益生菌与ND疫苗协同对雏鸡局部黏膜组织抗体生成细胞数量的影响

为探明益生菌能否增强新城疫(newcastle disease,ND)疫苗局部黏膜组织的免疫效果,雏鸡分别于ND疫苗免疫后第0,7,14,21天及新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)攻击7d后或死亡前,采用免疫组织化学方法测定盲肠扁桃体、哈德氏腺和十二指肠派伊尔结的IgA,IgM,IgG抗体生成细胞数量的动态变化.结果发现:益生菌协同ND疫苗组雏鸡局部黏膜的IgA,IgM,IgG抗体生成细胞数量分别在免疫后7d明显高于ND疫苗单独免疫雏鸡(P<0.05);NDV攻击后,益生菌ND疫苗免疫雏鸡的局部黏膜组织抗体生成细胞数量无统计学差异(P>0.05),表明益生菌是疫苗的理想佐剂之一.     

雏鸡新城疫免疫后体液中Ig含量和HI滴度的动态变化

本研究对健康２周龄雏鸡ＮＤ免疫后血清、泪液、气管液、胆汁、肠液中ＩｇＭ，ＩｇＧ，ＩｇＡ含量和血清、泪液、气管液中ＨＩ抗体滴度进行了检测．结果表明，健康雏鸡１次ＮＤ免疫后其上述指标均升高，２次免疫后进一步升高．说明健康雏鸡ＮＤ免疫后，其全身和呼吸道、消化道局部都呈现明显的体液免疫应答，２次免疫后应答反应增强．     

切除哈德氏腺雏鸡眼区局部对新城疫疫苗免疫反应

６０只１日龄肉雏鸡平均分成Ａ、Ｂ、Ｃ三组。Ａ组于１日龄手术切除哈德氏腺,１２日龄时Ａ、Ｂ两和新城疫疫苗点眼,Ｃ组为非免疫对照组。２３日龄时,采集泪液和血清做血凝抑制（ＨＩ）试验,同时采取哈德氏腺、结膜结合淋巴组织（ＣＡＬＴ）和泪腺做组织切片。结果,Ａ组血清抗体水平与Ｂ组相当,泪液则显著降低,但比Ｃ组高得多。Ｂ组泪液抗体效价比血清高,差异极显著。组织学观察,Ａ组泪腺上皮下有明显的淋巴小结,少数雏鸡原     

氮酮对鸡嗉囊粘膜结构及新城疫疫苗免疫效果的影响

用含氮酮的新城疫(ND)疫苗进行免疫,通过组织学检查和血清ND H I抗体检测,研究了氮酮对鸡嗉囊粘膜结构及ND疫苗免疫效果的影响.结果表明:用含氮酮的ND疫苗免疫后,鸡嗉囊粘膜复层扁平上皮结构由致密变得疏松乃至部分上皮脱落,其H I抗体明显高于对照组,差异极显著.表明氮酮可引起嗉囊粘膜结构变化,促进ND疫苗的吸收,从而增强疫苗免疫效果.     

新城疫疫苗对雏鸡支气管结合淋巴组织形态发育的影响

５０只１日龄雏鸡随机分成数量相等的免疫组和非免疫组,免疫组雏鸡于１日龄用鸡新城疫Ⅱ（ＮＤⅡ）系弱毒疫苗免疫,晨免疫组雏鸡不免疫。定期收集免疫组和对非免疫组雏鸡肺脏和支气管,制做石蜡切片,苏木素伊红（ＨＥ）、阿尔森蓝－过碘酸雪夫氏和生非特异酯酶染色,经组织学观察,免疫组雏鸡支气管结合淋巴组织比非免疫组雏鸡的发生早、生长快、体积大、淋巴细胞数量多,ＢＡＬＴ中有ＡＮＡＥ阳性淋巴细胞,此结果证明抗原刺激能     

新城疫免疫雏鸡免疫球蛋白的形成动态

本实验以单向环状免疫扩散试验（ＳＲＩＤ）为检测手段，对以点眼和滴鼻途径接种新城疫Ｂ＿１系疫苗的无特定病原（ＳＰＦ）雏鸡（１日龄首免、１４日龄二免）进行免疫球蛋白消长规律的测定，力图为制定合理的免疫程序提供理论依据。实验结果表明：无论是免疫组，还是对照组，其血清免疫球蛋白Ｇ（ＩｇＧ）含量的动态变化均呈现１个波峰和１个波谷。刚孵出时为２．３９±０．５０ｍｇ／ｍｌ，４日龄时达最高值，但３～４周龄时迅速下降到最低值（此时免疫组和对照组ＩｇＧ含量呈现极显著差异，其余检测日龄差异均不显著），其后又逐渐回升。     

