WY14643对小鼠早期胚胎抗氧化损伤的影响

旨在研究WY14643对小鼠早期胚胎发育的影响,探讨WY14643对早期胚胎抗氧化损伤的机理。通过H2O2诱导建立胚胎氧化损伤模型,添加WY14643对胚胎进行体外培养,DCHFDA测定胚胎内部H2O2含量,分别用超氧化物歧化酶(SOD)和微量丙二醛试剂盒测定胚胎不同发育阶段SOD活性和丙二醛MDA含量,并观察后续胚胎发育情况。结果表明:(1)不同浓度WY14643处理2h后,0.1μmol·L-1 WY14643处理组4-细胞率、囊胚率显著高于其他各组(P<0.05);(2)经0.1μmol·L-1 WY14643和H2O2联合处理后,其胚胎发育率显著高于单独H2O2处理组和对照组(P<0.05);(3)DCHFD荧光检测发现,WY14643添加组胚胎内部H2O2水平显著低于其他各组(P<0.05);(4)经SOD、MDA检测,发现添加WY14643胚胎内部各时期SOD水平显著高于其他各组(P<0.05),MDA水平显著低于其他各组(P<0.05)。综上表明,氧化应激对早期胚胎发育是不利的,WY14643通过增加抗氧化酶SOD活性、降低脂质损伤等途径减少胚胎内部ROS,增加抗氧化能力,促进胚胎在体外更好地发育。     

活性氧(ROS)对小鼠早期胚胎染色体相对长度的影响

通过对小鼠体内发育的囊胚、扩张囊胚和从1-细胞期取出在CZB培养液中培养的囊胚、扩张囊胚的染色体相对长度进行统计分析,在各号染色体相对长度出现显著性差异的同时,发现体外培养的比体内发育的染色体相对长度短;体外CZB培养的不同时期添加外源性过氧化氢,发育至囊胚、扩张囊胚阶段,制作胚胎标本,观察胚胎的染色体相对长度。结果表明:不同时期添加外源性过氧化氢组比对照组的染色体相对长度短。说明经过氧化氢处理之后存活下来的胚胎染色体相对长度发生了变化。     

排卵不同阶段氯胺酮麻醉对昆明小鼠卵母细胞和早期胚胎的影响

主要研究排卵不同阶段氯胺酮III期麻醉深度对昆明小鼠卵母细胞和早期胚胎的影响。结果表明:排卵前麻醉(150mg/kg体重)造成卵母细胞和早期胚胎数量的极显著下降(P<0.01),而排卵期间麻醉及排卵后麻醉对排卵及早期胚胎数量影响不显著(P>0.05),排卵不同阶段麻醉均造成一定数量异常卵母细胞和非正常胚胎出现。因此,排卵期间麻醉小鼠相比排卵前及排卵后麻醉小鼠对卵母细胞和早期胚胎的影响最小,但仍有可能造成卵母细胞异常、胚胎畸形的发生。     

影响胚胎早期发育环境因素的研究进展

妊娠期生理状态的改变,使母体对治疗药物和各种环境有害物质的吸收、分布和排泄发生了较大的改变。在发育初期,胚胎对治疗药物和环境因素的影响极为敏感,此时各种有害因素都可导致胚胎的损伤,甚至丢失。许多药物和环境因素是引起早期胚胎死亡或胎儿畸形的主要因素。环境类激素可直接作用于中枢神经内分泌调节系统,引起生殖激素分泌紊乱,出现生殖率下降和胚胎发育异常。重金属铅、镉、汞、砷可导致早期胚胎的丢失,或使胎儿出现畸形。对于药物和环境因素对胚胎发育的毒性评估,妊娠动物服用的剂量对妊娠结果仍然是最基本的方法,而用BBDR模型来反映药物在低剂量情况下的作用以及在种间变化是近年来常用的模型。另一方面,细胞和分子的水平上观察环境毒物造成畸胎发生的机理也是活跃的研究领域。     

非电泳法PCR牛早期胚胎性别鉴定研究

为选出更高效、实用的牛胚胎性别鉴定方法，分别用成年牛血样提取的基因组DNA和冷冻的牛早期胚胎细胞DNA为样本，以电泳法和非电泳法用相应的性染色体DNA引物做胚胎PCR性别鉴定实验，以相对比。血液模板DNA结果与胚胎样本结果都表明，使用DYZ-1引物的非电泳法在比使用SE引物的电泳节约1h以上时间的同时，具有比SE更高的灵敏度。这次研究在我国首次成功地把非电泳PCR法应用到牛胚胎性别鉴定之中，减少了胚胎性别鉴定的操作步骤，并大大缩短了性别鉴定所需要的时间，从而使胚胎移植现场性别鉴定更加可行。     

