动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究Ⅰ．分泌抗大肠杆菌O157：H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

将E．coli O157：H7（EHEC—O157：H7）用甲醛灭活、超声破碎,免疫BALB／c小鼠,制备免疫脾细胞;与SP2／0骨髓瘤细胞融合后,获得7株分泌抗E．coli O157：H7单克隆抗体（mAbs）的杂交瘤细胞株,分别命名为F5、B8、E7、G9、G11、F1和C3,Ig亚类分别是IgG2ak、IgG2aK、IgG1K、IgMK、IgMh、IgMK和IgG2aK。用间接ELISA检测,E7和F1细胞培养上清液的效价为1．6×10^3,腹水效价均为1×10^11;C3、F5、B8、G9和G11细胞培养上清液的效价为1×10～2×10^2,腹水效价均为1×10^3。相加ELISA结果显示,F1、G9和G113株mAbs对应相同的抗原表位,而其它4株对应不同的抗原表位。用间接ELISA分析特异性,7株mAbs与某些其他血清型的大肠杆菌有交叉反应。Westernblotting表明,c3、E7和F13株mAbs在蛋白分子量28×10^3处有特异性条带,而其它4株mAbs则未显示蛋白带。     

几种糖业有机物料对蔗田土壤微生物数量的影响

采用尼龙网袋法研究了几种糖业有机物料（蔗叶、蔗根、宿根蔗头、糖厂滤泥和酒精废液）对蔗田土壤微生物数量的影响,探讨不同有机物料对蔗田土壤微生物的作用效应。结果表明：8次采样蔗叶、蔗根、宿根蔗头、糖厂滤泥、酒精废液、对照（不加物料）处理的细菌数量平均值分别为5．75×10^6、8．01×10^6、11．99×10^6、59．55×10^6、14．3×10^6、1．09×10^6个／g干土,放线茵数量平均值分别为0．436×10^6、1．138×10^6、1．096×10^6、6．349×10^6、3．433×10^6、0．185×10^6个／g干土,真菌数量平均值分别为0．433×10^6、2．312×10^6、2．015×10^6、1．973×10^6、0．487×10^6、0．069×10^6个／g干土。说明糖业有机物料能增加土壤微生物数量,与蔗叶、蔗根、宿根蔗头相比,施用糖厂有机废料（滤泥或酒精废液）能使土壤细菌及放线菌数量明显增多,而对真菌的影响则以蔗根和宿根蔗头更有效。     

慢病毒载体介导外源基因在不同细胞及鸡体不同组织中的表达

以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为标记基因构建复制缺陷型慢病毒载体生产病毒,以病毒感染不同来源、不同分化特征的细胞,并进行鸡囊胚注射,观测外源基因的表达情况。试验结果表明,在所有类型细胞中均可检测到EGFP较高水平的表达,其中在HeLa、293FT细胞中的转染效率约1×10^8TU·mL^-1（TU：转染单位）,在C127细胞中为5×10^7TU·mL^-1,在鸡胚胎成纤维细胞（CEF）中约为1×10^6TU·mL^-1,病毒在鸡原生殖细胞（cPGC）中转染效率最低为1×10^2TU·mL^-1。病毒的感染可引起细胞表型的不利改变。用该病毒载体注射鸡囊胚获得了可直接活体观察绿色荧光信号的转基因鸡,转基因效率约53％;外源基因在鸡体不同组织如表皮、消化道等器官中检测到不同水平的表达,并表现出不同的分布特征。     

大黄鱼溶藻弧菌外膜蛋白ISCOMs的免疫效果初步研究

以溶藻弧菌外膜蛋白为模式抗原,制备其ISCOMs,免疫大黄鱼,进行安全和免疫力试验测定,结果显示溶藻弧菌外膜蛋白ISCOMs安全、纯净;免疫组菌体凝集效价比对照组高,但免疫组个体间有差异,而免疫组的血清ELISA抗体水平明显高于对照组;攻毒试验组（O．3×10^7个·尾^-1）存活率可达100％,对照组（0．3×10^7个·尾^-1）存活率为20％;试验表明溶藻弧菌外膜蛋白ISCOMs安全,免疫大黄鱼后可产生免疫保护力。     

地衣芽孢杆菌和荚膜红假单胞菌对异育银鲫鱼种非特异性免疫机能的影响

本试验主要研究芽孢杆菌和光合细菌对异育银鲫鱼种血液白细胞数量、白细胞吞噬活性及血清溶菌酶活性的影响。600尾异育银鲫鱼种,随机分成9个试验组,一个对照组,每组设一平行。试验组在水中添加不同浓度（5×10^8、5×10^9、5×10^10 CFU／m^3）的芽孢杆菌和光合细菌及两种菌1：1的混合制剂,饲养49d后,测定异育银鲫血液白细胞数目、白细胞的吞噬活性、血清溶菌酶活性等各项免疫指标。试验结果表明：光合细菌、芽孢杆菌及其1：1的混合制剂均能提高异育银鲫鱼种血液中白细胞的免疫机能,其中混合制剂作用效果最佳,其次芽孢杆菌,效果最差的是光合细菌,且在5×10^8、5×10^9、5×10^10 CFU／m^3。浓度范围内,微生态制剂的作用效果随着添加量的增加而增加。     