新城疫疫苗点眼对雏鸡结膜结合淋巴组织的影响

用鸡新城疫Ⅱ（ＮＤⅡ）系弱毒疫苗点眼免疫１日龄雏鸡，定期收集免疫组和对照组雏鸡泪液，血清做微量血细胞凝集抑制（ＨＩ）试验。同时，采取雏鸡下眼睑做宏观美兰和ＨＥ染色，疫苗点眼后，经眼观和组织学观察，免疫级雏鸡比对照组鸡的结膜结合淋巴组织（Ｃｏｎｊｕｎｃｔｉｖａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｙｍｐｈｏｉｄｔｉｓｓｕｅ，ＣＡＬＴ）发生早，生长快，淋巴细胞数量多，此结果证明抗原刺激能促进ＣＡＬＴ的发育成熟，通过     

鸡新城疫抗原抗体复合物疫苗的研究

用中等毒力新城疫（ND）-Roakin株病毒作为抗原,与ND抗体配制不同比例的复合物,并在37℃感作不同的时间,分别配制复合物疫苗1和复合物疫苗2,用无特定病原菌（SPF）鸡进行免疫对比试验。试验鸡随机分为4组,饲养在隔离器中,除对照组外,试验1、2、3组分别在20日龄接种复合物疫苗1,复合物疫苗2和常规Roakin活疫苗。各组从免疫后第1周起至第7周,每周采血,用HI试验检测血清中ND抗体水平,70日龄时用北京株ND强毒进行攻毒试验,第1、2组在接种疫苗后,有个别鸡出现轻微喘气或羽毛蓬松的症状,2-3d后好转;第3组接种疫苗后,鸡群100%发病,呈典型ND症状,约1周后康复,无鸡只死亡;对照组的鸡群一直保持健康状态。第1、2、3组的抗体水平分别在免疫后的2、3、2周达到高峰,HI效价分别为1：2^9,1:2^8.5和1：2^10,在第7周分别下降为1：2^6.07,1:2^6.07和1：2^7,而对照组的HI效价一直在1：2^2左右。攻毒后,对照组死亡率为100%,第1、2、3组分别为13.3%,6.7%和6.7%。试验结果提示：用中等毒力的NDV和ND抗体配制成抗原抗体复合物疫苗,可以大大减轻疫苗的毒副作用。在保持疫苗良好免疫原性的同时,提高了疫苗的安全性。     

新城疫La Sota疫苗对不同基因型流行株的免疫保护

选取国内2001—2003年发生的5株NDV毒株,经CEF蚀斑纯化和SPF鸡胚增殖,克隆其融合蛋白（F）和血凝素—神经氨酸酶（HN）基因。利用F基因为Ⅱ型的疫苗La Sota活疫苗在隔离器中免疫SPF鸡,每7 d 采血监测NDV抗体,免疫后2周,利用经过鉴定的新城疫病毒（NDV）基因Ⅶ流行株潍坊毒SGM01,昌乐毒SCL03,东营毒SKY和莘县毒SSX03;基因为Ⅱ型日照毒SRZ03和基因为Ⅲ型经典强毒F48E9分别进行攻毒试验,同时设SPF 鸡对照。每天观察,及时剖检发病鸡,检查鸡群病变,观查疫苗的保护性,便于对常规生产中的免疫失败原因进行分析。     

新城疫病毒HN蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

【目的】应用酵母双杂交技术构建新城疫病毒的血凝素-神经氨酸酶(HN)蛋白线性中和表位区的诱饵载体pGBKT7-HN-neu,为筛选靶向新城疫病毒HN蛋白的中和性纳米抗体奠定基础。【方法】合成HN蛋白的线性中和表位区HN-neu,将其克隆至酵母双杂交系统诱饵载体pGBKT7中,构建诱饵载体pGBKT7-HN-neu,经酶切鉴定和测序验证正确后,将pGBKT7-HN-neu转化酵母菌Y2H Gold,检测其在酵母细胞中的毒性和自激活作用。【结果】成功合成了HN-neu,构建的pGBKT7-HN-neu在酵母细胞Y2H Gold中无毒性和自激活能力。【结论】成功构建了诱饵载体pGBKT7-HN-neu。     