影响奶牛早期胚胎死亡的病因探析

本文从三个方面综述了导致早期胚胎死亡原因,即母体因素、胎儿因素和环境因素。三者相互作用,使临床上的病因确定十分困难。深入了解和探讨相关因素对早期胚胎的影响,有利于提高对EED的认识,并为提高奶牛繁育技术水平、制定和实施及时有效的奶牛繁殖障碍性疾病的临床防制对策提供一些理论参考。     

表皮生长因子对水牛胚胎体外发育及凋亡的影响

为了探讨表皮生长因子(EGF)对水牛早期胚胎体外发育及凋亡的影响,通过收集屠宰场卵巢卵母细胞进行体外成熟和体外受精,将假定的受精卵置于含不同浓度EGF(0,25,50和100 ng/mL)的培养液中培养,检查分裂率和囊胚发育率,用细胞凋亡试剂盒(Annexin-V-FluosStaining kit)试剂染色,统计囊胚细胞凋亡率和坏死率。结果表明:50 ng/mL EGF组的孵化囊胚率显著高于对照组(P<0.05),该组细胞凋亡率和坏死率显著低于对照组(P<0.05)。100 ng/mL EGF的卵裂率、囊胚率、D7囊胚率和孵化囊胚率显著低于对照组和其他试验组(P<0.05)。细胞凋亡率和坏死率显著高于其他各组(P<0.05)。提示:一定浓度的EGF可提高囊胚孵化率,并可抑制胚胎细胞的凋亡。     

胚胎早期死亡的因素分析

引起胚胎早期死亡的因素很多。如配子发生过程中的潜在异常、胚胎内在缺陷、母胎识别建立的失败、母体环境异常等。本文从配子发生、胚胎发生、母胎关系建立、母体环境等方面对胚胎早期死亡的因素进行分析。     

哺乳动物早期胚胎中的基因表达

本文总结最新的相关研究资料,对影响早期胚胎发育中的基因表达进行综述,主要包括原癌基因、Xist基因、性别决定基因、生长因子、生长发育及凋亡调节基因、白血病抑制因子等。     

小鼠早期胚胎发育过程中的DNA去甲基化

表观遗传修饰在基因转录与表达、细胞生长与分化以及动物个体正常发育等过程中都具有重要的调控作用。表观遗传修饰发生异常,会引起机体生长发育中的各种异常。哺乳动物从精卵受精到附植前的胚胎早期发育阶段会发生重要的表观遗传重编程,主要包括DNA甲基化和组蛋白修饰。精卵受精后DNA发生主动和被动2种方式的去甲基化。本文主要综述了与DNA甲基化相关的蛋白和早期胚胎发育过程中的去甲基化机制,并对小鼠附植前胚胎发育过程中的DNA甲基化的动态变化进行了详细的论述。     

奶牛早期胚胎死亡的原因分析

奶牛早期胚胎死亡是奶牛不孕症的重要原因之一。发生在奶牛等家畜的胚胎死亡是繁殖率降低和造成经济损失的重要原因,因为胚胎死亡可延长产犊间隔,并且还可因胚胎死亡或隐性流产后不易发现而错过下一个情期。奶牛在一次配种或授精后大约有90％的卵子可以受精,但却只有约55％的牛产续,也就是说,在整个妊娠过程中约有35％的受精卵损失,其中约28％的损失发生在受精后的25天内,特别是17天前,主要发生在配种后8～17天,另有7％的损失发生在胚胎晚期或以后的其它时间。引起奶牛早期胚胎死亡的原因很复杂,其具体机理还没有搞清楚,但是近年…     

影响胚胎早期发育环境因素的研究进展

母体妊娠期的组织器官对各种物质的代谢发生明显改变，对外界环境因素的影响极为敏感。此时各种有害因素都可能引起胚胎的损害，特别是胚胎发育初期。本文就多年来国内外学者对环境因素对胚胎发育初期的危害、机理和后果的研究现状进行综述。     

不同共培养体细胞和胎牛血清浓度对牛体外受精后早期胚胎的影响

利用屠宰黄牛的卵母细胞经体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)后的早期胚胎,与单层颗粒细胞(GC)、输卵管上皮细胞(BOEC)等体细胞共培养及在胎牛血清的胚胎培养液中的后续发育进行了研究,并探讨了其影响因素,以期筛选出最佳的体外培养条件。结果表明:使用GC和BOEC体外共培养牛体外受精后胚胎,均取得了较好的囊胚发育率;且牛体外受精后早期胚胎体外培养体系中,添加10%血清能有效地促进牛体外受精后胚胎的囊胚率。     

热应激对小鼠附植前早期胚胎HSP70的诱导表达

选择超数排卵后怀孕昆明小鼠75只,以注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)后的胚胎发育阶段为标准,分别在合子、2细胞、4细胞、8~16细胞和囊胚期对孕鼠进行了37℃、39℃、41℃和43℃热应激4 h。热应激后取胚,用免疫荧光细胞化学法检验胚胎热休克蛋白70(HSP70)的诱导表达。结果表明,HSP70在4细胞以上胚胎内呈阳性表达,相对高温时其表达量增加,囊胚时最显著。可见,附植前早期胚胎HSP70的热诱导表达与细胞期和温度密切相关。     

