兔支气管败血波氏杆菌的分离与鉴定

对陕西商洛某养殖场病死兔解剖、无菌采取病料,从病料中分离到1株革兰阴性小杆菌,经生物学特性试验和生理生化试验鉴定,为兔支气管败血波氏杆菌.药敏试验结果表明,该分离菌株对环丙沙星、氟哌酸、氧氟沙星等抗生素高度敏感;对氯霉素、红霉素、四环素等抗生素耐药.外毒素试验和动物致病性试验对小白鼠均有致病作用.     

广西猪支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

为掌握广西猪传染性萎缩性鼻炎（AR）发病情况、猪支气管败血波氏杆菌（Bb）流行血清型及耐药情况,分别从广西南宁、上林、贵港、武鸣等地4个规模化猪场和1个屠宰场采集到247份猪鼻腔分泌物样品,径常规细菌分离获得57株Bb可疑菌株,以生理生化试验和PCR鉴定等方法对可疑菌株进行鉴定,并根据O、K抗血清凝集试验进行分型.结果表明,57株可疑菌株均确定为Bb,其中6株为Ⅰ相Bb、14株为Ⅱ相Bb、37株为m相Bb,且Ⅰ相Bb毒力较Ⅱ相、Ⅲ相Bb毒力强;药敏试验结果表明,大多数Bb对复方新诺明、阿米卡星、新霉素、庆大霉素和环丙沙星等高度敏感,对阿莫西林、青霉素、痢特灵、氨苄青霉素、呋喃妥因、头孢氨苄、林可霉素、头孢噻吩、恩诺沙星、万古霉素和利福平等不敏感.     

猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

 【目的】探讨2003～2006年间支气管败血波氏杆菌（Bordetella bronchiseptica,Bb）在中国湖北等十余省市猪群中的流行病学分布和协同感染特性并对部分菌株进行生物学特性研究。【方法】采用病原菌的形态学观察、生化鉴定和PCR鉴定,从2 057份有肺炎或萎缩性鼻炎症状猪的肺脏等病料组织中分离出190株Bb和不同数量的其它共感染菌。经生化鉴定,药敏试验、血凝试验及动物试验等方法进行检测和分析。【结果】在中国湖北等十余省市的猪群中,不同省份Bb的总分离率介于7.3%～14.1%之间;不同年份Bb的总分离率介于7.3%～11.8%之间;2003～2006年间的Bb总分离率为9.2%;Bb的分离率与猪日龄有一定的关系。Bb最常见的共感染菌依次是链球菌（55.9%）、副猪嗜血杆菌（50.0%）、大肠杆菌（43.1%）、巴氏杆菌（25.5%）、绿脓杆菌（17.6%）和沙门氏菌（11.8%）。在43份有典型萎缩性鼻炎症状猪的病料中,分离出22株Bb、7株产毒素巴氏杆菌和6株绿脓杆菌;在分离出产毒素巴氏杆菌的7份病料中均同时分离出了Bb,而其中6份又同时分离出了绿脓杆菌。对2003年分离的31株Bb进行药敏试验、红细胞凝集试验和乳鼠皮肤坏死试验。结果表明：各菌株对15种药物的耐药谱不同,但对卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素B、环丙沙星和舒普深高度敏感;各菌株均可凝集猪和羊的红细胞且能不同程度导致乳鼠皮肤坏死。【结论】在中国湖北等十余省市的猪群中,Bb与其它病原菌的共感染情况非常严重,且在萎缩性鼻炎的病猪中检出率最高。     

猪支气管败血波氏杆菌的鉴定和生物学特性

从某猪场呼吸道症状严重的发病猪病料中分离到4株细菌,经形态和培养特征、生化试验、小鼠致病性试验和PCR方法鉴定为猪支气管败血波氏杆菌。药敏试验结果显示,4株分离菌对阿米卡星、卡那霉素、妥布霉素、氧呱嗪青霉素、环丙沙星、氟派酸等敏感,对新霉素、红霉素、壮观霉素、复方新诺明、四环素等不敏感,对小白鼠致病性强弱不一,生物被膜的形成能力不同。     

西部白眉长臂猿支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及其耐药基因检测

为探究某动物园西部白眉长臂猿死亡的可能原因,无菌采集病死白眉长臂猿肺脏组织进行细菌分离鉴定。通过分离纯化、培养特性观察、革兰染色镜检、生化试验以及16S rDNA克隆测定对分离菌株进行鉴定;进一步研究分离株的致病性、耐药性,并进行超广谱β-内酰胺酶耐药基因检测及测序分析。结果表明,分离得到1株革兰阴性小杆菌,命名为J181121,该分离菌的培养及生化特性符合支气管败血波氏杆菌,其16S rDNA基因序列与Genbank中支气管败血波氏杆菌(登录号:CP018761.1)的同源性为99%,对小鼠致病力强。药敏试验结果显示,分离株对β-内酰胺类抗生素耐药,PCR检测到超广谱β-内酰胺酶耐药基因bla-SHV。     