中药复方抗鸡新城疫作用及其对雏鸡免疫内分泌调节的影响

为筛选抗鸡新城疫中药复方并观察中药复方对雏鸡免疫内分泌调节的影响,将152羽30日龄健康免疫雏鸡随机分为5组:3个中药复方组(方1、方2、方3)、病毒对照组和空白对照组.人工感染鸡新城疫病毒(NDV)后,观察鸡群的发病情况,并于试验各期随机心脏采血,测定外周血淋巴细胞转化和血清抗体、白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)、甲状腺素(T4)及胰高血糖素(Glu)的水平.结果表明:中药复方能延缓鸡新城疫的发病时间,减轻病理损伤,促进病鸡康复,有效降低鸡的死亡率,尤以方3效果最好.方1和方3能快速提高抗体水平;方1能提升血清IFN-γ和T4的水平,方2能提高血清IL-2的含量,方3则可提高血清IL-2、IL-6和T4的水平,3个中药复方都可降低鸡死亡高峰期血清IL-6和Glu的水平.研究表明,中药复方能快速刺激免疫鸡体内体液免疫应答,并通过免疫内分泌整体调节途径以抵抗NDV感染,不同组方原则的复方调节途径可能也不一致,但方3的效果整体上优于方1和方2.     

银杏叶提取物对肉仔鸡免疫器官指数及消化道局部体液 免疫球蛋白含量的影响

为研究银杏叶提取物(EGB)对肉仔鸡免疫器官指数及消化道局部体液免疫球蛋白含量的影响,选用360只1日龄健康AA肉用母雏,随机分成5组,每组6个重复,分别饲喂添加0、0.15%、0.20%、0.25%EGB或90 mg.kg-1金霉素的玉米-豆粕型日粮,试验期为42 d。结果表明,添加0.20%、0.25%EGB可显著提高42日龄肉仔鸡脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数(P<0.05),提高胆汁和肠液IgA、IgG、IgM含量(P<0.05),并且作用效果好于金霉素组(P<0.05)。可见,在该试验条件下,日粮中添加0.20%、0.25%EGB可促进肉仔鸡免疫器官的生长发育,提高消化道局部黏膜的体液免疫反应水平。     

农凤鸡新城疫与禽流感母源抗体的衰减规律研究

[目的]研究农凤鸡新城疫和禽流感母源抗体的衰减规律,为农凤鸡新城疫(ND)和禽流感(AI)的预防提供依据。[方法]通过血凝抑制(HI)试验对1~37日龄的农凤鸡进行新城疫和禽流感(H5和H9)母源抗体水平的检测,研究农凤雏鸡ND和AI母源抗体的衰减规律。[结果]AI H5母源抗体水平较低,AI H9和ND的母源抗体水平相对较高,但都在3~5日龄出现高峰,此后随着日龄的增长,抗体水平逐渐下降。[结论]农凤鸡AI H5的首免日龄推荐为5~8日龄,AI H9和ND的首免日龄推荐为7~12日龄。     

鸡新城疫病毒感染不同细胞的病变特性研究

为了探讨鸡新城疫病毒(Newscastle disease virus,NDV)感染不同细胞的病变特性,选用NDV强、弱毒株感染鸡胚成纤维细胞(DF-1)、仓鼠肾细胞(BHK-21)和人宫颈癌细胞(HeLa).结果表明:NDV强毒株在DF-1、BHK-21、HeLa上均能增殖,在DF-1、BHK-21、HeLa上产生的细胞病变(cytopathic effect,CPE)以发生细胞融合和形成合胞体为主要特征,在DF-1上增殖速度较快,HA效价也高;NDV弱毒株含10μg/mL胰蛋白酶的DMEM培养基上,DF-1、BHK-21、HeLa可引起细胞变圆、脱落,没有典型的CPE,盲传15代CPE特征未发生改变,血球凝集(HA)效价较低.可见,NDV在其种属来源相同的DF-1中更适宜增殖,DF-1可用作NDV感染的最佳细胞模型.     

鸡IL-18对IBDV多聚蛋白DNA疫苗的免疫增强作用研究

    为进一步评价鸡IL-18的免疫增强作用,用鸡白细胞介素18(IL-18)的真核表达质粒(pCI-IL-18)与传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白DNA疫苗分别免疫SPF鸡,14日龄时首免,2周后二免,二免后5周用IBDV标准强毒株BC6/85攻击.研究发现,鸡IL-18能显著促进T、B淋巴细胞的增殖反应,增强IBDV多聚蛋白DNA疫苗诱导的中和抗体水平及其对强毒攻击的保护力.结果提示,鸡IL-18(200 μg)对IBDV多聚蛋白DNA疫苗具有显著的免疫增强作用(P＜0.05).