生长快。培养基成分为WPM+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA较适宜愈伤组织的诱导和增殖,诱导率可达83.3%。培养基成分为WPM+2.0 mg/L KT+0.2 mg/L NAA能分化出芽,愈伤组织率分化率达到82.3%;而1/2WPM+1.0 mg/L IBA适宜于试管苗生根,生根率达92.0%。以钩藤嫩枝为外植体诱导获得了质量良好的愈伤组织,并成功再生成植株,结果的获得可为解决钩藤人工栽培过程的资源和品质问题以及进行细胞培养和分子遗传改良奠定基础。     

四倍体菘蓝毛状根的诱导及其植株再生

利用发根农杆菌A4和R1000感染四倍体菘蓝子叶,毛状根诱导频率和得根率分别达72.5%和27%以上.A4诱导四倍体菘蓝毛状根优于R1000,光照对毛状根的诱导起着重要作用,外源激素IAA能明显地促进毛状根的诱导作用.rolB、rolC基因的PCR分析表明,Ri质粒中的T-DNA片段已整合到毛状根细胞基因组中.毛状根能在不含激素的MS固体培养基上分化出不定芽,6-BA能促进毛状根不定芽的诱导;NAA促进不定芽生根,再生完整植株.