兔支气管败血波氏杆菌病的防治

兔支气管败血波氏杆菌病是由兔支气管败血波氏杆菌引起的一种家兔常见传染病。临床上以出现呼吸道症状为主的病理特征。本病传播广泛,常呈地方性流行或散发性,一般毛兔的发病率较高,为条件性致病,多在气候多变、阴雨潮湿以及其他应激因素等条件下,因机体抵抗力下降而发病,常与兔多杀性巴氏杆菌混合感染。兔支气管败血波氏杆菌病根据发病症状可将其分为败血型、鼻炎型和支气管肺     

兔支气管败血波氏杆菌病的防治

<正>一、流行病学该病传播广泛,常地方性流行或散发,病兔和带菌兔为传染源,一般通过咳嗽、打喷嚏的飞沫经呼吸道传染。各品种、不同年龄段的家兔均可感染该病,一般毛兔的发病率较高。该病在气候多变、阴雨潮湿以及其他应激因素条件下多发,且常与多杀性巴氏杆菌混合感染。二、临床症状1.败血型。败血型病例相对较为少见,主要是病菌进入血液循环导致全身脏器出血,特点为发病急、死亡快,不表现出任何异常情况,一般都来不及治疗。该类型病例多发生于仔兔和青年兔。2.鼻炎型。鼻炎型病例较为多见,常呈地方性流行。发病早期患兔的精神状况、饮食欲、体     

长毛兔支气管败血波氏杆菌病的防治

支气管败血波氏杆菌病是由支气管败血波氏杆菌引起的兔的一种常见的多发性呼吸道传染病,多发生于春秋,不同年龄、性别和品种的兔都易感染,通常发病率为40％,病死率可达30％,给养兔业造成极大地经济损失,已成为危害养兔业最严重的一种疾病.临床上以鼻炎、支气管炎和脓疱性肺炎等为特征.     

家兔支气管败血波氏杆菌灭活疫苗菌种筛选

正兔波氏杆菌病是一种严重危害养兔业的细菌性疾病。兔波氏杆菌病可引起家兔的传染性鼻炎,特别是在规模化养兔场,波氏杆菌与巴氏杆菌、葡萄球菌混合感染相当普遍,已成为兔病防治的一大难题。接种疫苗是目前预防这两种疾病的最有效的措施。本研究从Bb分离株中筛选得到制苗用兔波氏杆菌1株,为研制Bb灭活疫苗打下了坚实的基础。现将菌种的筛选及生物学特性的试验结果报告如下。     

用双层平板和双温培养法分离支气管败血波氏杆菌

自行设计双层平板选择培养基并用双温培养法分离猪支气管败血波氏杆菌。用加有１％葡萄糖的麦康凯琼脂作为基础培养基，从猪鼻腔采取病料以环形或３点形接种到该基础培养基，在３７℃培养８～１０ｈ后，再在该培养过的基础平板上倾注一层约３ｍｍ厚的经灭菌并冷至４５～５０℃的半固体培养基，于２５℃再正放培养１４－１６ｈ。其后在培养基表面挑选单个或扩散生长的菌落接种上述基础平板培养基进行初步验证，再取这些验证过的菌落作     

支气管败血波氏杆菌的间接ELISA诊断方法

我国随着集约化猪场的迅速发展，国外引种及国内种猪的频繁调动，使得猪萎缩性鼻炎在许多猪场发生。在萎缩性鼻炎症状的猪鼻腔分泌物中，61．5％的分离菌为支气管败血波氏杆菌，说明该菌是导致本病的主要病原菌（宋克磊），因此支气管败血波氏杆菌的防制和检测方法的研究显得尤为重要。间接酶联免疫吸附试验（间接ELISA试验）是一种快速、准确、简便的方法，并具有敏感性高、特异性强的特点，且能够同时检验大量血清样品（陈博文），因此间接ELISA方法是检测波氏杆菌抗体的一种优良方法。     

支气管败血波氏杆菌dnt基因的克隆、表达及活性鉴定

通过PCR扩增获得支气管败血波氏杆菌的全长4 395 bpdnt基因,并利用pET-28a/BL21系统对其进行了融合表达。Western-blot检测结果表明,表达产物具有良好的免疫学活性。使用His-band purification kit纯化后,得到纯度为93.2%的融合蛋白HIS6-DNT。在乳鼠皮肤坏死试验中,表达产物HIS6-DNT和天然DNT均能导致乳鼠皮肤产生坏死性病变。在乳鼠皮肤坏死阻断试验中,兔抗HIS6-DNT血清能中和天然DNT,使其失去对乳鼠皮肤的坏死毒性。试验结果表明,重组蛋白具有天然DNT的生物学毒性和免疫原性,所产生的抗体具有中和活性,为DNT的结构和功能研究奠定了基础。     

