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参考GenBank收录的传染性喉气管炎病毒gC基因序列设计并合成一对引物,以ILTV河南长葛株DNA为模板,PCR扩增出一条1270bp的特异性条带,并克隆至pGEM—T载体上。经PCR扩增、酶切鉴定,得到含gC基因重组质粒,并对重组阳性质粒进行序列测定,测序结果为1550bp。 相似文献
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鸡传染性喉气管炎病毒gB基因核酸探针的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
郭霄峰 《华南农业大学学报》1997,18(3):105-109
将插有传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白B(gB)基因的重组质粒pILgB克隆,然后用碱法抽提,乙醇沉淀。质粒pILgB经EcoRI酶切后,用地高辛标记,获得ILTVgB基因的核酸探针。该探针分别与传染性喉气管炎病毒,传染性支气管炎病毒,传染性法氏囊病毒,禽流感病毒,马立克氏病病毒,新城疫病毒核酸斑点杂交,发现只有传染性喉气管炎病毒的核酸有阳性反应,说明该探针对ILTV有高度的特异性。gB基因核酸探针与不同浓度的核酸杂交,能检出0.01μg的核酸,表明该探针高度敏感。实验结果还显示,探针能重复多次使用,检测效果不变。 相似文献
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鸡传染性喉气管炎是由传染性喉气管炎病毒引起的一种急性呼吸道传染病。本病传染性强,传播快,死亡率也较高,是危害养鸡业发展的主要疫病之一。 相似文献
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从河南省长葛、荥阳等地采集的病鸡(临床疑似感染ILTV)喉气管组织中分离得到两株病毒,暂命名为ILTV-CG和ILTV-XY.经人工接种易感鸡,ILTV-CG组于接种后第四天、ILTV-XY组于接种后第三天部分鸡只死亡,并可致死部分鸡胚,绒毛尿囊膜增厚且有大小不等、数量不一的白色痘斑;两株病毒对乙醚、氯仿敏感;在电镜下可观察到六边形、二十面体对称、有囊膜、具空心颗粒的病毒粒子;根据GenBank中收录的ILTV TK基因核苷酸序列,设计一对特异引物,以两病毒株及参考株的DNA为模板进行PCR反应,均扩增出完全一致的特异带,扩增产物用EcoR Ⅰ酶切后的酶切图谱也完全一致.试验结果表明两分离株均为ILTV. 相似文献
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鸡传染性喉气管炎病毒PCR快速检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
根据GenBank发表的传染性喉气管炎病毒(ILTV)TK基因序列(EF552578),设计合成了1对特异性引物,通过优化反应条件,成功地从ILTV疫苗株中扩增出329 bp特异性片段,而传染性支气管炎病毒、新城疫病毒及马立克病毒基因组均未扩增为出相应的片段。回收的PCR产物经EcoRⅠ酶切和测序鉴定,证实了该扩增片段的特异性。PCR检测ILTV DNA的最小检测量为30 pg。经临床初步应用表明,该方法的建立使传染性喉气管炎病毒的检测更为快速、简便、经济和实用。 相似文献
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中药治疗鸡传染性喉气管炎 总被引:1,自引:0,他引:1
阐述了鸡传染性喉气管炎的病原、流行病学、临床症状、病理变化和实验室诊断,提出中药治疗方法,用进口喉炎苗滴眼,再以新发明中药配方拌料喂鸡,疗效显著。 相似文献
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采用原代鸡胚肾细胞增殖鸡传染性喉气管炎病毒用PEG-20000粗提病毒蛋白抗原,建立了用来检测抗ILTV抗体的间接酶联免疫吸际试验。应用该法检测从广西9个大、中型鸡场采集的239份未免疫鸡血清样品,结果血清样品阳性率为45.19%,各个鸡场无 相似文献
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鸡传染性喉气管炎病毒PCR诊断技术研究 总被引:4,自引:0,他引:4
根据传染性喉气管炎病毒 (ILTV)基因的核苷酸序列 ,设计并合成了一对引物 ,以ILTV北京E2株、ILTV山东分离株和 4个发病鸡喉气管组织的DNA为模板 ,利用PCR反应扩增出了一条长 12 0 0bp的核苷酸片段 ,而以正常绒尿膜组织、鸡正常喉气管组织、鸡传支病毒、鸡新城疫病毒感染鸡胚的尿囊膜DNA为模板的PCR扩增反应 ,则为阴性 ,说明该方法对ILTV是特异的。敏感性实验表明 ,该体系可检测到 40pg的ILTV感染鸡胚尿囊膜DNA。对发病鸡不同部位DNA的PCR扩增结果表明 ,喉气管是ILTV的主要增殖部位 相似文献
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<正> 鸡传染性喉气管炎对养鸡业危害严重,虽然能用疫苗预防,但保护率低,用高免血清治疗本病,效果虽好,但费用较高。为此,我们自1990年以来,选用中西药加工配制成“喉瘟散”,对本病进行了治疗试验,效果较满意。一、材料和方法 1.供试鸡及药品“喉瘟散”系本研究室提取加工制成的中西药散剂。供试鸡来自养鸡场或养鸡户自然发病的患鸡。 2.诊断标准患鸡呈现有明显的咳嗽、喘息、张口呼吸、并发出湿性啰音,有时喷有带血粘液等呼吸道症状。剖检可见喉头和气管发红肿胀,并复盖有一层粘液性或纤维素 相似文献