流动注射化学发光法测定水中的甲萘威

在酸性介质中硫酸铈与甲萘威作用,有微弱的发光现象,基于罗丹明B对该发光反应有明显的增敏效果,结合流动注射技术建立了一种测定甲萘威的简便快捷灵敏的方法。该方法的检出限为5．6×10^-9mol／L,线性范围是2．0×10^6～1．0×^10^-4～mol／L。对1．0×10^-5mol／L的甲萘威进行了11次连续平行测定,相对标准偏差为1.8％。对饮用水源中甲萘威的测定,回收率为95．4％～104．0％,其结果令人满意。     

地衣芽孢杆菌和荚膜红假单胞菌对异育银鲫鱼种非特异性免疫机能的影响

本试验主要研究芽孢杆菌和光合细菌对异育银鲫鱼种血液白细胞数量、白细胞吞噬活性及血清溶菌酶活性的影响。600尾异育银鲫鱼种,随机分成9个试验组,一个对照组,每组设一平行。试验组在水中添加不同浓度（5×10^8、5×10^9、5×10^10 CFU／m^3）的芽孢杆菌和光合细菌及两种菌1：1的混合制剂,饲养49d后,测定异育银鲫血液白细胞数目、白细胞的吞噬活性、血清溶菌酶活性等各项免疫指标。试验结果表明：光合细菌、芽孢杆菌及其1：1的混合制剂均能提高异育银鲫鱼种血液中白细胞的免疫机能,其中混合制剂作用效果最佳,其次芽孢杆菌,效果最差的是光合细菌,且在5×10^8、5×10^9、5×10^10 CFU／m^3。浓度范围内,微生态制剂的作用效果随着添加量的增加而增加。     

超声诊断肝硬化门静脉高压脾肾分流1例

1病例 患者,女,40岁,因“腹胀、纳差、肝功能异常”来诊。有血吸虫病史。化验检查：直接胆红素28．3μmol／L,间接胆红素40．8μmol／L,总胆红素69．1μmol／L,总蛋白54．7g／L,白蛋白27．3g／L,A／G比例1．0,白细胞2．08×10^9／L,红细胞2．36×10^12／L,血小板28．6×10^9／L。     

环磷酰胺免疫抑制法制备单克隆抗体的研究

 采用纯化的鸡IgG免疫环磷酰胺预处理BALB/c小鼠后，再用亲和层析纯化的鸡IgM进行免疫，运用淋巴细胞杂交瘤技术，以间接ELISA法筛选，获得了5株能稳定地分泌抗鸡IgMμ链特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。经ELISA交叉反应性试验和羊抗鸡IgMμ链抗血清阻断试验，证明这5株单克隆抗体均是抗鸡IgMμ链特异性的。采用环磷酰胺免疫抑制法制备单克隆抗体，其杂交瘤细胞阳性率为8.696%,而用常规免疫法为4.032%,前者比后者杂交瘤细胞阳性率提高1倍以上。经两次有限稀释法克隆和比较后，免疫抑制法获得5株单克隆抗体，而常规免疫法只获得2株单克隆抗体，前者有3株单克隆抗体腹水ELISA效价达到10#+（-12）、10#+（-14）、10#+（-15）；后者单克隆抗体腹水ELISA效价为10#+（-5）和10#+（-6）。因此，与常规免疫法相比，环磷酰胺免疫抑制法制备单克隆抗体具有杂交瘤细胞阳性率高，分泌的单克隆抗体特异性强、滴度高等优点，值得推广。     

大菱鲆出血性败血症病原菌的分离与鉴定

从全身呈弥漫性出血的养殖大菱鲆Scophthalmus maximus肝脏、腹水和肾脏中分离到3株菌落形态相同的优势菌,取菌株L一59231通过注射（菌液浓度分别为4×10^8、5×10^7cfu／mL,剂量0．1mL／尾）、灌喂（4×10^6cfu／mL,0．5mL/尾）和创伤浸泡（4．7×10^5cfu／mL）三种途径对大菱鲆进行人工感染试验。结果表明：以上三种途径均可造成大菱鲆的发病,灌喂感染和创伤浸泡对试验鱼的感染率为100％和57．1％,未发现死亡;注射感染的死亡率分别为100％和71．4％。药敏试验表明,庆大霉索、四环索、氯霉素、红霉素、链霉素等对L-59231菌株有较强的抑制作用。该菌呈短杆状,革兰氏染色阴性,氧化酶阳性,接触酶阴性,V—P试验阴性,硝酸盐还原反应阳性。根据《常见细菌系统鉴定手册》所描述的弧菌属的生理生化特性,综合形态观察、生理生化特征、16SrRNA基因序列等试验结果,可将L-59231菌株鉴定为创伤弧菌。