NO在小鼠早期胚胎吸收过程中的作用

给妊娠 7d小鼠尾静脉注射细菌脂多糖 (L PS)诱导早期胚胎吸收。注射 L PS后 12、2 4、36 h,以 EL ISA、比色法检测血清和子宫匀浆中 Th1型细胞因子 IFN- γ、IL- 12与 NO的含量变化 ;免疫组织化学法观察 3种一氧化氮合酶(n NOS,e NOS,i NOS)和 Th2型细胞在小鼠子宫表达的变化。此外 ,还观察了 NO供体硝普钠 (SNP)诱导孕鼠流产效果及氨基胍 (AG)对抗 L PS诱导孕鼠流产的效果。结果显示 ,相对于正常妊娠组 ,L PS处理组孕鼠子宫匀浆 NO含量及 IFN- γ、IL- 12水平极显著升高 (P<0 .0 1) ,血清 NO含量也极显著升高 (P<0 .0 1) ;n NOS、i NOS在 L PS处理组小鼠子宫可见阳性标记 ,而 e NOS未见阳性标记 ;大量 Th2型阳性细胞标记仅在正常妊娠组小鼠子宫内膜基质可见 ,L PS处理组未见阳性细胞。腹腔注射 SNP致使孕鼠早期胚胎吸收 ,然而妊娠 6～ 9d腹腔注射 AG却未能降低 L PS诱导的孕鼠早期胚胎吸收。上述结果提示 ,L PS处理后 ,Th1型免疫反应增强 ;源自升高表达的 i NOS的子宫局部高浓度 NO可能作为一种效应分子介导小鼠早期胚胎吸收。     

热休克蛋白对胚胎早期发育的影响

热休克现象是1962年R itossa首先在果蝇幼虫动物试验中发现的。试验发现,果蝇唾液腺染色体在过热环境中会发生形态改变。此现象与细胞中一类特殊蛋白质———热休克蛋白(Heat shock protein,HSP)的合成有关,因其最先在热休克现象中发现而得以命名。热休克蛋白除了因热休克刺激产生以外,还有很多因素(如缺氧、低温、氧化反应、化学物质、各种重金属、放射线、某些线粒体呼吸链抑制剂及某些药物等)都可以诱导产生,因此热休克蛋白又称为应激蛋白质(stress protein)。HSP70和HSP90是分子质量分别在70,90 ku左右的热休克蛋白,是热休克蛋白家…     

牛早期胚胎体外培养的研究进展

本文就目前牛早期胚胎体外培养的常用基础培养液、牛早期胚胎的体外培养方法以及影响牛早期胚胎发育的一些常规添加成分的发展现状做了较全面系统的概括,并指出了体外培养体系的研究价值和意义。     

牛早期胚胎体外培养的研究进展

本文就目前牛早期胚胎体外培养的常用基础培养液、牛早期胚胎的体外培养方法以及影响牛早期胚胎发育的一些常规添加成分的发展现状作了比较全面的概括，并指出了体外培养体系的研究价值和意义。     

以囊胚双重染色方法检测果糖对胚胎早期发育效果的影响

本试验结合囊胚细胞(TCM/TE)双重染色方法研究了果糖代替葡萄糖后对牛早期胚胎体外发育效果的影响。结果显示,对第8d囊胚双重染色时,以TritonX-100处理60-69s为宜,TCM细胞数和囊胚细胞总数分别为48.2±12.4和142.5±30.1,二者之比约为0.33;果糖组与葡萄糖组卵裂率(62.2%±3.87vs61.7%±2.89)、囊胚率(32.1%±1.73vs29.7%±4.16)差异均不显著(P0.05),而且,TCM细胞数(43.6±14.5vs40.2±11.3)和TE细胞数(99.3±26.7vs89.9±24.8)差异也不显著(P0.05)。但是数据显示,囊胚细胞总数果糖组要高于葡萄糖组(142.3±21vs136.2±35,P0.05),说明果糖可以代替葡萄糖作为早期胚胎体外培养的能量代谢底物,而且可以提高囊胚质量。     

哺乳动物附植前胚胎细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡是细胞为维持内环境稳定,更好地适应生存环境而主动形成的一种自我死亡过程,它涉及一系列基因的激活、表达及调控等作用。附植前的胚胎就已经观察到凋亡的发生,研究认为超出一程度的凋亡不利于胚胎的发育。作者主要对哺乳动物附植前胚胎发生凋亡的研究进行阐述,为改进体外培养体系、提高胚胎质量提供一定的理论依据。