兔支气管败血波氏杆菌不同感染途径研究

用兔支气管败血波氏杆菌分离株BJL0504菌株(I相菌)经滴鼻、肺内、气管、静脉、皮下对30～40日龄兔攻毒,并进行临床观察和微生物学检查,比较不同攻毒方法的优势。结果显示,经静脉注射的家兔发病率和死亡率高,症状较典型;经肺内注射也可以引起部分发病和死亡;滴鼻和气管注射感染均可以复制到典型的临床症状,但是解剖病变都不明显。由此可见,支气管败血波氏杆菌经静脉攻毒可以较好的复制病例,这对支气管败血波氏杆菌的致病机理的研究、疫苗的研制和评价提供了理论基础。     

一例林麝支气管败血波氏杆菌性肺炎的诊断

肺炎是圈养林麝养殖面临的重要疾病之一,林麝肺炎的病原包括致病性大肠杆菌、铜绿假单胞菌、巴氏杆菌等.2020年,某林麝养殖场中连续出现多只怀孕林麝因肺炎死亡的情况,通过对1例死亡个体进行病理解剖、组织病理学诊断和病原学分析,详细分析了该病例的主要病理变化,并进行病原分离鉴定,确定支气管败血性波氏杆菌感染引起的出血性大叶性...     

四川省猪源支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及耐药基因和毒力基因检测分析

【目的】为了解四川省猪源呼吸道疾病支气管败血波氏杆菌的流行情况及菌株生物特性。【方法】采集56份病料进行支气管败血杆菌的分离纯化、药敏及相关耐药基因和毒力基因的筛选。【结果】分离到10株支气管败血波氏杆菌,分离率为17.86%。分离菌对青霉素、氨苄西林、羧苄西林、林可霉素、复方新诺明和头孢氨苄的耐药率为100%,对新霉素、氯霉素、氧氟沙星和左氧氟沙星高度敏感。共检出耐药基因9种,其中gyrA、sul1和tetC的检出率超过50%;共检出毒力基因6种,其中fla、dnt、prn和fhaB的检出率高达100%。小鼠致病试验结果显示大部分菌株具有较强的致病性。【结论】四川省主要流行的支气管败血波氏杆菌多重耐药情况严重,耐药机制复杂,耐药基因和耐药表型符合率较低,毒力基因检出率较高,且对小鼠呈现较强的致病性。研究结果可为四川省支气管败血波氏杆菌的防控和治疗提供参考。     

河南省规模化猪场支气管败血波氏杆菌的流行病学研究

为了解河南省规模化猪场支气管败血波氏杆菌的流行病学情况,2015—2017年应用染色镜检、生化试验和PCR检测等方法进行支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)的分离与鉴定,从全省规模化猪场有明显萎缩性鼻炎症状猪的1 022份样品中,共分离鉴定到82株Bb,总分离率为8.0%。其中,有30份组织病料只分离出波氏杆菌,52份共感染病料以S.suis,HPS,E.coli,Pm居多,且鼻拭子分离率低于肺脏组织。说明Bb在河南省猪群的感染十分普遍,且与其他细菌协同感染情况非常普遍,在猪萎缩性鼻炎的发生中具有重要作用。     

猪支气管败血波氏杆菌FlaA基因克隆与序列分析

参考相关资料,针对支气管败血波氏杆菌Bordetella bronchiseptica FlaA基因上游序列选择合成1对特异性引物,对贵州分离株（B8株和B27株）进行PCR扩增,将扩增产物连接在pMD18-T载体上,并转化到DI-L5a感受态细胞中,提取重组质粒进行PCR和双酶切鉴定后测序。结果获得分子长为237bp的特异性DNA片段;核苷酸同源性分析表明,贵州分离株间的同源性高达99．1％,与Bb参考株的同源性为97．8％～99．6％,与Bpp参考株的同源性为95．6％-97．4％;系统进化树分析表明,贵州分离株与Bb参考株亲缘关系较近,而与Bpp参考株亲缘关系远。     

支气管败血波氏杆菌PRN基因CDS区的生物信息学分析

通过生物信息学软件预测分析支气管败血波氏杆菌PRN基因编码蛋白功能及其调节机制。结果表明,支气管败血波氏杆菌PRN基因CDS区编码911个氨基酸,分子式为C_{4 121}H_{6 556}N_{1 250}O_{1 258}S₁₁,分子质量为13 196,消光系数为95 800,其理论等电点为9.64,不稳定系数为36.24,PRN蛋白的理化性质稳定;PRN蛋白有多个磷酸化位点和糖基化位点;信号肽预测PRN蛋白有1个信号肽,信号肽位置在1～34;PRN蛋白为亲水性蛋白,存在1个跨膜结构;预测二级结构主要由无规则卷曲构成,占39.08%,β-折叠占23.93%,α-螺旋占23.30%,三级结构主要由无规则卷曲和β-折叠构成。上述结果提示,该蛋白具有重要生物学意义,可为进一步开发支气管败血波氏杆菌亚单位疫苗奠定基础。